專利名稱：異喹啉衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及通式I化合物及其生理上可接受的衍生物，特別是它們的鹽和溶劑化物 其中X為H，-C(＝NR3)-NHR4或Het， 或 Y為-(CH2)m-，Z為NH或CH2，R1和R5彼此獨(dú)立地為H，A，OH，OA，芳烷基，，Hal，-CO-A，CN，NO2，NHR3，COOA，COOH，SO2A，CF3或OCF3，R2在每種情況下獨(dú)立地為H或A，R3和R4彼此獨(dú)立地為H，A，-CO-A，NO2或CN，A為具有1-6個(gè)碳原子的烷基，m為0，1，2，3，4，5或6，n和p彼此獨(dú)立地為1，2或3。
本發(fā)明的目的在于尋找有價(jià)值的新化合物，特別是那些可用于制備藥物的新化合物。
業(yè)已發(fā)現(xiàn)，式I化合物及其鹽具有非常有價(jià)值的藥理學(xué)性質(zhì)和良好的耐受性。具體講，它們可用作整聯(lián)蛋白的抑制劑，特別是能夠抑制αv，β3，β5或β6整聯(lián)蛋白受體與配體間的相互作用，例如能夠抑制血纖蛋白原與整聯(lián)蛋白受體的結(jié)合。
整聯(lián)蛋白屬于I類異源二聚體跨膜受體家族，在許多細(xì)胞-基質(zhì)和細(xì)胞-細(xì)胞粘附過程中起著重要作用(Tuckwell等，1996，Symp.Soc.Exp.Biol.47)。它們大致可分為3類β1整聯(lián)蛋白(它們是細(xì)胞外基質(zhì)的受體)，β2整聯(lián)蛋白(它們可以在白細(xì)胞上激活，從而在炎癥過程中被激發(fā))，以及αv整聯(lián)蛋白，該類整聯(lián)蛋白能夠影響傷口愈合過程及其它病理過程中的細(xì)胞應(yīng)答(Marshall和Hart，1996，Semin.CancerBiol.7，191)。對(duì)配體結(jié)合的相對(duì)親和性和特異性取決于各種α和β亞單位的組合。
本發(fā)明的化合物對(duì)于整聯(lián)蛋白αvβ1，αvβ3，αvβ5，αIIbβ3以及αvβ6和αvβ8(優(yōu)選αvβ3，αvβ5和αvβ6，以及αIIbβ3)，都顯示出特殊的功效。
αvβ6是一種相對(duì)稀少的整聯(lián)蛋白(Busk等，J.Biol.Chem.1992，267(9)，5790)，在上皮組織的修復(fù)過程中其形成量增多，并且優(yōu)先與天然基質(zhì)分子粘連蛋白和肌腱蛋白結(jié)合(Wang等，Am.J.Respir.CellMol.Biol.1996，15(5)，664)。αvβ6的生理學(xué)和病理學(xué)作用尚不確切，但推測(cè)這種整聯(lián)蛋白在與上皮細(xì)胞有關(guān)的生理過程和病癥(例如炎癥、傷口愈合、腫瘤)中起重要作用。因此，αvβ6在傷口的角化細(xì)胞上表達(dá)(Haapasalmi等，J.Invest.Dermatol.1996，106(1)，42)，據(jù)此可以假定除傷口愈合過程和炎癥以外，皮膚的其它病理現(xiàn)象例如牛皮癬、大皰性天皰疹、皮炎和紅斑、以及囊性纖維化、子宮內(nèi)膜異位癥、肝硬化和牙周炎，也可能受到所述整聯(lián)蛋白的激動(dòng)劑或拮抗劑的影響。此外，αvβ6還在呼吸道上皮中起作用(Weinacker等，Am.J.Respir.CellMol.Biol.1995，12(5)，547)，因此該整聯(lián)蛋白的相應(yīng)激動(dòng)劑/拮抗劑可成功地用于呼吸道疾病，例如支氣管炎、氣喘、肺纖維化和呼吸道腫瘤。最后，已知αvβ6還在腸道上皮中起作用，這意味著相應(yīng)的整聯(lián)蛋白激動(dòng)劑/拮抗劑可以用于治療胃腸道的炎癥、腫瘤和創(chuàng)傷。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的式I化合物及其鹽作為可溶性分子作用于攜帶上述受體的細(xì)胞，或者如果它們結(jié)合在表面上，則它們是αvβ6介導(dǎo)的細(xì)胞粘連的人工配體。具體講，它們可用作αvβ6整聯(lián)蛋白抑制劑，特別是能夠抑制這種受體與其它配體的相互作用，例如粘連蛋白的結(jié)合。
本發(fā)明化合物尤其是玻連蛋白受體αvβ3的強(qiáng)效抑制劑和/或αvβ6受體的強(qiáng)效抑制劑。
αvβ3整聯(lián)蛋白在許多細(xì)胞上均有表達(dá)，例如內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞(例如主動(dòng)脈的血管平滑肌細(xì)胞)、降解骨基質(zhì)(破骨細(xì)胞)或腫瘤細(xì)胞。
本發(fā)明化合物的作用例如可以采用J.W.Smith等在J.Biol.Chem.1990，265，12267-12271中描述的方法證實(shí)。
B.Felding-Habermann和D.A.Cheresh在Curr.Opin.Cell.Biol.1993，5，864中描述了整聯(lián)蛋白作為粘連受體對(duì)各種病象與癥狀，尤其是與玻連蛋白受體αvβ3有關(guān)的各種病象與癥狀的重要性。
P.C.Brooks，R.A.Clark和D.A.Cheresh在Science 1994，264，569-571中描述到，血管生成依賴于血管整聯(lián)蛋白與細(xì)胞外基質(zhì)蛋白之間的相互作用。
P.C.Brooks，A.M.Montgomery，M.Rosenfeld，R.A.Reisfeld，T.Hu，G.Klier和D.A.Cheresh在Cell 1994，79，1157-1164中描述了使用環(huán)肽抑制這種相互作用并由此引發(fā)血管生成性血管細(xì)胞的細(xì)胞凋亡(編程性細(xì)胞死亡)的可能性。其中描述了可通過引發(fā)細(xì)胞凋亡而使腫瘤縮小的αvβ3拮抗劑或抗αvβ3的抗體。
類似于F.Mitjans等人的方法(J.Cell Science 1995，108，2825-2838)，在細(xì)胞粘附試驗(yàn)中，可提供實(shí)驗(yàn)證據(jù)證明本發(fā)明化合物也能阻止活細(xì)胞粘附于相應(yīng)的基質(zhì)蛋白，因此也可以阻止腫瘤細(xì)胞粘附于基質(zhì)蛋白。
P.C.Brooks等在J.Clin.Invest.1995，96，1815-1822中介紹了可用于殺滅癌癥和治療腫瘤誘發(fā)的血管生成疾病的αvβ3拮抗劑。
本發(fā)明化合物能夠抑制金屬蛋白酶與整聯(lián)蛋白的結(jié)合，由此阻止細(xì)胞利用蛋白酶的酶活性。其中的一個(gè)實(shí)例是如P.C.Brooks等所述(Cell 1996，85，683-693)，使用環(huán)-RGD肽可以抑制MMP-2(基質(zhì)金屬蛋白酶2)與玻連蛋白受體αvβ3的結(jié)合。
本發(fā)明的式I化合物因此可以用作藥物活性成分，特別適用于治療腫瘤疾病、骨質(zhì)疏松癥、溶骨病，以及用于抑制血管生成。
可以阻斷整聯(lián)蛋白受體與配體之間(例如纖維蛋白原與纖維蛋白原受體(糖蛋白IIb/IIIa)之間)相互作用的式I化合物，作為GPIIb/IIIa拮抗劑，能夠阻止腫瘤細(xì)胞通過轉(zhuǎn)移進(jìn)行擴(kuò)散。這可通過下列研究證實(shí)局部腫瘤的腫瘤細(xì)胞向脈管系統(tǒng)的擴(kuò)散通過腫瘤細(xì)胞與血小板相互作用形成微聚集物(微血栓)而進(jìn)行。腫瘤細(xì)胞通過保護(hù)在微聚集物中受到屏蔽，因而不能被免疫系統(tǒng)的細(xì)胞識(shí)別。微聚集物本身可以附著在血管壁上，從而有助于腫瘤細(xì)胞進(jìn)一步侵入組織。由于纖維蛋白原與活化血小板上纖維蛋白原受體的結(jié)合能夠促進(jìn)微血栓的形成，因此GPIIb/IIIa拮抗劑可被認(rèn)為是有效的轉(zhuǎn)移抑制劑。
除能抑制纖維蛋白原、纖連蛋白和von Willebrand因子與血小板纖維蛋白原受體的結(jié)合之外，式I化合物還抑制其它粘附蛋白如玻連蛋白、膠原和層粘連蛋白與各種類型細(xì)胞表面上的相應(yīng)受體的結(jié)合。特別是，它們能抑制血小板性血栓的形成，并因此可用于治療血栓形成、中風(fēng)、心肌梗死、炎癥和動(dòng)脈硬化。
血小板聚集抑制作用可用Born方法(Nature 1962，4832，927-929)在體外證實(shí)。
藥物活性成分在生物體中的吸收量度標(biāo)準(zhǔn)是其生物利用度。
如果藥物活性成分以注射液形式靜脈內(nèi)施于生物體，其絕對(duì)生物利用度，即在系統(tǒng)血液中未發(fā)生變化，亦即進(jìn)行體循環(huán)的藥物的比例為100％。
在口服給藥治療活性成分時(shí)，活性成分通常以固體制劑形式存在，因此必須首先溶出才能跨越進(jìn)入屏障，例如胃腸道、口腔粘膜、鼻腔粘膜或皮膚，特別是角質(zhì)層，然后才可以被身體吸收。藥代動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)，即生物利用度數(shù)據(jù)可采用類似于J.Shaffer等人的方法獲得(J.Pharm.Sciences，1999，88，313-318)。
本發(fā)明涉及用作治療活性成分的權(quán)利要求1所述的式I化合物及其生理上可接受的鹽和/或溶劑化物。
為此，本發(fā)明涉及用作整聯(lián)蛋白抑制劑的權(quán)利要求1所述的式I化合物及其生理上可接受的鹽和/或溶劑化物。
本發(fā)明涉及用于對(duì)抗疾病的權(quán)利要求1所述的式I化合物及其生理上可接受的鹽和/或溶劑化物。
式I化合物可用作人和獸用藥物的藥物活性成分，尤其可用于預(yù)防和/或治療以下疾病循環(huán)疾病、血栓形成、心肌梗塞、動(dòng)脈硬化、中風(fēng)、心絞痛、腫瘤疾病如腫瘤生長(zhǎng)或腫瘤轉(zhuǎn)移、溶骨性疾病如骨質(zhì)疏松癥、病理性血管生成疾病如炎癥、眼病、糖尿病性視網(wǎng)膜病、黃斑變性、近視、眼組織胞漿菌病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、新血管生成性(rubeotic)青光眼、胃潰瘍性結(jié)腸炎、Crohn病、動(dòng)脈粥樣硬化、牛皮癬、大泡性天皰疹、皮炎、紅斑、肺纖維化、囊性纖維化、子宮內(nèi)膜異位癥、肝硬化、牙周炎、血管成形術(shù)后再狹窄、多發(fā)性硬化、病毒感染、細(xì)菌感染、真菌感染、急性腎衰竭以及在傷口愈合中促進(jìn)愈合過程。
式I化合物可在使用生物材料、植入物、導(dǎo)管或心臟起博器的手術(shù)中作為抗微生物劑使用。在此它們具有防腐作用?？刮⑸锘钚缘男Я捎肞.Valentin-Weigund等在Infection and Immunity，1988，2851-2855中描述的方法證明。
由于式I化合物是纖維蛋白原結(jié)合的抑制劑并因此是血小板上纖維蛋白原受體的配體，所以，如果它們被例如放射活性或UV可檢測(cè)的基團(tuán)取代，則它們可以作為體內(nèi)診斷劑用于檢測(cè)和定位血管系統(tǒng)中的血栓。
作為纖維蛋白原結(jié)合的抑制劑，式I化合物還可以作為有效助劑用于研究不同活化階段血小板的代謝情況或研究纖維蛋白原受體的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)機(jī)制。摻入的標(biāo)記物的可檢測(cè)單位，例如3H標(biāo)記的同位素，使得上述機(jī)理在與受體結(jié)合之后進(jìn)行研究成為可能。
本文使用以下縮寫Ac 乙?；鵄za-Gly H2N-NH-COOHBOC 叔丁氧基羰基CBZ或Z 芐氧基羰基DCCI二環(huán)己基碳二亞胺DCM 二氯甲烷DIPEA 二異丙基乙胺DMF 二甲基甲酰胺DMSO二甲基亞砜EDCIN-乙基-N，N’-(二甲氨基丙基)碳二亞胺Et 乙基Fmoc9-芴基甲氧基羰基Gly 甘氨酸Gua 胍HATUO-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽HOBt1-羥基苯并三唑Me 甲基MBHA4-甲基二苯甲基胺Mtr 4-甲氧基-2，3，6-三甲基苯磺酰基NMP N-甲基吡咯烷酮NMR 核磁共振HONSu N-羥基琥珀酰亞胺OBzl芐基酯OtBu叔丁基酯Oct 辛?；鵒Me 甲基酯
OEt 乙基酯Pbf 2，2，4，6，7-五甲基二氫苯并呋喃-5-磺酰基β-Pheβ-苯丙氨酸POA 苯氧基乙?；鵓yr 吡啶Rf值 保留因子RP反相RT保留時(shí)間Sal 水楊酰TBTU O-(1H-苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓四氟硼酸鹽TFA 三氟乙酸Thiqu 1，2，3，4-四氫異喹啉Trt 三苯甲基(三苯基甲基)式I化合物具有至少一個(gè)手性中心，因此可以多種立體異構(gòu)體形式存在。所有這些立體異構(gòu)體(例如D和L形式)及其混合物的形式(例如DL形式)都包括在式I內(nèi)。
權(quán)利要求1所述的本發(fā)明化合物還包括所謂的前藥衍生物，亦即用例如烷基或酰基、糖或寡肽修飾的式I化合物，它們?cè)谏矬w內(nèi)能迅速裂解成本發(fā)明的活性化合物。
這些還包括本發(fā)明化合物的生物可降解的聚合物衍生物，參見Int.J.Pharm.1995，115，61-67中的描述。
權(quán)利要求1所述的本發(fā)明化合物還包括式I化合物的這些衍生物，其中的羧基已轉(zhuǎn)化成其藥學(xué)上可接受的代謝不穩(wěn)定酯或酰胺。
此外，作為式I化合物的取代基的游離氨基或游離羥基還可以帶有合適的保護(hù)基。
術(shù)語“式I化合物的溶劑化物，，應(yīng)理解為是指惰性溶劑分子與式I化合物形成的加合物，這種加合物基于它們的相互吸引力而形成。例如，溶劑化物包括一水合物或二水合物，或者與醇例如甲醇或乙醇形成的加合物。
本發(fā)明進(jìn)一步涉及制備權(quán)利要求1所述化合物及其鹽的方法，其特征在于a)在縮合劑例如HATU的存在下，使式II化合物 其中Z，R1和n如上定義，且W為常規(guī)保護(hù)基或肽化學(xué)中使用的固相，與式III化合物進(jìn)行反應(yīng) 其中Y如上定義，Q為合適的保護(hù)基或Het，隨后除去所述保護(hù)基和/或所述固相，并且，在適當(dāng)情況下，如果作為保護(hù)基的Q被除去，則將所得產(chǎn)物與合適的脒化合物例如N，N’-雙-BOC-1-脒基吡唑反應(yīng)，并且如果需要的話，除去剩余的保護(hù)基和/或固相，或者b)通過用溶劑解劑或氫解劑處理，將式I化合物從其官能團(tuán)衍生物中釋出，和/或其特征在于，將堿性或酸性式I化合物通過用酸或堿處理而轉(zhuǎn)化成其鹽。
在本發(fā)明全文中，所有出現(xiàn)不止一次的基團(tuán)例如R1可以相同或不同，即其是彼此獨(dú)立的。
在上述各式中，A為直鏈或支鏈烷基，并且具有1-6個(gè)，優(yōu)選1、2、3、4、5或6個(gè)的碳原子。A優(yōu)選為甲基，此外還優(yōu)選為乙基、異丙基、正丙基、正丁基、異丁基、仲丁基或叔丁基，以及正戊基，1-、2-或3-甲基丁基，1，1-、1，2-或2，2-二甲基丙基，1-乙基丙基，己基，1-、2-、3-或4-甲基戊基，1，1-、1，2-、1，3-、2，2-、2，3-或3，3-二甲基丁基，1-或2-乙基丁基，1-乙基-1-甲基丙基，1-乙基-2-甲基丙基，1，1，2-或1，2，2-三甲基丙基。
A特別優(yōu)選為甲基。
術(shù)語“保護(hù)基”優(yōu)選為乙?；?，丙?；?，丁?；?，苯乙?；?，苯甲?；?，甲苯基，POA，甲氧基羰基，乙氧基羰基，2，2，2-三氯乙氧基羰基，BOC，2-碘代乙氧基羰基，CBZ(“芐氧基羰基”)，4-甲氧基芐氧基羰基，F(xiàn)moc，Mtr或芐基，特別優(yōu)選Fmoc。
芳烷基優(yōu)選為芐基，苯乙基，苯丙基或萘甲基，特別優(yōu)選芐基。
Hal優(yōu)選為F，Cl或Br。
Het為含有至多三個(gè)雜原子的芳香性或飽和的單環(huán)或二環(huán)基團(tuán)，優(yōu)選為具有5-10個(gè)環(huán)原子的飽和、部分飽和或完全不飽和的單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)基，其中可以存在1或2個(gè)N和/或1或2個(gè)S或O原子，并且這種雜環(huán)基可被CN、Hal、OH、OA、CF3、A、NO2或OCF3單取代或二取代。
Het優(yōu)選是取代或未取代的2-或3-呋喃基，2-或3-噻吩基，1-、2-或3-吡咯基，1-、2-、4-或5-咪唑基，3-、4-或5-吡唑基、2-、4-或5-噁唑基、3-、4-或5-異噁唑基，2-、4-或5-噻唑基，3-、4-或5-異噻唑基，2-、3-或4-吡啶基，2-、4-、5-或6-嘧啶基，此外還優(yōu)選1，2，3-三唑-1-、-4-或-5-基，1，2，4-三唑-1-、-4-或-5-基，1-或5-四唑基，1，2，3-噁二唑-4-或-5-基，1，2，4-噁二唑-3-或-5-基，1，3，4-噻二唑-2-或-5-基，1，2，4-噻二唑-3-或-5-基，1，2，3-噻二唑-4-或-5-基，2-、3-、4-、5-或6-2H-噻喃基，2-、3-或4-4H-噻喃基，3-或4-噠嗪基，吡嗪基，2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并呋喃基，2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并噻吩基，1-、2-、3-、4-、5-、6-或7-1H-吲哚基，1-、2-、4-或5-苯并咪唑基，1-、3-、4-、5-、6-或7-苯并吡唑基，2-、4-、5-、6-或7-苯并噁唑基，3-、4-、5-、6-或7-苯并異噁唑基，2-、4-、5-、6-或7-苯并噻唑基，2-、4-、5-、6-或7-苯并異噻唑基，4-、5-、6-或7-苯并-2，1，3-噁二唑基，1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基，1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-異喹啉基，1-、2-、3-、4-或9-咔唑基，1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-、8-或9-吖啶基，3-、4-、5-、6-、7-或8-噌啉基，2-、4-、5-、6-、7-或8-喹唑啉基。雜環(huán)基還可以被部分或全部氫化。Het因此還可以是2，3-二氫-2-、-3-、-4-或-5-呋喃基，2，5-二氫-2-、-3-、-4-或-5-呋喃基，四氫-2-或-3-呋喃基，1，3-二氧戊環(huán)-4-基，四氫-2-或-3-噻吩基，2，3-二氫-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡咯基，2，5-二氫-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡咯基，1-、2-或3-吡咯烷基，四氫-1-、-2-或-3-吡咯基，四氫-1-、-2-或-4-咪唑基，2，3-二氫-1-、-2-、-3-、-4-、-5-、-6-或-7-1H-吲哚基，2，3-二氫-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡唑基，四氫-1-、-3-或-4-吡唑基，1，4-二氫-1-、-2-、-3-或-4-吡啶基，1，2，3，4-四氫-1-、-2-、-3-、-4-、-5-或-6-吡啶基，1，2，3，6-四氫-1-、-2-、-3-、-4-、-5-或-6-吡啶基，1-、2-、3-或4-哌啶基，1-、2-、3-或4-氮雜庚環(huán)基，2-、3-或4-嗎啉基，四氫-2-、-3-或-4-吡喃基，1，4-二噁烷基，1，3-二噁烷-2-、-4-或-5-基，六氫-1-、-3-或-4-噠嗪基，六氫-1-、-2-、-4-或-5-嘧啶基，1-、2-或3-哌嗪基，1，2，3，4-四氫-1-、-2-、-3-、-4-、-5-、-6-、-7-或8-喹啉基，1，2，3，4-四氫-1-、-2-、-3-、-4-、-5-、-6-、-7-或-8-異喹啉基。Het特別優(yōu)選甲基吡啶基，尤其是4-甲基吡啶-2-基，吡啶-2-基，嘧啶-2-基，咪唑-2-基，苯并咪唑-2-基和它們的氫化衍生物。
OA優(yōu)選為甲氧基，乙氧基，丙氧基或丁氧基，此外還優(yōu)選為戊氧基或己氧基。
R1和R5彼此獨(dú)立地優(yōu)選為H，A，CN，NO2，Hal或-COA，其中A如上定義；R1和R5尤其為H。
R2優(yōu)選為H或A，其中A如上定義；特別是H。
R3和R4，彼此獨(dú)立，優(yōu)選為H或-COA，特別是H。
X優(yōu)選為H，-C(＝NH)-NH2，-C(＝N-甲基)-NH2，4-甲基吡啶-2-基，吡啶-2-基，嘧啶-2-基，咪唑-2-基，苯并咪唑-2-基和它們的氫化衍生物。
Y為-(CH2)m-或 尤其是-(CH2)4-或 n和p，彼此獨(dú)立，優(yōu)選為1或2，尤其為1。
m優(yōu)選為0，2或4，尤其是0或4。
優(yōu)選式IA和IB的化合物 其中X、Y、Z和R2如上定義。式IA和IB中的R2特別優(yōu)選為H。
因此，本發(fā)明尤其涉及其中所述基團(tuán)至少一個(gè)具有上述優(yōu)選含義的式I化合物。一些優(yōu)選的化合物組可以用下面亞式I1-136表述







另外，式I化合物及制備它們用的起始原料可用本領(lǐng)域已知的方法制備，例如參見文獻(xiàn)(譬如標(biāo)準(zhǔn)專著，如Houben-Weyl，Methoden derorganischen Chemie[有機(jī)化學(xué)方法]，Georg-Thieme-Verlag，Stuttgart)中描述的方法，確切地講是在已知的且適于所述反應(yīng)的反應(yīng)條件下制備。在此也可以采用已知方法的變化形式，但在此不作詳述。
如果需要，起始原料也可以就地生成，這樣就無需從反應(yīng)混合物中分離出它們，而可以直接進(jìn)一步轉(zhuǎn)化成式I化合物。
式I化合物優(yōu)選在肽合成的條件下獲得。理想的是使用常規(guī)肽合成方法，參見例如Houben-Weyl1.c.，Volume 15/II，第1-806頁(1974)中所述。
式I化合物的直接前體也可以在固相例如可溶脹的聚苯乙烯樹脂上合成，參見例如Merrifield所述方法(Angew.Chem.97，801-812，1985)?？梢允褂玫墓滔嘣瓌t上可以是例如固相肽合成或核酸合成已知的所有載體。合適的高分子載體材料是固相高分子(優(yōu)選具有親水性能)，例如交聯(lián)的多糖如纖維素，sepharose或SephadexR，丙烯酰胺，聚乙二醇基聚合物或觸角聚合物(tentacle polymersR)。所用固相優(yōu)選為三苯甲基氯-聚苯乙烯樹脂，4-甲氧基三苯甲基氯樹脂，Merrifield樹脂或Wang樹脂。
因此，式I化合物可以通過式II化合物與式III化合物反應(yīng)，隨后除去保護(hù)基或這種固相而獲得。
式I化合物同樣也可以經(jīng)過式IV化合物與式V化合物反應(yīng)，隨后除去保護(hù)基而獲得。
偶聯(lián)反應(yīng)優(yōu)選是在脫水劑，例如碳化二亞胺如DCCI或EDCI，以及例如丙烷膦酸酐(參見Angew.Chem.1980，92，129)，二苯基膦?；B氮或2-乙氧基-N-乙氧基羰基-1，2-二氫喹啉的存在下，在惰性溶劑例如鹵代烴(如二氯甲烷)、醚(如四氫呋喃或二噁烷)、酰胺(如DMF或二甲基乙酰胺)、腈(如乙腈)、二甲亞砜中或在這種溶劑存在下，于大約-10至40℃，優(yōu)選0-30℃的溫度下進(jìn)行。為了促進(jìn)分子間肽鍵合之前的分子內(nèi)環(huán)化作用，反應(yīng)宜在稀溶液中進(jìn)行。反應(yīng)時(shí)間取決于所用條件，可以從幾分鐘到14天不等。
本發(fā)明也可以使用式II和/或IV化合物的衍生物來代替式II和/或IV化合物，優(yōu)選使用預(yù)活化的羧酸、或羧酰鹵、對(duì)稱或混合酸酐或活性酯。文獻(xiàn)(例如見標(biāo)準(zhǔn)專著如Houben-Weyl，Methoden derorganischen Chemie[有機(jī)化學(xué)方法]，Georg-Thieme-Verlag，Stuttgart)已經(jīng)記載了在典型的?；磻?yīng)中用于活化羧基的此類基團(tuán)，活性酯宜就地形成，例如通過加入HOBt或N-羥基琥珀酰亞胺就地形成。
反應(yīng)通常在惰性溶劑中進(jìn)行，如果使用羧酰鹵，反應(yīng)則在有酸結(jié)合劑(優(yōu)選有機(jī)堿如三乙胺、二甲基苯胺、吡啶或喹啉)存在的情形下進(jìn)行。
同樣有利的是加入堿金屬或堿土金屬的氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽，或堿金屬或堿土金屬的其它弱酸鹽，優(yōu)選鉀、鈉、鈣或銫的這種鹽。
此外，通過溶劑解(特別是水解)，或通過氫解，式I化合物還可以通過從其官能衍生物中釋出而獲得。
用于溶劑解或氫解的優(yōu)選起始原料是在其它方面都與式I的結(jié)構(gòu)一致，但其中的一個(gè)或多個(gè)游離氨基和/或羥基卻被相應(yīng)的被護(hù)氨基和/或羥基基團(tuán)取代的那些化合物，尤其是其中H-N基團(tuán)被SG1-N基團(tuán)(其中SG1為氨基保護(hù)基)取代，和/或其中羥基的H原子被羥基保護(hù)基取代的那些化合物，例如具有式I結(jié)構(gòu)但其中的-COOH基團(tuán)被-COOSG2取代的化合物，其中SG2為羥基保護(hù)基。
起始原料分子中也可以存在多個(gè)相同或不同的保護(hù)的氨基和/或羥基。如果存在的保護(hù)基彼此不同，在許多情形下，能夠選擇性地將它們除去(參見T.W.Greene，P.G.M.Wuts，有機(jī)化學(xué)中的保護(hù)基(Protective Groups in Organic Chemistry)，第2版，Wiley，New York1991或P.J.Kocienski，保護(hù)基(Protecting Groups，第1版，GeorgThieme Verlag，Stuttgart-New-York，1994)，H.Kunz，H.Waldmann綜合有機(jī)合成(Comprehensive Organic Synthesis)Vol.6(Eds..B.M.Trost，I.Fleming，E.Winterfeldt)，Pergamon，Oxford，1991，pp.631-701)。
術(shù)語“氨基保護(hù)基”是通常已知的，并且是指適于保護(hù)(或封閉)氨基以避免其發(fā)生化學(xué)反應(yīng)的基團(tuán)。典型的這類基團(tuán)尤其是未取代的或取代的酰基、芳基、芳烷氧基甲基或芳烷基。由于氨基保護(hù)基是在需要的反應(yīng)(或合成順序)之后除去，因此其類型和大小并不重要；但優(yōu)選具有1-20個(gè)碳原子的那些基團(tuán)。術(shù)語“酰基”應(yīng)作與本發(fā)明方法有關(guān)的最廣義的解釋。它包括衍生自脂肪族、芳脂族、脂環(huán)族、芳族或雜環(huán)羧酸或磺酸的酰基，以及烷氧基羰基、鏈烯氧基羰基、芳氧基羰基和尤其是芳烷氧基羰基的基團(tuán)。該類型?；膶?shí)例是鏈烷?；?，譬如乙?；?、丙?；投□；?；芳烷?；?，譬如苯乙?；?；芳?；?，如苯甲?；图妆郊柞；?；芳氧基鏈烷?；?，如苯氧基乙?；?；烷氧基羰基，如甲氧基羰基、乙氧基羰基、2，2，2-三氯乙氧基羰基；Boc和2-碘代乙氧基羰基；鏈烯氧基羰基，如烯丙氧基羰基(Aloc)、芳烷氧基羰基，如CBZ(與Z同義)、4-甲氧基芐氧基羰基(MOZ)、4-硝基芐氧基羰基和9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)；2-(苯磺酰基)乙氧基羰基；三甲基甲硅烷基乙氧基羰基(Teoc)，和芳基磺?；?，如4-甲氧基-2，3，6-三甲基苯磺酰基(Mtr)。優(yōu)選的氨基保護(hù)基是Boc，F(xiàn)moc和Aloc，另外還有Z、芐基和乙?；?br> 術(shù)語“羥基保護(hù)基”同樣也是通常已知的，并且是指適于保護(hù)羥基以避免其發(fā)生化學(xué)反應(yīng)的基團(tuán)。典型的此類基團(tuán)是上述的未取代的或取代的芳基、芳烷基、芳酰基或?；送膺€可以是烷基，烷基-、芳基-和芳烷基甲硅烷基基團(tuán)，以及O，O-和O，S-縮醛。由于羥基保護(hù)基是在需要的化學(xué)反應(yīng)或合成順序之后除去，因此其性質(zhì)和大小并不重要；具有1-20個(gè)碳原子，特別是1-10個(gè)碳原子的基團(tuán)是優(yōu)選的。羥基保護(hù)基的實(shí)例特別是芳烷基，如芐基、4-甲氧基芐基和2，4-二甲氧基芐基，芳?；绫郊柞；蛯?duì)-硝基苯甲?；；缫阴；托挛祯；?，對(duì)-甲苯磺酰基，烷基如甲基和叔丁基，但也可以是烯丙基，烷基甲硅烷基，如三甲基甲硅烷基(TMS)、三異丙基甲硅烷基(TIPS)、叔丁基二甲基甲硅烷基(TBS)和三乙基甲硅烷基，三甲基甲硅烷基乙基，芳烷基甲硅烷基，如叔丁基二苯基甲硅烷基(TBDPS)，環(huán)狀縮醛，如亞異丙基縮醛、亞環(huán)戊基縮醛、亞環(huán)己基縮醛、亞芐基縮醛、對(duì)甲氧基亞芐基羧酸和鄰，對(duì)-二甲氧基亞芐基縮醛，非環(huán)狀縮醛，如四氫吡喃基(Thp)、甲氧基甲基(MOM)、甲氧基乙氧基甲基(MEM)、芐氧基甲基(BOM)和甲硫基甲基(MTM)。特別優(yōu)選的羥基保護(hù)基是芐基、乙酰基、叔丁基和TBS。
在使用保護(hù)基的每種情形下，從其官能團(tuán)衍生物中釋出式I化合物的方法是文獻(xiàn)中已知的(如T.W.Greene，P.G.M.Wuts，有機(jī)化學(xué)中的保護(hù)基(Protective Groups in Organic Chemistry)，第2版，Wiley，New York 1991，或P.J.Kocienski，保護(hù)基(Protecting Groups)，第1版，Georg Thieme Verlag，Stuttgart-New York，1994)。在該情形下也可以使用本領(lǐng)域已知的改進(jìn)形式，但在此不作詳述。
式I堿可利用酸轉(zhuǎn)化成締合的酸加成鹽，例如，在惰性溶劑如乙醇中將等量的這種堿與酸反應(yīng)，然后蒸發(fā)便可以實(shí)現(xiàn)這種轉(zhuǎn)化。對(duì)于該反應(yīng)，適宜的酸特為那些能形成生理上可接受的鹽的酸。因此，可以使用無機(jī)酸，例如硫酸、亞硫酸、連二硫酸、硝酸、氫鹵酸(如鹽酸或氫溴酸)、磷酸，如正磷酸，氨基磺酸、另外也可以使用有機(jī)酸，特別是脂族、脂環(huán)族、芳脂族、芳族或雜環(huán)的一元或多元羧酸、磺酸或硫酸，例如甲酸、乙酸、丙酸、己酸、辛酸、癸酸、十六烷酸、十八烷酸、新戊酸、二乙基乙酸、丙二酸、琥珀酸、庚二酸、富馬酸、馬來酸、乳酸、酒石酸、蘋果酸、檸檬酸、葡糖酸、抗壞血酸、煙酸、異煙酸、甲磺酸或乙磺酸、苯磺酸、三甲氧基苯甲酸、金剛烷羧酸、對(duì)-甲苯磺酸、乙醇酸、撲酸、氯苯氧基乙酸、天冬氨酸、谷氨酸、脯氨酸、乙醛酸、棕櫚酸、對(duì)-氯苯氧基異丁酸、環(huán)己烷羧酸、葡萄糖1-磷酸、萘一磺酸和萘二磺酸或月桂基硫酸。與生理上不可接受的酸所成的鹽，例如苦味酸鹽，可用于分離和/或純化式I化合物。
另一方面，式I化合物可利用堿(例如氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉或碳酸鉀)轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的金屬鹽，特別是堿金屬鹽或堿土金屬鹽，或者轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的銨鹽。另外，合適的鹽還包括取代的銨鹽，例如單乙醇-、二乙醇-或二異丙基銨鹽，環(huán)己基或二環(huán)己基銨鹽，二芐基乙二胺鹽，以及例如與精氨酸或賴氨酸形成的鹽。
本發(fā)明還涉及式I化合物和/或其生理上可接受的鹽在制備藥物方面的用途。
此外，本發(fā)明還涉及包含至少一種式I化合物和/或其生理上可接受的鹽或溶劑化物的藥物制劑，所述藥物制劑是以非化學(xué)方法制備的。在這種情形下，可以將式I化合物與至少一種固體、液體和/或半液體賦形劑或輔劑一起，并且如果需要，和一種或多種其它活性成分聯(lián)合制成合適劑型。
這些制劑可作為人用藥或獸用藥使用。適宜的賦形劑是適于腸道(例如口服)、胃腸外或局部給藥并且不與本發(fā)明的新化合物發(fā)生反應(yīng)的有機(jī)或無機(jī)物質(zhì)，例如水、植物油、芐醇類、亞烷基二醇、聚乙二醇、甘油三乙酸酯、明膠、碳水化合物如乳糖或淀粉、硬脂酸鎂、滑石或凡士林。具體講，片劑、丸劑、包衣片劑、膠囊劑、粉劑、顆粒劑、糖漿劑、果汁劑或滴劑適合口服給藥，栓劑適合直腸給藥，溶液優(yōu)選油性或水性溶液、以及混懸劑、乳劑或植入劑適合胃腸外給藥，軟膏劑、霜?jiǎng)┗蚍蹌┻m合局部給藥。也可以將本發(fā)明新化合物凍干，由此得到的凍干物可用于例如制備注射劑。所述制劑可以加以滅菌和/或可包含輔助劑，如潤(rùn)滑劑、防腐劑、穩(wěn)定劑和/或濕潤(rùn)劑，乳化劑、調(diào)節(jié)滲透壓的鹽、緩沖物質(zhì)、著色劑、調(diào)味劑和/或其它活性成分，例如一種或多種維生素。
對(duì)于吸入噴霧給藥，可以使用其中的活性成分溶在或懸浮在推進(jìn)劑氣體或推進(jìn)劑氣體混合物(例如CO2或氯氟烴類)中的噴霧劑。在此所用的活性成分優(yōu)選為微粉化形式，其中可存在一種或多種附加的生理上可接受的溶劑，例如乙醇。吸入溶液可借助常規(guī)的吸入器施用。
在對(duì)抗疾病，特別是血栓形成、心肌梗塞、冠心病、動(dòng)脈硬化、腫瘤、骨質(zhì)疏松癥、炎癥和感染中，式I化合物及其生理上可接受的鹽可以用作整聯(lián)蛋白抑制劑。
式I化合物及其生理上可接受的鹽還可以用于通過血管生成來維持或擴(kuò)散的病理過程，特別是腫瘤或類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。
本發(fā)明的物質(zhì)通常以類似于其它已知的市售肽，特別是類似于US-A-472,305中所述化合物的方式給藥，優(yōu)選以每劑量單位約0.05-500mg，特別是0.5-100mg的劑量給藥。日劑量?jī)?yōu)選為約0.01-2mg/kg體重。但對(duì)于每位患者的特定劑量取決于多種因素，例如所所用特定化合物的效力、年齡、體重、健康狀況、性別、飲食、給藥的時(shí)間與方法、排泄速率、藥物聯(lián)用情況以及所治療的特定疾病的嚴(yán)重程度。優(yōu)選胃腸外給藥。
此外，式I化合物可以作為整聯(lián)蛋白配體用于制備純化整聯(lián)蛋白用的親和色譜柱。在該方法中，配體即式I化合物通過粘固官能團(tuán)如Asp的羧基共價(jià)偶聯(lián)在高分子載體上。
用于整聯(lián)蛋白純化的親和色譜材料在本領(lǐng)域已知的縮合氨基酸用的常規(guī)條件下制備。
式I化合物含有一個(gè)或多個(gè)手性中心，因此可以以外消旋或旋光體形式存在。得到的外消旋體可用本領(lǐng)域已知的物理或化學(xué)方法拆分成對(duì)映體。非對(duì)映體優(yōu)選通過外消旋混合物與光活性拆分劑反應(yīng)來形成。適宜的拆分劑的實(shí)例有光活性酸，如D和L形式的酒石酸、二乙?；剖?、二苯甲?；剖?、扁桃酸、蘋果酸、乳酸，以及各種光活性的樟腦磺酸，如β-樟腦磺酸。借助填充有光活性拆分劑(如二硝基苯甲?；拾彼?的柱進(jìn)行對(duì)映體的拆分也是有利的；合適的洗滌劑的實(shí)例包括己烷/異丙醇/乙腈混合物，其體積比為例如82∶15∶3。
當(dāng)然，按照上述方法，使用光活性起始原料也可以獲得光學(xué)活性的式I化合物。
在上下文中，所有溫度均以℃為單位給出。在下列實(shí)施例中，“常規(guī)后處理”是指，如果需要的話，加入水，如果需要話(取決于最終產(chǎn)物的構(gòu)成)，將pH值調(diào)節(jié)至2-10，用乙酸乙酯或二氯甲烷萃取混合物，分相，將有機(jī)相用硫酸鈉干燥并進(jìn)行蒸發(fā)，然后將產(chǎn)物通過硅膠色譜和/或通過結(jié)晶純化。
RT＝下列體系中HPLC的保留時(shí)間(分鐘)柱購自O(shè)mnicrom YMC1.4.6×250mm，5μm，C18(分析)；2.30×250mm，7μm，C18(制備).
采用的洗脫劑為含0.1％TFA的乙腈(B)和含0.1％TFA的水(A)的梯度洗脫液(梯度數(shù)值在每種情況下都是以乙腈的體積百分比表示)。保留時(shí)間RT在1ml/min的流速下測(cè)定。
在220nm處檢測(cè)。
非對(duì)映體優(yōu)選在所述條件下分離。
質(zhì)譜(MS)ESI(電噴霧離子化)(M+H)+FAB(快原子轟擊)(M+H)+.
1.材料與制備通法合成用溶劑可以是“技術(shù)級(jí)”產(chǎn)品(使用前要進(jìn)行蒸餾)，或者也可以是購自Fluka(Seelze)或Merck(Darmstadt)的“無水”或“供合成用”純度級(jí)別產(chǎn)品。NMP(已蒸餾過)由BASF(Ludwigshafen)惠贈(zèng)。柱色譜用溶劑為“技術(shù)級(jí)”產(chǎn)品，使用前需進(jìn)行蒸餾或者也可以不經(jīng)蒸餾而直接使用(己烷)。HPLC溶劑乙腈(溶劑B)和TFA為購自Merck(Dermstadt)的“梯度級(jí)”純度級(jí)別產(chǎn)品，水(溶劑A)為去離子水并且經(jīng)Millipore(Molsheim，F(xiàn)rance)的Milli-Q系統(tǒng)處理。
Fmoc-保護(hù)的氨基酸購自Novabiochem Advanced ChemTech，MultiSyn Tech或PepTech Corporation(Cambridge，USA)。
對(duì)于人工固相合成，使用由Becton-Dickinson(Fraga，Spain)或Braun(Melsungen)提供的PE注射器，其中的PE釉料由Roland VetterLaborbedarf(Ammerbuch)提供。為混合樹脂懸浮液，以大約30rpm旋轉(zhuǎn)注射器。將樹脂加料到玻璃振動(dòng)器內(nèi)。
空氣或濕度敏感反應(yīng)在干燥玻璃容器中于氬氣氛(99.996％)下進(jìn)行。已經(jīng)經(jīng)過無水處理的吸濕性溶劑在氬氣氛圍中轉(zhuǎn)移到注射器中。
對(duì)于HPLC純化，是將化合物溶于DMSO、乙腈或甲醇(梯度級(jí))中，通過Sartorius(Gttingen)生產(chǎn)的RC15或RC25(RC膜，0.45μm)過濾。分析、半制備和制備性分離使用兩個(gè)Amersham PharmaciaBiotech)生產(chǎn)的HPLC系統(tǒng)(分析kta Basic 10F，帶有A-900自動(dòng)進(jìn)樣器；制備kta Basic 100F，帶有P-900泵系統(tǒng)和UV-900檢測(cè)器)和兩個(gè)Beckman提供的系統(tǒng)(具有125溶劑模塊和166檢測(cè)器模塊的Gold系統(tǒng)；110B泵系統(tǒng)，420控制單元和Knauer Uvicord檢測(cè)器)進(jìn)行。分析分離使用的柱為Omnicrom YMC生產(chǎn)的ODS-A C18(250mm×4.6mm，5μm，流速1ml/min)；半制備分離用的柱為Omnicrom YMC生產(chǎn)的ODS-A C18(250mm×20mm，5μm或10μm，流速8ml/min)；制備分離柱為Omnicrom YMC生產(chǎn)的ODS-A C18(250mm×30mm，10μm，流速25ml/min)和Macherey-Nagel生產(chǎn)的Nucleosil C18(250mm×20mm，7μm，流速25ml/min)?；衔镉迷谒?溶劑A)和0.1％(v/v)TFA中的乙腈(溶劑B)線性梯度洗脫劑洗脫(30min)。為了測(cè)定半制備或制備性HPLC純化后化合物的分析純度，在220nm檢測(cè)器波長(zhǎng)下求值分析HPLC色譜的峰積分值。
柱色譜用Merck(Darmstadt)生產(chǎn)的硅膠60(230-400目ASTM，粒度0.040-0.063mm)進(jìn)行，快速色譜在高于大氣壓1-1.2巴的壓力下進(jìn)行。
薄層色譜(TLC)及Rf值的測(cè)定使用Merck(Darmstadt)生產(chǎn)的涂布有硅膠60F254的鋁TLC板。在UV燈(λ＝254nm)下觀察TLC板進(jìn)行檢測(cè)。
熔點(diǎn)使用Büchi 510熔點(diǎn)儀按照Dr Tottoli法測(cè)定，并且未經(jīng)校正。
所有1H-NMR和13C-NMR光譜是在300K下用Bruker AC250或DMX500光譜儀記錄，光譜數(shù)據(jù)在Bruker Aspekt 1000(AC250)或Silicon Graphics Indy，O2和Octane工作站上利用XWINNMR軟件處理?；瘜W(xué)位移(δ)以相對(duì)于四甲基硅烷的百萬分之幾(ppm)為單位給出，并且偶合常數(shù)以赫茲(Hz)為單位給出。所用內(nèi)標(biāo)為四甲基硅烷或溶劑峰DMSO-d62.49ppm(1H-NMR)和39.5ppm(13C-NMR)；CDCl37.24ppm(1H-NMR)和77.0ppm(13C-NMR)。13C-NMR光譜利用1H寬帶去偶合技術(shù)記錄。大多數(shù)情況下的信號(hào)歸屬借助于HMQC和COSY實(shí)驗(yàn)確定。
質(zhì)譜是在Finnigan MAT8200儀器上利用電子轟擊(EI)和化學(xué)電離(CI)技術(shù)記錄的。電噴霧電離(ESI)質(zhì)譜是在Finnigan LCQ質(zhì)譜議上記錄，該質(zhì)譜議與帶有Omnicrom YMC生產(chǎn)的ODS-A C18(125mm×2mm，3μm，流速0.2ml/min)柱的Hewlett Packard 1100 HPLC系統(tǒng)聯(lián)用?；衔镆砸译?溶劑B)/水(溶劑A)+0.1％(v/v)甲酸的線性梯度洗脫液洗脫(15分鐘)。質(zhì)譜以“X(Y)[M+Z]+”的形式給出，其中“X”為檢測(cè)質(zhì)量，“Y”為質(zhì)量峰的觀測(cè)強(qiáng)度，“M”為所測(cè)試的分子，且“Z”為加成陽離子。
高分辨質(zhì)譜(HRMS)由Koka Jajasimhulu博士(University ofCincinnati，USA)采用電噴霧電離-飛行時(shí)間(ESI-TOF)技術(shù)記錄。
凍干使用Christ(Osterode)提供的Alpha2-4儀器進(jìn)行。
AAV 1TCP樹脂的載荷將相應(yīng)的Fmoc-保護(hù)的氨基酸(1.56mmol，1.5eq)和DIPEA(177μl，1.03mmol)加到在無水CH2Cl2(6ml，10min)中預(yù)溶脹TCP樹脂(1.16g，最大負(fù)荷0.9mmol/g)內(nèi)。5分鐘后，進(jìn)一步加入DIPEA(91μl，0.52mmol)，振動(dòng)樹脂。2小時(shí)后，加入甲醇(1.16ml)用于封端未反應(yīng)的三苯甲基基團(tuán)，并且進(jìn)一步振動(dòng)15分鐘。樹脂然后用無水CH2Cl2(5×20ml，每次3分鐘)、NMP(5×20ml，每次3分鐘)洗滌，然后再用無水CH2Cl2(5×20ml，每次3分鐘)洗滌，最后用甲醇/CH2Cl2(1∶1，20ml)的混合物和甲醇(20ml)洗滌。將樹脂在高真空下干燥，利用下述方程可以測(cè)定樹脂的載荷l=(m2-m1)×1000(MW-36.45)×m2]]>l樹脂載荷，單位[mmol/g]，m1偶聯(lián)前樹脂重量[g]m2偶聯(lián)后干燥樹脂的重量[g]MW Fmoc-保護(hù)的氨基酸/羧酸的分子量，單位[g/mol]CI和MeO的質(zhì)量差值引起的誤差可以忽略不計(jì)。
AAV 2Fmoc保護(hù)基的除去將樹脂(100mg)在NMP(5ml，10min)中預(yù)溶脹。在NMP(5ml)中用新制備的20％哌啶溶液(v/v)處理15分鐘以除去Fmoc保護(hù)基。然后將樹脂用NMP(5×5ml，每次3分鐘)洗滌，再加入在NMP(5ml，15分鐘)中的20％哌啶溶液(v/v)。最后，將樹脂用NMP洗滌(5×5ml，每次3分鐘)。
AAV 3按照Gibson法偶聯(lián)5-(9H-芴-9-基甲氧基)-3H-1，3，4-噁二唑-2-酮(142)和樹脂鍵合的游離胺為了脫保護(hù)樹脂鍵合的胺，向TCP樹脂(100mg，0.354mmol/g，0.035mmol)中加入在NMP(2×5ml，每次15分鐘)中的20％哌啶(v/v)。樹脂然后用NMP(5×5ml，每次3分鐘)和無水CH2Cl2(5×5ml，每次3分鐘)洗滌，然后在無水CH2Cl2(5ml)中溶脹半小時(shí)。之后再向樹脂中加入5-(9H-芴-9-基甲氧基)-3H-1，3，4-噁二唑-2-酮(142)(30.5mg，0.108mmol，3.1eq)的無水CH2Cl2(1ml)溶液，振動(dòng)所得混合物90分鐘。通過用CH2Cl2(5×5ml，每次3分鐘)和NMP(5×5ml，每次3分鐘)洗滌終止反應(yīng)。
AAV 4利用HATU/HOAt的偶聯(lián)將樹脂鍵合的游離胺或肼(0.389mmol)用NMP(5×5ml，每次3分鐘)洗滌。然后向樹脂中加入適當(dāng)Fmoc-保護(hù)的氨基酸或羧酸單元(0.779mmol，2eq)、HATU(296mg，0.779mmol，2eq)和HOAt(106mg，0.779mmol，2eq)在NMP(5ml)中的溶液。最后，加入均三甲吡啶(1027μl，7.79mmol，20eq)，并且振動(dòng)樹脂過夜。樹脂然后用NMP(5×5ml，每次3分鐘)洗滌，并使用相同的試劑、用量和反應(yīng)時(shí)間重復(fù)偶聯(lián)步驟。樹脂隨后用NMP(5×5ml，每次3分鐘)洗滌。
AAV 5從TCP樹脂中脫除按照下述流程從TCP樹脂中脫除化合物步驟試劑 操作 次數(shù)時(shí)間[min]1 CH2Cl2洗滌 3 102 TFA/TIPS/H2O脫除/脫保護(hù) 3 30(18∶1∶1)3 CH2Cl2洗滌 3 3
對(duì)于100mg樹脂，通常使用2ml脫除溶液。蒸發(fā)合并的步驟2和3的濾液。
2.實(shí)施例實(shí)施例1a) N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]肼(141)將Boc-肼(10.0g，75.6mmol)和DIPEA(12.95ml，75.6mmol)溶于無水CH2Cl2(200ml)，冷卻到0℃。然后在30分鐘內(nèi)加入溶在無水CH2Cl2(100ml)中的FmocCl(19.6g，75.8mmol)，并于室溫?cái)嚢杌旌衔镞^夜。有機(jī)相用水(200ml)萃取，蒸發(fā)到大約100ml體積。隨后于0℃小心加入三氟乙酸(100ml)，攪拌混合物1.5小時(shí)。產(chǎn)物通過小心加入飽和Na2CO3溶液(300ml)進(jìn)行沉淀，干燥得無色固體(18.02g，70.8mmol，94％)。
m.p.150-153℃；1H-NMR(250MHz，DMSO-d6，300K)δ＝10.10(bs，1H，NH)，9.60(bs，1H，NH)，7.89(d，J＝7.6Hz，2H，arom)，7.70(d，J＝7.3Hz，2H，arom)，7.30-7.45(m，4H，arom)，4.48(d，J＝6.6Hz，2H，CO-CH2)，4.27(t，J＝6.7Hz，1H，CO-CH2-CH)；13C-NMR(62.9MHz，DMSO-d6，300K)δ＝156.26，143.59，140.98，127.96，127.34，125.33，120.39，67.00，46.60；HRMS(ESI-TOF)C15H15N2O2[M+H]+255.1134(計(jì)算值255.1119)；分析HPLC(5-90％，30min)tR＝16.47min.
實(shí)施例1b) 5-(9H-芴-9-基甲氧基)-3H-1，3，4-噁二唑-2-酮(142)
將由N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]肼(141)(1.49g，5.78mmol)、CH2Cl2(60ml)和飽和NaHCO3溶液(60ml)組成的懸浮液于0℃劇烈攪拌5分鐘，所形成的溶液然后在不攪拌情形下放置5分鐘。然后利用注射器向下方的有機(jī)相中小心加入光氣(1.89M甲苯溶液，7.95ml，15.0mmol)，加畢隨即開始攪拌反應(yīng)混合物。10分鐘后，向反應(yīng)混合物中加入水(20ml)和CH2Cl2(20ml)。然后迅速分離各相，水相用CH2Cl2(50ml)萃取，合并的有機(jī)相用Na2SO4干燥。減壓除去溶劑，干燥得無色固體(1.35g，4.82mmol，83％)。
m.p.125℃；1H-NMR(250MHz，CDCl3，300K)δ＝8.72(bs，1H，NH)，7.77(d，J＝7.5Hz，2H，arom)，7.59(d，J＝7.4Hz，2H，arom)，7.28-7.45(m，4H，arom)，4.49(d，J＝7.8Hz，2H，CH2-CH)，4.32-4.41(m，1H，CH2-CH).
實(shí)施例2a) N-苯乙基甲酰胺(146)緩慢加熱苯乙胺(20.0g，0.165mol)和甲酸(49.4ml，1.309mol)的混合物到200℃。在該過程中餾除過量的水和甲酸。然后將混合物于200℃維持1小時(shí)，減壓蒸餾產(chǎn)物，得到無色油體(22.0g，0.147mol，89％)。
1H-NMR(250MHz，DMSO-d6，300K)δ＝8.06(bs，1H，CHO)，7.16-7.32(m，5H，arom)，3.32-3.42(m，2H，NH-CH2)，2.77(t，J＝7.2Hz，2H，NH-CH2-CH2)；分析HPLC(5-90％，30min)tR＝15.04min.
實(shí)施例2b) 3，4-二氫異喹啉(147)氬氣氛下，在油浴中于1小時(shí)內(nèi)加熱多磷酸(25g)和五氧化二磷(5.4g，38.0mmol)到180℃。然后于160℃加入N-苯乙基甲酰胺(146)(4.3g，28.8mmol)，并在恒溫下攪拌混合物1.5小時(shí)。然后任混合物自然冷卻到室溫，加入水(40ml)?；旌衔镫S后通過小心加飽和氫氧化鈉水溶液調(diào)節(jié)pH至10?；旌衔锶缓笥靡颐?500ml)萃取，分出有機(jī)相，用NaOH干燥。蒸發(fā)得到棕色油體(2.81g，21.4mmol，74％)。
1H-NMR(250MHz，DMSO-d6，300K)δ＝8.32(t，J＝2.3Hz，1H，N-CH)，7.16-7.40(m，4H，arom)，3.59-3.66(m，2H，N-CH2)，2.66(t，J＝7.3Hz，2H，N-CH2-CH2)；分析HPLC(5-90％，30min)tR＝8.29min.
實(shí)施例2c) 2-(1，2，3，4-四氫-1-異喹啉基)乙酸(148)在室溫下混合3，4-二氫異喹啉(147)(2.2g，16.77mmol)和丙二酸(1.94g，16.77mmol)，進(jìn)而在油浴中于120℃加熱1小時(shí)。冷卻混合物到室溫，將產(chǎn)物用甲醇(150ml)重結(jié)晶。干燥得到無色固體(1.52g，7.99mmol，48％).
m.p.230℃(分解)；1H-NMR(250MHz，D2O，300K)δ＝7.13-7.23(m，4H，arom)，4.65(t，J＝6.9Hz，1H，CH-NH)，3.44-3.54(m，1H，NH-CH2)，3.24-3.34(m，1H，NH-CH2)，2.95-3.03(m，2H，NH-CH2-CH2)，2.79(d，J＝6.1Hz，2H，CH2-COOH)；HRMS(ESI-TOF)C11H14NO2[M+H]+192.1047(計(jì)算值192.1025)；分析HPLC(5-90％，30min)tR＝10.15min.
實(shí)施例2d)
1-羧甲基-3，4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸9H-芴-9-基甲基酯(149)將2-(1，2，3，4-四氫-1-異喹啉基)乙酸(148)(0.9g，4.73mmol)、飽和NaHCO3溶液(15ml)和二噁烷(5ml)組成的懸浮液冷卻到0℃。然后在30分鐘內(nèi)逐滴加入溶解在二噁烷(5ml)中的FmocCl(1.35g，5.2mmol)，攪拌混合物過夜?；旌衔锶缓笸ㄟ^搖動(dòng)用乙醚洗滌(30ml)，進(jìn)而利用濃鹽酸將水相的pH調(diào)節(jié)至1。產(chǎn)物然后用乙酸乙酯(50ml)萃取，將有機(jī)相用硫酸鎂干燥并且蒸發(fā)。粗產(chǎn)物隨后通過柱色譜純化(乙酸乙酯/己烷/乙酸，1∶1∶1％)，干燥得無色泡沫物(1.54g，3.73mmol，79％)。
m.p.61-63℃；TLC Rf(乙酸乙酯/己烷/乙酸，1∶1∶1％)＝0.54；1H-NMR(250MHz，DMSO-d6，300K)δ＝7.79-7.91(m，2H，arom)，7.63-7.66(m，2H，arom)，7.05-7.39(m，8H，arom)，5.40-5.52(m，1H，NH-CH)，4.37-4.42(m，1H，COO-CH2-CH)，4.25-4.32(m，2H，COO-CH2)，3.62-4.02(m，1H，N-CH2)，3.27-3.38(m，1H，N-CH2)，2.52-2.76(m，4H，N-CH-CH2和N-CH2-CH2)；MS(ESI)m/e 179.1(30)，414.0(20)[M+H]+，436.2(25)[M+Na]+，492.8(15)，826.7(5)[2M+H]+，849.1(45)[2M+Na]+，865.1(100)[2M+K]+；HRMS(ESI-TOF)C26H24NO4[M+H]+414.1721(計(jì)算值414.1705)；分析HPLC(5-90％，30min)tR＝27.53min.
實(shí)施例3a) 5-[N-(4-甲基吡啶-2-基)氨基]戊酸乙酯在130℃(油浴溫度)回流5-溴戊酸乙酯(33.03g，25ml，158mmol)和2-氨基-4-甲基吡啶(32.9g，304mmol)過夜。待冷卻到室溫后，向反應(yīng)混合物中加入飽和NaHCO3溶液(100ml)，然后用乙醚(5×100ml)萃取。合并的有機(jī)相用MgSO4干燥，然后除去溶劑。粗產(chǎn)物通過快速色譜純化(乙酸乙酯/己烷，1∶1，2l；3∶2，1l；7∶3，1l；4∶11l)，干燥得到無色固體(16.7g，70.7mmol，45％)。
m.p.41-43℃；TLC Rf(乙酸乙酯/己烷，1∶1)＝0.26；1H-NMR(250MHz，DMSO-d6，300K)δ＝7.90(d，J＝5.3Hz，1H，N-CH-CH)，6.38(d，J＝5.2Hz，1H，N-C-CH)，6.17(s，1H，N-CH-CH)，4.51(bs，1H，NH)，4.11(q，J＝7.2Hz，2H，O-CH2-CH3)，3.25(q，J＝6.3Hz，2H，NH-CH2)，2.33(t，J＝7.0Hz，2H，CH2-CO)，2.21(s，3H，C-CH3)，1.60-1.80(m，4H，NH-CH2-CH2-CH2)，1.23(t，J＝7.0Hz，2H，O-CH2-CH3)；分析HPLC(5-90％，30min)tR＝13.58min.
實(shí)施例3b) 5-[N-(4-甲基吡啶-2-基)氨基]戊酸將5-[N-(4-甲基吡啶-2-基)氨基]戊酸乙酯(16.7g，70.7mmol，可以按照實(shí)施例3a)獲得)溶解在甲醇(20ml)中，加入2N NaOH水溶液(71ml，141mmol)，將混合物在室溫下攪拌過夜。然后除去溶劑，并將所得固體用CHCl3(500ml)和過量的DIPEA充分萃取。蒸發(fā)濾液，干燥得到無色固體(3.92g，18.8mmol，27％)。
m.p.138-140℃；1H-NMR(250MHz，DMSO-d6，300K)δ＝7.79(d，J＝5.2Hz，1H，NH)，6.26-6.30(m，2H，arom.C5-H和C6-H)，6.22(s，1H，arom.C3-H)，3.17(dt，J＝5.8Hz，2H，NH-CH2)，2.21(t，J＝7.0Hz，2H，CH2-CH2-CO)，2.11(s，3H，Cquat.-CH3)，1.41-1.58(m，4H，CH2-CH2-CH2-CH2)；13C-NMR(67.5MHz，DMSO-d6，300K)δ＝174.6(COOH)，159.3，147.3，146.8，113.1，107.9，40.5，33.7，28.8，22.4，20.8；HRMS(ESI-TOF)C11H17N2O2[M+H]+209.1293(計(jì)算值209.1290)；分析HPLC(5-90％，30min)tR＝9.83min.
實(shí)施例4
按照AAV 1中所述(m1＝0.84g，m2＝1.0g，I＝0.426mmol/g)，在TCP樹脂上加載1-羧甲基-3，4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸9H-芴-9-基甲基酯(149，實(shí)施例2d))(0.48g，1.16mmol)。按照AAV 2和3所述脫保護(hù)Fmoc并偶聯(lián)新制備的5-(9H-芴-9-基甲氧基)-3H-1，3，4-噁二唑-2-酮(142，實(shí)施例1b))(385mg，1.32mmol)，然后如AAV 4所述偶聯(lián)5-[N-(4-甲基吡啶-2-基)氨基]戊酸(177mg，0.852mmol)，并按照AAV 5的方法除去樹脂。經(jīng)HPLC純化(10-80％，30min)和凍干后，得到無色粉末(3.0mg，0.00542mmol，1.3％)。
m.p.103-109℃；1H-NMR(500MHz，DMSO-d6，300K)δ＝8.81(bs，1H，NH-NH)，8.44(bs，1H，NH-NH)，8.25(d，J＝6.5Hz，1H，N-CH-CH)，7.74-7.77(m，4H，arom)，7.34(s，1H，N-C-CH)，7.21(d，J＝6.4Hz，1H，N-CH-CH)，6.06-6.07(m，1H，N-CH)，4.46-4.52(m，1H，CH-CH2)，3.82-3.93(m，3H，NH-CH2和CH-CH2)，3.47-3.57(m，2H，NCH2CH2)，3.30-3.40(m，2H，NCH2CH2)，2.94(s，3H，C-CH3)，2.79-2.84(m，2H，CH2-CO)，2.23-2.35(m，4H，NH-CH2-CH2-CH2)；MS(ESI)m/e 191.2(8)，249.1(100)，440.1(30)[M+H]+，462.1(8)[M+Na]+，478.1(10)[M+K]+，901.0(2)[2M+Na]+，917.1(3)[2M+K]+，939.1(4)[2M-H+Na+K]+，945.1(4)；C23H30N5O4[M+H]+的HRMS440.2273(計(jì)算值440.2298)；分析HPLC(5-90％，30min)tR＝14.69min(92.7％純度，220nm).
實(shí)施例5a)
樹脂鍵合的Fmoc-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-(S)-基乙酸將200mg三苯甲基氯-聚苯乙烯樹脂(0.18mmol，理論載荷)在1.5ml無水DCM中洗滌。隨后向樹脂中加入0.24mmol Fmoc-1，2，3，4-四氫異喹啉-3(S)-基乙酸和0.6mmol DIPEA在1.5ml無水DCM中的溶液，并在室溫下振動(dòng)該混合物1.5小時(shí)，爾后加入0.2ml甲醇?；旌衔镉肈CM(5×1.5ml)和甲醇(3×1.5ml)洗滌，干燥。
實(shí)施例5b) 樹脂鍵合的Fmoc-Gly-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-基乙酸將0.072mmol A用DMF(1×2ml)洗滌。其后用20％哌啶/DMF(2×2ml)脫保護(hù)兩次，第一次5分鐘，第二次15分鐘，并用DMF(6×2ml)洗滌。向與樹脂鍵合的游離胺中加入大約0.1M的2.5當(dāng)量(基于樹脂載荷，0.18mmol)的Fmoc-甘氨酸、2.4當(dāng)量(0.17mmol)的HATU和30當(dāng)量(2.16mmol)的均三甲基吡啶在無水DMF中的溶液，并將混合物在室溫下振動(dòng)90分鐘。之后通過在DMF(6×2ml)中洗滌終止反應(yīng)。
實(shí)施例5c)
3-胍基苯甲?；拾滨；?1，2，3，4-四氫異喹啉-3-基乙酸將0.036mmol B用DMF(1×1ml)洗滌。該化合物隨后用在DMF中的20％哌啶(2×1ml)脫保護(hù)兩次，第一次5分鐘，第二次則15分鐘，然后用DMF(6×1ml)洗滌。向樹脂鍵合的游離胺中加入大約0.1M的2.5當(dāng)量(基于樹脂載荷，0.09mmol)Fmoc-3-氨基苯甲酸、2.4當(dāng)量(0.086)HATU和30當(dāng)量(1.08)均三甲基吡啶在無水DMF中的溶液，并在室溫下振動(dòng)該混合物90分鐘?；旌衔锶缓笥肈MF(6×1ml)洗滌，并按上所述脫保護(hù)。
樹脂隨后用無水氯仿(3×1ml)洗滌，加入0.36mmol N，N’-雙-BOC-1-脒基吡唑在0.4ml無水氯仿中的溶液，使混合物于50℃在可加熱的震動(dòng)器中反應(yīng)。20小時(shí)后，將樹脂用DCM(6×1ml)洗滌。為了從樹脂中裂除并同時(shí)除去BOC，將樹脂與4.75∶4.75∶0.5的DCM、TFA和TIPS的混合物(3×1ml)一起震動(dòng)，一次1.5小時(shí)，一次30分鐘，一次3分鐘，然后過濾。蒸發(fā)合并的濾液，殘留物在叔丁醇/水中凍干。利用制備HPLC純化，得到3-胍基苯甲?；拾滨；?1，2，3，4-四氫異喹啉-3-基乙酸，三氟乙酸鹽。
RT＝12.3(10→90％ACN，30min)MS(ESI)m/e＝410.2([M+H]+).
1H-NMR(1.3∶1比例的內(nèi)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，*少量?jī)?nèi)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的信號(hào)，500MHz，DMSO-d6)δ＝12.39(br.s，1H，COOH)，9.95(s，1H，NH-ArC)，8.67(t，J＝5.4Hz，1H，NH-GlyCH2)，8.63*(t，J＝5.4Hz，IH，NH-GlyCH2)，7.78(d，J＝7.8Hz，IH，ArC6-H)，7.72(s，1H，ArC2-H)，7.58(s，4H，GuaN2H4)，7.53(t，J＝7.8Hz，1H，ArC5-H)，7.39(d，J＝7.8Hz，1H，ArC4-H)，7.17-7.25(m，4H，ThiquC5，6，7，8-H)，5.11(d，J＝17.9Hz，1H，ThiquC1-H2)，5.01-5.02*(m，1H，ThiquC3-H)，4.82*(d，J＝16.2Hz，1H，ThiquC1-H2)，4.73-4.75(m，1H，ThiquC3-H)，4.55*(d，J＝16.2Hz，1H，ThiquC1-H2)，4.44(dd，J＝16.4Hz，J＝5.4Hz，1H，GlyCH2)，4.19-4.29(m，3H，GlyCH2)，4.10(d，J＝17.9Hz，1H，ThiquC1-H2)，3.15(dd，J＝16.4Hz，J＝5.0Hz，1HCH2CO2H)，2.98*(dd，J＝15.8Hz，J＝5.2Hz，1H，CH2CO2H)，2.74-2.79(m，2H，CH2CO2H)，2.41-2.51，2.33-2.37，2.16-2.21(m，4H，ThiquiC4-H2).
實(shí)施例6 5-(4-甲基吡啶-2-基氨基)戊?；拾滨；?1，2，3，4-四氫異喹啉-3-基乙酸將0.036mmol B(可按照實(shí)施例5b)所述制得)用DMF(1×1ml)洗滌。隨后將該化合物用在DMF中的20％哌啶(2×1ml)脫保護(hù)兩次，第一次5分鐘，第二次15分鐘，之后用DMF(6×1ml)洗滌。將得到的樹脂鍵合的游離胺在室溫下與大約0.1M的2.5當(dāng)量(0.09mmol)5-(N-(4-甲基吡啶-2-基)氨基戊酸、2.4當(dāng)量(0.086mmol)HATU和30當(dāng)量(1.08mmol)三甲基吡啶在無水DMF中的溶液一起振動(dòng)過夜?；旌衔镉肈MF和DCM洗滌。為了從固相中裂解出來，將洗滌過的樹脂與1ml DCM/三氟乙醇/乙酸(31/1)混合物一起振動(dòng)，第一次90分鐘，然后30分鐘，最后1分鐘。除去溶劑，利用制備HPLC純化，得到5-(4-甲基吡啶-2-基氨基)戊?；拾滨；?1，2，3，4-四氫異喹啉-3-基乙酸，三氟乙酸鹽。
RT＝13.3(10→90％ACN，30min)MS(ESI)m/e＝439.3([M+H]+).
1H-NMR(1.3∶1比例的內(nèi)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，*少量?jī)?nèi)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的信號(hào)，500MHz，DMSO-d6)δ＝12.35(br.s，1H，COOH)，8.46(br.s，1H，NH-CH2)，7.93-7.97(m，1H，NH-GlyCH2)，7.78(d，J＝6.5Hz，1H，PyrC6-H)，7.14-7.22(m，4H，ThiquC5，6，7，8-H)，6.81(s，1H，PyrC3-H)，6.69(d，J＝6.5Hz，1H，PyrC5-H)，5.08(d，J＝17.9Hz，1H，ThiquC1-H2)，4.97-5.01*(m，1H，ThiquC3-H)，4.71*(d，J＝16.2Hz，1H，ThiquC1-H2)，4.59-4.63(m，1H，ThiquC3-H)，4.47*(d，J＝16.2Hz，1H，ThiquC1-H2)，4.21(dd，J＝16.7Hz，J＝5.5Hz，1H，GlyCH2)，4.04-4.08(m，3H，GlyCH2，ThiquC1-H2)，3.97*(dd，J＝16.9Hz，J＝5.4Hz，1H，GlyCH2)，3.27(m，2H，NH-CH2)，3.11(dd，J＝16.2Hz，J＝5.3Hz，1H，CH2CO2H)，2.95*(dd，J＝15.7Hz，J＝5.4Hz，1H，CH2CO2H)，2.62-2.77(m，2H，CH2CO2H)，2.34-2.44(m，3H，ThiquiC4-H2)，2.31(s，3H，CH3)，2.12-2.21(m，3H，ThiquiC4-H4，CH2-CH2-CO)，1.58(s，4H，(CH2)2-CH2-CO).
類似地，其它式I化合物，特別是式I1至I36的化合物，可以使用相應(yīng)的前體制得。
下列實(shí)施例涉及藥物制劑實(shí)施例A小瓶注射劑將100g的式I活性成分和5g磷酸氫二鈉在3L雙蒸水中的溶液用2N鹽酸調(diào)節(jié)至pH6.5，無菌過濾，分裝到注射小瓶中，在無菌條件下凍干，然后在無菌條件下密封。每瓶注射劑包含5mg活性成分。
實(shí)施例B栓劑將20g式I活性成分與100g大豆卵磷脂和1400g椰子油的混合物熔融，倒入模具中并使其冷卻。每顆栓劑含有20mg活性成分。
實(shí)施例C溶液使用1g式I活性成分、9.38g NaH2PO4·2H2O、28.48gNa2HPO4·12H2O和0.1g苯扎氯銨在940ml雙蒸水中制備溶液。將該溶液的pH調(diào)至6.8，加至1L，然后通過輻射滅菌。該溶液可用作滴眼劑。
實(shí)施例D軟膏劑取500mg式I活性成分與99.5g凡士林在無菌條件下混合。
實(shí)施例E片劑將1kg式I活性成分、4kg乳糖、1.2kg馬鈴薯淀粉、0.2kg滑石與0.1kg硬脂酸鎂的混合物以常規(guī)方式壓制成片，每片含10mg活性成分。
實(shí)施例F包衣片劑類似于實(shí)施例E壓制片劑，然后以常規(guī)方式使用蔗糖、馬鈴薯淀粉、滑石、黃耆膠和注射劑的包衣衣料包衣。
實(shí)施例G膠囊劑將2kg式I活性成分以常規(guī)方式填充到硬明膠膠囊內(nèi)，使每粒膠囊含有20mg活性成分。
實(shí)施例H安瓿劑將1kg式I活性成分在60L雙蒸水中的溶液進(jìn)行滅菌過濾，分裝到安瓿中，在無菌條件下凍干并無菌密封。每瓶安瓿含有10mg活性成分。
實(shí)施例I吸入噴霧劑將14g式I活性成分溶于10L等滲NaCl溶液中，并將該溶液轉(zhuǎn)移到帶有泵裝置的市售噴霧容器中。該溶液噴霧到口腔或鼻腔中。每噴射一次的噴霧量(約0.1ml)相當(dāng)于大約0.14mg的劑量。
權(quán)利要求
1.式I化合物及其生理上可接受的衍生物，特別是其鹽和溶劑化物 其中X為H，-C(＝NR3)-NHR4或Het， 或 Y為-(CH2)m-，Z為NH或CH2，R1和R5彼此獨(dú)立地為H，A，OH，OA，芳烷基，Hal，-CO-A，CN，NO2，NHR3，COOA，COOH，SO2A，CF3或OCF3，R2在每種情況下獨(dú)立地為H或A，R3和R4彼此獨(dú)立地為H，A，-CO-A，NO2或CN，A為具有1-6個(gè)碳原子的烷基，m為0，1，2，3，4，5或6，n和p彼此獨(dú)立地為1，2或3。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的式I化合物，其中A為甲基，此外還為乙基、異丙基、正丙基、正丁基、異丁基、仲丁基或叔丁基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1和2中任一項(xiàng)或多項(xiàng)的式I化合物，其中Het為4-甲基吡啶-2-基，吡啶-2-基，嘧啶-2-基，咪唑-2-基，苯并咪唑-2-基和它們的氫化衍生物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)或多項(xiàng)的式I化合物，其特征在于R1和R5彼此獨(dú)立，優(yōu)選為H，A，CN，NO2，Hal或-CO-A-。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)或多項(xiàng)的式I化合物，其特征在于R2優(yōu)選為H或A。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)或多項(xiàng)的式I化合物，其特征在于R3和R4彼此獨(dú)立，優(yōu)選為H或-COA-。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)或多項(xiàng)的式I化合物，其特征在于X為H，-C(＝NH)-NH2，-C(＝N-甲基)-NH2，4-甲基吡啶-2-基，吡啶-2-基，嘧啶-2-基，咪唑-2-基，苯并咪唑-2-基和它們的氫化衍生物。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)或多項(xiàng)的式I化合物，其特征在于Y為-(CH2)m-或
9.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)或多項(xiàng)的式I化合物，其特征在于n和p彼此獨(dú)立地為1或2。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)或多項(xiàng)的式I化合物，其特征在于m為0，2或4。
11.式I1至I36的化合物
12.制備權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)或多項(xiàng)所述的式I化合物及其鹽的方法，其特征在于a)在縮合劑例如HATU的存在下，使式II化合物 其中Z，R1和n如上定義，W為常規(guī)保護(hù)基或肽化學(xué)中使用的固相，與式III化合物進(jìn)行反應(yīng) 其中Y如上定義，Q為合適的保護(hù)基或Het，隨后除去所述保護(hù)基和/或所述固相，并且，在適當(dāng)情況下，如果作為保護(hù)基的Q被除去，則將所得產(chǎn)物與合適的脒化合物例如N，N’-雙-BOC-1-脒基吡唑反應(yīng)，并且如果需要的話，除去剩余的保護(hù)基和/或固相，或者b)通過用溶劑解劑或氫解劑處理，將式I化合物從其官能團(tuán)衍生物中釋出，和/或其特征在于，將堿性或酸性式I化合物通過用酸或堿處理而轉(zhuǎn)化成其鹽。
13.作為治療活性成分的權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)或多項(xiàng)所述的式I化合物及其生理上可接受的鹽或溶劑化物。
14.作為整聯(lián)蛋白抑制劑的權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)或多項(xiàng)所述的式I化合物及其生理上可接受的鹽或溶劑化物。
15.用于對(duì)抗疾病的權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)或多項(xiàng)所述的式I化合物及其生理上可接受的鹽或溶劑化物。
16.藥物制劑，其特征在于其中含有至少一種權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)或多項(xiàng)所述的式I化合物和/或一種其生理上可接受的鹽或溶劑化物。
17.權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)或多項(xiàng)所述的式I化合物和/或其生理上可接受的鹽或溶劑化物在制備藥物制劑中的應(yīng)用。
18.權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)或多項(xiàng)所述的式I化合物和/或其生理上可接受的鹽或溶劑化物在制備用于對(duì)抗下述疾病的藥物制劑中的應(yīng)用血栓形成、心肌梗塞、冠心病、動(dòng)脈硬化、炎癥、腫瘤、骨質(zhì)疏松癥、感染和血管成形術(shù)后再狹窄。
19.權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)或多項(xiàng)所述的式I化合物和/或其生理上可接受的鹽或溶劑化物在血管生成所維持或擴(kuò)散的病理過程中的應(yīng)用。
全文摘要
通式(I)的異喹啉衍生物(其中X、Y、Z、R
文檔編號(hào)A61P31/00GK1639150SQ03805175
公開日2005年7月13日 申請(qǐng)日期2003年2月7日 優(yōu)先權(quán)日2002年3月6日
發(fā)明者M·維斯內(nèi)爾, S·戈德曼, H·凱斯勒, G·圖姆席恩, D·韋伯, D·戈特施林 申請(qǐng)人:默克專利股份有限公司