用于合成脂肪酸的細(xì)菌和方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種用于增加高產(chǎn)量(接近最高理論產(chǎn)量)的游離脂肪酸的生產(chǎn)的工藝，其中各種脂肪酸組成和各種百分比的脂肪酸在細(xì)胞內(nèi)聚集。本發(fā)明將使得源自游離脂肪酸的其它產(chǎn)物和/或可從脂肪酸合成途徑分支的產(chǎn)物的有效生產(chǎn)成為可能。
【專利說明】用于合成脂肪酸的細(xì)菌和方法
[0001]在先相關(guān)申請
[0002]本申請要求2011年10月17日提交的61/548，005和2011年10月18日提交的61/548，399的優(yōu)先權(quán)，各自通過引用以整體并入。
[0003]聯(lián)邦資助的研究聲明
[0004]本發(fā)明根據(jù)由國家科學(xué)基金會授予的撥款號:EEC_0813570在政府支持下進行。政府享有本發(fā)明的某些權(quán)利。
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0005]本發(fā)明涉及通過使用基因工程微生物增加脂肪酸的生產(chǎn)的方法。
【背景技術(shù)】
[0006]日益增加的能源成本和環(huán)境問題都已強調(diào)對于生產(chǎn)可持續(xù)的、可再生的燃料和化學(xué)品的需求。脂肪酸由長的烷基鏈組成并且代表自然界的“石油”，作為被細(xì)胞使用的初級代謝產(chǎn)物用于化學(xué)和能量存儲功能。這些高能分子現(xiàn)今從植物和動物油分離，用于從燃料到油脂化學(xué)品的多樣化的產(chǎn)品。
[0007]鑒于用于生產(chǎn)乙醇和相關(guān)醇生物燃料的微生物發(fā)酵工藝已經(jīng)非常成熟，生物柴油(脂肪酸的甲基酯) 為生物學(xué)生產(chǎn)的主要的長鏈產(chǎn)物，并且現(xiàn)今它幾乎全部來源于植物油。然而，工程油籽代謝的緩慢的循環(huán)時間和作為副產(chǎn)品的甘油的過度累積為從植物獲得生物柴油的兩個主要缺點。盡管大多數(shù)細(xì)菌產(chǎn)生脂肪酸作為細(xì)胞被膜前體，但是脂肪酸的生物合成在多個層次被嚴(yán)密地調(diào)節(jié)并且并不生產(chǎn)較大的量。因此，從細(xì)菌生產(chǎn)脂肪酸還沒有達(dá)到符合成本效益的地步。
[0008]通過代謝工程菌株以高產(chǎn)量和高速率生產(chǎn)游離脂肪酸的能力將提供生物學(xué)或化學(xué)生產(chǎn)較大類的其它衍生產(chǎn)物(化學(xué)品和生物燃料)的有效框架。例如，如圖1中所示，通過引入額外的適當(dāng)途徑，脂肪酸可被轉(zhuǎn)化為化學(xué)品比如烴類、脂肪醇、羥基脂肪酸、二羧酸等。同樣地，分子的ω端可在脂肪酸生物合成途徑的初始步驟中通過改變起始前體而被修飾(由白色塊箭頭標(biāo)記)。此外，這些分子的鏈長度可通過使用對特定鏈長度比如C8、C10、C12或C14特異的適當(dāng)?shù)孽；?ACP硫酯酶而改變。另外，也可在脂肪酸延伸循環(huán)期間的不同時間點挖掘出各種分子。
[0009]US7759094公開了用于通過基因工程微生物的發(fā)酵生產(chǎn)L-氨基酸的方法，其中fadR被過表達(dá)并且sucC也被過表達(dá)。然而，在該專利中沒有關(guān)于脂肪酸生產(chǎn)的教導(dǎo)。
[0010]US7553645公開了用于使用基因工程或轉(zhuǎn)化的微生物制備L-氨基酸的工藝，其中sucC被過表達(dá)。然而，在該專利中沒有關(guān)于脂肪酸生產(chǎn)的教導(dǎo)。
[0011]US7211415也公開了用于通過腸桿菌科(Enterobacteriaceae)家族的基因工程微生物的發(fā)酵生產(chǎn)L-氨基酸的工藝，其中sucC被過表達(dá)。然而，在該專利中沒有關(guān)于脂肪酸生產(chǎn)的教導(dǎo)。
[0012]US20110195505公開了用于丁醇生產(chǎn)的基因工程乳酸菌，其中在fabH的缺失導(dǎo)致整個細(xì)胞膜飽和脂肪酸的10%的增加。然而，沒有關(guān)于fabZ過表達(dá)對脂肪酸生產(chǎn)的影響的教導(dǎo)。
[0013]US20080160585和US20080038787公開了增加從微生物生產(chǎn)賴氨酸的方法，其中sucC調(diào)節(jié)失控(deregulated)。然而,對于所涉及的調(diào)節(jié)失控的程度，比如過表達(dá)、減少或失活沒有公開細(xì)節(jié)，也沒有關(guān)于如何達(dá)到所述調(diào)節(jié)失控。
[0014]US20060046288公開了具有增加的琥珀酸生產(chǎn)的突變的大腸桿菌(E.coli)菌株，其中fadR基因活性降低。然而，沒有具體公開關(guān)于所述fadR基因或其調(diào)節(jié)/突變的細(xì)節(jié)。
[0015]W02011116279公開了雜合的ACP硫酯酶，其可與天然的fadD和sucC缺失組合。它們還教導(dǎo)了使培養(yǎng)基酸化以增加脂肪酸的生產(chǎn)。
[0016]因此，在本領(lǐng)域中存在對于比迄今所能實現(xiàn)的更有效且更具成本效益的生產(chǎn)脂肪酸的生物系統(tǒng)的需要。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0017]本發(fā)明涉及通過基因工程微生物生產(chǎn)脂肪酸，特別涉及借助于例如植物?；?ACP硫酯酶的加入和參與脂肪酸生物合成和/或降解途徑的轉(zhuǎn)錄因子；這些轉(zhuǎn)錄因子與在脂肪酸合成途徑、脂肪酸降解途徑或中心代謝途徑 中挑選的基因的一種或更多種的組合的操縱生產(chǎn)大量的游離脂肪酸的工程微生物。
[0018]本發(fā)明將允許生產(chǎn)具有與最高理論產(chǎn)量接近的產(chǎn)量的游離脂肪酸。同樣地，本發(fā)明將提供經(jīng)濟地生產(chǎn)共享脂肪酸合成途徑或從脂肪酸合成途徑分支的許多其它產(chǎn)物的必要框架。這些產(chǎn)物包括烴類、脂肪醇、羥基脂肪酸、二羧酸等。
[0019]更詳細(xì)地，本發(fā)明為以下的一種或更多種:
[0020]一種用于生產(chǎn)脂肪酸的基因工程細(xì)菌，所述細(xì)菌包含含有以下的基因型:
[0021]i)過表達(dá)的?；鵄CP硫酯酶(TE+)；
[0022]ii)過表達(dá)的FabZ+、FadR+或FabH+的一種或更多種；
[0023]iii) Δ fadR、Δ sucC、Δ fabR、Δ fadD> AptsG 的零種、一種或更多種；
[0024]前提條件是所述細(xì)菌沒有Λ fadD Δ sucC TE+的基因型。
[0025]一種用于生產(chǎn)脂肪酸的基因工程細(xì)菌，所述細(xì)菌包含含有以下的基因型:
[0026]i)過表達(dá)的酰基ACP硫酯酶(TE+)；
[0027]ii)過表達(dá)的FabZ+、FadR+或FabH+的一種或更多種；
[0028]iii) Δ fadR, AsucC, Δ fabR, Δ fadD, AptsG 的零種、一種或更多種；
[0029]前提條件是所述細(xì)菌不是fabA+并且沒有Λ fadD Δ sucC TE+的基因型。
[0030]一種包含以下基因型的基因工程細(xì)菌:i) AsucC FabZ+TE+ ；ii) AsucCAfabRFabZ+TE+ ；iii) FabZ+TE+ ；iv) Δ fabR FadR+TE+ ；或 ν) Δ sucC Δ fabR FadR+TE+ ；或 Δ sucCFabZ+TE+ ;或 Λ fadD Δ sucC FabZ+TE+。
[0031]一種包含選自由以下組成的組的基因型的基因工程細(xì)菌:
[0032]I) Δ fadD Δ fabR 酰基-ACP 硫酯酶 +
[0033]2) Δ fadD Δ fabR fabZ+ ?；?ACP 硫酯酶 +
[0034]3) Δ fadD Δ fadR ?；?ACP 硫酯酶 +
[0035]4) Δ fadD Δ fadR fabZ+ ?；?ACP 硫酯酶 +[0036]5) Δ fadD Δ fadR Δ fabR ?；?ACP 硫酯酶 +
[0037]6) Δ fadD fabZ+ ?；?ACP 硫酯酶 +
[0038]7) Δ fadD fadR+ ?；?ACP 硫酯酶 +
[0039]8) Δ fadD Δ sucC Δ fabR 酰基-ACP 硫酯酶 +
[0040]9) Δ fadD Δ sucC Δ fabR fabZ+ ?；?ACP 硫酯酶 +
[0041 ]10) Δ fadD Δ sucC Δ fadR ?；?ACP 硫酯酶 +
[0042]11) Δ fadD Δ sucC Δ fadR fabZ+ 酰基-ACP 硫酯酶 +
[0043]12) Δ fadD Δ sucC Δ fabR Δ fadR ?；?ACP 硫酯酶 +
[0044]13) Δ fadD Δ sucC fabZ+ 酰基-ACP 硫酯酶 +
[0045]14) Δ fadD Δ sucC fadR+ ?；?ACP 硫酯酶 +
[0046]15) Δ fabR ?；?ACP 硫酯酶 +
[0047]16) Δ fabR fabZ+ ?；?ACP 硫酯酶 + [0048]17) Δ fadR 酰基-ACP 硫酯酶 +
[0049]18) Δ fadR fabZ+ ?；?ACP 硫酯酶 +
[0050]19) Δ fadR Δ fabR ?；?ACP 硫酯酶 +
[0051 ]20) fabZ+ 酰基-ACP 硫酯酶 +
[0052]21) fadR+ ?；?ACP 硫酯酶 +
[0053]22) Δ sucC Δ fabR ?；?ACP 硫酯酶 +
[0054]23) Δ sucC Δ fabR fabZ+ ?；?ACP 硫酯酶 +
[0055]24) Δ sucC Δ fadR 酰基-ACP 硫酯酶 +
[0056]25) Δ sucC Δ fadR fabZ+ ?；?ACP 硫酯酶 +
[0057]26) Δ fadD Δ sucC Δ fabR Δ fadR 酸基-ACP 硫酯酶 +
[0058]27) Δ fadD Δ sucC fabZ+ 酰基-ACP 硫酯酶 +
[0059]28) Δ fadD Δ sucC fadR+ ?；?ACP 硫酯酶 +
[0060]29) Δ fadD Δ fabR fadR+ 酰基-ACP 硫酯酶 +
[0061 ]30) Δ fabR fadR+ ?；?ACP 硫酯酶 +
[0062]31) Δ fadD Δ sucC Δ fabR fadR+ 酰基-ACP 硫酯酶 +
[0063]32) Δ sucC Δ fabR fadR+ ?；?ACP 硫酯酶 +
[0064]33) Δ fadD Δ ptsG fabH+ ?；?ACP 硫酯酶 +
[0065]34) Δ ptsG fabH+ ?；?ACP 硫酯酶 +
[0066]在另一個實施方案中，具有無效突變(例如，Λ基因)的本文描述的每種細(xì)菌可替代為基因_。因此，AfadD可為FadD' Δ fadR可為fadIT, Δ fabR可為FabIT, Δ sucC可為SucC_以及Δ ptsG可為PtsG_等。
[0067]本文描述的細(xì)菌的任一種，其生產(chǎn)比具有AfadD加上TE+的對照微生物多至少14%的脂肪酸。優(yōu)選地，所述細(xì)菌生產(chǎn)比具有Λ fadD加上TE+的對照微生物多至少45%的脂肪酸、或者多至少65%的脂肪酸以及最優(yōu)選地，多至少80%的脂肪酸。
[0068]一種用于生產(chǎn)相比于缺乏所述基因型的對照細(xì)菌增加量的脂肪酸的基因工程細(xì)菌，所述細(xì)菌包含選自由以下組成的組的基因型:
[0069]1.Δ sucC fabZ+ 酰基-ACP 硫酯酶 +[0070]2.Δ sucC Δ fabR fabZ+ ?；?ACP 硫酯酶 +
[0071 ] 3.fabZ+ ?；?ACP 硫酯酶 +
[0072]4.fadR+ 酰基-ACP 硫酯酶 +
[0073]5.Δ sucC Δ fabR ?；?ACP 硫酯酶 +
[0074]6.Δ fabR ?；?ACP 硫酯酶 +
[0075]7.Δ fadR fabZ+ ?；?ACP 硫酯酶 +
[0076]8.Δ fa bR fabZ+ ?；?ACP 硫酯酶 +
[0077]9.Δ fadD Δ sucC fabZ+ 酰基-ACP 硫酯酶 +
[0078]10.Δ fadD Δ sucC Δ fabR fabZ+ ?；?ACP 硫酯酶 +
[0079]11.Δ fadD fabZ+ 酰基-ACP 硫酯酶 +
[0080]12.Δ fadD fadR+ ?；?ACP 硫酯酶 +
[0081 ] 13.Δ fadD Δ sucC Δ fabR 酰基-ACP 硫酯酶 +
[0082]14.Δ fadD Δ fabR ?；?ACP 硫酯酶 +
[0083]15.Δ fadD Δ fadR fabZ+ ?；?ACP 硫酯酶 +
[0084]16.Δ fadD Δ fabR fabZ+ 酰基-ACP 硫酯酶 +
[0085]17.Δ fadD Δ fabR fadR+ ?；?ACP 硫酯酶 +
[0086]18.Δ fabR fadR+ ?；?ACP 硫酯酶 +
[0087]19.Δ fadD Δ sucC Δ fabR fadR+酸基-ACP 硫酯酶 +
[0088]20.Δ sucC Δ fabR fadR+ ?；?ACP 硫酯酶 +
[0089]其它實施方案提供了包含 Δ fadD Δ sucC FabZ+TE+ ；或 Δ fadD Δ sucC Δ fabRFabZ+TE+ ；或 Δ fadD FabZ+TE+ ；或 Δ sucC FabZ+TE+ 或 Δ sucC Δ fabR FabZ+TE+ ；或 FabZ+TE+的基因工程腸桿菌科(Enterobacteriaceae)或腸桿菌屬(Enterobacter),或本文描述的細(xì)菌的任一種。在其它實施方案中，本發(fā)明可容易地被轉(zhuǎn)移到具有等價基因集(gene set)的任意細(xì)菌，例如在厚壁菌門(Firmicutes)、放線菌門(Actinobacteria)、螺旋菌(Spirochetes)、變形菌門(Proteobacteria)、芽抱桿菌屬(Bacillus)、鏈球菌屬(Streptococcus)、乳酸菌屬(Lactobaccillus)、乳球菌屬(Lactococcus)、朽1樣酸桿菌屬(Citrobacter)、嗜血桿菌屬(Haemophilus)、放線菌屬(Actinomycetes)、藍(lán)藻細(xì)菌(Cyanobacteria)、葡萄球菌(Staphylococcus)、奈瑟氏菌屬(Neisseria)、微球菌(Micrococcus)、曲霉菌屬(Aspergillus)、假單胞菌屬(Psuedomonas)等中。由于存在數(shù)百個現(xiàn)成的完全測序的細(xì)菌基因組(參見en.wikipedia.0rg/wiki/List_of_sequenced_bacterial_genomes),本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員可通過比較,尤其是使用蛋白序列(其發(fā)散小于原核生物中的基因序列)容易地確認(rèn)同源基因組。
[0090]還提供了生產(chǎn)脂肪酸的方法，所述方法包括在對生產(chǎn)脂肪酸有效的條件下在培養(yǎng)基中培養(yǎng)如本文所述的任意基因工程細(xì)菌；以及從所述細(xì)菌和/或培養(yǎng)基中收獲所述脂肪酸。另一個實施方案包括向所述培養(yǎng)基中加入醋酸以及從所述培養(yǎng)基收獲脂肪酸。
[0091]提供了生產(chǎn)脂肪酸的另一種方法，包括在對生產(chǎn)脂肪酸有效的條件下在培養(yǎng)基中培養(yǎng)基因工程細(xì)菌；以及從所述微生物和/或培養(yǎng)基中收獲所述脂肪酸，其中所述細(xì)菌和期望的脂肪酸組成(fatty acid profile)選自由表2中所列的那些組成的組。作為一種選擇，所述細(xì)菌和脂肪酸組成選自由以下組成的組:[0092]
【權(quán)利要求】
1.一種用于生產(chǎn)脂肪酸的基因工程細(xì)菌，所述細(xì)菌包含含有以下的基因型: b)過表達(dá)的?；鵄CP硫酯酶(TE+)； c)過表達(dá)的FabZ+、FadR+或FabH+的一種或更多種； d)Δ fadR、Δ sucC、Δ fabR、Δ fadD 或 AptsG 的零種、一種或更多種； 前提條件是所述細(xì)菌沒有Λ fadD Δ sucC TE+的基因型。
2.如權(quán)利要求1所述的基因工程細(xì)菌，其中所述細(xì)菌的所述基因型包含i)Δ SucCFabZ+TE+ ；ii) AsucCAfabR FabZ+TE+ ；iii)FabZ+TE+ ；iv) Δ fabR FadR+TE+ ；或 ν)Δ sucC Δ fabR FadR+TE+。
3.如權(quán)利要求1所述的基因工程細(xì)菌，其中所述細(xì)菌的所述基因型包含AsucCFabZ+TE+。
4.如權(quán)利要求1所述的基因工程細(xì)菌，其中所述細(xì)菌的所述基因型包含Δ fadD Δ sucCFabZ+TE+。
5.如權(quán)利要求1所述的基因工程細(xì)菌，其中所述細(xì)菌的所述基因型包含選自由以下組成的組的基因型:
1)Δ fadD Δ fabR ?；?ACP 硫酯酶 +
2)Δ fadD Δ fabR fabZ+ ?；?ACP 硫酯酶 +
3)Δ fadD Δ fadR 酰基-ACP 硫酯酶 +
4)Δ fadD Δ fadR fabZ+ ?；?ACP 硫酯酶 +
5)Δ fadD Δ fadR Δ fabR ?；?ACP 硫酯酶 + 6)Δ fadD fabZ+ ?；?ACP 硫酯酶 + 7)Δ fadD fadR+ ?；?ACP 硫酯酶 +
8)Δ fadD Δ sucC Δ fabR ?；?ACP 硫酯酶 +
9)Δ fadD Δ sucC Δ fabR fabZ+ 酰基-ACP 硫酯酶 +
10)Δ fadD Δ sucC Δ fadR ?；?ACP 硫酯酶 +
11)Δ fadD Δ sucC Δ fadR fabZ+ ?；?ACP 硫酯酶 +
12)Δ fadD Δ sucC Δ fabR Δ fadR 酰基-ACP 硫酯酶 +
13)Δ fadD Δ sucC fabZ+ ?；?ACP 硫酯酶 +
14)Δ fadD Δ sucC fadR+ ?；?ACP 硫酯酶 + 15)Δ fabR?；?ACP硫酯酶+ 16)Δ fabR fabZ+ ?；?ACP 硫酯酶 + 17)Δ fadR?；?ACP硫酯酶+ 18)Δ fadR fabZ+ 酰基-ACP 硫酯酶 +
19)Δ fadR Δ fabR ?；?ACP 硫酯酶 + 20)fabZ+?；?ACP硫酯酶+ 21)fadR+?；?ACP硫酯酶+
22)Δ sucC Δ fabR ?；?ACP 硫酯酶 +
23)Δ sucC Δ fabR fabZ+ ?；?ACP 硫酯酶 +
24)Δ sucC Δ fadR ?；?ACP 硫酯酶 +
25)Δ sucC Δ fadR fabZ+ ?；?ACP 硫酯酶 +26)Δ fadD Δ sucC Δ fabR Δ fadR ?；?ACP 硫酯酶 +
27)Δ fadD Δ sucC fabZ+ ?；?ACP 硫酯酶 +
28)Δ fadD Δ sucC fadR+ ?；?ACP 硫酯酶 +
29)Δ fadD Δ fabR fadR+ 酰基-ACP 硫酯酶 + 30)Δ fabR fadR+ ?；?ACP 硫酯酶 +
31)Δ fadD Δ sucC Δ fabR fadR+ ?；?ACP 硫酯酶 +
32)Δ sucC Δ fabR fadR+ 酰基-ACP 硫酯酶 +
33)Δ fadD Δ ptsG fabH+ ?；?ACP 硫酯酶 +
34)Δ ptsG fabH+ 酰基-ACP 硫酯酶 +。
6.如權(quán)利要求1所述的基因工程細(xì)菌，其中所述細(xì)菌生產(chǎn)比具有AfadD加上TE+的對照微生物多至少14%的脂肪酸。
7.如權(quán)利要求1所述的基因工程細(xì)菌，其中所述細(xì)菌生產(chǎn)比具有AfadD加上TE+的對照微生物多至少45%的脂肪酸。
8.如權(quán)利要求1所述的基因工程細(xì)菌，其中所述細(xì)菌生產(chǎn)比具有AfadD加上TE+的對照微生物多至少65%的脂肪酸。
9.如權(quán)利要求1所述的基因工程細(xì)菌，其中所述細(xì)菌生產(chǎn)比具有AfadD加上TE+的對照微生物多至少80%的脂肪酸。
10.一種用于生產(chǎn)增加量的脂肪酸的基因工程細(xì)菌，所述細(xì)菌包含選自由以下組成的組的基因型:
(1)Δ sucC fabZ+ 酰基-ACP 硫酯酶 +
(2)Δ sucC Δ fabR fabZ+ 酰基-ACP 硫酯酶 + (3)fabZ+?；?ACP硫酯酶+ (4)fadR+酰基-ACP硫酯酶+
(5)Δ sucC Δ fabR ?；?ACP 硫酯酶 + (6)Δ fabR?；?ACP硫酯酶+
(7)Δ fadR fabZ+ ?；?ACP 硫酯酶 +
(8)Δ fabR fabZ+ ?；?ACP 硫酯酶 +
(9)Δ fadD Δ sucC fabZ+ ?；?ACP 硫酯酶 +
(10)Δ fadD Δ sucC Δ fabR fabZ+ ?；?ACP 硫酯酶 +
(11)Δ fadD fabZ+ 酰基-ACP 硫酯酶 +
(12)Δ fadD fadR+ 酰基-ACP 硫酯酶 +
(13)Δ fadD Δ sucC Δ fabR ?；?ACP 硫酯酶 +
(14)Δ fadD Δ fabR 酰基-ACP 硫酯酶 +
(15)Δ fadD Δ fadR fabZ+ ?；?ACP 硫酯酶 +
(16)Δ fadD Δ fabR fabZ+ ?；?ACP 硫酯酶 +
(17)Δ fadD Δ fabR fadR+ ?；?ACP 硫酯酶 +
(18)Δ fabR fadR+ 酰基-ACP 硫酯酶 +
(19)Δ fadD Δ sucC Δ fabR fadR+ ?；?ACP 硫酯酶 +
(20)Δ sucC Δ fabR fadR+ ?；?ACP 硫酯酶 +(21)Δ fadD Δ ptsG fabH+ 酰基-ACP 硫酯酶 +。
11.一種基因工程腸桿菌科，所述基因工程腸桿菌科包含Λ fadD Λ sucC FabZ+TE+。
12.—種基因工程腸桿菌科，所述基因工程腸桿菌科包含AfadDAsucCAfabRFabZ+TE+。
13.一種基因工程腸桿菌科，所述基因工程腸桿菌科包含Λ fadD FabZ+TE+。
14.一種基因工程腸桿菌科，所述基因工程腸桿菌科包含Λ sucC FabZ+TE+。
15.一種基因工程腸桿菌科，所述基因工程腸桿菌科包含Λ sucC Λ fabR FabZ+TE+。
16.一種基因工程腸桿菌科，所述基因工程腸桿菌科包含F(xiàn)abZ+TE+。
17.—種生產(chǎn)脂肪酸的方法，所述方法包括在對生產(chǎn)脂肪酸有效的條件下在培養(yǎng)基中培養(yǎng)如權(quán)利要求1-16中任一項所述的基因工程細(xì)菌；以及從所述細(xì)菌和/或所述培養(yǎng)基中收獲所述脂肪酸。
18.如權(quán)利要求17所述的生產(chǎn)脂肪酸的方法，所述方法包括向所述培養(yǎng)基加入醋酸以及從所述培養(yǎng)基收獲所述脂肪酸。
19.一種生產(chǎn)脂肪酸的方法，所述方法包括在對生產(chǎn)脂肪酸有效的條件下在培養(yǎng)基中培養(yǎng)基因工程細(xì)菌；以及從所述微生物和/或所述培養(yǎng)基中收獲所述脂肪酸，其中所述細(xì)菌和所述脂肪酸組成選自由表2中所列的那些組成的組。
20.如權(quán)利要求19所述的方法，其中所述細(xì)菌和所述脂肪酸組成選自由以下組成的組:

【文檔編號】C12P7/64GK103998616SQ201280062238
【公開日】2014年8月20日 申請日期:2012年10月16日 優(yōu)先權(quán)日:2011年10月17日
【發(fā)明者】K-Y·桑, M·利 申請人:威廉馬什萊斯大學(xué)