專利名稱：：一種飼料預(yù)混料及其專用枯草芽孢桿菌的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于生物
技術(shù)領(lǐng)域：
，涉及一種詞料預(yù)混料及其專用枯草芽孢桿菌。
背景技術(shù)：
：一般能被動(dòng)物食用又能給動(dòng)物某種或多種營(yíng)養(yǎng)的物質(zhì)統(tǒng)稱為飼料。隨著人口逐年增多及人類飲食習(xí)慣改變，對(duì)動(dòng)物性食物需求量增加，使動(dòng)物飼料需求也不斷提升。根據(jù)《國(guó)際飼料》估計(jì)，2002年全球詞料工業(yè)產(chǎn)量達(dá)6億4百萬噸。但畜牧業(yè)和飼料業(yè)的高速發(fā)展同時(shí)也帶來一些副作用，濫用抗生素就是其中之一。抗生素的濫用容易引起畜禽內(nèi)源性感染或二重感染；飼料中使用抗生素導(dǎo)致畜產(chǎn)品中的藥物殘留，直接威脅人類健康；動(dòng)物產(chǎn)生的耐藥性轉(zhuǎn)移給人類，使人類的用藥效果降低，各種疾病蔓延；有些藥物通過糞便排泄出來，造成環(huán)境污染?？股卦谑称分械臍埩粢殉蔀槿澜缛藗冴P(guān)注的熱點(diǎn)。養(yǎng)殖業(yè)面臨的形勢(shì)，一方面是全社會(huì)對(duì)動(dòng)物肉品安全、綠色的要求，另一方面是養(yǎng)殖農(nóng)民面對(duì)豬、雞、水產(chǎn)動(dòng)物等動(dòng)物疾病的困擾。尋找一種無毒副作用、無殘留、無耐藥性的新型抗菌劑是當(dāng)前科學(xué)界的重大課題和緊迫任務(wù)。根據(jù)歐盟70-524號(hào)令，從2006年1月起全面禁止在飼料中添加抗生素，目前我國(guó)農(nóng)業(yè)部也頒布了禁用藥物的法令。生物科技飼料是解決畜產(chǎn)品安全問題的一把鑰匙，唯有開發(fā)生物科技飼料替代抗生素可以滿足出口市場(chǎng)對(duì)綠色肉品的需求。全價(jià)配合飼料也稱全日糧配合飼料，能直接用于飼喂對(duì)象，全面滿足詞喂對(duì)象的營(yíng)養(yǎng)需要，主要包括能量詞料、蛋白質(zhì)飼料和礦物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。預(yù)混料是全價(jià)配合飼料的一種重要組分。預(yù)混料是添加劑預(yù)混合飼料的簡(jiǎn)稱，它是將一種或多種微量組分(包括各種微量礦物元素、各種維生素、合成氨基酸、某些藥物等添加劑)與稀釋劑或載體按要求配比，均勻混合后制成的中間型配合飼料產(chǎn)品。綠色飼料添加物，廣義來講，指無污染、無殘留、抗疾病和能促進(jìn)生長(zhǎng)的天然添加物，近年來先后已開發(fā)的種類包括微生物制劑、酵素制劑、酸化劑、調(diào)味劑、中草藥制劑和純天然萃取物等。微生物制劑就是生菌劑，又可稱為益生菌，活菌制劑在國(guó)外已被廣泛應(yīng)用，1989年美國(guó)食品與藥物管理局(FDA)公布了可以直接詞喂且一般認(rèn)為是安全的微生物種名單，共有41種，年使用量在8000噸以上。我國(guó)對(duì)綠色添加物的研究和應(yīng)用一直高度重視，中央一號(hào)文件連續(xù)三年提出要大力推廣健康養(yǎng)殖方式。在此政策引導(dǎo)下，我國(guó)益生菌的研究方興未艾，許多科研單位和企業(yè)都在積極探索，有的己取得了突破性的進(jìn)展，研究出的益生菌不僅完全可替代抗生素，而且大幅提高飼料蛋白的轉(zhuǎn)化率，為農(nóng)戶節(jié)省飼料成本，并縮短動(dòng)物飼養(yǎng)時(shí)間，改善肉蛋奶品性，科技水平居于世界領(lǐng)先。益生菌必將對(duì)提高我國(guó)養(yǎng)殖技術(shù)水平、增加農(nóng)民養(yǎng)殖收入、去除畜產(chǎn)品中有害物質(zhì)以及養(yǎng)殖過程的污染具有重要意義。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種飼料預(yù)混料及其專用枯草芽孢桿菌。本發(fā)明所提供的枯草芽孢桿菌(&ci77"ss^tih's)，名稱為Bs006，是從土壤中分離得到的，已于2008年4月3日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(簡(jiǎn)稱CGMCC，地址為北京市朝陽區(qū)大屯路)，保藏號(hào)為CGMCCNo.2434。本發(fā)明所提供的飼料預(yù)混料，它的活性成分是用枯草芽孢桿菌(&"77m幼Z;"7is)Bs006CGMCCNo.2434發(fā)酵底物得到的培養(yǎng)物；所述底物為豆粕、蠶豆粕、棉籽粕、菜籽粕、豆粉和玉米粉中的至少一種。所述飼料預(yù)混料中枯草芽孢桿菌Bs006的含量為2X104-4X107CFU/kg，優(yōu)選為2X106CFU/kg。本發(fā)明還提供了制備所述預(yù)混料的方法，包括如下制備活性成分的步驟以枯草芽孢桿菌(5acj77wsw力"7j^)Bs006CGMCCNo.2434發(fā)酵底物得到的培養(yǎng)物作為活性成分；所述底物為豆粕、蠶豆粕、棉籽粕、菜籽粕、豆粉和玉米粉中的至少一種。所述發(fā)酵條件為30-45。C培養(yǎng)18-48小時(shí)?？莶菅挎邨U菌Bs006在進(jìn)行所述發(fā)酵前可先進(jìn)行活化?；罨瘯r(shí)可采用如下培養(yǎng)基每升培養(yǎng)基中含有肉膏提取物3g，蛋白胨5g;蒸餾水配制，pH7.0。還可以將活化的枯草芽孢桿菌Bs006先進(jìn)行擴(kuò)增再發(fā)酵。擴(kuò)增枯草芽孢桿菌Bs006可采用如下培養(yǎng)基每升培養(yǎng)基中含有20-30g脫脂奶粉、5-15g焦糖蜜；蒸餾水配制，pH7.0;可采用如下擴(kuò)增條件30-45'C培養(yǎng)18-48小時(shí)。擴(kuò)增枯草芽孢桿菌Bs006具體可采用如下培養(yǎng)基每升培養(yǎng)基中含有25g脫脂奶粉和10g焦糖蜜。本發(fā)明提供的預(yù)混料具有無毒、無抗藥性、無殘料、無副作用的特點(diǎn)，并且可以添加入多種動(dòng)物飼料中，顯著促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)、提高飼料轉(zhuǎn)化率、增強(qiáng)動(dòng)物的免疫功能。本發(fā)明提供的預(yù)混料制備方法簡(jiǎn)單、成本較低。本發(fā)明具有巨大的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和社會(huì)意義。以下的實(shí)施例便于更好地理解本發(fā)明，但并不限定本發(fā)明。具體實(shí)施例方式下述實(shí)施例中的實(shí)驗(yàn)方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法。實(shí)施例l、枯草芽孢桿菌(勘w77ws幼&ih's)Bs006CGMCCNo.2434的獲得一、菌種的獲得1、自臺(tái)灣省臺(tái)中縣取一克土壤，加入10mlTrypticaseSoyBroth(TSB培養(yǎng)液；每升含胰蛋白胨20.0g，右旋糖1.0g，磷酸氫二鈉2.0g，硝酸鉀1.0g，將pH調(diào)至7.0，固態(tài)培養(yǎng)基加入1.5%瓊脂)中震蕩混合均勻后，以常規(guī)巴氏德消毒法消毒。2、將TSB培養(yǎng)液進(jìn)行10倍梯度稀釋至10—4，每個(gè)梯度稀釋液于37'C溫度培養(yǎng)24小時(shí)，進(jìn)行芽孢化菌株的初步增菌篩選。3、再自各稀釋管取100u1至TSA(胰酶大豆瓊脂，Difco，Sparks,U.S.A.)平板上，并以L型玻棒涂抹均勻，同樣37t:培養(yǎng)24小時(shí)，再以隨機(jī)選取方式挑取單一菌落至一個(gè)新的TSA平板上，并以三步法劃開，重復(fù)純化繼代三次以后，得到一株具有芽孢化特性和蛋白酶活性的菌株，將其命名為Bs006。二、菌種的特性1、形態(tài)特征菌落外觀型態(tài)呈圓形或不規(guī)則狀，表面黯淡，不透明，有皺折，為淡黃色或褐色。革蘭氏染色陽性，產(chǎn)單孢桿菌，大小約(0.6-0.8nm)X(1.5-3um)，通常利用周生鞭毛移動(dòng)。2、生理特性化學(xué)異營(yíng)，有氧代謝，接觸酶(catalase)為陽性；具水解淀粉的能力，在20-45'C生長(zhǎng)良好；具耐壓、耐熱、耐酸、耐堿特性。3、熱穩(wěn)定性枯草芽孢桿菌(^ac^7ws犯Z"7h)Bs006CGMCCNo.2434的熱穩(wěn)定性見表1。表1枯草芽孢桿菌Bs006CGMCCNo.2434的熱穩(wěn)定性溫度作用時(shí)間存活率溫度作用時(shí)間存活率75°C5min99%105°C5min98%510min99%lOmin90%15min99%15min78%90°C5min99%110°C5min95%lOmin99%lOmin83%15min99%15min61%100°C5min99%lOmin98%15min95%4、耐酸堿性分別將枯草芽孢桿菌(^3ci77wss^"7A)Bs006CGMCCNo.2434在不同pH值的緩沖液中(pH2-7緩沖液為使用0.2M的化2朋04溶液與0.2MHCl進(jìn)行調(diào)劑，pH8-10緩沖液為使用0.2M的磷酸氫二鈉鹽溶液與0.2MNOH進(jìn)行調(diào)劑)，靜置三沖時(shí)，然后統(tǒng)計(jì)存活率，結(jié)果見表2。表2枯草芽孢桿菌Bs006CGMCCNo.2434的耐酸堿性pH2pH3pH4pH5p朋pH7pH8pH9pHIO存活率69%100%100%100%100%100%100%100%100%5、最適培養(yǎng)基成份培養(yǎng)基A的組成為每升培養(yǎng)基中含有肉膏提取物3g，蛋白胨5g;蒸餾水配制，pH7.0。6、最適培養(yǎng)溫度最適培養(yǎng)溫度為42'C。實(shí)施例2、本發(fā)明的預(yù)混料對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響本實(shí)施例通過對(duì)432只1日齡愛拔益加(AA)肉雞公雛進(jìn)行試驗(yàn)，闡明本發(fā)明提供的預(yù)混料的有益效果。本實(shí)施例中進(jìn)行了6次重復(fù)試驗(yàn)，每次重復(fù)試驗(yàn)具體如下一、預(yù)混料的制備1、第一次擴(kuò)大發(fā)酵將活化后的枯草芽孢桿菌(^acj77wss^"h's)Bs006CGMCCNo.2434接入如下培養(yǎng)基A中，37"C發(fā)酵12小時(shí)。培養(yǎng)基A的組成為每升培養(yǎng)基中含有肉膏提取物3g，蛋白胨5g;蒸餾水配6制，pH7.0。2、第二次擴(kuò)大發(fā)酵將步驟1的發(fā)酵液以10%(體積比)的接種量接入如下培養(yǎng)基B中，37'C發(fā)酵18小時(shí)。培養(yǎng)基B的組成為每升培養(yǎng)基中含有25g脫脂奶粉、10g焦糖蜜；蒸餾水配制，PH7.0。3、固態(tài)發(fā)酵將步驟2的發(fā)酵液加入豆粕中(加入量為300mL發(fā)酵液/kg豆粕)，37'C發(fā)酵24小時(shí)，每隔6小時(shí)攪拌10分鐘。將步驟3得到的培養(yǎng)物烘干至干粉，得到飼料預(yù)混料。每千克預(yù)混料中含有2X1()6CFU的枯草芽孢桿菌(5acfL〃ss〃力^7A)Bs006CGMCCNo.2434。二、添加劑的制備1、添加劑A將100g綜合酵素、50g綜合維他命、200g海藻礦物質(zhì)和250g綜合氨基酸混合，得到添加劑A。2、添加劑B在添加劑A中加入林可霉素，使每千克添加劑中含有0.22g林可霉素。3、添加劑C在添加劑A中加入步驟一制備的預(yù)混料，使每千克添加劑中含有l(wèi)g預(yù)混料。4、添加劑D在添加劑A中加入步驟一制備的預(yù)混料，使每千克添加劑中含有2g預(yù)混料。三、肉雞的飼喂將72只1日齡愛拔益加(AA)肉雞公雛隨機(jī)分為4組，每組18只。肉雞分兩階段飼養(yǎng)第一階段為1-21日齡、第二階段為22-42日齡。4組肉雞飼養(yǎng)過程中所用的日糧及其營(yíng)養(yǎng)水平見表3。第l組為陰性對(duì)照組，在日糧中添加了1%的添加劑A;第2組的日糧中加入了W的添加劑B;第3組的日糧中加入了W的添加劑C;第4組的日糧中加入了W的添加劑D。各組的營(yíng)養(yǎng)水平均符合中國(guó)2004版"雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)"。試驗(yàn)各組營(yíng)養(yǎng)水平均為等能量、等蛋白。試驗(yàn)在中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)家禽代謝室進(jìn)行，肉雞采用三層籠養(yǎng)，喂給干粉料，自由采食和飲水，溫度20-26t:，相對(duì)7濕度45%-55%，按照正常免疫程序免疫。表34組肉雞的日糧配方及營(yíng)養(yǎng)水平(％)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>四、肉雞生長(zhǎng)性能的評(píng)價(jià)每日觀察雞群健康情況與精神狀況。分別在試驗(yàn)的l日齡、21日齡、42日齡稱重并記錄耗料量，計(jì)算日采食量(ADFI)、日增重(ADG)、飼料轉(zhuǎn)化效率(FCR)和死亡率。試驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用6次重復(fù)試驗(yàn)的平均結(jié)果，用平均值士標(biāo)準(zhǔn)差表示。試驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS12.0軟件中One-wayANOVA程序處理，用Duncan比較。飼料轉(zhuǎn)化效率(FCR)=日增重(ADG)/日采食量(ADFI)。試驗(yàn)過程中，各組肉雞的生長(zhǎng)性能結(jié)果見表4，死亡率見表5。表4肉雞的生產(chǎn)性能<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>由表4和表5，可得出結(jié)論如下1、采食量(ADFI)1-21日齡、22-42日齡、1-42日齡，各組間差異不顯著；各階段均表現(xiàn)為第1組的采食量最高；1-21日齡、22-42日齡，第4組的采食量最低；1-42日齡，第3組采食量最低。2、日增重(ADG)1-21日齡，第3組日增重最高，第l組日增重最低，第3組的日增重極顯著的高于第l組(;XO.Ol)，與第2組差異不顯著，其它各組間差異不顯著；22-42日齡、1-42日齡，第2組日增重最高，第4組日增重最低，各組間差異不顯著。3、飼料轉(zhuǎn)化效率(FCR)1-21日齡，第3組飼料轉(zhuǎn)化效率最高，第1組飼料轉(zhuǎn)化效率最低，第3組與第l組之間差異顯著(;X0.05)，其它各組間差異不顯著；22-42日齡，第2組飼料轉(zhuǎn)化效率最高，第l組飼料轉(zhuǎn)化效率最低，各組間差異不顯著；1-42日齡，第2組飼料轉(zhuǎn)化效率最高，第l組飼料轉(zhuǎn)化效率最低，各組間差異不顯著。4、死亡率1-21日齡、22-42日齡、1-42日齡，各組間差異不顯著。試驗(yàn)結(jié)果表明在詞料中添加0.1%的本發(fā)明提供的預(yù)混料飼喂的肉雞的各項(xiàng)成長(zhǎng)性能與在飼料中添加抗生素飼喂的肉雞的各項(xiàng)成長(zhǎng)性能相似，顯著高于不加預(yù)混料的對(duì)照組，而本發(fā)明提供的預(yù)混料不含有抗生素。實(shí)施例3、本發(fā)明的預(yù)混料對(duì)奶牛生產(chǎn)性能的影響本實(shí)施例中通過對(duì)60頭荷斯坦泌乳母牛進(jìn)行試驗(yàn)，闡明本發(fā)明提供的枯草芽孢桿菌作為詞料添加劑的有益效果。一、預(yù)混料的制備1、第一次擴(kuò)大發(fā)酵將活化后的枯草芽孢桿菌("aci77i/ssw力"h's)Bs006CGMCCNo.2434接入如下培養(yǎng)基A中，37'C發(fā)酵12小時(shí)。培養(yǎng)基A的組成為每升培養(yǎng)基中含有肉膏提取物3g，蛋白胨5g;蒸餾水配制，pH7.0。2、第二次擴(kuò)大發(fā)酵將步驟1的發(fā)酵液以10%(體積比)的接種量接入如下培養(yǎng)基B中，45T:發(fā)酵48小時(shí)。培養(yǎng)基B的組成為每升培養(yǎng)基中含有20g脫脂奶粉、5g焦糖蜜；蒸餾水配制，pH7.0。3、固態(tài)發(fā)酵將步驟2的發(fā)酵液加入棉籽粕中(加入量為300mL發(fā)酵液/kg棉籽粕)，45°C發(fā)酵48小時(shí)，每隔6小時(shí)攪拌10分鐘。將步驟3得到的培養(yǎng)物烘干至干粉，得到飼料預(yù)混料。每千克預(yù)混料中含有維他命A:180，000IU、維他命D3:10，OOOIU、維他命E:l,500mg、維他命K3:60mg、維他命Bl:35mg、維他命B2:80mg、維他命B6:60mg、維他命B12:0.5mg、煙酸500mg、泛酸鈣300mg、葉酸16mg、生物素3mg、膽10堿:7，500mg、硫酸銅4g、硫酸亞鐵:7g、硫酸錳1.3g、碘酸鈣6.5mg、硫酸鋅10g、亞硒酸鈉9mg、4X107CFU的枯草芽孢桿菌(5aw77〃s卯6"7A)Bs006CGMCCNo.2434。二、基礎(chǔ)日糧的配制將100g綜合酵素、50g綜合維他命、200g海藻礦物質(zhì)和250g綜合氨基酸混合，得到添加劑A?；A(chǔ)日糧由混合精料和粗飼料組成?；旌暇习凑瘴覈?guó)奶牛詞養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制而成，配方見表6。粗詞料由玉米青貯、青干苜蓿組成。采用中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)飼料檢驗(yàn)法(總號(hào)2770、類號(hào)N4024)測(cè)定干物質(zhì)含量(105"C烘干恒重)；然后測(cè)定干物質(zhì)中的粗蛋白含量(凱氏定氮法)、粗灰分含量(高溫灰化法)、磷含量(鉬黃法)、酸性洗滌纖維含量(范氏VanSoest法)、中性洗滌纖維含量(范氏VanSoest法)。日糧中各組分的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(干物質(zhì)、粗蛋白、中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、鈣、磷)含量見表7。表6混合精料日糧配方原料配比(%)原料配比(%)玉米(Com)53.0《ff禾白(Rapeseedmeal)3.0力^禾白(Soybeanmeal)9,0食鹽(NaCl)1.0麥麩(Wheatbran)21.0小蘇打(NaHC03)1.0棉米子禾白(Cottonseedmeal)7.0添加劑A5.0表7日糧營(yíng)養(yǎng)成份營(yíng)養(yǎng)成份干物質(zhì)百分比(%)占干物質(zhì)的百分比(%)粗蛋白(CP)粗灰分(Ca)磷含量(P)酸性洗滌纖維(ADF)中性洗滌纖維(NDF)混合精料90.0317.531.040.5111.1020.88玉米青貯21.789.450.410.3332.2354.19青干苜蓿87.3113.721.370.2241.0753.73三、奶牛的飼喂選年齡、體重、胎次、泌乳期、產(chǎn)奶量及生理狀態(tài)一致或相近的健康荷斯坦泌乳奶牛60頭，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。整個(gè)實(shí)驗(yàn)包括預(yù)飼期(預(yù)飼期奶牛均伺喂普通飼料)和li實(shí)驗(yàn)期，預(yù)飼期7天，實(shí)驗(yàn)期28天。在預(yù)詞期對(duì)奶牛進(jìn)行防疫和驅(qū)蟲，觀察并調(diào)整牛群；預(yù)詞期結(jié)束時(shí)連續(xù)兩天稱重(兩次稱重誤差在3%以內(nèi))后進(jìn)入試驗(yàn)期，試驗(yàn)期內(nèi)不進(jìn)行免疫接種和預(yù)防性投藥。本實(shí)施例中進(jìn)行了4次重復(fù)試驗(yàn)，每次重復(fù)試驗(yàn)具體如下將15頭奶牛隨機(jī)分為3組，每組5頭。第l組為陰性對(duì)照組，飼喂基礎(chǔ)日糧；第2組在詞喂基礎(chǔ)日糧的同時(shí)，每天伺喂步驟一制備的預(yù)混料，7克/天/頭，飼喂時(shí)將預(yù)混料拌入混合精料混勻一起喂給；第3組在飼喂基礎(chǔ)日糧的同時(shí)，每天飼喂步驟一制備的預(yù)混料，14克/天/頭，飼喂時(shí)將預(yù)混料拌入混合精料混勻一起喂給。混合精料根據(jù)奶牛個(gè)體產(chǎn)奶量的多少來定量供給，粗飼料自由采食，精、粗比約為50:50。實(shí)驗(yàn)過程中，奶牛集中在同一牛舍，同一飼養(yǎng)管理?xiàng)l件，派專人負(fù)責(zé)。飼喂方式采用單槽拴系詞喂，飼喂順序是先精后粗，擠奶采用管道式擠奶機(jī)進(jìn)行，自由飲水，日喂三次，分別在早晨4:00-6:00、中午11:00-13:00、晚上6:00-8:00。下槽后運(yùn)動(dòng)場(chǎng)自由活動(dòng)，保證供給清潔飲水，保持圈舍清潔衛(wèi)生，每天隨時(shí)對(duì)牛群進(jìn)行觀察。四、奶牛生產(chǎn)性能的評(píng)價(jià)在試驗(yàn)期內(nèi)逐日記料，試驗(yàn)期結(jié)束時(shí)連續(xù)兩天稱重(兩次誤差在3%以內(nèi))，稱重按原來稱重的順序進(jìn)行。通過采食量、體增重、產(chǎn)奶量、乳成分4個(gè)指標(biāo)對(duì)奶牛的生長(zhǎng)性能和產(chǎn)奶性能進(jìn)行評(píng)價(jià)。對(duì)試驗(yàn)所得的數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行單因素方差分析，在差異顯著的基礎(chǔ)上，進(jìn)行鄧肯氏多重比較，數(shù)據(jù)用平均值士標(biāo)準(zhǔn)差表示，以P〈0.01(差異極顯著)，P<0.05(差異顯著)作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。1、采食量每天記錄每頭試驗(yàn)?zāi)膛８黝愶暳系墓┙o量，次日早晨清槽時(shí)稱出剩余量，兩者之差即為每日實(shí)際采食量。結(jié)果見表8。表8試驗(yàn)?zāi)膛５娜站墒沉匡暳系趌組第2組第3組混合精料(Kg/d)7.007.007.00玉米青貯(Kg/d)4.244.224.29青干苜蓿(Kg/d)2.712.692.7212預(yù)混料(g/d)0714由表8可見，各組對(duì)混合精料的采食量均為7.00kg/天，對(duì)玉米青貯和青干苜蓿的采食量有微量的差異。添加預(yù)混料對(duì)奶牛的采食量無顯著的影響。2、體增重預(yù)詞期最后兩天和試驗(yàn)期末早飼前空腹稱重，兩者之差即為總增重?？傇鲋爻詫?shí)驗(yàn)天數(shù)即為平均日增重。結(jié)果見表9。表9試驗(yàn)?zāi)膛５钠骄赵鲋刂笜?biāo)第l組第2組第3組始重(kg)588.66±45.00592.13±59.43573.44±50.77末重(kg)586.52±40.45592.13±59.43574.44±48.47平均日增重(kg)O.Ol土O.070.10±0.070.04±0.13由表9可見，各組試驗(yàn)?zāi)膛ｓw重變化不大，維持在580kg左右，體重基本穩(wěn)定。添加預(yù)混料對(duì)奶牛日增重?zé)o顯著影響。3、產(chǎn)奶性能準(zhǔn)確稱重各試驗(yàn)?zāi)膛Ｃ刻斓漠a(chǎn)奶量，用其平均值作為該階段的日產(chǎn)奶量。產(chǎn)奶量的具體測(cè)量方法如下:該牛場(chǎng)采用的是管道式擠奶裝置，擠奶時(shí)牛奶進(jìn)入到玻璃缸中，用肉眼可按刻度讀取產(chǎn)奶量。試驗(yàn)期末，連續(xù)兩天分別于早、午、晚三次按產(chǎn)奶量比例收集最后兩天的奶樣，分別放入帶蓋玻璃瓶中，每毫升乳樣中加入0.6mg重鉻酸鉀防腐劑，送至河南省DHI測(cè)定中心，測(cè)定乳蛋白、乳脂率。飼料轉(zhuǎn)化效率(FCR)=日增重(ADG)/日采食量(ADFI)。結(jié)果見表10。表IO試驗(yàn)?zāi)膛５漠a(chǎn)奶性能指標(biāo)第l組第2組第3組預(yù)飼期產(chǎn)奶量(kg/d)24.78±1.5323.78±1.0922,82±1.02試驗(yàn)期產(chǎn)奶量(kg/d)23.88±0.26a25.03±0.58b24.64±0.49b標(biāo)準(zhǔn)乳產(chǎn)量(kg/d)22.63±0.48a23.44±0.61b23.69±0.38b13乳脂率(％)3.70±0.183.61±0.223.76±0.06乳脂產(chǎn)量(g/d)872.24±31.40895.08±39.94912.07±22.78乳蛋白率(％)3.52±0.203.58±0.193.54±0.20乳蛋白產(chǎn)量(g/d)831.24±30.04890.43±56.01847.62±41.49飼料轉(zhuǎn)化效率(kgFCM/kgDM)2.91±0.0633.01±0.08ab3.07±0.06b注同行肩注有不同大寫字母為差異極顯著(P〈0.01)，同行肩注有不同小寫字母為差異顯著(P〈0.05)。由表10可見，預(yù)飼期3組奶牛的日均產(chǎn)奶量分別為24.78土1.53kg、23.78±1.09kg、22.82土1.02kg，差異不顯著。在正式試驗(yàn)期，第2組、第3組的非校正產(chǎn)奶量比第1組分別提高了4.82%、3.18%，且差異顯著(P〈0.05)，第2組、第3組間無顯著差異；換算成4%乳脂校正乳后，第2組、第3組的非校正產(chǎn)奶量比第l組分別提高了3.58%、4.68%，差異仍然顯著(P〈0.05)，第2組、第3組間無顯著差異；3個(gè)組的乳脂率無顯著差異；從日均乳脂產(chǎn)量看，第2組、第3組比第1組提高了2.62%、4.57%,但差異不顯著；3個(gè)組的乳蛋白率差異不顯著；從乳蛋白產(chǎn)量看，第2組、第3組比第1組分別提高了7.12%、1.97%，但差異不顯著；從飼料轉(zhuǎn)化效率看，第2組比第1組提高了3.44%，但差異不顯著，第3組比第1組提高了5.50%，差異顯著(P〈0.05)，但第2組、第3組間無顯著差異。4、結(jié)論奶牛日糧中添加預(yù)混料對(duì)泌乳奶牛的體重、干物質(zhì)采食量無顯著的影響。日糧中添加7g/d、14g/d預(yù)混料后頭日均產(chǎn)奶量顯著增加(P〈0.05)，換算成4%乳脂校正乳后，差異仍然顯著(P〈0.05)，說明預(yù)混料有增加奶牛產(chǎn)奶量的作用；另外添加預(yù)混料還使飼料轉(zhuǎn)化效率有提高，說明預(yù)混料可顯著提高泌乳奶牛的產(chǎn)奶性能。而添加7g/d和14g/d預(yù)混料處理組非校正產(chǎn)奶量、4%乳脂校正乳產(chǎn)奶量、飼料轉(zhuǎn)化效率無顯著差異，可見在泌乳奶牛日糧中添加7g/d預(yù)混料就可以起到顯著提高泌乳奶牛的產(chǎn)奶性能的作用。實(shí)施例4、本發(fā)明的預(yù)混料對(duì)羅非魚養(yǎng)殖的影響羅非魚是聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織向全世界推薦的水產(chǎn)養(yǎng)殖品種，目前在80多個(gè)國(guó)家與地區(qū)均有養(yǎng)殖，而奧尼羅非魚(6!reoc/Lraw'sW7o"ci/sXaawrews)由于肉質(zhì)鮮嫩、抗病力強(qiáng)、生長(zhǎng)快及屠宰率高等特點(diǎn)，已成為中國(guó)羅非魚的主導(dǎo)養(yǎng)殖品種，也是主14要出口水產(chǎn)品，2003年產(chǎn)量達(dá)805,859噸。一、預(yù)混料的制備1、第一次擴(kuò)大發(fā)酵將活化后的枯草芽孢桿菌(5aw77ws犯&ih's)Bs006CGMCCNo.2434接入如下培養(yǎng)基A中，37'C發(fā)酵12小時(shí)。培養(yǎng)基A的組成為每升培養(yǎng)基中含有肉膏提取物3g，蛋白胨5g;蒸餾水配制，pH7.0。2、第二次擴(kuò)大發(fā)酵將步驟1的發(fā)酵液以10%(體積比)的接種量接入如下培養(yǎng)基B中，3(TC發(fā)酵18小時(shí)。培養(yǎng)基B的組成為每升培養(yǎng)基中含有30g脫脂奶粉、15g焦糖蜜；蒸餾水配制，pH7.0。3、固態(tài)發(fā)酵將步驟2的發(fā)酵液加入玉米粉中(加入量為300mL發(fā)酵液/kg玉米粉)，30°C發(fā)酵18小時(shí)，每隔6小時(shí)攪拌10分鐘。將步驟3得到的培養(yǎng)物烘干至干粉，得到飼料預(yù)混料。每千克預(yù)混料中含有維他命E:5，OOOmg、維他命K3:500mg、維他命Bl:650mg、維他命B2:2，500mg、維他命B6:650mg、維他命B12:l.5mg、煙酸9，500mg、泛酸鈣6，300mg、葉酸190mg、維他命H:65mg、維他命C:13，OOOmg、膽堿63，000mg/kg、肌醇25,000mg、對(duì)氨基苯甲酸5，OOOrag、硫酸銅0.4mg、硫酸鋅3.8mg、硫酸錳1.3mg、碘酸鈣:0.04mg、硫酸亞鐵13g、硫酸鎂:52g，2X104CFU的枯草芽孢桿菌(&"7k卯6"仏)Bs006CGMCCNo.2434。二、試驗(yàn)飼料的配制1、基礎(chǔ)飼料試驗(yàn)基礎(chǔ)飼料根據(jù)奧尼羅非魚膨化料生產(chǎn)配方配制。2、復(fù)合詞料I在基礎(chǔ)飼料中加入步驟一制備的預(yù)混料，加入量為lg/kg。3、復(fù)合飼料II在基礎(chǔ)詞料中加入黃霉素，加入量為0.02g/kg。4、復(fù)合詞料III15在基礎(chǔ)飼料中加入海特寶(廣東海大飼料公司提供)，加入量為0.5g/kg。實(shí)驗(yàn)飼料制作時(shí)，先將原料粉碎，使原料粉末能全部通過60目篩，再按比例充分?jǐn)嚢杌靹颍舆m量水?dāng)嚢?，由膨化機(jī)制成直徑3mm的顆粒，充分干燥后于4t:冰箱密封保存?zhèn)溆?。飼料的常?guī)營(yíng)養(yǎng)成分(水分、粗蛋白、粗脂肪、灰分)根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)AOAC法進(jìn)行，采用105X:烘干恒重法測(cè)定水分含量；凱氏定氮法測(cè)定粗蛋白(CP)含量；索氏抽提法測(cè)定粗脂肪(EE)含量；高溫灰化法測(cè)定粗灰分(CAs)含量，常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分見表ll。表11飼料配方組成及化學(xué)成分(%)化學(xué)成分基礎(chǔ)飼料復(fù)合飼料I復(fù)合飼料II復(fù)合飼料III水分5.927.298.727.90粗蛋白32.4233.1331.5232.5粗脂肪9.248.489.059.04粗灰分9.278.127.817.47三、羅非魚的飼喂試驗(yàn)用魚為同一批健康、活潑、體型規(guī)格的奧尼羅非魚魚種(&^oc力ro/^s/n7o"c^X61a^/re^)(中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所浙江水產(chǎn)營(yíng)養(yǎng)試驗(yàn)基地，浙江嘉興市)。本實(shí)施例共用240尾奧尼羅非魚進(jìn)行試驗(yàn)。養(yǎng)殖設(shè)施為溫室內(nèi)養(yǎng)殖網(wǎng)箱，網(wǎng)箱規(guī)格為0.6X0.6X0.6m3，實(shí)驗(yàn)用水為充分曝氣自來水。正式實(shí)驗(yàn)前對(duì)實(shí)驗(yàn)魚馴養(yǎng)兩周，使其適應(yīng)實(shí)驗(yàn)詞料及養(yǎng)殖環(huán)境。共進(jìn)行4次重復(fù)試驗(yàn)，每次重復(fù)試驗(yàn)具體如下將饑餓一天的奧尼羅非魚60尾(初重87.64士2.46g)隨機(jī)分成4組，每組15尾，整體稱重后隨機(jī)置入4個(gè)養(yǎng)殖網(wǎng)箱中，分別飼喂4種不同的飼料。CK組伺喂基礎(chǔ)飼料，為對(duì)照組；T1組飼喂復(fù)合飼料I;T2組飼喂復(fù)合飼料II;T3組飼喂復(fù)合飼料m。實(shí)驗(yàn)采用人工定時(shí)定量投喂，日投飼量按實(shí)驗(yàn)魚體重的1%，分7:30、11:00、15:00和18:004次投喂，每周對(duì)投喂量進(jìn)行調(diào)整(根據(jù)攝食最差的實(shí)驗(yàn)飼料組)。實(shí)驗(yàn)為期8周。實(shí)驗(yàn)期間定時(shí)對(duì)水質(zhì)進(jìn)行監(jiān)控，養(yǎng)殖全程水溫3o士rc、D0〉5.Omg02/L、pH7.73±0.24、氨氮低于0.5mgN/L、亞硝酸鹽氮低于0.05mgN/L。16四、羅非魚生長(zhǎng)性能的評(píng)價(jià)采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因子方差分析(one-wayANOVA)，若組間差異顯著，則進(jìn)行Duncan，s多重比較，顯著水平p設(shè)為0.05，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用平均值士標(biāo)準(zhǔn)誤表示(mean士S.E)。1、增重率、飼料系數(shù)、存活率、屠宰率及肝體比的測(cè)定1)增重率、飼料系數(shù)、存活率的測(cè)定實(shí)驗(yàn)結(jié)束，停飼一天后對(duì)各網(wǎng)箱實(shí)驗(yàn)魚整體稱重，計(jì)算其增重率(WG，％)、飼料系數(shù)(FCR)、存活率(SR，％)。計(jì)算公式如下增重率(WG，％)=100X(平均末重—平均初重)/平均初重；飼料系數(shù)(FCR)=攝食飼料總量/魚體增重量；存活率(SR，％)二100X實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)魚體數(shù)量/實(shí)驗(yàn)開始時(shí)魚體數(shù)量；2)奧尼羅非魚屠宰率及肝體比的測(cè)定實(shí)驗(yàn)結(jié)束整體稱重后，每網(wǎng)箱隨機(jī)取10尾奧尼羅非魚，逐個(gè)稱重后解剖，取其肝臟并稱重，測(cè)其肝體比。除去所有內(nèi)臟后稱重，測(cè)其屠宰率。計(jì)算公式如下屠宰率(%)=100X胴體重/體重；肝體比(%)=100X肝臟重/體重；不同飼料對(duì)奧尼羅非魚的增重率、成活率、屠宰率和肝體比的影響結(jié)果見表12。表12羅非魚增重率、成活率、屠宰率和肝體比參數(shù)CK組Tl組T2組T3組平均初重(g)86.37±0.99a87.75±0.29a87.22±0.50a89.21±2.24a平均末重(g)195.62±15.84a215.54±15.92b208.97±20.37b208.57±18.15b增重率(%)126.49±18.49a145.79±18.83b139.60±23.67b134.46±22.42ab屠宰率(%)90.03±0.29a89.13±0.27a89.38±0.85a89.47±0.47a肝體比(%)2.55±0.18a2.93±0.24a2.80±0.25a2.82±0.20a飼料系數(shù)(%)'2.37±0.33a1.80±0.18b1.82±0.18b2.22±0.54ab成活率(%)100a100a98.33±1.67a100a*同行數(shù)據(jù)肩注不同者表示統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著(p<0.05)。2、奧尼羅非魚血液溶菌酶活性的測(cè)定實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)尾靜脈取3尾魚血清。1)以溶壁微球菌(必'crococcws&^0^化"0^)凍干粉為底物，溶于O.lmg/L17p服.4的磷酸鹽緩沖液中，調(diào)整菌懸液的OD值(0D54。=0.3)。2)取200W溶壁微球菌菌懸液加入96孔酶標(biāo)板內(nèi)，再加入待測(cè)血清樣品，溶菌酶標(biāo)準(zhǔn)品(酶活200U)，每組測(cè)6個(gè)平行。加樣過程在冰水盒內(nèi)進(jìn)行。于540mn處測(cè)OD值A(chǔ)。。然后將酶標(biāo)板置入37T:恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，反應(yīng)15min，反應(yīng)結(jié)束后立即置入冰水中終止反應(yīng)，測(cè)其540nm處測(cè)OD值A(chǔ)。按下列公式計(jì)算溶菌酶活性樣品溶菌酶活力(U)=AA/AA^200△A樣品反應(yīng)前后吸光值差值；△A#溶菌酶標(biāo)準(zhǔn)品反應(yīng)前后吸光值差值。攝食不同飼料對(duì)奧尼羅非魚血液溶菌酶活性的影響見表13。_表13攝食不同飼料后，奧尼羅非魚血液溶菌酶活性的影響_參數(shù)CK組T3組^~，^"158.91±11.97b199.88±7.32a189.14±8.36a192.09±5.38a0.027*同行數(shù)據(jù)肩注不同者表示統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著(P〈0.05)。由表13可以發(fā)現(xiàn)，攝食不同詞料后，奧尼羅非魚的血液溶菌酶活性均比對(duì)照組有顯著提高(p〈0.05)，而實(shí)驗(yàn)組之間無顯著差異(p>0.05)。從數(shù)值看，Tl組溶菌酶活性最高，較對(duì)照組高25%。這表明，預(yù)混料可以顯著提高奧尼羅非魚的免疫能力。3、結(jié)論飼料中添加預(yù)混料可以顯著提高奧尼羅非魚增重、改善詞料系數(shù)，提高血液的溶菌酶活力，即可以增強(qiáng)機(jī)體的免疫能力，這對(duì)奧尼羅非魚的健康養(yǎng)殖具有非常重要的意義。實(shí)施例5、本發(fā)明的預(yù)混料對(duì)豬養(yǎng)殖的影響本實(shí)施例通過對(duì)88頭健康(杜洛克X長(zhǎng)白X大白)三元雜交仔豬(體重平均在12.6kg左右)進(jìn)行試驗(yàn)，闡明本發(fā)明提供的枯草芽孢桿菌作為飼料添加劑的有益效果。一、預(yù)混料的制備1、本發(fā)明的預(yù)混料的配制1)第一次擴(kuò)大發(fā)酵將活化后的枯草芽孢桿菌(&"Wwsswb"7h)Bs006CGMCCNo.2434接入如下培養(yǎng)基A中，37T:發(fā)酵12小時(shí)。培養(yǎng)基A的組成為每升培養(yǎng)基中含有肉膏提取物3g，蛋白胨5g;蒸餾水配制，pH7.0。2)第二次擴(kuò)大發(fā)酵將步驟1的發(fā)酵液以10%(體積比)的接種量接入如下培養(yǎng)基B中，37t發(fā)酵24小時(shí)。培養(yǎng)基B的組成為每升培養(yǎng)基中含有25g脫脂奶粉、10g焦糖蜜；蒸餾水配制，pH7.0。3)固態(tài)發(fā)酵將步驟2的發(fā)酵液加入豆粕中(加入量為300mL發(fā)酵液/kg豆粕)，37°(3發(fā)酵36小時(shí)，每隔6小時(shí)攪拌10分鐘。將步驟3)得到的培養(yǎng)物烘干至干粉，得到飼料預(yù)混料。每40g預(yù)混料含有如下組分維生素A:IO，OOOIU;維生素D:590IU;a-生育酚乙酸酯27mg;維生素K3:0.65mg;核黃素10.0mg;D-泛酸鈣9.7mg;煙酸32.2mg;維生素B。0.12mg;生物素0.40mg;葉酸4.9mg;維生素Be:7.9mg;硫胺素5.8mg;錳46.2mg;鋅:135.5mg;鐵:187.8mg;銅205mg;碘:1.2mg;硒0.35mg;食鹽0.3%(質(zhì)量比)；氯化膽堿590mg;2X104CFU的枯草芽孢桿菌(&cil/ussw力"7is)Bs006CGMCCNo.2434。2、普通預(yù)混料的配制l.Og綜合酵素、0.5g綜合維他命、2.0g海藻礦物質(zhì)和2.5g綜合氨基酸混合，得到普通預(yù)混料。每40g預(yù)混料含有如下組分維生素A:9000IU;維生素D:660IU;a-生育酚乙酸酯32mg;維生素K3:0.70mg;核黃素8.lmg;D-泛酸鈣11.7mg;煙酸26.4mg;維生素Bw0.023mg;生物素0.24mg;葉酸3.lmg;維生素Be:5.0mg;硫胺素7mg;錳37.2mg;鋅120.0mg;鐵180.5mg;銅210mg;碘lrag;硒0.25rag;食鹽0.3%(質(zhì)量比)；氯化膽堿525mg。二、試驗(yàn)飼料的配制1、基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)日糧的配方見表H，含有除預(yù)混料外的所有組分。2、復(fù)合飼料I在基礎(chǔ)日糧中加入步驟一的1制備的預(yù)混料，加入量為40kg/t。193、復(fù)合飼料n在基礎(chǔ)日糧中加入步驟一的2制備的預(yù)混料，加入量為40kg/t。日糧參照NRC和我國(guó)豬的營(yíng)養(yǎng)需要量進(jìn)行配制，所用飼料原料均達(dá)到國(guó)標(biāo)2級(jí)，試驗(yàn)日糧的主要營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)力求達(dá)到一致，所有試驗(yàn)日糧為粉狀飼料，其配方和營(yíng)養(yǎng)成分見表14。營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)依據(jù)NRC(1998)，并結(jié)合豬場(chǎng)具體情況進(jìn)行配制。表14日糧組成飼料原料含量，％營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)玉米，2級(jí)，8.4%44.80消化能(Mcal/kg)3.30熟化玉米，8.8%15.00粗蛋白(%)19.60全脂大豆粕，37.8%12.00鈣(%)0.96植物油2.40總磷(%)0.68去殼大豆粕，48%12.50有效磷(%)0.39魚粉，65.2%2.50賴氨酸(%)1.24代奶粉，37%5.00蛋氨酸(%)0.30預(yù)混料(4呢)^'24.00蛋+胱氨酸(%)0.69合計(jì)100.00*1:步驟一的l制備的預(yù)混料；*2:步驟一的2制備的預(yù)混料。三、仔豬的飼喂選用88頭健康(杜洛克X長(zhǎng)白X大白)三元雜交仔豬(體重平均在12.6kg左右)進(jìn)行試驗(yàn)，試驗(yàn)設(shè)2次重復(fù)，每次重復(fù)試驗(yàn)具體如下44頭仔豬根據(jù)體重相近、公母各半的原則分為2組，每組22頭。整個(gè)試驗(yàn)分為預(yù)飼期和正式期兩個(gè)階段，預(yù)飼期14天，正式期42天。仔豬直接從母豬舍轉(zhuǎn)出(在母豬舍采食粉狀人工乳)，預(yù)飼期14天，在此期間由人工乳逐漸轉(zhuǎn)為復(fù)合飼料I，而后開始為期42天的正式期。正式期中，第1組用復(fù)合詞料I飼喂，第2組用復(fù)合飼料II飼喂。試驗(yàn)盡量使每個(gè)組的仔豬從地理位置、單個(gè)仔豬重量、采光和窩重等指標(biāo)均勻地分布于豬舍。試驗(yàn)仔豬在同一棟豬舍進(jìn)行飼養(yǎng)，采用高床飼養(yǎng)(地面前部分是帶有保溫層的水泥地板，后半部分為漏縫地板)，自由采食、自由飲水(乳頭式飲水器)。試驗(yàn)期內(nèi)每天觀察并記錄腹瀉、疾病情況。糞便清理和飼槽清刷以及光照等均按常規(guī)要20求進(jìn)行，所有試驗(yàn)仔豬處于相同的環(huán)境和管理?xiàng)l件。其它方法按常規(guī)進(jìn)行，正式試驗(yàn)期為42天，所有試驗(yàn)豬只由專人負(fù)責(zé)飼喂和治療。四、仔豬生長(zhǎng)性能的評(píng)價(jià)1、仔豬的體重變化試驗(yàn)期間仔豬體重變化見表15，可見本發(fā)明提供的預(yù)混料可以促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)。表15仔豬體重(kg/頭)變化情況<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>2、仔豬的平均日增重仔豬的平均日增重見表16，由表16可知，應(yīng)用本發(fā)明提供的預(yù)混料顯著提高了仔豬的平均日增重，效果優(yōu)于普通預(yù)混料。表16仔豬增重(g/頭/日)的影響變化<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>3、對(duì)仔豬采食量的影響預(yù)混料對(duì)仔豬進(jìn)食量的影響見表17，可以看出與普通預(yù)混料相比，本發(fā)明提供的預(yù)混料提高了仔豬的采食量。表17預(yù)混料對(duì)仔豬采食量(g/頭/日)的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>4、對(duì)仔豬飼料轉(zhuǎn)化率的影響預(yù)混料對(duì)仔豬飼料轉(zhuǎn)化率的影響見表18，可以看出與普通預(yù)混料相比，本發(fā)明提供的預(yù)混料在同樣的詞料耗料下，仔豬的體重增加更高。表18預(yù)混料對(duì)仔豬飼料轉(zhuǎn)化率(耗料/增重)的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>綜上所述在日糧中添加4%的本發(fā)明的預(yù)混料不僅適口性佳，促進(jìn)仔豬的日攝食量，而且改善了仔豬的平均日增重和飼料轉(zhuǎn)化效率。權(quán)利要求1、枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)Bs006，其保藏號(hào)為CGMCCNo.2434。2、一種飼料預(yù)混料，它的活性成分是用枯草芽孢桿菌(feciW^s^^7^s)Bs006CGMCCNo.2434發(fā)酵底物得到的培養(yǎng)物；所述底物為豆粕、蠶豆粕、棉籽粕、菜籽粕、豆粉和玉米粉中的至少一種。3、如權(quán)利要求2所述的預(yù)混料，其特征在于所述飼料預(yù)混料中枯草芽孢桿菌Bs006的含量為2X104-4X107CFU/kg。4、如權(quán)利要求3所述的預(yù)混料，其特征在于所述飼料預(yù)混料中枯草芽孢桿菌Bs006的含量為2X106CFU/kg。5、一種制備權(quán)利要求2至4中任一所述預(yù)混料的方法，包括如下制備活性成分的步驟以枯草芽孢桿菌(&w77i/sBs006CGMCCNo.2434發(fā)酵底物得到的培養(yǎng)物作為活性成分；所述底物為豆粕、蠶豆粕、棉籽粕、菜籽粕、豆粉和玉米粉中的至少一種。6、如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于所述發(fā)酵條件為30-45°C，18-48小時(shí)。7、如權(quán)利要求5或6所述的方法，其特征在于枯草芽孢桿菌Bs006進(jìn)行所述發(fā)酵前進(jìn)行活化。8、如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于所述方法中還包括將活化的枯草芽孢桿菌Bs006進(jìn)行擴(kuò)增的步驟。9、如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于用于擴(kuò)增枯草芽孢桿菌Bs006的培養(yǎng)基如下每升培養(yǎng)基中含有20-30g脫脂奶粉、5-15g焦糖蜜；蒸餾水配制，pH7.0;擴(kuò)增條件如下30-45。C培養(yǎng)18-48小時(shí)。10、如權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于用于擴(kuò)增枯草芽孢桿菌Bs006的培養(yǎng)基如下每升培養(yǎng)基中含有25g脫脂奶粉和10g焦糖蜜。全文摘要本發(fā)明公開了一種飼料預(yù)混料及其專用枯草芽孢桿菌。本發(fā)明提供的枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)Bs006，其保藏號(hào)為CGMCCNo.2434。本發(fā)明提供的飼料預(yù)混料，它的活性成分是用枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)Bs006CGMCCNo.2434發(fā)酵底物得到的培養(yǎng)物；所述底物為豆粕、蠶豆粕、棉籽粕、菜籽粕、豆粉和玉米粉中的至少一種。本發(fā)明提供的預(yù)混料具有無毒、無抗藥性、無殘料、無副作用的特點(diǎn)，可添加入多種動(dòng)物飼料中，顯著促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)、提高飼料轉(zhuǎn)化率、增強(qiáng)動(dòng)物的免疫功能。本發(fā)明提供的預(yù)混料制備方法簡(jiǎn)單、成本較低。本發(fā)明具有巨大的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和社會(huì)意義。文檔編號(hào)C12R1/125GK101684450SQ200810222670公開日2010年3月31日申請(qǐng)日期2008年9月22日優(yōu)先權(quán)日2008年9月22日發(fā)明者干小英,萍張,徐慶霖,曹君平,汪志陽,程景章,邱云棕申請(qǐng)人:北京欣博陽科技有限公司