一種釀酒酵母催化生產(chǎn)手性亞環(huán)己基烯醇的方法
【專利摘要】一種釀酒酵母催化生產(chǎn)手性亞環(huán)己基烯醇的方法。將釀酒酵母用于催化制備(1S,3S)-1,2-（亞環(huán)己基二氧基）庚-6-烯-3-醇，反應(yīng)罐中加入磷酸鹽緩沖液，加入苧麻紗布調(diào)控底物、產(chǎn)物濃度，顯著減少抑制，用酵母細(xì)胞進(jìn)行生物催化反應(yīng)，產(chǎn)品收率高，對(duì)映體過(guò)量率高。
【專利說(shuō)明】一種釀酒酵母催化生產(chǎn)手性亞環(huán)己基烯醇的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于制藥工程【技術(shù)領(lǐng)域】，特別涉及到釀酒酵母細(xì)胞生物催化制備手性醫(yī)藥 中間體（1S，3S)-1，2-(亞環(huán)己基二氧基）庚-6-烯-3-醇的技術(shù)。

【背景技術(shù)】
[0002] 手性亞環(huán)己基二氧基）庚-6-烯-3-醇是合成手性藥物、精細(xì)化學(xué)品、農(nóng)藥品和其 他特殊材料的重要中間體。生物催化不對(duì)稱反應(yīng)具有環(huán)境友好、條件溫和、選擇性高等優(yōu) 點(diǎn)，作為綠色高效制備手性化合物的優(yōu)先途徑，被越來(lái)越多地應(yīng)用于生產(chǎn)一些高附加值的 手性化合物。生物催化制備手性亞環(huán)己基二氧基）庚-6-烯-3-醇具有很好的應(yīng)用前景。
[0003] 生物催化具有催化效率高、選擇性強(qiáng)、條件溫和、環(huán)境友好等突出優(yōu)點(diǎn)，是可持續(xù) 發(fā)展過(guò)程中替代和拓展傳統(tǒng)有機(jī)化學(xué)合成的重要方法。其中手性拆分和不對(duì)稱合成是生物 催化最具吸引力的應(yīng)用領(lǐng)域。在作為生物催化劑的六大類(lèi)酶中，水解酶能夠催化動(dòng)力學(xué)拆 分外消旋體得到手性產(chǎn)品，在工業(yè)生物催化中一直扮演著重要角色。近幾年來(lái)，氧化還原 酶在工業(yè)上的應(yīng)用得到了迅速增長(zhǎng)。目前，采用水解酶動(dòng)力學(xué)拆分法、生物還原法和生物 氧化法工業(yè)制備光學(xué)活性手性化合物的比例為4:2:1。
[0004] (IS, 3S)-1，2-(亞環(huán)己基二氧基）庚-6-烯-3-醇是合成手性藥物、精細(xì)化學(xué)品、 農(nóng)藥品的重要手性砌塊，由于有2個(gè)手性中心，使得化學(xué)合成較為困難，成本高。本發(fā)明將 米用生物催化制備（1S，3S) _1，2_ (亞環(huán)己基二氧基）庚_6_烯_3_醇。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明采用釀酒酵母細(xì)胞催化制備（1S，3S)_1，2-(亞環(huán)己基二氧基） 庚-6-烯-3-醇，反應(yīng)式如下：

【權(quán)利要求】
1. 一種釀酒酵母細(xì)胞生物催化制備（1S，3S)-1，2-(亞環(huán)己基二氧基)庚-6-烯-3-醇 的方法，其特征在于反應(yīng)罐中加入磷酸鹽緩沖液，裝料系數(shù)為〇. 6-0. 7,pH為7. 5,加入吸附 了底物S-亞環(huán)己基甘油醛與4-溴-1- 丁烯的苧麻紗布，使底物S-亞環(huán)己基甘油醛添加 量為80-90 g/L，底物S-亞環(huán)己基甘油醛與底物4-溴-1-丁烯摩爾比為1，葡萄糖含量為 14-15g/L，木糖16-20 g/L，10碳醇聚氧乙烯醚含量為15-18g/L，121°C高壓滅菌30分鐘； 冷卻至27-29°C時(shí)，加入濕酵母細(xì)胞使?jié)舛葹?8-20g/L，通氣比為0. 16-0. 2V/ (V分鐘)，進(jìn) 行生物催化反應(yīng)，反應(yīng)時(shí)間為84-89小時(shí)；反應(yīng)結(jié)束后，分別濾出細(xì)胞、苧麻紗布，用乙酸乙 酯萃取反應(yīng)液、萃取苧麻紗布，合并乙酸乙酯萃取液和萃取苧麻紗布的乙酸乙酯，蒸出乙酸 乙酯，得到產(chǎn)物（1S，3S)-1，2-(亞環(huán)己基二氧基)庚-6-烯-3-醇，反應(yīng)轉(zhuǎn)化率94-96%，產(chǎn) 品收率92-94 %，對(duì)映體過(guò)量率（ee%) 97-98 %。
2. 權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于濕酵母細(xì)胞制備過(guò)程如下：釀酒酵母經(jīng)斜面、 搖瓶、種子罐培養(yǎng)得到種子液；發(fā)酵罐加入培養(yǎng)液，裝料系數(shù)為〇. 6-0. 7,121°C高壓滅菌 30分鐘，冷卻至25-26°C，將釀酒酵母種子液接種至發(fā)酵罐，接種比例為7-8 %，通氣比為 0. 8-1V/ (V分鐘)，25-26°C培養(yǎng)42-46小時(shí)，用過(guò)濾式離心機(jī)離心得到濕酵母細(xì)胞，用作生 物催化反應(yīng)催化劑。
3. 權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于培養(yǎng)液成份為：蛋白胨1.5-2 g/L，酵母浸膏 8-10 g/L，葡萄糖 18-22 g/L，麥芽浸膏 25-30 g，硫酸銨 0.2-0. 25g/L，硫酸鎂 0.3-0. 4g/L， 磷酸二氧鉀1. 8-2. 3g/L ;固體培養(yǎng)基成份：在液體培養(yǎng)基中加入2%的瓊脂粉。
4. 權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述吸附了底物的苧麻紗布制作方法為，將底 物S-亞環(huán)己基甘油醛和4-溴-1- 丁烯混溶，R-亞環(huán)己基甘油醛與4-溴-1- 丁烯摩爾比 為1，用尺寸為0. 5cmX0. 5cm的苧麻紗布吸收此溶液，即得到吸附了底物的苧麻紗布，調(diào)節(jié) 底物與苧麻紗布用量，使得底物與苧麻紗布的質(zhì)量比率為0. 33-0. 35。
【文檔編號(hào)】C12R1/865GK104263774SQ201410537328
【公開(kāi)日】2015年1月7日 申請(qǐng)日期:2014年10月13日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月13日
【發(fā)明者】田璐, 劉均洪 申請(qǐng)人:青島科技大學(xué)