專利名稱：透明質酸鉍鉀及其制備方法和應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明屬于醫(yī)療技術領域，涉及一種透明質酸鉍鉀鹽及其制備方法和在其制備預防和治療胃腸道疾病藥物和保健食品方面的應用。
透明質酸又稱玻璃酸(hyaluronic acid，以下簡稱HA)。HA是由D-葡糖醛酸和N-乙?；咸墙M成的雙糖單位有規(guī)律重復構成的大分子鏈狀多糖，分子量從幾萬到幾百萬，具有良好的潤滑性、黏彈性、非免疫原性和高度的保濕性。目前，商品HA主要以鈉鹽的形式應用于臨床和化妝品中。透明質酸的鉀、鈣、鎂、鋁、銨、銀和金鹽制備及其應用已在多個專利中公開，透明質酸與元素周期表第4周期第3族金屬的離子成鹽(絡合)，如透明質酸鋅和透明質酸鈷已證實對皮膚潰瘍、褥瘡有療效(WO9010020)，透明質酸鋅具有顯著的胃保護活性，可用于預防和治療消化性潰瘍(CN1126548)。透明質酸鉍鉀鹽(復合物)及其制備和應用還未見文獻公開報道。
胃腸道疾病包括慢性胃炎、消化性潰瘍、功能性消化不良和胃癌等，其中消化性潰瘍是一種高發(fā)病種，它是引發(fā)胃腸道炎癥、胃腸道出血、消化不良以及胃腸道癌癥的重要誘因。消化性潰瘍的發(fā)病機理較為復雜，近年來的研究表明其與胃腸局部黏膜損害(致潰瘍)因素和黏膜保護(黏膜屏障)因素失衡以及感染幽門螺旋桿菌有關。目前臨床聯(lián)合使用抗生素、制酸劑和黏膜保護劑治療消化性潰瘍病取得良好效果，其中鉍劑是臨床使用最多的一類黏膜保護劑，常用的有枸櫞酸鉍鉀、次水楊酸鉍、次硝酸鉍和膠體果膠鉍等。鉍劑的藥理作用可歸納為在胃酸條件下產生沉淀，黏附于胃黏膜表面形成保護層，保護胃黏膜(潰瘍面)，減少胃的不良刺激，促進潰瘍黏膜再生和潰瘍愈合；調節(jié)分泌作用，如降低胃蛋白酶的活性、增加黏蛋白分泌、促進黏膜釋放PGE2；吸附細菌素(如大腸埃希氏菌產生的毒素或霍亂弧菌產生的腸毒素)和對病原性微生物(幽門螺旋桿菌)的直接抗菌活性。生物大分子鉍劑，如膠體果膠鉍以其較強的黏附選擇性，即對胃腸潰瘍面及炎癥表面特殊的親和力，在胃及十二指腸潰瘍、慢性淺表性胃炎、慢性萎縮性胃炎、消化道出血等疾病的治療中療效明顯超過其他小分子鉍劑。透明質酸鉍鉀也屬于大分子鉍劑，HA是動物體固有的大分子生物黏多醣，其結構無種屬區(qū)別，具有良好的黏彈性、潤滑性和成膜性。目前的研究表明HA參與了多種細胞活動和生理過程，如細胞的遷移和分化、傷口愈合、癌細胞遷徙，影響生長因子的作用、胚胎形成和發(fā)育以及炎癥的發(fā)生。有試驗證實HA在炎癥和損傷部位有定向聚集的趨勢，高分子HA通過抑制巨噬細胞的功能具有抗炎活性。在酸性條件下，HA溶液黏度增加，形成大分子的網狀結構，呈凝膠狀，具有較強的附著性。因此，透明質酸鉍鉀作為黏膜保護劑，與同類產品相比，具有無可比擬的優(yōu)越性。
本發(fā)明的目的是提供一種可用于制備預防和治療胃腸道疾病藥物和保健食品的鉍劑及其制備方法，這種鉍劑即透明質酸鉍鉀鹽，經初步動物試驗證明，透明質酸鉍鉀用于治療胃腸道潰瘍療效好于膠體果膠鉍。
本發(fā)明透明質酸鉍鉀鹽的特征在于，其分子式為(C14O13NH21Bi)m(C14O11NH19K)n，結構式如下所示 其中m∶n＝1∶0.01～20根據分子式計算，本發(fā)明透明質酸鉍鉀干燥品中鉍的含量范圍約在2.33％～33.49％，鉀的含量范圍約在0.06％～8.73％，糖醛酸的含量范圍約在31.39％～45.58％。
本發(fā)明透明質酸鉍鉀的制備方法，其特征是使鉍鹽先溶解于含有多元醇的去離子水中，然后與氫氧化鉀溶液同時滴加到可溶性透明質酸鹽的水溶液中，攪拌反應，再經沉淀、洗滌、過濾和干燥。
上述透明質酸鉍鉀的制備方法中，所述鉍鹽可以使用硝酸鉍、氫氧化鉍、氯化鉍或氧化鉍，所述多元醇可以使用山梨醇、甘露醇或甘油，所述可溶性透明質酸鹽可以使用其無機鹽，如透明質酸鈉、透明質酸鉀、透明質酸鈣或透明質酸鋅，也可以使用其有機鹽，如透明質酸的季銨鹽。
采用本發(fā)明方法制備生產的透明質酸鉍鉀，產品純度較高、雜質含量較少。通過調節(jié)反應物的比例，可以得到鉍含量不同的產品，其中鉍含量在15％～30％的產品較適合用于臨床治療。
本發(fā)明透明質酸鉍鉀具有良好的生物相容性和成膜性，在人工胃液和人工腸液中均可形成高黏度溶膠，作為胃腸道黏膜的保護層，可避免食物、胃酸、消化酶以及某些藥物對受損黏膜的刺激，促進潰瘍愈合。由于HA具有在炎癥和損傷部位有定向聚集的趨勢和一定的抗炎活性，與同類產品相比，透明質酸鉍鉀預防和治療胃腸道疾病的效果更加顯著。
本發(fā)明透明質酸鉍鉀可以直接口服用于胃腸道炎癥和胃腸道潰瘍預防和治療，也可以與其它功能成分和常用輔料組方，制成適于口服給藥的片、丸、膠囊、顆粒、糖漿、凝膠、溶液或混懸液等藥物制劑或保健食品，口服用于預防和治療胃腸道疾病，包括慢性胃炎、消化性潰瘍、功能性消化不良和胃癌等，可以達到減輕疼痛、腹瀉和消化不良等癥狀，保護消化道黏膜、促進潰瘍黏膜再生和潰瘍愈合、減少炎癥發(fā)生等目的。
下面通過實施例進一步說明本發(fā)明。
實施例1
將10g透明質酸鈉(平均分子量109萬)分散于500ml去離子水中，攪拌溶解。另取氫氧化鉀10g溶解于100ml去離子水。取14克硝酸鉍[Bi(NO3)3·5H2O]和25克甘露醇，加入500ml去離子水中，攪拌溶解。然后將硝酸鉍溶液和氫氧化鉀溶液同時滴加入透明質酸鈉溶液，攪拌反應，反應完畢加入3～4倍(V/V)乙醇，攪拌，沉淀，用80％乙醇水溶液充分洗滌沉淀，最后用無水乙醇脫水，35℃～40℃減壓干燥，得成品。成品經測定，按干燥品計，鉍含量為31.5％(W/W)，鉀含量為0.51％(W/W)，糖醛酸含量為32.27％(W/W)。
實施例二將10g透明質酸鈉(平均分子量141萬)分散于500ml去離子水中，攪拌溶解，另取氫氧化鉀8.5g溶解于100ml去離子水。取12克硝酸鉍[Bi(NO3)3·5H2O]和24克甘露醇，加入500ml去離子水中，攪拌溶解。然后將硝酸鉍溶液和氫氧化鉀溶液同時滴加入透明質酸溶液，攪拌反應，反應完畢加入3～4倍乙醇(V/V)，攪拌，沉淀，用80％乙醇水溶液充分洗滌沉淀，最后用無水乙醇脫水，35℃～40℃減壓干燥，得成品。成品經測定，按干燥品計，鉍含量為27.4％(W/W)，鉀含量為0.81％(W/W)，糖醛酸含量為33.65％(W/W)。
實施例三將10g透明質酸鈉(平均分子量75萬)分散于500ml去離子水中，攪拌溶解，另取氫氧化鉀5g溶解于100ml去離子水。取3.5g氫氧化鉍[Bi(OH)3]加入500ml含6克甘油的水溶液，攪拌溶解。然后將氫氧化鉍溶液和氫氧化鉀溶液同時緩慢加入透明質酸溶液，攪拌反應，反應完畢加入2～3倍(V/V)丙酮，沉淀，用70％～80％丙酮水溶液充分洗滌沉淀，最后用丙酮脫水，35℃～40℃減壓干燥，得成品。成品經測定，按干燥品計，鉍含量為20.3％(W/W)，鉀含量為3.45％(W/W)，糖醛酸含量為36.96％(W/W)。
本發(fā)明制備的透明質酸鉍鉀的初步藥效學試驗結果如下。
1.透明質酸鉍鉀對乙酸致大鼠胃潰瘍的保護作用。
選用體重150～200g的雌性Wistar大鼠，參考文獻方法(①藥理實驗方法學，第2版.北京人民衛(wèi)生出版社，1991；1158～1160。②中華人民共和國衛(wèi)生部藥政局，新藥(西藥)臨床前研究指導原則匯編(藥學、藥理學、毒理學)，1993；88～89)制作乙酸燒灼型胃潰瘍模型。在乙醚麻醉的大鼠胃體漿膜面直徑5mm的范圍，用0.2ml冰醋酸處理1.5min來誘發(fā)胃潰瘍。手術次日將動物隨機分為6組并開始口服給藥，陰性對照為蒸餾水，陽性對照為膠體果膠鉍原料藥，試驗樣品為按本發(fā)明實施例1制備的透明質酸鉍鉀(鉍含量為31.5％，鉀含量為0.51％，糖醛酸含量為32.27％)和透明質酸鈉原料藥(平均分子量91萬，糖醛酸含量38.9％)。大鼠每天灌胃一次，每次約10ml，連續(xù)給藥10天后處死動物，取胃，用甲醛溶液固定，解剖后，在顯微鏡下測量胃黏膜潰瘍面的大小，測量通過潰瘍中心的最大縱徑(d1)和最大橫徑(d2)，用下列公式計算潰瘍面積S＝π×(d1/2)×(d2/2)，潰瘍抑制率以對照組與實驗組的差值百分數(shù)表示。試驗結果列于下表。
表1 透明質酸鉍鉀對乙酸致大鼠胃潰瘍的保護作用
*與對照組比較P＜0.05**與對照組比較比較P＜0.01***與對照組比較比較P＜0.0012.透明質酸鉍鉀對鹽酸乙醇所致胃黏膜損傷的防治作用選用體重150～200g的雌性Wistar大鼠，參考文獻方法(中藥藥理研究方法學.北京人民衛(wèi)生出版社，1994441)大鼠禁食不禁水24h，隨機分組(同上)，灌胃給藥，灌藥30min后，每只大鼠分別灌服鹽酸乙醇(50ml無水乙醇和1ml濃鹽酸的混合物)，劑量為0.5ml/100g體重，酸化乙醇處理1h后將動物處死，摘取胃，甲醛固定后沿胃大彎剪開胃壁，洗滌后觀察胃黏膜損傷情況。測量條索狀出血損傷的長度，結果見下表。
表2 胃對鹽酸乙醇所致大鼠胃黏膜損傷的防治作用
*與對照組比較P＜0.05**與對照組比較比較P＜0.01***與對照組比較比較P＜0.00權利要求
1.一種透明質酸鉍鉀，其特征是分子式為(C14O13NH21Bi)m(C14O11NH19K)n，結構式如下所示 其中m∶n＝1∶0.01～20
2.權利要求1所述透明質酸鉍鉀的制備方法，其特征是使鉍鹽先溶解于含有多元醇的去離子水中，然后與氫氧化鉀溶液同時滴加到可溶性透明質酸鹽的水溶液中，攪拌反應，再經沉淀、洗滌、過濾和干燥。
3.權利要求2所述的制備方法，其特征在于所述的鉍鹽為硝酸鉍、氫氧化鉍、氯化鉍或氧化鉍。
4.權利要求2所述的制備方法，其特征在于所述的多元醇為山梨醇、甘露醇或甘油。
5.權利要求2所述的制備方法，其特征在于所述的可溶性透明質酸鹽包括其無機鹽透明質酸鈉、透明質酸鉀、透明質酸鈣、透明質酸鋅和其有機鹽透明質酸季銨鹽。
6.權利要求1所述透明質酸鉍鉀用于制備預防和治療胃腸道疾病的藥物或保健食品。
全文摘要
一種透明質酸鉍鉀鹽，其特征是分子式為(C
文檔編號A61P1/04GK1765937SQ200510125668
公開日2006年5月3日 申請日期2005年12月2日 優(yōu)先權日2005年12月2日
發(fā)明者凌沛學, 賀艷麗, 陳建英, 汪敏, 張?zhí)烀?申請人:凌沛學