專利名稱：一種天然食品添加劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于食品添加劑技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種天然食品添加劑。
背景技術(shù)：
食品添加劑是食品生產(chǎn)中具有創(chuàng)造力的因素，正是因為有了食品添加劑，才有了色香味俱全的食品，才滿足了越來越挑剔的消費(fèi)者的需求。在食品生產(chǎn)日益社會化和規(guī)?；慕裉?，食品添加劑對食品工業(yè)而言已不可缺少，“沒有食品添加劑就沒有現(xiàn)代食品工業(yè)”。目前，國際上使用的食品添加劑已達(dá)1萬種以上，我國許可使用的有20多種類型、2000 多個品種，包括防腐劑、抗氧化劑、增稠劑、乳化劑、甜味劑、疏松劑、營養(yǎng)劑、著色劑等。食品添加劑是指為有效改善食品的品質(zhì)質(zhì)量和色、香、味，以及為延長食品的貯存期而加入食品中的化學(xué)合成物質(zhì)或天然物質(zhì)。隨著食品工業(yè)的迅速發(fā)展，現(xiàn)在有些食品添加劑有了保健、營養(yǎng)的功能。比如含有對人體有益的維生素C、礦物質(zhì)元素、微量元素、氨基酸等以及其他種類的食品添加劑，具有很好的保健、抗氧化、防腐等功能，極大地提高了食品的附加值和經(jīng)濟(jì)效益。隨著人們飲食水平的不斷提高和我國食品工業(yè)的迅速發(fā)展，食品添加劑正在逐步走進(jìn)我們的生活，并被人們所了解和接受，特別是飲食結(jié)構(gòu)由解決溫飽轉(zhuǎn)向追求保健營養(yǎng)的變化，使消費(fèi)者更加關(guān)注自己的飲食衛(wèi)生和健康。因此，關(guān)于食品添加劑的種種問題，也自然成了人們近年來在飲食方面普遍關(guān)注的熱點(diǎn)。我國使用食品添加劑的歷史悠久，人們一日三餐的主食和副食品幾乎都在使用食品添加劑，人們在生活中拒絕食品添加劑是不現(xiàn)實(shí)也是不可能的。人們食用的食品品種越來越多，追求的色、香、味、形，感官質(zhì)量以及保健價值也越來越高，隨著食品進(jìn)入人體的食品添加劑的數(shù)量和種類也越來越多，因此，食品添加劑的安全使用極為重要。食品添加劑按照其來源的不同可以分為天然食品添加劑和化學(xué)合成食品添加劑兩大類。目前使用的大多屬于化學(xué)合成食品添加劑?；瘜W(xué)合成的食品添加劑在達(dá)到一定濃度或劑量水平時，會產(chǎn)生一定的毒副作用。食品添加劑的毒性除與物質(zhì)本身的化學(xué)結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)有關(guān)外，還與其有效濃度、作用時間、接觸途徑和部位、物質(zhì)的相互作用與機(jī)體的機(jī)能狀態(tài)等條件有關(guān)。一段時間以來發(fā)生的一些食品安全事件都與合成的食品添加劑有著一定的聯(lián)系。因此，在崇尚自然的今天，消費(fèi)者將會不斷追求純天然的、食用安全、無毒副作用的的食品添加劑。
食品在一定的環(huán)境條件下，因微生物的作用會使食品失去原有的營養(yǎng)價值、組織性狀以及色、香、味，而轉(zhuǎn)變成不符合衛(wèi)生要求的食品。造成食品腐敗變質(zhì)的原因主要是微生物的繁殖引起的食品腐敗變質(zhì)；空氣中氧的作用也會引起食品成分的氧化變質(zhì)；食品內(nèi)部所含各種酶等的作用，會促進(jìn)食品的代謝，致使食品變質(zhì)；昆蟲的侵蝕繁殖和有害物質(zhì)間接與直接污染，也能致使食品腐敗。食品防腐劑能防止食品因微生物繁殖引起的腐敗變質(zhì)，使食品在一般的自然環(huán)境中具有一定的保存期。正確、合理地使用食品防腐劑，能有效地抑制微生物的生長，防止食品腐敗，延長食品的保質(zhì)期。所以，食品都必須使用適當(dāng)?shù)姆栏夹g(shù)。長期以來，人們?yōu)榱吮ｕr和防止氧化，在食品行業(yè)一直使用合成抗氧化劑如BHTBHATBHQ和PG 等。近年來，人們對于這些人工合成抗氧化劑的安全性問題進(jìn)行了廣泛的研究，表明合成抗氧化劑具有諸多副作用，如對人體的肝、脾、肺均有不良影響，會誘發(fā)惡性腫瘤等。人們因?qū)θ斯ず铣煽寡趸瘎┐嬖诓环判男睦矶D(zhuǎn)向研發(fā)高效、無毒、安全的天然抗氧化劑。因此，近年來從自然界尋求天然抗氧化劑的研究已引起各國科學(xué)家的高度重視。目前，世界各國開發(fā)了大量天然抗氧化劑產(chǎn)品，受到人們的普遍歡迎。目前已經(jīng)研發(fā)或正在研發(fā)的天然抗氧化劑有多酚類、天然黃酮類、維生素類、蛋白質(zhì)和酶類、類胡蘿卜素、植酸、中草藥提取物等幾類物質(zhì)。在“崇尚綠色、回歸自然”的當(dāng)今， 隨著工業(yè)的迅速發(fā)展，人們安全意識的不斷加強(qiáng)，天然抗氧化劑的使用會日趨普遍。隨著天然抗氧化劑的品種增多以及生產(chǎn)成本的進(jìn)一步減低，天然抗氧化劑將逐步替代合成抗氧化劑。隨著科技的進(jìn)步，微量元素硒對人類健康的作用也越來越被重視。國內(nèi)外專家呼吁人們要象重視補(bǔ)碘一樣重視補(bǔ)充有機(jī)硒制品。有機(jī)硒元素可廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)富硒食品， 它對人類抗衰老、延年益壽，用于防治癌癥、近視眼、白內(nèi)障、心腦血管病、地方病等疾病都發(fā)揮了一定的作用。在食品和生產(chǎn)中，已廣泛使用有機(jī)硒制品作為微量元素硒的補(bǔ)充劑。目前一些發(fā)達(dá)國家生產(chǎn)和應(yīng)用硒等微量元素制劑已經(jīng)達(dá)到相當(dāng)?shù)囊?guī)模。有機(jī)硒制品的營養(yǎng)保健價值是同行業(yè)產(chǎn)品中難以替代的。現(xiàn)有的天然食品添加劑，僅具有抗氧化或防腐作用，很少有在具有很強(qiáng)的抗氧化及防腐殺菌作用的同時還具有很好的營養(yǎng)保健價值及一定的輔助治療作用的天然食品添加劑的問世。

發(fā)明內(nèi)容
針對現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述問題，本發(fā)明的目的在于設(shè)計提供一種食用安全、無毒副作用的天然食品添加劑的技術(shù)方案，其不僅具有很強(qiáng)的抗氧化及防腐殺菌作用，同時還具有很好的營養(yǎng)保健價值及一定的輔助治療作用。所述的一種天然食品添加劑，其特征在于含有重量百分含量的以下物質(zhì)黃秋葵提取物20-50%，甌柑果皮提取物20 40%、茶多酚9 20% ；
所述的黃秋葵提取物采用以下方法制備將黃秋葵嫩果實(shí)以橫段面切片后曬干或風(fēng)干，將曬干或風(fēng)干的黃秋葵果實(shí)置于電機(jī)功率為800 1800 W的破碎提取器中，加入 30% 70%含水乙醇，啟動開關(guān)，以6000-10000 r/min的轉(zhuǎn)速破碎提取1 2次，將原料打碎成20 100目的粒度，若黃秋葵果實(shí)干物重量為1公斤則含水乙醇用量為8 12升，提取時間為1 4分鐘，將提取液抽濾或甩濾，棄去濾渣，得到的提取液在50°C 80°C、真空度為0. 085 0. 095 Mpa條件下采用真空薄膜濃縮裝置進(jìn)行閃蒸濃縮，調(diào)節(jié)待濃縮液的進(jìn)液速度，以100 觀0 mL · HiirT1的流量反復(fù)濃縮至原體積的1/6 1/10，將濃縮液進(jìn)行噴霧干燥或進(jìn)行真空干燥成干粉，得到黃秋葵提取物干粉；
所述的甌柑果皮提取物采用以下方法制備將甌柑果實(shí)的鮮果皮進(jìn)行低溫烘干或自然風(fēng)干，取干燥的甌柑果皮置于電機(jī)功率為800 1800 W的破碎提取器中，加入50% 80% 含水乙醇，啟動開關(guān)，以6000-10000 r/min的轉(zhuǎn)速破碎提取1 3次，將原料打碎成20 100目的粒度，若甌柑果皮干物重量為Ikg則含水乙醇用量為8 12升，提取時間為1 4分鐘，將提取液抽濾或甩濾，棄去濾渣，得到的提取液在50°C 80°C、真空度為0. 085 0. 095 Mpa條件下采用真空薄膜濃縮裝置進(jìn)行閃蒸濃縮，調(diào)節(jié)待濃縮液的進(jìn)液速度，以 100 觀0 mL · HIirT1的流量反復(fù)濃縮至原體積的1/6 1/10，將濃縮液進(jìn)行真空干燥成干粉，得到甌柑提取物干粉。所述的一種天然食品添加劑，其特征在于還含有總重量9 20%蜂花粉，9 20% 螺旋藻，0. 0003 0. 0005%硒酵母。所述的一種天然食品添加劑，其特征在于所述黃秋葵提取物的重量百分含量為 25-40%，優(yōu)選30-35% ；所述甌柑果皮提取物的重量百分含量為25_35%，優(yōu)選30-3 ；所述茶多酚的重量百分含量為10 18%，優(yōu)選12 15%。所述的一種天然食品添加劑，其特征在于所述黃秋葵提取物的制備方法中含水乙醇的濃度為40 65%，優(yōu)選50 60% ；破碎提取時間為2 3分鐘；提取液閃蒸溫度為 55°C 70°C，優(yōu)選 60°C 65°C。所述的一種天然食品添加劑，其特征在于所述甌柑果皮提取物的制備方法中含水乙醇的濃度為55 70%，優(yōu)選60 65% ；破碎提取時間為2 3分鐘；提取液閃蒸溫度為 55°C 70°C，優(yōu)選 60°C 65°C。所述的一種天然食品添加劑，其特征在于所述蜂花粉的重量百分含量為10 18%，優(yōu)選12 15% ；所述螺旋藻的重量百分含量為10 18%，優(yōu)選12 15% ；所述硒酵母的重量百分含量為.00035 0. 0004%ο所述的破碎提取器可以從市場上直接購得，真空薄膜濃縮裝置(閃蒸濃縮裝置)為自行設(shè)計組裝，也可從市場上直接購得。所述的黃秋葵提取物從黃秋葵嫩果實(shí)中提取，黃秋葵為錦葵科秋葵屬一年生草本植物，黃秋葵嫩果實(shí)中含有黃酮、多糖、果膠、微量元素、氨基酸等多種功效成分，具有抗疲勞、增強(qiáng)人體耐力與機(jī)體的免疫力，保肝強(qiáng)腎，抗衰老、降低血糖、幫助消化、清火明目、健胃潤腸等方面的作用，是一種優(yōu)良的食療保健蔬菜。所述的甌柑果皮提取物從甌柑果實(shí)的鮮果皮中提取，甌柑為蕓香科柑桔屬植物， 營養(yǎng)價值極高。據(jù)報道，甌柑果實(shí)及果皮中含有豐富的黃酮、維生素等，具有很好的抗氧化、 降壓、耐缺氧和增加冠脈流量等作用。所述的茶多酚具有較強(qiáng)的抗脂質(zhì)過氧化、抗衰老、清除自由基、降血脂及血膽固醇、抗菌消炎、抗病毒、增強(qiáng)機(jī)體免疫功能等作用。所述的蜂花粉主要成分為維生素類、生育酚、礦物質(zhì)、氨基酸、活性酶。具有改善抗衰老、降血糖，抗疲勞、增強(qiáng)免疫功能、調(diào)解內(nèi)分泌等方面的作用。所述的螺旋藻主要成分為維生素類、微量元素與氨基酸、蛋白質(zhì)、Y -亞麻酸、 β -胡蘿卜素等，具有抗癌、抗輻射，降血脂、降低膽固醇、提高機(jī)體免疫功能等作用。所述的硒酵母含有機(jī)元素硒。具有抗衰老、延年益壽的作用，用于防治腫瘤、肝病、近視眼、白內(nèi)障、心腦血管疾病、地方性疾病等。上述黃秋葵嫩果實(shí)、甌柑果實(shí)的鮮果皮、茶多酚、蜂花粉、螺旋藻、硒酵母這些原料均可從市場上直接購得。上述一種天然食品添加劑，以純天然的黃秋葵提取物、甌柑提取物、茶多酚、蜂膠、 螺旋藻和有機(jī)微量元素硒酵母為原料制成。該天然食品添加劑與現(xiàn)有食品添加劑比較，具有如下優(yōu)點(diǎn)
1、本發(fā)明中對黃秋葵果實(shí)及甌柑果皮采用破碎提取，將破碎與提取過程同時完成。主要原理是將被提取的原料與一定濃度的含水乙醇置提取器內(nèi)，利用高速旋轉(zhuǎn)的特殊刀具將原料打碎成勻漿狀，同時將植物組織中的成分快速轉(zhuǎn)移至溶劑中，通過過濾即可得到提取液。該提取方法具有提取速度快、提取一次只需幾分鐘，且提取完全；不加熱，有利于熱敏性成分不受破壞；節(jié)省時間、溶劑和能源的特點(diǎn)。采用該方法提取能將黃秋葵果實(shí)及甌柑果皮中的大部分黃酮、果膠、多糖、維生素等功效成分提取完全，經(jīng)測定黃秋葵果實(shí)提取物的收率達(dá)觀.6 % 34. 3 %，甌柑果皮提取物的收率達(dá)20. 6 % 觀.1 %，提高了功效成分的提取率。2、本發(fā)明中對黃秋葵果實(shí)及甌柑果皮采用破碎提取，能避免功效成分及熱敏性成分受熱破壞，提取效率高、溶劑用量小；進(jìn)行閃蒸濃縮受熱時間短，效率高。3、本發(fā)明制備的食品添加劑具有很強(qiáng)的抗氧化、抗菌、防腐的作用，同時還具有抗衰老，抗疲勞、增強(qiáng)人體耐力與免疫力；保肝強(qiáng)腎，降血壓、降血脂等輔助作用。該食品添加劑的保健營養(yǎng)價值高、安全、無毒，生產(chǎn)工藝簡單，生產(chǎn)成本低，使用方便，易于長期貯存和運(yùn)輸，可用作功能性食品添加劑或保健食品添加劑。本申請文件中涉及的百分含量除另有說明外，均指重量百分含量。
具體實(shí)施例方式現(xiàn)結(jié)合本發(fā)明的實(shí)施例和相關(guān)試驗，對本發(fā)明作進(jìn)一步說明。實(shí)施例1 每100 g天然食品添加劑由黃秋葵提取物20 g、甌柑果皮提取物40 g、 茶多酚10 g、蜂花粉10 g、硒酵母300 mg及余量螺旋藻組成，按照以上重量比混合均勻后得到的食品添加劑，可直接裝袋，也可制成顆粒劑、丸劑、膠囊，以方便使用。所述的黃秋葵提取物采用以下方法制備將黃秋葵嫩果實(shí)以橫段面切片后曬干或風(fēng)干，將曬干或風(fēng)干的黃秋葵果實(shí)置于電機(jī)功率為840 W的破碎提取器中，加入50%含水乙醇，啟動開關(guān)，以10000 r/min的轉(zhuǎn)速破碎提取2次，將原料打碎成60目的粒度。若黃秋葵果實(shí)干物重量為1公斤則含水乙醇用量為10升，提取時間為3分鐘，將提取液抽濾或甩濾，棄去濾渣，得到的提取液在65°C、真空度為0.090 Mpa條件下采用真空薄膜濃縮裝置進(jìn)行閃蒸濃縮，調(diào)節(jié)待濃縮液的進(jìn)液速度，以200 mL · rniiT1的流量反復(fù)濃縮至原體積的 1/8，將濃縮液進(jìn)行噴霧干燥或進(jìn)行真空干燥成干粉，得到黃秋葵提取物干粉；
所述的甌柑果皮提取物采用以下方法制備將甌柑果實(shí)的鮮果皮進(jìn)行低溫烘干或自然風(fēng)干，取干燥的甌柑果皮置于電機(jī)功率為840 W的破碎提取器中，加入65%含水乙醇，啟動開關(guān)，以10000 r/min的轉(zhuǎn)速破碎提取1次，將原料打碎成60目的粒度。若甌柑果皮干物重量為1公斤則含水乙醇用量為10升，提取時間為4分鐘，將提取液抽濾或甩濾，棄去濾渣， 得到的提取液在60°C條件下采用真空度為0. 095 Mpa條件下采用真空薄膜濃縮裝置進(jìn)行閃蒸濃縮，調(diào)節(jié)待濃縮液的進(jìn)液速度，以180 mL · HiirT1的流量反復(fù)濃縮至原體積的1/8， 將濃縮液進(jìn)行真空干燥成干粉，得到甌柑提取物干粉。實(shí)施例2 每100 g天然食品添加劑由黃秋葵提取物30 g、甌柑果皮提取物30 g、 茶多酚12 g、蜂花粉12 g、硒酵母400 mg及余量螺旋藻組成，按照以上重量比混合均勻后得到的食品添加劑。黃秋葵提取物的制備方法中含水乙醇的濃度為30%，破碎提取器電機(jī)功率為840 W，轉(zhuǎn)速為10000 r/min，破碎提取1次，原料打碎成的粒度為60目。若黃秋葵果實(shí)干物重量為1公斤則含水乙醇用量為12升，破碎提取時間為4分鐘，提取液閃蒸濃縮溫度為80°C，真空度為0. 090 Mpa,以220 mL · mirT1的流量反復(fù)濃縮至原體積的1/6。 甌柑果皮提取物的制備方法中含水乙醇的濃度為50%，破碎提取器電機(jī)功率為840 W，轉(zhuǎn)速為10000 r/min，破碎提取2次，原料打碎成的粒度為80目。若黃秋葵果實(shí)干物重量為1 公斤則含水乙醇用量為12升，破碎提取時間為3分鐘，提取液閃蒸濃縮溫度為80°C，真空度為0.095 Mpa，以250 mL · mirT1的流量反復(fù)濃縮至原體積的1/6。黃秋葵提取物和甌柑果皮提取物的制備方法中其它同實(shí)施例1。實(shí)施例3 每100 g天然食品添加劑由黃秋葵提取物40 g、甌柑果皮提取物20 g、 茶多酚20 g、蜂花粉10 g、硒酵母500 mg及余量螺旋藻組成，按照以上重量比混合均勻后得到的食品添加劑。黃秋葵提取物的制備方法中含水乙醇的濃度為40%，破碎提取器電機(jī)功率為1800 W，轉(zhuǎn)速為6000 r/min，破碎提取2次，若黃秋葵果實(shí)干物重量為1公斤則含水乙醇用量為11升，破碎提取時間為2分鐘，提取液閃蒸濃縮溫度為70°C，真空度為0. 090 Mpa,以170 mL · mirT1的流量反復(fù)濃縮至原體積的1/7。甌柑果皮提取物的制備方法中含水乙醇的濃度為60%，破碎提取器電機(jī)功率為1800 W，轉(zhuǎn)速為6000 r/min，破碎提取2次， 原料打碎成的粒度為60目。若黃秋葵果實(shí)干物重量為1公斤則含水乙醇用量為11升，破碎提取時間為2分鐘，提取液閃蒸濃縮溫度為80°C，真空度為0.0955 Mpa，以210 mL · mirT1 的流量反復(fù)濃縮至原體積的1/7。黃秋葵提取物和甌柑果皮提取物的制備方法中其它同實(shí)施例1。實(shí)施例4 每100 g天然食品添加劑由黃秋葵提取物45 g、甌柑果皮提取物25 g、 茶多酚10 g、蜂花粉10 g、硒酵母350 mg及余量螺旋藻組成，按照以上重量比混合均勻后得到的食品添加劑。黃秋葵提取物的制備方法中含水乙醇的濃度為60%，破碎提取器電機(jī)功率為840 W，轉(zhuǎn)速為10000 r/min，破碎提取1次，原料打碎成的粒度為40目。若黃秋葵果實(shí)干物重量為1公斤則含水乙醇用量為9升，破碎提取時間為3分鐘，提取液閃蒸濃縮溫度為60°C，真空度為0. 090 Mpa,以160 mL · mirT1的流量反復(fù)濃縮至原體積的1/9。甌柑果皮提取物的制備方法中含水乙醇的濃度為70%，破碎提取器電機(jī)功率為840 W，轉(zhuǎn)速為10000 r/min，破碎提取1次，原料打碎成的粒度為40目。若黃秋葵果實(shí)干物重量為1公斤則含水乙醇用量為9升，破碎提取時間為3分鐘，提取液閃蒸濃縮溫度為60°C，真空度為 0.090 Mpa，以210 mL · mirT1的流量反復(fù)濃縮至原體積的1/9。黃秋葵提取物和甌柑果皮提取物的制備方法中其它同實(shí)施例1。實(shí)施例5:每100 g天然食品添加劑由黃秋葵提取物50g、甌柑果皮提取物20 g、 茶多酚9 g、蜂花粉9 g、硒酵母450 mg及余量螺旋藻組成，按照以上重量比混合均勻后得到的食品添加劑。黃秋葵提取物的制備方法中含水乙醇的濃度為70%，破碎提取器電機(jī)功率為840 W，轉(zhuǎn)速為10000 r/min，破碎提取3次，原料打碎成的粒度為80目若黃秋葵果實(shí)干物重量為1公斤則含水乙醇用量為8升，破碎提取時間為1分鐘，提取液閃蒸濃縮溫度為50°C，真空度為0.095 Mpa，以190 mL · mirT1的流量反復(fù)濃縮至原體積的1/10。甌柑果皮提取物的制備方法中含水乙醇的濃度為80%，破碎提取器電機(jī)功率為840 W，轉(zhuǎn)速為 10000 r/min，破碎提取3次，原料打碎成的粒度為80目。若黃秋葵果實(shí)干物重量為2公斤則含水乙醇用量為8升，破碎提取時間為1分鐘，提取液閃蒸濃縮溫度為50°C，真空度為0.085 Mpa，以MOO mL · mirT1的流量反復(fù)濃縮至原體積的提取液濃縮至原體積的1/10。 黃秋葵提取物和甌柑果皮提取物的制備方法中其它同實(shí)施例1。上述實(shí)施例1-5中的提取時間是指累計破碎提取時間，即破碎提取器的電機(jī)需要工作一段時間后停止工作幾十秒，電機(jī)得到休息后再工作，以免連續(xù)操作時間過長而影響電機(jī)壽命。為進(jìn)一步說明本發(fā)明的保健功效及在食品領(lǐng)域中的作用，下面通過部分生物活性試驗結(jié)果說明。1.抑菌活性試驗
抑菌活性的測定采用瓊脂擴(kuò)散濾紙片法，根據(jù)抑菌環(huán)直徑判斷抑菌能力。濾紙片直徑 6.0 mm，滅菌干燥后備用。每個樣品做3次重復(fù)實(shí)驗，數(shù)據(jù)采用SPSS1010進(jìn)行分析，組間比較采用t檢驗。1)樣品溶液的配制分別稱取20 mg采用實(shí)施例1制備的食品添加劑，平行稱取 3份，加蒸餾水定容至容量瓶中，制得質(zhì)量濃度為2.0 mg · mL—1的水溶液，依次稀釋為400、 300、200、150、100、50 Ug · mL—1的水溶液，并以消毒蒸餾水做空白對照。供細(xì)菌實(shí)驗用的培養(yǎng)基為牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，配方為0.5 g牛肉膏，1.0 g蛋白胨，0.5 g NaCl, 2 g瓊脂，100 mL水。真菌實(shí)驗用培養(yǎng)基為馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基。配方為 2 g葡萄糖、2 g瓊脂、100 mL 20%馬鈴薯浸汁。2)菌種的活化與材料的滅菌處理將實(shí)驗所用培養(yǎng)基及試驗器材置120°C干燥箱中干熱高壓滅菌2 h;培養(yǎng)基及裝好蒸餾水的試管置高壓蒸汽滅菌鍋中，濕熱滅菌2 h備用。將所有供試的菌種分別接入2支營養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)基活化，30°C培養(yǎng)M h。3)供試菌株懸液與含菌平板的制備取盛有10 mL無菌水的試管排放在試管架上，將預(yù)先進(jìn)行過斜面活化的菌種各挑取2環(huán)，分別溶解于無菌水試管中，制成菌懸液，然后，稀釋菌液，使其含菌體為IO7 IO8 cfu ·1、即得供試菌株懸液。再將融化的滅菌培養(yǎng)基傾入無菌培養(yǎng)皿中待凝固后滴入0. 1 mL菌懸液，用無菌涂布環(huán)將菌懸液涂布均勻即成含菌平板，待用。4)抑菌實(shí)驗及抑菌圈的測定抑菌圈測量是微生物分析的經(jīng)典方法。它是利用抑菌物質(zhì)在涂布特定試驗菌的瓊脂培養(yǎng)基內(nèi)成球形立體狀擴(kuò)散，抑制試驗菌的繁殖，在抑菌物質(zhì)的周圍形成的透明圈。將無菌小濾紙片高溫蒸汽滅菌干燥后備用。用無菌移液管吸取 0. 1 ml各種菌懸液加入無菌培養(yǎng)皿中，用鑷子夾取浸透樣品溶液的濾紙片，將其放在培養(yǎng)基表面。將放好濾紙片的含菌培養(yǎng)皿分別在恒溫箱中培養(yǎng)(細(xì)菌37°C、24 h,真菌^°C、72 h)，到時取出，測量并記錄形成的抑菌環(huán)的直徑。每組實(shí)驗重復(fù)3次，實(shí)驗結(jié)果取平均值，結(jié)果見表1。5)最小抑菌濃度(MIC)測定結(jié)果MIC的測定采用二倍稀釋法。將400、300、200、 150,100,50 yg · mL—1系列濃度的樣品溶液分別用移液管移入各個平皿內(nèi)，每個濃度重復(fù) 3個皿，倒入已經(jīng)高溫滅菌的培養(yǎng)基中充分混勻，冷卻凝固后，每皿中加入菌懸液，用無菌涂布器涂布均勻進(jìn)行培養(yǎng)。取出，觀察結(jié)果，以不長菌的溶液濃度做為最低抑菌濃度MIC，結(jié)果見表1。該試驗結(jié)果表明樣品的水溶液對供試菌種金黃色葡萄球菌、大腸桿菌及黃曲霉菌均具有較強(qiáng)的抑制作用，且隨濃度的增加抑菌效果增強(qiáng)。樣品對金黃色葡萄球菌的抑制作用明顯大于大腸桿菌和黃曲霉菌。實(shí)施例1制備的食品添加劑具有較強(qiáng)的抑菌活性。以實(shí)施例2-5進(jìn)行同樣的試驗，也能達(dá)到基本相同的有益效果。2.抗氧化活性試驗 1)儀器與試劑
Infinite M 200酶標(biāo)儀(瑞士 Tecan) ；UV-2102 PCS紫外可見分光光度計(上海尤尼柯儀器有限公司)；1，1-二苯基-2-苦胼基自由基(DPPH，sigma公司)。2)樣品溶液的制備
分別精確稱取通過實(shí)施例1制備的食品添加劑樣品粉末120. 5 mg，于100 mL量瓶中， 用60 %乙醇定容，超聲溶解。樣品溶液置于4°C冰箱中保存待用。3) DPPH自由基清除能力測定原理
DPPH法是自由基清除能力檢測的常用方法之一，可用于各種天然植物提取物抗氧化活性的評價。DPPH · (1，l-Diphenyl-2 -picryl-hydrazyl)在有機(jī)溶劑中是一種穩(wěn)定的自由基，其結(jié)構(gòu)中含有3個苯環(huán)，1個氮原子上有1個孤對電子，呈紫色，在517 nm有強(qiáng)吸收。 當(dāng)存在自由基清除劑時，由于清除劑與DPPH單電子配對而使其吸收減小，其吸光度的變化與其所接受的電子數(shù)成定量關(guān)系，因而可用分光光度法進(jìn)行定量分析。樣品測定過程中用 Trolox作陽性對照，并以此換算出被測樣品總的抗氧化能力，測定結(jié)果表示為達(dá)到一定濃度測試物質(zhì)相當(dāng)?shù)目寡趸芰λ枰腡rolox濃度。稱該方法為TEAC法。TEAC值表示為達(dá)到半數(shù)清除率時被測樣品相當(dāng)于Trolox的含量。TEAC值越大，表明清除自由基能力越強(qiáng)。IC5tl值是一個經(jīng)常用于評價抗氧化能力的參數(shù)，它是指抗氧化劑清除50%的DPPH自由基時所需的濃度。其值越小，表示達(dá)到50%清除率時，所用的自由基清除劑的濃度劑量越小，其對自由基的清除效果也就越好，對應(yīng)的參試樣品抗氧化活性越強(qiáng)。4)測定方法準(zhǔn)確稱取一定量DPPH試劑，用95%乙醇溶解，并定量轉(zhuǎn)入100 mL
權(quán)利要求
1.一種天然食品添加劑，其特征在于含有重量百分含量的以下物質(zhì)黃秋葵提取物 20-50%,甌柑果皮提取物20 40%、茶多酚9 20% ；所述的黃秋葵提取物采用以下方法制備將黃秋葵嫩果實(shí)以橫段面切片后曬干或風(fēng)干，將曬干或風(fēng)干的黃秋葵果實(shí)置于電機(jī)功率為800 1800 W的破碎提取器中，加入 30% 70%含水乙醇，啟動開關(guān)，以6000-10000 r/min的轉(zhuǎn)速破碎提取1 2次，將原料打碎成20 100目的粒度，若黃秋葵果實(shí)干物重量為1公斤則含水乙醇用量為8 12升，提取時間為1 4分鐘，將提取液抽濾或甩濾，棄去濾渣，得到的提取液在50°C 80°C、真空度為0. 085 0. 095 Mpa條件下采用真空薄膜濃縮裝置進(jìn)行閃蒸濃縮，調(diào)節(jié)待濃縮液的進(jìn)液速度，以100 觀0 mL · HiirT1的流量反復(fù)濃縮至原體積的1/6 1/10，將濃縮液進(jìn)行噴霧干燥或進(jìn)行真空干燥成干粉，得到黃秋葵提取物干粉；所述的甌柑果皮提取物采用以下方法制備將甌柑果實(shí)的鮮果皮進(jìn)行低溫烘干或自然風(fēng)干，取干燥的甌柑果皮置于電機(jī)功率為800 1800 W的破碎提取器中，加入50% 80% 含水乙醇，啟動開關(guān)，以6000-10000 r/min的轉(zhuǎn)速破碎提取1 3次，將原料打碎成20 100目的粒度，若甌柑果皮干物重量為Ikg則含水乙醇用量為8 12升，提取時間為1 4分鐘，將提取液抽濾或甩濾，棄去濾渣，得到的提取液在50°C 80°C、真空度為0. 085 0. 095 Mpa條件下采用真空薄膜濃縮裝置進(jìn)行閃蒸濃縮，調(diào)節(jié)待濃縮液的進(jìn)液速度，以 100 觀0 mL · HIirT1的流量反復(fù)濃縮至原體積的1/6 1/10，將濃縮液進(jìn)行真空干燥成干粉，得到甌柑提取物干粉。
2.如權(quán)利要求1所述的一種天然食品添加劑，其特征在于還含有總重量9 20%蜂花粉，9 20%螺旋藻，0. 0003 0. 0005%硒酵母。
3.如權(quán)利要求1所述的一種天然食品添加劑，其特征在于所述黃秋葵提取物的重量百分含量為25-40%，優(yōu)選30-35% ；所述甌柑果皮提取物的重量百分含量為25_35%，優(yōu)選 30-32% ；所述茶多酚的重量百分含量為10 18%，優(yōu)選12 15%。
4.如權(quán)利要求1所述的一種天然食品添加劑，其特征在于所述黃秋葵提取物的制備方法中含水乙醇的濃度為40 65%，優(yōu)選50 60% ；破碎提取時間為2 3分鐘；提取液閃蒸溫度為55°C 70°C，優(yōu)選60V 65°C。
5.如權(quán)利要求1所述的一種天然食品添加劑，其特征在于所述甌柑果皮提取物的制備方法中含水乙醇的濃度為55 70%，優(yōu)選60 65% ；破碎提取時間為2 3分鐘；提取液閃蒸溫度為昍°C 70°C，優(yōu)選60V 65°C。
6.如權(quán)利要求2所述的一種天然食品添加劑，其特征在于所述蜂花粉的重量百分含量為10 18%，優(yōu)選12 15% ；所述螺旋藻的重量百分含量為10 18%，優(yōu)選12 15% ；所述硒酵母的重量百分含量為.00035 0. 0004%ο
全文摘要
一種天然食品添加劑，屬于食品添加劑技術(shù)領(lǐng)域。含有重量百分含量的以下物質(zhì)黃秋葵提取物20-50%，甌柑果皮提取物20～40%、茶多酚9～20%；還含有總重量9～20%蜂花粉，9～20%螺旋藻，0.0003～0.0005%硒酵母。該天然食品添加劑食用安全、無毒副作用，不僅具有很強(qiáng)的抗氧化及防腐殺菌作用，同時還具有很好的營養(yǎng)保健價值及一定的輔助治療作用。且生產(chǎn)工藝簡單、生產(chǎn)成本低，使用方便、易于長期貯存和運(yùn)輸，可用作功能性食品添加劑或保健食品添加劑。
文檔編號A23L1/30GK102160646SQ20111005208
公開日2011年8月24日 申請日期2011年3月4日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月4日
發(fā)明者姜東青, 徐殿宏, 林曉春, 袁珂 申請人:浙江農(nóng)林大學(xué)