本發(fā)明涉及一種黑豆芽苗提取物的制備方法，尤其涉及一種黑豆芽苗提取物在制備食品、保健品、藥品和日化用品中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

黑豆，又名黑大豆、櫓豆、烏豆，是豆科植物，因外皮為黑色而得名。黑豆味甘性平，具有高蛋白、低熱量的特性，黑豆是藥食同源的豆類。黑豆含有豐富的蛋白質(zhì)、脂肪、維生素、尼克酸、胡蘿卜素、微量元素和粗纖維?！侗静菥V目拾遺》中記載黑豆具有延緩衰老，美容養(yǎng)顏的功效，長(zhǎng)期食用可以強(qiáng)身健體，延年益壽，并可以滋養(yǎng)肌膚，美容烏發(fā)。現(xiàn)代科學(xué)研究表明黑豆具有降血脂、增加骨密度、抗氧化、養(yǎng)顏美容的效果。

異酮類成分是黑豆中的主要活性成分之一，具有雌激素樣作用，目前大部分關(guān)于黑豆功效的研究也都是圍繞其中的異黃酮類物質(zhì)而展開。目前，常見的方法是通過(guò)發(fā)酵來(lái)增加黑豆中高活性的異黃酮苷元的含量，此法需加入特定的發(fā)酵用酶，需嚴(yán)格控制生產(chǎn)環(huán)境，工藝要求較高，發(fā)酵過(guò)程易產(chǎn)品其它成分，對(duì)產(chǎn)品產(chǎn)品安全性造成影響。

研究發(fā)現(xiàn)，將黑豆萌發(fā)成芽，由于酶的作用，其非糖基化的黃酮醇含量顯著增加，可顯著增加其中異黃酮類物質(zhì)的含量，對(duì)其功效增強(qiáng)有改善作用。同時(shí)黑豆芽作為傳統(tǒng)食用豆芽的一種，來(lái)源綠色天然，食用安全。

因此利用發(fā)芽法提高黑豆中主要活性成分異黃酮類成分含量，并進(jìn)行有效提取與富集異，可確保提取物來(lái)源天然，無(wú)污染，食用安全性高，具有廣泛的開發(fā)應(yīng)用前景。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種黑豆芽苗提取物的制備方法。

本發(fā)明的另一目的在于提供上述黑豆芽苗提取物在制備食品、保健品、藥品或日化用品中的應(yīng)用。

本發(fā)明的目的是通過(guò)以下步驟獲得：

（1）黑豆芽苗處理：收集播種后第5-7天的黑豆芽苗，摘選提取部位，干燥至水份含量≤10%，粉碎過(guò)20目篩，得到黑豆芽苗粉末；

（2）芽苗提?。喝『诙寡糠?，以體積濃度50%-80%的乙醇為溶劑，提取，過(guò)濾，濾液減壓回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度1.15～1.18（60℃），備用；

（3）洗脫：取濃縮液以3～5倍質(zhì)量水稀釋，作為上樣液，加入已處理好的聚酰胺樹脂柱中，以上樣液體積5～10倍的體積濃度70%乙醇洗脫，收集洗脫液；

（4）將收集的洗脫液減壓回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度1.15～1.20（60℃），干燥至水份含量≤5.0，即得黑豆芽苗提取物。

優(yōu)選的：步驟(1)中，所述的摘選提取部位，為摘除豆瓣后的部位。

優(yōu)選的：步驟(2)中，所述的提取方法為以超聲法提取兩次，每次10倍體積溶劑，每次30分鐘，或以熱回流提取法提取2次，每次10倍體積溶劑，每次1小時(shí)。

優(yōu)選的：步驟(3)中，所述的加入上樣液為按每克聚酰胺樹脂加入上樣液1～3ml。

優(yōu)選的：步驟(4)中，所述的黑豆芽苗提取物總異黃酮含量為32.2-61.5%。

本發(fā)明通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，黑豆芽苗的芽根、豆瓣和豆苗中異黃酮存在較大差異，為了得到異黃酮含量更高的部位，本發(fā)明對(duì)黑豆芽苗部位選擇苗進(jìn)行了如下優(yōu)化：

提取部位優(yōu)化：

取發(fā)芽7天的黑豆芽苗，分離成芽根、豆瓣和豆苗三個(gè)不部位，分別測(cè)定總異黃酮含量，結(jié)果芽根、豆瓣和芽苗三個(gè)部分總異黃酮質(zhì)量含量依次為6.634%、0.571%和3.281%，因此，本發(fā)明主要選擇黑豆芽苗去除豆瓣后的部位制備提取物。

本發(fā)明還對(duì)黑豆芽苗提取方法進(jìn)行了如下優(yōu)化：

提取方法優(yōu)化：

取黑豆芽的干燥芽根和芽苗，粉碎過(guò)40目篩，稱取兩份，每份2.5g，精密稱定，以體積濃度80%乙醇溶液為提取溶劑，其中一份以超聲法提取2次，每次10倍量溶劑，每次提取30min，濾過(guò)，取濾液測(cè)定浸出物含量和總異黃酮含量并分別計(jì)算得率；另一份以同樣溶劑加熱回流提取2次，每次10倍量溶劑，每次提取1個(gè)小時(shí)，合并濾液，將合并后的濾液測(cè)定浸出物含量和總異黃酮含量，分別計(jì)算得率結(jié)果見表1。

表1不同方法提取效果

由表1可知，超聲法提取和回流法提取，總異黃酮提取率接近，及浸出物含量以熱回流提取法略高，因此，從總異黃酮提取角度考慮，本發(fā)明可選擇該兩種方法用于異黃酮的提取。

本發(fā)明還對(duì)黑豆芽苗洗脫液進(jìn)行了如下優(yōu)化：

洗脫液的優(yōu)化

稱取聚酰胺樹脂按步驟（3）中上樣，取上樣濃縮液體積10倍體積濃度分別為30%、50%、70%、90%的乙醇溶液各200ml依次洗脫，收集洗脫液，測(cè)定總異黃酮含量，見表2。

表2不同洗脫液含量結(jié)果（mg/ml）

由表2結(jié)果可知，體積濃度70%和95%的乙醇洗脫液總異黃酮含量較高，總異黃酮主要集中在該濃度洗脫液中，兩濃度乙醇洗脫效果相近，結(jié)合工藝成本因素，因此選擇70%乙醇作為洗脫液。

本發(fā)明提供上述黑豆芽苗提取物在制備食品、保健品、藥品或日化用品中的應(yīng)用。

優(yōu)選地，所述食品、保健品為固體飲料、餅干、片劑或膠囊，所述藥品為膠囊或片劑，所述的日化用品為乳膏劑、霜?jiǎng)⑷閯?/p>

優(yōu)選地，所述食品、保健品、藥品或日化用品還包括食品、保健品或藥品可接受的輔助藥物或輔料。

本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)：

（1）本發(fā)明通過(guò)選擇黑豆芽苗，并優(yōu)化活性成分含量較高的部位，可增加黑豆活性成分異黃酮的含量，可進(jìn)一步強(qiáng)化黑豆藥用和食用功效。

（2）本發(fā)明以體積濃度50%-80%乙醇提取，以聚酰胺樹脂對(duì)異黃酮類成分進(jìn)行分離純化，可有效富集黑豆芽苗異黃酮類成分，發(fā)揮更好的功效。

（3）本發(fā)明可將該提取物制成為固體飲料、餅干、片劑或膠囊等食品、保健品，或者加入輔助藥物和藥學(xué)上可接受的載體，制成制劑，原料來(lái)源天然、功效確切，產(chǎn)品攜帶和使用方便。

具體實(shí)施案例：

下面通過(guò)具體實(shí)施方式來(lái)進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，以下實(shí)施例為本發(fā)明具體的實(shí)施方式，但本發(fā)明的實(shí)施方式并不受下述實(shí)施例的限制，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡(jiǎn)化，均應(yīng)為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。

實(shí)施例1

一種黑豆芽苗提取物的制備，包括以下步驟：

（1）黑豆芽苗處理：收集播種后第7天的黑豆芽苗，去除豆瓣，干燥至水份含量8.5%，粉碎過(guò)20目篩，得到黑豆芽苗粉末；

（2）芽苗提取：取黑豆芽粉，以體積濃度80%的乙醇為溶劑，以超聲法提取兩次，每次10倍體積溶劑，每次30分鐘，過(guò)濾，濾液減壓回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度1.15（60℃），備用；

（3）洗脫：取濃縮液，加5倍水稀釋后作上樣液，加入已處理好的聚酰胺樹脂柱，以上樣液體積10倍的體積濃度70%乙醇洗脫，收集洗脫液；

（4）將收集的洗脫液減壓回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度1.20（60℃），干燥至水份含量4.4%，得黑豆芽苗提取物。

黑豆芽苗提取物總異黃酮含量為61.5%。

實(shí)施例2

一種黑豆芽苗提取物的制備，包括以下步驟：

（1）黑豆芽苗處理：收集播種后第6天的黑豆芽苗，去除豆瓣，干燥至水份含量10.0%，粉碎過(guò)20目篩，得到黑豆芽苗粉末；

（2）芽苗提?。喝『诙寡糠郏泽w積濃度65%的乙醇為溶劑，以熱回流提取法提取2次，每次10倍體積溶劑，每次1小時(shí)，過(guò)濾，濾液減壓回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度1.16（60℃），備用；

（3）洗脫：取濃縮液，加4倍水稀釋后作上樣液，加入已處理好的聚酰胺樹脂柱，以上樣液體積8倍的體積濃度70%乙醇洗脫，收集洗脫液；

（4）將收集的洗脫液減壓回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度1.18（60℃），干燥至水份含量5.0%，得黑豆芽苗提取物。

黑豆芽苗提取物總異黃酮含量為43.8%。

實(shí)施例3

一種黑豆芽苗提取物的制備，包括以下步驟：

（1）黑豆芽苗處理：收集播種后第5天的黑豆芽苗，去除豆瓣，干燥至水份含量8.8%，粉碎過(guò)20目篩，得到黑豆芽苗粉末；

（2）芽苗提?。喝『诙寡糠?，以體積濃度50%的乙醇為溶劑，提取，過(guò)濾，濾減壓回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度1.18（60℃），備用；

（3）洗脫：取濃縮液，加3倍水稀釋后作上樣液，加入已處理好的聚酰胺樹脂柱，以上樣液體積5倍的體積濃度70%乙醇洗脫，收集洗脫液；

（4）將收集的洗脫液減壓回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度1.15（60℃），干燥至水份含量4.1%，即得黑豆芽苗提取物。

黑豆芽苗提取物總異黃酮含量為32.2%。

實(shí)施例4

一種黑豆芽苗片的制備，包括以下步驟：

（1）取實(shí)施例1中制得的黑豆芽苗提取物，粉碎過(guò)80目篩，備用；

（2）按質(zhì)量比例（10：1.5：1.0：0.03）取黑豆芽苗提取物粉、乳糖、淀粉和硬酯酸鎂，混合均勻；

（3）將混合均勻的粉末，壓片，每片重0.2g，即得。