專利名稱：胡蘆巴提取物及其生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從胡蘆巴植物中提取的提取物及其提取方法，是一種胡蘆巴提取物及其生產(chǎn)方法和在制備治療糖尿病中對(duì)血糖和血脂有調(diào)節(jié)作用藥品中的應(yīng)用，該胡蘆巴提取物特別具有防治糖尿病(DM)和糖尿病(DM)慢性并發(fā)癥的作用，對(duì)于血糖和血脂有調(diào)節(jié)作用。
背景技術(shù)：
中藥胡蘆巴系豆科植物胡蘆巴(Trigonella foenum-graecum L)的種子，又名香豆子，是新疆維吾爾自治區(qū)的特色產(chǎn)品，作為民間面食中常用的佐料，已有悠久的歷史，分布廣泛，資源豐富，也是中醫(yī)和維吾爾醫(yī)常用的一種藥食兼用植物，維吾爾醫(yī)認(rèn)為其具有醒腦開竅，延年益壽之功效。傳統(tǒng)醫(yī)藥中以其果實(shí)入藥，味甜、性溫，具有補(bǔ)腎陽，祛寒濕，止疼痛之功效，主治腎虛寒，疝氣腹痛，陽萎，偏墜，小腹冷痛，寒濕腳氣等癥。
世界衛(wèi)生組織最新調(diào)研報(bào)告指出，目前全世界約有1.35億人患糖尿病，預(yù)計(jì)從現(xiàn)在到2025年糖尿病患者將增加到3億。據(jù)中國國家衛(wèi)生部的最新調(diào)查數(shù)字表明，糖尿病在中國已成流行趨勢，人數(shù)已達(dá)2000萬以上，90％以上為II型糖尿病。且大量無癥狀的糖尿病人群未被發(fā)現(xiàn)。據(jù)報(bào)道，糖耐量異常者中，5-10％患者將在5-10年轉(zhuǎn)變?yōu)樘悄虿?，在已確診的患者中60％的人血糖控制很差，(飲食習(xí)慣很難改變可能是原因之一)，高血糖可進(jìn)一步導(dǎo)致血脂，蛋白質(zhì)等其它物質(zhì)代謝紊亂，引起心，腦、腎等合并癥，腎病的發(fā)生率是正常人的7倍之多。文獻(xiàn)報(bào)道80％的糖尿病患者死于心、腦、腎慢性合并癥。糖尿病已成為世界第三大嚴(yán)重危害人類健康的疾病。
近年來口服降糖藥繼發(fā)性失效已日益明顯，患者對(duì)胰島素敏感性降低是磺酰脲類繼發(fā)失效的主要原因，它們只能使60％-70％的糖尿病人血糖得到較好控制，而持續(xù)高血糖水平和嚴(yán)重肥胖使病人幾乎不能達(dá)到預(yù)期效果，除了相當(dāng)高的最初治療失敗率外，每年約10％的病人對(duì)治療無反應(yīng)，且不用于并發(fā)癥的治療。低血糖是磺酰脲誘發(fā)的主要副作用，特別是老年病人。胃腸道反應(yīng)，肝功能損害也阻礙了某些病人對(duì)二甲雙胍，噻唑烷二酮應(yīng)用，況且糖尿病及慢性并發(fā)癥的治療是一個(gè)慢性過程，用藥原則必然是長期的，所以，尋找新的療效好、不良反應(yīng)少的抗糖尿病藥物已成為發(fā)展的焦點(diǎn)，而從植物中提取活性成分，研發(fā)成新藥是重要的途徑之一。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種從植物胡蘆巴中提取的胡蘆巴提取物及其生產(chǎn)方法和在制備治療糖尿病中對(duì)血糖和血脂有調(diào)節(jié)作用藥品中的應(yīng)用，該胡蘆巴提取物在防治糖尿病(DM)和糖尿病(DM)慢性并發(fā)癥方面具有良好的應(yīng)用前景，對(duì)于血糖和血脂有調(diào)節(jié)作用。
本發(fā)明的技術(shù)方案之一是這樣來實(shí)現(xiàn)的一種從植物胡蘆巴中提取的胡蘆巴提取物，該胡蘆巴提取物按重量百分比含有20％至70％的胡蘆巴總皂苷。
上述胡蘆巴總皂苷可為含有甲基原薯蕷皂苷、甲基原翠雀皂苷、胡蘆巴皂苷I、胡蘆巴皂苷II和胡蘆巴皂苷III的混合物。
本發(fā)明的技術(shù)方案之二是這樣來實(shí)現(xiàn)的上述胡蘆巴提取物的生產(chǎn)方法按以下步驟進(jìn)行第一步、首先將胡蘆巴干燥粗粉經(jīng)濃度為50％至95％的乙醇水溶液應(yīng)用浸漬法或滲漉法或回流法提取后，回收乙醇得流浸膏；第二步、將流浸膏用水稀釋3至5倍后呈混懸液，并與中等極性的大孔樹脂接觸，采用樹脂吸附，當(dāng)吸附后的混懸液中的胡蘆巴總皂苷含量低于1％時(shí)，將吸附后的混懸液與吸附有胡蘆巴提取物的大孔樹脂分離；第三步、用由無機(jī)堿調(diào)節(jié)的PH值為8.0至14.0的水溶液洗滌吸附有胡蘆巴提取物的大孔樹脂，當(dāng)洗滌液中含有0.1％至1％的胡蘆巴總皂苷時(shí)停止洗滌；然后用水洗滌吸附有胡蘆巴提取物的大孔樹脂，至流出液的PH值接近中性時(shí)停止水洗；第四步、用能解析吸附在大孔樹脂上的胡蘆巴總皂苷的洗脫液解析水洗后的大孔樹脂，采用樹脂吸附，解析溫度為室溫至60℃；第五步、解析了胡蘆巴總皂苷后的洗脫液經(jīng)濃縮、真空干燥后既得胡蘆巴提取物，干燥溫度為室溫至60℃。
上述中等極性的大孔樹脂可為苯乙烯型共聚體的含有酯基或氰基的中等極性吸附樹脂，其結(jié)構(gòu)為大孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。
上述洗脫液可為一種可與水混溶的極性有機(jī)溶劑水溶液組成，其水溶液PH值為5.0至9.0，其有機(jī)溶劑與水的體積比為20∶80至90∶10。
上述洗脫液可為醇的或酮的極性有機(jī)溶劑水溶液。
上述洗脫液可為甲醇或乙醇或丙醇或丙酮或丁酮的一種或一種以上的水溶液。
本發(fā)明的技術(shù)方案之二是上述胡蘆巴提取物在制備治療糖尿病中對(duì)血糖和血脂有調(diào)節(jié)作用藥品中的應(yīng)用。
本發(fā)明的效果該胡蘆巴提取物降糖作用明顯，降糖同時(shí)能降血脂，抑制血小板聚集，降低血粘度，保護(hù)急性腦缺血損傷等作用；該提取物主要是通過增加機(jī)體對(duì)胰島素的敏感性而發(fā)揮治療作用。其這種獨(dú)特的降糖作用機(jī)理對(duì)2型糖尿病乃至胰島素抵抗綜合征的治療頗有意義。同時(shí)，由于降低血糖和改善血脂的作用，也減輕了高血糖、高血脂對(duì)胰島B細(xì)胞的毒性作用，由此進(jìn)一步增強(qiáng)糖尿病(DM)大鼠和高脂大鼠的胰島素敏感性，形成良性循環(huán)，使機(jī)體代謝恢復(fù)正常，胡蘆巴提取物的這些作用和其能升高糖尿病(DM)大鼠的血清HDL和降低血清的NO水平有關(guān)，提示TFGS可能有阻止糖尿病(DM)和糖尿病(DM)慢性并發(fā)癥發(fā)生和發(fā)展的作用；因此，可以預(yù)測胡蘆巴提取物在防治糖尿病(DM)和糖尿病(DM)慢性并發(fā)癥方面具有良好的應(yīng)用前景。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明不受下述實(shí)施例的限制，可根據(jù)上述本發(fā)明的技術(shù)方案和實(shí)際情況來確定具體的實(shí)施方式。
實(shí)施例1，該胡蘆巴提取物按重量百分比含有20％的胡蘆巴總皂苷。
實(shí)施例2，該胡蘆巴提取物按重量百分比含有30％的胡蘆巴總皂苷。
實(shí)施例3，該胡蘆巴提取物按重量百分比含有40％的胡蘆巴總皂苷。
實(shí)施例4，該胡蘆巴提取物按重量百分比含有50％的胡蘆巴總皂苷。
實(shí)施例5，該胡蘆巴提取物按重量百分比含有60％的胡蘆巴總皂苷。
實(shí)施例6，該胡蘆巴提取物按重量百分比含有70％的胡蘆巴總皂苷。
在上述實(shí)施例1至6中，胡蘆巴總皂苷為含有甲基原薯蕷皂苷、甲基原翠雀皂苷、胡蘆巴皂苷I、胡蘆巴皂苷II和胡蘆巴皂苷III的混合物。
上述實(shí)施例1至6中的胡蘆巴提取物按以下步驟得到第一步、首先將胡蘆巴干燥粗粉經(jīng)濃度為50％或60％或70％或80％或95％的乙醇水溶液應(yīng)用浸漬法或滲漉法或回流法提取后，回收乙醇得流浸膏；第二步、將流浸膏用水稀釋3倍或4倍或5倍后呈混懸液，并與中等極性的大孔樹脂接觸，采用樹脂吸附，當(dāng)吸附后的混懸液中的胡蘆巴總皂苷含量低于1％時(shí)，將吸附后的混懸液與吸附有胡蘆巴提取物的大孔樹脂分離；第三步、用PH值為10.0或12.0或14.0的水溶液洗滌吸附有胡蘆巴提取物的大孔樹脂，當(dāng)洗滌液中含有0.1％或0.5％或1％的胡蘆巴總皂苷時(shí)停止洗滌；然后用水洗滌吸附有胡蘆巴提取物的大孔樹脂，至流出液的PH值接近中性時(shí)停止水洗；第四步、用能解析吸附在大孔樹脂上的胡蘆巴總皂苷的洗脫液解析水洗后的大孔樹脂，采用動(dòng)態(tài)解析或靜態(tài)解析，解析溫度為室溫或30℃或40℃或50℃或60℃；第五步、解析了胡蘆巴總皂苷后的洗脫液經(jīng)濃縮、干燥后既得胡蘆巴提取物，干燥溫度為室溫或30℃或40℃或50℃或60℃。
在上述步驟中中等極性的大孔樹脂為苯乙烯型共聚體的中極性吸附樹脂，其結(jié)構(gòu)為大孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)；洗脫液為一種可與水混溶的極性有機(jī)溶劑水溶液組成，其水溶液PH值為5.0或7.0或9.0，其有機(jī)溶劑與水的體積比為20∶80或20∶40或20∶20或20∶10或20∶10或50∶10或70∶10或90∶10；洗脫液優(yōu)先為醇的或酮的極性有機(jī)溶劑水溶液。
洗脫液最佳為甲醇或乙醇或丙醇或丙酮或丁酮的水溶液。
在本發(fā)明中，除上述優(yōu)選出的工藝及參數(shù)外，其它工藝及參數(shù)都采用了常規(guī)乙醇提出方法。
本發(fā)明所得胡蘆巴提取物的效果實(shí)驗(yàn)如下一、藥效實(shí)驗(yàn)結(jié)果(一)胡蘆巴提取物中胡蘆巴總皂苷(TFGs)對(duì)糖尿病(DM)大鼠各項(xiàng)指標(biāo)的影響
根據(jù)現(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)方法(北京醫(yī)科大學(xué)中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社)建立糖尿病動(dòng)物模型，觀察到胡蘆巴提取物胡中的蘆巴總皂苷對(duì)糖尿病大鼠血糖的影響，結(jié)果顯示給藥5周后，模型組空腹血糖(FBG)高于正常組，有顯著性差異(p＜0.01)，三個(gè)TFGs給藥組與模型組相比，只有TFGs大組(大劑量)的FBG下降有顯著性差異(p＜0.01)；三個(gè)TFGs給藥組降低DM大鼠FBG有劑量依賴性；三個(gè)TFG給藥組血清胰島素(FINS)水平均有所升高，都有顯著性差異(p＜0.01)，但均未升至正常組水平，三個(gè)TFG給藥組之間隨劑量增加血清FINS水平逐漸下降，但各組間并無顯著性差異(p＞0.05)。
三個(gè)TFG給藥組，血清NO水平均降低，都有顯著性差異(p＜0.01)；TFG大組的胰島素敏感指數(shù)(IAI)、胰島素分泌指數(shù)(IS)均增高，有顯著性差異(p＜0.01)；正血糖鉗實(shí)驗(yàn)表明，TFG可顯著提高葡萄糖輸注率(p＜0.01)。
TFG大組和TFG小組升高血清高密度脂蛋白(HDL)水平，有顯著性差異。
(二)TFGS對(duì)高脂血癥大鼠血脂的影響根據(jù)現(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)方法(北京醫(yī)科大學(xué)中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社)建立高脂動(dòng)物模型TFG大組能顯著降低甘油三酯(TG)，TFG大組顯著升高血清HDL水平，并且三個(gè)TFG給藥組升高血清HDL水平有很好的劑量依賴性，三個(gè)TFGs給藥組能顯著降低血清總膽固醇(TC)水平，三個(gè)TFG給藥組均能顯著降低血清低密度脂蛋白(LDL)水平。
二、藥效實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)論結(jié)果顯示TFGs能升高DM大鼠血清FINS和HDL水平，降低血清NO水平，提高IAI和IS值。
綜上所述，可以認(rèn)為TFGs能提高胰島素敏感性，降低血糖和改善血脂紊亂，同時(shí)，由于降低血糖和改善血脂的作用，也減輕了高血糖、高血脂對(duì)胰島B細(xì)胞的毒性作用，由此進(jìn)一步增強(qiáng)DM大鼠和高脂大鼠的胰島素敏感性，形成良性循環(huán)，使機(jī)體代謝恢復(fù)正常，TFGs的這些作用和其能升高DM大鼠的血清HDL和降低血清的NO水平，提示TFGs可能有阻止DM和DM慢性并發(fā)癥發(fā)生和發(fā)展的作用；因此，該胡蘆巴提取物特別具有防治糖尿病(DM)和糖尿病(DM)慢性并發(fā)癥的作用。
權(quán)利要求
1.一種從植物胡蘆巴中提取的胡蘆巴提取物，其特征在于該胡蘆巴提取物按重量百分比含有20％至70％的胡蘆巴總皂苷。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的胡蘆巴提取物，其特征在于胡蘆巴總皂苷為含有甲基原薯蕷皂苷、甲基原翠雀皂苷、胡蘆巴皂苷I、胡蘆巴皂苷II和胡蘆巴皂苷III的混合物。
3.一種根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的胡蘆巴提取物生產(chǎn)方法，其特征在于按以下步驟進(jìn)行第一步、首先將胡蘆巴干燥粗粉經(jīng)濃度為50％至95％的乙醇水溶液應(yīng)用浸漬法或滲漉法或回流法提取后，回收乙醇得流浸膏；第二步、將流浸膏用水稀釋3至5倍后呈混懸液，并與中等極性的大孔樹脂接觸，采用樹脂吸附，當(dāng)吸附后的混懸液中的胡蘆巴總皂苷含量低于1％時(shí)，將吸附后的混懸液與吸附有胡蘆巴提取物的大孔樹脂分離；第三步、用由無機(jī)堿調(diào)節(jié)的PH值為8.0至14.0的水溶液洗滌吸附有胡蘆巴提取物的大孔樹脂，當(dāng)洗滌液中含有0.1％至1％的胡蘆巴總皂苷時(shí)停止洗滌；然后用水洗滌吸附有胡蘆巴提取物的大孔樹脂，至流出液的PH值接近中性時(shí)停止水洗；第四步、用能解析吸附在大孔樹脂上的胡蘆巴總皂苷的洗脫液解析水洗后的大孔樹脂，采用樹脂吸附，解析溫度為室溫至60℃；第五步、解析了胡蘆巴總皂苷后的洗脫液經(jīng)濃縮、真空干燥后既得胡蘆巴提取物，干燥溫度為室溫至60℃。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的胡蘆巴提取物生產(chǎn)方法，其特征在于中等極性的大孔樹脂為苯乙烯型共聚體的含有酯基或氰基的中等極性吸附樹脂，其結(jié)構(gòu)為大孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的胡蘆巴提取物生產(chǎn)方法，其特征在于洗脫液為一種可與水混溶的極性有機(jī)溶劑水溶液組成，其水溶液PH值為5.0至9.0，其有機(jī)溶劑與水的體積比為20∶80至90∶10。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的胡蘆巴提取物生產(chǎn)方法，其特征在于洗脫液為一種可與水混溶的極性有機(jī)溶劑水溶液組成，其水溶液PH值為5.0至9.0，其有機(jī)溶劑與水的體積比為20∶80至90∶10。
7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的胡蘆巴提取物生產(chǎn)方法，其特征在于洗脫液為醇的或酮的極性有機(jī)溶劑水溶液。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的胡蘆巴提取物生產(chǎn)方法，其特征在于洗脫液為甲醇或乙醇或丙醇或丙酮或丁酮的一種或一種以上的水溶液。
9.一種根據(jù)權(quán)利要求1或2或4或5或6或8所述的胡蘆巴提取物在制備治療糖尿病中對(duì)血糖和血脂有調(diào)節(jié)作用藥品中的應(yīng)用。
10.一種根據(jù)權(quán)利要求3所述的胡蘆巴提取物在制備治療糖尿病中對(duì)血糖和血脂有調(diào)節(jié)作用藥品中的應(yīng)用。
全文摘要
一種從植物胡蘆巴中提取的胡蘆巴提取物及其生產(chǎn)方法和在制備治療糖尿病中對(duì)血糖和血脂有調(diào)節(jié)作用藥品中的應(yīng)用，該胡蘆巴提取物按重量百分比含有20％至70％的胡蘆巴總皂苷；其生產(chǎn)方法按以下步驟進(jìn)行；第一步醇提??；第三步大孔樹脂吸附；第三步、洗滌雜質(zhì)；第四步、用能解析吸附在大孔樹脂上的胡蘆巴總皂苷的洗脫液解析水洗后的大孔樹脂；第五步、解析了胡蘆巴總皂苷后的洗脫液經(jīng)濃縮、干燥后既得胡蘆巴提取物；該胡蘆巴提取物能提高胰島素敏感性，降低血糖和改善血脂紊亂，減輕了高血糖、高血脂對(duì)胰島B細(xì)胞的毒性作用，由此進(jìn)一步增強(qiáng)糖尿病大鼠和高脂大鼠的胰島素敏感性，形成良性循環(huán)，使機(jī)體代謝恢復(fù)正常，因此，具有在防治糖尿病和糖尿病慢性并發(fā)癥的作用。
文檔編號(hào)A61P3/10GK1480462SQ0314407
公開日2004年3月10日 申請(qǐng)日期2003年8月1日 優(yōu)先權(quán)日2003年8月1日
發(fā)明者李琳琳, 毛新民, 楊衛(wèi)星, 張?jiān)旅? 李世強(qiáng), 王雪飛, 冉新建, 楊永新, 孫曉風(fēng), 王海燕, 李念東, 鄔利婭, 白麗 申請(qǐng)人:新疆特豐藥業(yè)股份有限公司, 新疆醫(yī)科大學(xué)