橡膠樹來源的HbsHsp2蛋白及其編碼基因與應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種橡膠樹來源的HbsHsp2蛋白及其編碼基因與應(yīng)用。本發(fā)明提供的蛋白質(zhì)是如下（a）或（b）或（c）：（a）由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；（b）將序列1的氨基酸序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與植物耐逆境脅迫能力相關(guān)的由序列1衍生的蛋白質(zhì)；（c）將序列1的氨基酸序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與微生物耐逆境脅迫能力相關(guān)的由序列1衍生的蛋白質(zhì)。本發(fā)明提供的蛋白質(zhì)及其編碼基因在提高植物抗鹽脅迫和高溫脅迫、提高橡膠樹產(chǎn)量中將發(fā)揮重要作用。
【專利說明】橡膠樹來源的HbsHsp2蛋白及其編碼基因與應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種橡膠樹來源的HbsHsp2蛋白及其編碼基因與應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]天然橡膠為四大工業(yè)原料之一，是關(guān)系國計民生的基礎(chǔ)產(chǎn)業(yè)和重要戰(zhàn)略物資，在國民經(jīng)濟(jì)中占有重要地位。巴西橡膠樹(Hevea brasiliensis Mull.Arg.)具有產(chǎn)量高、品質(zhì)好、產(chǎn)膠周期長、栽培措施易于掌握、采膠方便和生產(chǎn)成本低等優(yōu)點，是唯一一種人工栽培的產(chǎn)膠植物，其生產(chǎn)的天然橡膠占世界天然橡膠總產(chǎn)量的90%以上。此外，橡膠產(chǎn)業(yè)也是東南亞一些國家農(nóng)民的主要經(jīng)濟(jì)來源。
[0003]巴西橡膠樹屬大戟科，巴豆亞科，橡膠樹屬，原產(chǎn)于南美洲亞馬遜河流域，屬典型的熱帶高大喬木。我國植膠區(qū)位于北緯18-24度之間，屬非傳統(tǒng)植膠區(qū)域，橡膠樹經(jīng)常受低溫、干旱、風(fēng)害等非生物逆境條件影響。與傳統(tǒng)植膠區(qū)域相比，我國橡膠樹受逆境影響較大，產(chǎn)量偏低。我國是天然橡膠消費大國，對天然橡膠的需求量日益增長，造成我國天然橡膠供需矛盾日益突出。目前，我國天然橡膠自給率已不足18%。天然橡膠產(chǎn)業(yè)屬典型的資源約束型和技術(shù)依賴型產(chǎn)業(yè)，我國植膠區(qū)域有限，提高單產(chǎn)是保障我國天然橡膠供給能力的唯一出路。提高橡膠樹在逆境脅迫下的抗性及對逆境脅迫的適應(yīng)能力將有助于增加橡膠樹膠乳產(chǎn)量。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供一種橡膠樹來源的HbsHsp2蛋白及其編碼基因與應(yīng)用。
[0005]本發(fā)明提供的蛋白質(zhì)，獲自橡膠樹(Hevea brasiliensis),命名為HbsHsp2蛋白，是如下(a)或(b)或(c):
[0006](a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；
[0007](b)將序列1的氨基酸序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與植物耐逆境脅迫能力相關(guān)的由序列1衍生的蛋白質(zhì)；
[0008](c)將序列1的氨基酸序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與微生物耐逆境脅迫能力相關(guān)的由序列1衍生的蛋白質(zhì)。
[0009]為了使(a)中的蛋白質(zhì)便于純化，可在由序列表中序列I所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)的氨基末端或羧基末端連接上如表1所示的標(biāo)簽。
[0010]表1標(biāo)簽的序列
[0011]
【權(quán)利要求】
1.一種蛋白質(zhì)，是如下(a)或(b)或(c): Ca)由序列表中序列I所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)； (b)將序列I的氨基酸序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與植物耐逆境脅迫能力相關(guān)的由序列I衍生的蛋白質(zhì)； (C)將序列I的氨基酸序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與微生物耐逆境脅迫能力相關(guān)的由序列I衍生的蛋白質(zhì)。
2.編碼權(quán)利要求1所述蛋白質(zhì)的基因。
3.如權(quán)利要求2所述的基因，其特征在于:所述基因為如下(I)或(2)或(3)或(4)或(5)或(6)的DNA分子: (1)編碼區(qū)如序列表的序列2自5’末端第77-703位核苷酸所示的DNA分子； (2)序列表的序列2所不的DNA分子； (3 )在嚴(yán)格條件下與(I)或(2 )限定的DNA序列雜交且編碼植物耐逆境脅迫相關(guān)蛋白的DNA分子； (4)在嚴(yán)格條件下與(I)或(2)限定的DNA序列雜交且編碼微生物耐逆境脅迫相關(guān)蛋白的DNA分子； (5)與(I)或(2)限定的DNA序列至少具有70%、至少具有75%、至少具有80%、至少具有85%、至少具有90%、至少具有95%、至少具有96%、至少具有97%、至少具有98%或至少具有99%同源性且編碼植物耐逆境脅迫相關(guān)蛋白的DNA分子； (6)與(I)或(2)限定的DNA序列至少具有70%、至少具有75%、至少具有80%、至少具有85%、至少具有90%、至少具有95%、至少具有96%、至少具有97%、至少具有98%或至少具有99%同源性且編碼微生物耐逆境脅迫相關(guān)蛋白的DNA分子。
4.含有權(quán)利要求2或3所述基因的表達(dá)盒、重組載體、轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系或重組菌。
5.如權(quán)利要求4所述的重組載體，其特征在于:所述重組載體為將權(quán)利要求2或3所述基因插入pET28a(+)載體的多克隆位點得到的重組質(zhì)粒。
6.如權(quán)利要求4所述的重組菌，其特征在于:所述重組菌為將權(quán)利要求5所述重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌得到的重組菌。
7.一種培育重組微生物的方法，是將權(quán)利要求2或3所述基因?qū)肽康奈⑸镏?，得到耐逆境脅迫能力高于所述目的微生物的重組微生物。
8.如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于:所述目的微生物為大腸桿菌。
9.擴(kuò)增權(quán)利要求2或3所述基因全長或其任意片段的引物對。
10.權(quán)利要求1所述蛋白的應(yīng)用，為如下(I)或(11):( I )參與植物或微生物的對逆境脅迫的應(yīng)答；(II)提高植物或微生物對逆境脅迫的耐逆性。
【文檔編號】C12N15/11GK103665126SQ201310657133
【公開日】2014年3月26日 申請日期:2013年12月9日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月9日
【發(fā)明者】李德軍, 鄧治, 郭會娜, 杜磊 申請人:中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院橡膠研究所