專利名稱：用于靜脈給藥的黃藤素原料的精制方法、質(zhì)量控制技術(shù)及黃滕素制劑、制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種供靜脈給藥途徑用的中藥單體成分原料、制劑的制備方法和質(zhì)量控制技術(shù)，具體來說是靜脈注射級黃藤素(無水鹽酸巴馬汀或無水鹽酸棕櫚堿)、制劑的制備方法及其質(zhì)量控制技術(shù)。
背景技術(shù)：
黃藤素(又稱巴馬汀Palatine或棕櫚堿)是常用中草藥防己科黃藤(Fibaurea recisa Pierre)根和莖中的主要有效成分。試驗證實黃藤素具有抗菌消炎作用，尤其對金黃色葡萄球菌、大小孢子菌及白色念珠菌的抑菌作用強。本品已收錄于1977年版中國藥典，具有清熱解毒之功，可以增強白細(xì)胞的吞噬能力，臨床應(yīng)用于婦科炎癥、菌痢、腸炎、呼吸道及泌尿道炎、外科感染、眼結(jié)膜炎等疾患。目前，經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理局(SFDA)批準(zhǔn)的黃藤素制劑有黃藤素片、黃藤素分散片、黃藤素原料、黃藤素栓、供肌肉注射用的黃藤素注射液。SFDA未頒布注射級黃藤素，而目前供肌肉注射用的黃藤素原料經(jīng)試驗研究，其安全性和刺激性均不符合供靜脈注射給藥用的要求。而且因為長期無計劃采集，黃藤素植物資源急劇減少，為了更有效、更充分利用資源，克服肌肉注射劑的不足，提高黃藤素的療效，我們研究開發(fā)出一種靜脈注射級黃藤素原料、制劑的制備方法及其質(zhì)量控制技術(shù)，利用此靜脈注射級黃藤素，加入合適的輔料，可以制備出各種供靜脈途徑給藥用的黃藤素制劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明公開了一種療效確切且質(zhì)量穩(wěn)定的供靜脈途徑給藥用的黃藤素原料的精制方法及其質(zhì)量控制技術(shù)。
本發(fā)明公開了一種療效確切且質(zhì)量穩(wěn)定的注射用的黃藤素凍干粉針劑的制備方法。
本發(fā)明公開了一種療效確切且質(zhì)量穩(wěn)定的供靜脈滴注用的黃藤素注射液的制備方法。
本發(fā)明公開了一種療效確切且質(zhì)量穩(wěn)定的供靜脈滴注用的黃藤素葡萄糖或氯化鈉注射液的制備方法。
本發(fā)明的凍干粉針與注射液劑型質(zhì)量可控，更加安全有效并便于運輸與存儲。
本發(fā)明的滴注用注射液劑型穩(wěn)定性符合要求，避免中間環(huán)節(jié)，質(zhì)量可控，減少交叉污染幾率，更加安全有效并便于使用。
本發(fā)明的技術(shù)方案如下一種用于靜脈給藥的黃藤素原料的精制方法，其特征在于包括下列步驟在符合GMP的注射級原料車間內(nèi)操作，將黃藤素粗品與去離子水加熱攪拌，充分溶解后冷至室溫，加氫氧化鈉試液調(diào)節(jié)pH值，濾過；濾液加氯化鈉鹽析，濾過，沉淀物晾干；將沉淀物用乙醇回流提取，濾過，濾液加鹽酸調(diào)節(jié)pH值，冷卻析晶，即得黃色針狀結(jié)晶(含量HPLC測定應(yīng)≥95％)，再將此黃色針狀結(jié)晶加入去離子水，加熱使溶解，冷至室溫，加入乙醇至析出結(jié)晶，靜置析晶，濾過，結(jié)晶晾干；再將結(jié)晶加入注射用水，加熱使溶解，冷至室溫(若有不溶物濾過)，濾液加鹽酸調(diào)節(jié)pH值至析出結(jié)晶，靜置析晶，濾過，結(jié)晶晾干后至80℃減壓干燥，取出，包裝，即得(含量HPLC測定應(yīng)≥98.0％)，按制定標(biāo)準(zhǔn)和中國藥典2005年版一部附錄靜脈給藥用原料通則檢驗應(yīng)符合規(guī)定，所述的黃藤素是指無水鹽酸巴馬汀或無水鹽酸棕櫚堿。
一種黃藤素制劑，其特征在于是由下列比例的原料組分制成的供靜脈給藥用的凍干粉針劑(1)、黃藤素 10～80g(2)、賦形劑為以下一種成分或多種成分的混合物甘露醇、甘露醇乳糖、葡萄糖右旋糖苷、水解明膠 50～150g(3)、無菌注射用水加至2000ml；上述的黃藤素制劑——凍干粉針劑的制備方法，其特征在于包括以下步驟取符合檢驗規(guī)定的黃藤素原料和甘露醇，加注射用水至1500ml，攪拌使溶解，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至4.0～6.0，加入適量針用活性炭，攪拌20～40分鐘，濾過，檢測含量，加注射用水至全量，檢測pH合格后再經(jīng)0.22μm微孔濾膜終端濾過，分裝于7～10ml的鈉鈣管制注射劑瓶中，每瓶灌裝2ml，低溫下冷凍干燥，軋蓋即可。
一種黃藤素制劑，其特征在于是由下列比例的原料組分制成的供靜脈給藥用的注射液(1)、黃藤素 5～40g(2)、三氯叔丁醇 0.5～1.5g(3)、無菌注射用水加至 1000ml；上述的黃藤素制劑——注射液的制備方法，其特征在于包括以下步驟取符合檢驗規(guī)定的黃藤素原料和三氯叔丁醇，加注射用水至800ml，攪拌使溶解，加入適量針用活性炭，攪拌20～40分鐘，濾過，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至4.0～6.0，濾過，檢測樣品含量，加注射用水至全量，檢測pH合格后再經(jīng)0.22μm微孔濾膜終端濾過，灌封于2ml注射劑瓶中，滅菌，即可。
一種黃藤素制劑，其特征在于是由下列比例的原料組分制成的供靜脈給藥用的滴注液(1)、黃藤素 0.1～1.0g(2)、氯化鈉 7～9g(3)、無菌注射用水加至 1000ml；上述的黃藤素制劑——滴注液的制備方法，其特征在于包括以下步驟取符合檢驗規(guī)定的黃藤素原料，加注射用水至500ml，攪拌使溶解，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至4.0～6.0，加入0.1％(g/ml)的活性炭，加熱煮沸15～30分鐘，濾過，濾液備用，測定中間體含量。稱取處方量的氯化鈉，溶于250-500ml 90℃的注射用水中，攪拌使氯化鈉完全溶解，加0.1％的活性炭，保溫攪拌15分鐘，過濾脫炭，并調(diào)節(jié)pH值至5.5～6.5范圍內(nèi)，測定含量，與上述黃藤素濾液合并，加注射用水至定量，灌封分裝至100ml或250ml輸液瓶中，滅菌，即得；或超濾，無菌分裝至100ml或250ml聚丙烯輸液瓶中，即得。
一種黃藤素制劑，其特征在于是由下列比例的原料組分制成的供靜脈給藥用的滴注液(1)、黃藤素 0.1～1.0g(2)、葡萄糖 40～70g(3)、無菌注射用水加至1000ml；上述的黃藤素制劑——滴注液的制備方法，其特征在于制備方法包括以下步驟取符合檢驗規(guī)定的黃藤素原料，加注射用水至500ml，攪拌使溶解，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至4.0～6.0，加入0.1％(g/ml)的針用活性炭，加熱煮沸15～30分鐘，濾過，濾液備用，測定中間體含量。稱取處方量的葡萄糖，加于煮沸的注射用水中，使成50％～60％的濃溶液，加鹽酸適量，同時加入0.1％的活性炭加熱煮沸15～30分鐘，過濾脫炭，測定含量，與上述黃藤素濾液合并，加注射用水至定量，灌封分裝至100ml或250ml輸液瓶中，滅菌，即得；或超濾，無菌分裝至100ml或250ml聚丙烯輸液瓶中，即得。
所述的精制方法，其特征在于包括以下具體步驟(1)、將黃藤素粗品(含量＞10％)與去離子水按1∶100(g∶ml)比例，加熱攪拌，使其充分溶解，冷至室溫，濾過，濾液加氫氧化鈉試液調(diào)節(jié)pH值至10，靜置12小時，濾過；濾液按7～10％加氯化鈉鹽析，靜置12小時，濾過，沉淀晾干；將沉淀按1∶3～10用80％乙醇回流提取2～5次，每次1～2小時，濾過，合并濾液，加鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2，冷卻析晶，濾過，晾干，即得黃色針狀結(jié)晶(含量HPLC測定應(yīng)≥95％)；
(2)、將黃色針狀結(jié)晶，按1∶30～50(g∶ml)加入去離子水，加熱使溶解，冷至室溫(若有不溶物濾過)，加入乙醇至析出結(jié)晶，靜置析晶，濾過，結(jié)晶晾干；再將結(jié)晶按1∶30～50(g∶ml)比例加入注射用水，加熱使溶解，冷至室溫(若有不溶物濾過)，加鹽酸調(diào)節(jié)pH值至析出結(jié)晶，靜置析晶，濾過，結(jié)晶晾干后至80℃減壓干燥，取出，包裝，即得(含量HPLC測定應(yīng)大于98.0％)，按制訂標(biāo)準(zhǔn)和中國藥典2005年版一部附錄靜脈給藥用原料通則檢驗應(yīng)符合規(guī)定。
注射用黃藤素的安全性試驗研究注射用黃藤素按本發(fā)明方法制備，由安徽科創(chuàng)中藥天然藥物研究所有限責(zé)任公司提供(規(guī)格20mg/瓶，批號040601)，臨用前用生理鹽水(NS)稀釋至所需濃度，氯化鈉注射液(NS)由安徽六安華源制藥有限公司生產(chǎn)，批號05032112。
1.注射用黃藤素靜脈給藥過敏試驗(1)方法豚鼠24只，體重300-400g，♀♂各半，隨機分成NS組、陽性對照組(蛋清)和注射用黃藤素組(以下簡稱藥物組)，每組8只。分別于第1、3、5日于豚鼠小隱靜脈靜脈注射NS、蛋清和黃藤素溶液(0.16mg·ml-1)各0.5ml共3次，各組再分二組，分別于第1次給藥后14d及21d進行再次激發(fā)，每只豚鼠同法靜脈注射NS、蛋清和黃藤素溶液(0.16mg·ml-1)各2ml。觀察在給藥后3h內(nèi)豚鼠有無豎毛、噴嚏、咳嗽、興奮不安、呼吸困難等反應(yīng)，如出現(xiàn)二種或二種以上上癥狀或有抽搐、窒息死亡等則判定為陽性。
(2)結(jié)果①藥物組和NS組豚鼠在d14激發(fā)給藥3h內(nèi)均未見有發(fā)生豎毛、噴嚏、咳嗽、興奮不安、呼吸困難、抽搐及窒息死亡等反應(yīng)，動物活動、進食等行為正常；陽性對照組4只豚鼠在第14天激發(fā)注射蛋清后1-2min均出現(xiàn)搔鼻、噴嚏、咳嗽、呼吸困難，并在5min內(nèi)全部死亡(結(jié)果見表1)。
表1黃藤素溶液(0.16mg·ml-1)d14激發(fā)注射(iv)對豚鼠過敏的影響

②藥物組和NS組豚鼠在d21激發(fā)給藥3h內(nèi)也均未見有豎毛、噴嚏、咳嗽、興奮不安、呼吸困難、抽搐及窒息死亡等反應(yīng)，動物活動、進食等行為正常；陽性對照組4只豚鼠在d21激發(fā)注射藥物后1-2min也同樣均出現(xiàn)搔鼻、噴嚏、咳嗽、呼吸困難，并在5min內(nèi)全部死亡。
表2黃藤素溶液(0.16mg·ml-1)d21激發(fā)注射(iv)對豚鼠過敏的影響

(3)結(jié)論豚鼠在d14和d21激發(fā)給藥(iv)黃藤素溶液時均未出現(xiàn)過敏癥狀，結(jié)果表明三射用黃藤素靜脈給藥未見明顯的致敏作用。
2.注射用黃藤素溶血試驗(1)方法①2％兔紅細(xì)胞懸液制備取健康家兔-只，心臟取血10ml，置于燒杯內(nèi)，放入玻璃珠輕輕搖動，數(shù)分鐘后除出纖維蛋白，取出已去纖維蛋白血液，加等量生理鹽水(2000rpm 15min)離心，除去上清液，沉淀的血球再加生理鹽水清洗，再離心，如此反復(fù)三次，按血球的容量，用生理鹽水配成2％的紅細(xì)胞混懸液。
②取干凈試管7支，編號后分別加入2.5ml 2％兔紅細(xì)胞懸液，按表3所示分別加入相應(yīng)體積的黃藤素溶液(0.16mg.ml-1)和NS或雙餾水，置37℃培養(yǎng)箱中，分別觀察0.5、2、3h溶血試驗結(jié)果。
表3黃藤素溶液(0.16mg·ml-1)對兔紅細(xì)胞溶血的影響

注++溶血，+凝集，-不溶血也不凝集(2)結(jié)果結(jié)果如表3所示，在2％兔紅細(xì)胞懸液中加入不同體積的黃藤素溶液后0.5、2、3h均無溶血反應(yīng)的發(fā)生。
(3)結(jié)論注射用黃藤素不產(chǎn)生明顯的溶血反應(yīng)。
3.注射用黃藤素靜脈給藥局部刺激性試驗(1)方法取家兔6只，稱重后，隨機分成二組，每組3只，分別在固定的耳緣靜脈滴注黃藤素溶液(濃度為0.16mg·ml-1；10ml·kg-1)和等量NS(10.0ml·kg-1)，滴注速度為1.0ml·min-1，每日1次，連續(xù)4天，停藥后72h處死動物，立即取兔耳標(biāo)本置福爾馬林液中固定后行組織病理組織學(xué)檢查，記錄耳緣靜脈進針點處距向近心端間隔1.0、2.0、3.0cm處組織損害情況。
(2)結(jié)果靜脈滴注黃藤素溶液(0.16mg·ml-1)和NS后，家兔活動、進食正常，未見明顯的異常反應(yīng)；表4注射用黃藤素(0.16mg·ml-1)靜脈滴注對家兔靜脈刺激的影響

注-正常。
結(jié)果如上表所示，藥物組及NS對照組家兔耳緣靜脈血管管壁完整，管腔內(nèi)無血栓形成，血管周圍間質(zhì)未見出血、水腫及炎細(xì)胞浸潤。
(3)結(jié)論家兔靜脈滴注注射用黃藤素未見明顯的靜脈刺激性。
注射用黃藤素安全性試驗研究總結(jié)試驗結(jié)果表明注射用黃藤素靜脈給藥未見明顯的致敏作用，不產(chǎn)生明顯的溶血反應(yīng)，靜脈滴注時未見明顯的靜脈刺激性。
下面結(jié)合制備各種黃藤素注射制劑的實施例對本發(fā)明作進一步詳細(xì)描述
具體實施例方式實施例1供靜脈給藥用的黃藤素原料
1、制備方法(1)將黃藤素粗品500mg(含量HPLC測定19.3％)與去離子水按1∶100(g∶ml)比例，加熱攪拌，使其充分溶解，冷至室溫，濾過，加氫氧化鈉試液調(diào)節(jié)pH值至10，靜置12小時，濾過；濾液按7％加氯化鈉鹽析，靜置12小時，濾過，沉淀晾干，得黃藤素粗結(jié)晶92.6g；將沉淀按1∶5用80％乙醇回流提取3次，每次2小時，濾過，合并濾液，加鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2，冷卻析晶，濾過，晾干，即得黃色針狀結(jié)晶88.1g(含量HPLC測定95.7％)。
(2)將黃色針狀結(jié)晶，按1∶30(g∶ml)加入去離子水，加熱使溶解，冷至室溫，加入乙醇至析出結(jié)晶，靜置析晶24小時，濾過，結(jié)晶晾干；再將結(jié)晶按1∶30(g∶ml)比例加入注射用水，加熱使溶解，冷至室溫，得結(jié)晶82.4g，加鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2，析出結(jié)晶，靜置析晶，濾過，結(jié)晶晾干后至80℃減壓干燥24小時，取出，即得結(jié)晶75.2g，(含量HPLC測定98.6％)。按中國藥典2005年版一部附錄靜脈給藥用原料通則檢驗符合規(guī)定。
2、質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)本品為防己科植物黃藤Fibraurea recisa Pierre.的藤莖提取精制所得。
性狀本品為黃色的針狀結(jié)晶；氣微，味極苦。
本品在熱水中易溶，在水中略溶，在乙醇或氯仿中微溶，在乙醚中幾乎不溶。
熔點本品的熔點為198～201℃，熔融時同時分解(中國藥典2005年版一部附錄VIIC)。
鑒別(1)取本品，加硫酸，顯黃綠色，微熱后，顏色仍不變。
(2)取本品約0.05g，加水5ml，緩緩加熱溶解后，加氫氧化鈉試液2滴，顯橙紅色，放冷，濾過，取濾液，加丙酮4滴，即發(fā)生渾濁，放置后，生成橙黃色沉淀。取上清液，加丙酮1滴，如仍發(fā)生渾濁，再加丙酮適量使沉淀完全，濾過，濾液顯氯化物的鑒別反應(yīng)。
檢查其他生物堿取本品0.05g，置25ml量瓶中，加乙醇20ml，超聲處理10分鐘，再加乙醇稀釋至刻度，密塞，搖勻，作為供試品溶液。取鹽酸巴馬汀、鹽酸藥根堿、鹽酸黃連素，加乙醇分別配制成每1ml含0.8mg、0.5mg、0.4mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液與鹽酸藥根堿對照品溶液各2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲醇-濃氨試液-水(8∶1∶1)為展開劑，置氨蒸氣飽和的展開缸內(nèi)，首次展開約5cm，取出，晾干，置于100℃干燥20分鐘；取出，冷至室溫，旋轉(zhuǎn)90°角，再吸取鹽酸巴馬汀、鹽酸黃連素兩種對照品溶液各2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸(9∶3)為展開劑，展距約9cm，取出，晾干，置于紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，不得檢出與對照品鹽酸黃連素色譜位置相一致成分；在與對照品鹽酸藥根堿色譜相應(yīng)的位置上，其斑點熒光強度不得大于對照品熒光強度。
水分 照水分測定法(中國藥典2005年版一部附錄IX H第一法)測定，不得過5.0％。
熾灼殘渣 不得過0.8％(中國藥典2005年版一部附錄IX J)。
蛋白質(zhì) 取本品0.1g，加水10ml使溶解，取2ml，置試管中，滴加鞣酸試液1～3滴，不得出現(xiàn)渾濁。
鞣質(zhì) 取本品0.1g，加水10ml使溶解，取1ml，依法測定(中國藥典2005年版一部附錄IX S)，應(yīng)符合規(guī)定。
樹脂 取本品0.1g，加水10ml使溶解，取5ml，置分液漏斗中，加三氯甲烷10ml振搖提取，分取三氯甲烷液，依法測定(中國藥典2005年版一部附錄IX S)，應(yīng)符合規(guī)定。
草酸鹽 取本品0.1g，加水10ml使溶解，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1～2，保溫濾去沉淀，調(diào)節(jié)pH值至5～6，取2ml，加3％氯化鈣溶液2～3滴，放置10分鐘，不得出現(xiàn)渾濁或沉淀。
鉀離子 取本品0.12g，稱定，自“先用小火熾灼至炭化”起，依法測定(中國藥典2005年版一部附錄IX S)，應(yīng)符合規(guī)定。
重金屬 取熾灼殘渣項下遺留的殘渣，依法檢查(中國藥典2005年版一部附錄IX E第二法)，含重金屬不得過百萬分之二十。
砷鹽 取本品1.0g，加2％硝酸鎂乙醇溶液3ml，點燃，燃盡后，先用小火熾灼使炭化，再在500～600℃熾灼至完全灰化，放冷，殘渣加鹽酸5ml與水2ml使溶解，依法檢查(中國藥典2005年版一部附錄IX F第一法)。含砷量不得過百萬分之二。
含量測定鹽酸巴馬 汀照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水-磷酸二氫鉀-十二烷基硫酸鈉(300∶200∶1.7g∶0.85g)為流動相，柱溫30℃，流速1.0ml/min；檢測波長為345nm。色譜柱的理論板數(shù)按鹽酸巴馬汀峰計算為1500。
對照品溶液的制備稱取黃藤素對照品約4mg，精密稱定，置25ml量瓶中，加70％乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取1ml置10ml量瓶中，加70％乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得。
供試品溶液的制備 稱取黃藤素約5mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加70％乙醇超聲溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。
測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品按干燥品計算，含鹽酸巴馬汀(C21H22NO4·HCl)不得少于98.0％。
實施例2黃藤素凍干粉針制劑(1)處方黃藤素20g、甘露醇80g、無菌注射用水加至2000ml；(2)制備方法取符合檢驗規(guī)定的黃藤素原料、甘露醇，加注射用水至1500ml，攪拌使溶解，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至5.41，加入767型針用活性炭1g，攪拌30分鐘，濾過，檢測含量，加注射用水至全量，pH合格后再經(jīng)0.22μm微孔濾膜終端濾過，分裝于7ml的鈉鈣管制注射劑瓶中，每瓶灌裝2ml，低溫下冷凍干燥，軋蓋即可。
本工藝?yán)鋬龈稍锊捎靡淮紊A干燥法，將預(yù)先處理好的制品溶液在干燥室內(nèi)預(yù)冷至-45℃，同時將冷凍室內(nèi)溫度下降至-50℃，啟動真空泵，待真空度達到1.33KPa以下后，緩緩打開閥門，當(dāng)干燥室內(nèi)真空度達13.33Pa以下關(guān)閉冷凍機，緩緩加溫至-20℃。待水分蒸發(fā)余燼，緩緩升溫，在25℃轉(zhuǎn)入再干燥，整個干燥過程22小時。
經(jīng)檢驗，含量每瓶19.7mg，符合規(guī)定(標(biāo)示量95.0％～105.0％)，其它均符合中國藥典2005年一部附錄IU“注射劑”項下通則規(guī)定。
實施例3黃藤素靜脈注射液(1)、處方黃藤素10g、三氯叔丁醇1g、無菌注射用水加至1000ml；(2)、制備方法取符合檢驗規(guī)定的黃藤素原料、三氯叔丁醇，加注射用水至800ml，攪拌使溶解，加入767型針用活性炭0.5g，攪拌30分鐘，濾過，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至5.40，濾過，檢測樣品含量，加注射用水至全量，檢測pH合格后再經(jīng)0.22μm微孔濾膜終端濾過，灌封于2ml注射劑瓶中，滅菌，即可。
經(jīng)檢驗，每1ml含黃藤素9.9mg(含量限度95.0％～105.0％)，符合規(guī)定，其它均符合中國藥典2005年一部附錄IU“注射劑”項下通則規(guī)定。
實施例4黃藤素氯化鈉注射液(1)、處方黃藤素0.2g、氯化鈉9g、無菌注射用水加至1000ml；(2)制備方法取符合檢驗規(guī)定的黃藤素原料，加注射用水至500ml，攪拌使溶解，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至5.36，加入0.1％(g/ml)的活性炭，加熱煮沸15～30分鐘，濾過，濾液備用，測定中間體含量。稱取處方量的氯化鈉，溶于250～500ml 90℃的注射用水中，攪拌使氯化鈉完全溶解，加0.1％的活性炭，保溫攪拌15分鐘，過濾脫炭，并調(diào)節(jié)pH值至5.5～6.0范圍內(nèi)，測定含量，與上述黃藤素濾液合并，加注射用水至定量，灌封分裝至100ml或250ml輸液瓶中，滅菌，即得；或超濾，無菌分裝至100ml或250ml聚丙烯輸液瓶中，即得。
經(jīng)檢驗，每瓶100ml含黃藤素19.7mg、氯化鈉891.2mg(含量限度95.0％～105.0％)，符合規(guī)定，其它均符合中國藥典2005年一部附錄IU“注射劑”項下通則規(guī)定。
實施例5黃藤素葡萄糖注射液(1)處方黃藤素0.4g、葡萄糖50g、無菌注射用水加至1000ml；(2)制備方法取符合檢驗規(guī)定的黃藤素原料，加注射用水至500ml，攪拌使溶解，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至5.42，加入0.1％(g/ml)的針用活性炭，加熱煮沸20分鐘，濾過，濾液備用，測定中間體含量。稱取處方量的葡萄糖，加于煮沸的注射用水中，使成50％～60％的濃溶液，加鹽酸適量，同時加入0.1％的活性炭加熱煮沸20分鐘，過濾脫炭，測定含量，與上述黃藤素濾液合并，加注射用水至定量，灌封分裝至100ml或250ml輸液瓶中，滅菌，即得；或超濾，無菌分裝至100ml或250ml聚丙烯輸液瓶中，即得。
經(jīng)檢驗，每瓶100ml含黃藤素38.8mg、葡萄糖482.9mg(含量限度95.0％～105.0％)，符合規(guī)定，其它均符合中國藥典2005年一部附錄IU“注射劑”項下通則規(guī)定。
權(quán)利要求
1.一種用于靜脈給藥的黃藤素原料的精制方法，其特征在于包括下列步驟在符合GMP的注射級原料車間內(nèi)操作，將黃藤素粗品與去離子水加熱攪拌，充分溶解后冷至室溫，加氫氧化鈉試液調(diào)節(jié)pH值，濾過；濾液加氯化鈉鹽析，濾過，沉淀物晾干；將沉淀物用乙醇回流提取，濾過，濾液加鹽酸調(diào)節(jié)pH值，冷卻析晶，即得黃色針狀結(jié)晶(含量HPLC測定應(yīng)≥95％)，再將此黃色針狀結(jié)晶加入去離子水，加熱使溶解，冷至室溫，加入乙醇至析出結(jié)晶，靜置析晶，濾過，結(jié)晶晾干；再將結(jié)晶加入注射用水，加熱使溶解，冷至室溫(若有不溶物濾過)，濾液加鹽酸調(diào)節(jié)pH值至析出結(jié)晶，靜置析晶，濾過，結(jié)晶晾干后至80℃減壓干燥，取出，包裝，即得(含量HPLC測定應(yīng)≥98.0％)，按制定標(biāo)準(zhǔn)和中國藥典2005年版一部附錄靜脈給藥用原料通則檢驗應(yīng)符合規(guī)定，所述的黃藤素是指無水鹽酸巴馬汀或無水鹽酸棕櫚堿。
2.一種黃藤素制劑，其特征在于是由下列比例的原料組分制成的供靜脈給藥用的凍干粉針劑(1)、黃藤素10～80g(2)、賦形劑為以下一種成分或多種成分的混合物甘露醇、甘露醇乳糖、葡萄糖右旋糖苷、水解明膠50～150g(3)、無菌注射用水加至2000ml。
3.一種黃藤素制劑，其特征在于是由下列比例的原料組分制成的供靜脈給藥用的注射液(1)、黃藤素5～40g(2)、三氯叔丁醇0.5～1.5g(3)、無菌注射用水加至1000ml。
4.一種黃藤素制劑，其特征在于是由下列比例的原料組分制成的供靜脈給藥用的滴注液(1)、黃藤素0.1～1.0g(2)、氯化鈉7～9g(3)、無菌注射用水加至1000ml。
5.一種黃藤素制劑，其特征在于是由下列比例的原料組分制成的供靜脈給藥用的滴注液(1)、黃藤素0.1～1.0g(2)、葡萄糖40～70g(3)、無菌注射用水加至1000ml。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的精制方法，其特征在于包括以下具體步驟(1)、將黃藤素粗品(含量＞10％)與去離子水按1∶100(g∶ml)比例，加熱攪拌，使其充分溶解，冷至室溫，濾過，濾液加氫氧化鈉試液調(diào)節(jié)pH值至10，靜置12小時，濾過；濾液按7～10％加氯化鈉鹽析，靜置12小時，濾過，沉淀晾干；將沉淀按1∶3～10用80％乙醇回流提取2～5次，每次1～2小時，濾過，合并濾液，加鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2，冷卻析晶，濾過，晾干，即得黃色針狀結(jié)晶(含量HPLC測定應(yīng)≥95％)；(2)、將黃色針狀結(jié)晶，按1∶30～50(g∶ml)加入去離子水，加熱使溶解，冷至室溫(若有不溶物濾過)，加入乙醇至析出結(jié)晶，靜置析晶，濾過，結(jié)晶晾干；再將結(jié)晶按1∶30～50(g∶ml)比例加入注射用水，加熱使溶解，冷至室溫(若有不溶物濾過)，加鹽酸調(diào)節(jié)pH值至析出結(jié)晶，靜置析晶，濾過，結(jié)晶晾干后至80℃減壓干燥，取出，包裝，即得(含量HPLC測定應(yīng)大于98.0％)，按制訂標(biāo)準(zhǔn)和中國藥典2005年版一部附錄靜脈給藥用原料通則檢驗應(yīng)符合規(guī)定。
7.一種黃藤素的質(zhì)量控制技術(shù)，其特征在于是進行以下鑒別與檢測①、鑒別I、取本品，加硫酸，顯黃綠色，微熱后，顏色仍不變；II、取本品約0.05g，加水5ml，緩緩加熱溶解后，加氫氧化鈉試液2滴，顯橙紅色，放冷，濾過，取濾液，加丙酮4滴，即發(fā)生渾濁，放置后，生成橙黃色沉淀；取上清液，加丙酮1滴，如仍發(fā)生渾濁，再加丙酮適量使沉淀完全，濾過，濾液顯氯化物的鑒別反應(yīng)；②、檢測其他生物堿 取本品0.05g，置25ml量瓶中，加乙醇20ml，超聲處理10分鐘，再加乙醇稀釋至刻度，密塞，搖勻，作為供試品溶液。取鹽酸巴馬汀、鹽酸藥根堿、鹽酸黃連素，加乙醇分別配制成每1ml含0.8mg、0.5mg、0.4mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液與鹽酸藥根堿對照品溶液各2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲醇-濃氨試液-水(8∶1∶1)為展開劑，置氨蒸氣飽和的展開缸內(nèi)，首次展開約5cm，取出，晾干，置于100℃干燥20分鐘；取出，冷至室溫，旋轉(zhuǎn)90°角，再吸取鹽酸巴馬汀、鹽酸黃連素兩種對照品溶液各2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸(9∶3)為展開劑，展距約9cm，取出，晾干，置于紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，不得檢出與對照品鹽酸黃連素色譜位置相一致成分；在與對照品鹽酸藥根堿色譜相應(yīng)的位置上，其斑點熒光強度不得大于對照品熒光強度。水分 照水分測定法(中國藥典2005年版一部 附錄IX H第一法)測定，不得過5.0％；熾灼殘渣 不得過0.8％(中國藥典2005年版一部 附錄IX J)；蛋白質(zhì) 取本品0.1g，加水10ml使溶解，取2ml，置試管中，滴加鞣酸試液1～3滴，不得出現(xiàn)渾濁；鞣質(zhì) 取本品0.1g，加水10ml使溶解，取1ml，依法測定(中國藥典2005年版一部 附錄IX S)，應(yīng)符合規(guī)定；樹脂 取本品0.1g，加水10ml使溶解，取5ml，置分液漏斗中，加三氯甲烷10ml振搖提取，分取三氯甲烷液，依法測定(中國藥典2005年版一部附錄IX S)，應(yīng)符合規(guī)定；草酸鹽 取本品0.1g，加水10ml使溶解，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1～2，保溫濾去沉淀，調(diào)節(jié)pH值至5～6，取2ml，加3％氯化鈣溶液2～3滴，放置10分鐘，不得出現(xiàn)渾濁或沉淀；鉀離子 取本品0.12g，稱定，自“先用小火熾灼至炭化”起，依法測定(中國藥典2005年版一部 附錄IX S)，應(yīng)符合規(guī)定；重金屬 取熾灼殘渣項下遺留的殘渣，依法檢查(中國藥典2005年版一部附錄IX E第二法)，含重金屬不得過百萬分之二十；砷鹽 取本品1.0g，加2％硝酸鎂乙醇溶液3ml，點燃，燃盡后，先用小火熾灼使炭化，再在500～600℃熾灼至完全灰化，放冷，殘渣加鹽酸5ml與水2ml使溶解，依法檢查(中國藥典2005年版一部 附錄IX F第一法)。含砷量不得過百萬分之二；③、含量測定鹽酸巴馬汀 照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水-磷酸二氫鉀-十二烷基硫酸鈉(300∶200∶1.7g∶0.85g)為流動相，柱溫30℃，流速1.0ml/min；檢測波長為345nm。色譜柱的理論板數(shù)按鹽酸巴馬汀峰計算為1500；對照品溶液的制備 稱取黃藤素對照品約4mg，精密稱定，置25ml量瓶中，加70％乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取1ml置10ml量瓶中，加70％乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得；供試品溶液的制備 稱取黃藤素約5mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加70％乙醇超聲溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液；測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本品按干燥品計算，含鹽酸巴馬汀(C21H22NO4·HCl)不得少于98.0％。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的黃藤素制劑的制備方法，其特征在于包括以下步驟取符合檢驗規(guī)定的黃藤素原料和甘露醇，加注射用水至1500ml，攪拌使溶解，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至4.0～6.0，加入適量針用活性炭，攪拌20～40分鐘，濾過，檢測含量，加注射用水至全量，檢測pH合格后再經(jīng)0.22μm微孔濾膜終端濾過，分裝于7～10ml的鈉鈣管制注射劑瓶中，每瓶灌裝2ml，低溫下冷凍干燥，軋蓋即可。
9.根據(jù)權(quán)利要求3所述的黃藤素制劑的制備方法，其特征在于包括以下步驟取符合檢驗規(guī)定的黃藤素原料和三氯叔丁醇，加注射用水至800ml，攪拌使溶解，加入適量針用活性炭，攪拌20～40分鐘，濾過，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至4.0～6.0，濾過，檢測樣品含量，加注射用水至全量，檢測pH合格后再經(jīng)0.22μm微孔濾膜終端濾過，灌封于2m注射劑瓶中，滅菌，即可。
10.根據(jù)權(quán)利要求4所述的黃藤素制劑的制備方法，其特征在于包括以下步驟取符合檢驗規(guī)定的黃藤素原料，加注射用水至500ml，攪拌使溶解，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至4.0～6.0，加入0.1％(g/ml)的活性炭，加熱煮沸15～30分鐘，濾過，濾液備用，測定中間體含量。稱取處方量的氯化鈉，溶于250-500ml 90℃的注射用水中，攪拌使氯化鈉完全溶解，加0.1％的活性炭，保溫攪拌15分鐘，過濾脫炭，并調(diào)節(jié)pH值至5.5～6.5范圍內(nèi)，測定含量，與上述黃藤素濾液合并，加注射用水至定量，灌封分裝至100ml或250ml輸液瓶中，滅菌，即得；或超濾，無菌分裝至100ml或250ml聚丙烯輸液瓶中，即得。
11.根據(jù)權(quán)利要求5所述的黃藤素制劑的制備方法，其特征在于制備方法包括以下步驟取符合檢驗規(guī)定的黃藤素原料，加注射用水至500ml，攪拌使溶解，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至4.0～6.0，加入0.1％(g/ml)的針用活性炭，加熱煮沸15～30分鐘，濾過，濾液備用，測定中間體含量。稱取處方量的葡萄糖，加于煮沸的注射用水中，使成50％～60％的濃溶液，加鹽酸適量，同時加入0.1％的活性炭加熱煮沸15～30分鐘，過濾脫炭，測定含量，與上述黃藤素濾液合并，加注射用水至定量，灌封分裝至100ml或250ml輸液瓶中，滅菌，即得；或超濾，無菌分裝至100ml或250ml聚丙烯輸液瓶中，即得。
全文摘要
本發(fā)明涉及供靜脈途徑給藥用的一種中藥單體成分的原料、制劑的制備方法及其質(zhì)量控制技術(shù)，具體來說是注射級黃藤素(即無水鹽酸棕櫚堿C
文檔編號A61P31/04GK1785187SQ20051009521
公開日2006年6月14日 申請日期2005年10月31日 優(yōu)先權(quán)日2005年10月31日
發(fā)明者余世春 申請人:安徽科創(chuàng)中藥天然藥物研究所有限責(zé)任公司