專利名稱：一種從青占魚魚骨中提取復(fù)合多肽液的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及復(fù)合多肽液提取的方法，特別是涉及一種從青占魚魚骨中提取 復(fù)合多肽液的方法。
背景技術(shù)：
青占魚作為低值海洋魚類屬于海洋中的中上層回流魚類，近年來，漁獲物 中低值小型魚蝦的比重逐漸上升。浙江省溫州市作為海洋資源大市，其海洋資源 非常豐富，而青占魚也是低值魚中占比重較大的一塊。溫州的名小吃溫州魚丸, 有時(shí)也叫溫州魚面，在溫州地區(qū)非常流行，這個(gè)魚丸就是用青占魚肉制成的， 而每年產(chǎn)生的大量青占魚骨多用作加工價(jià)格低廉的魚粉飼料，或者被作垃圾拋 棄，成為不可回收垃圾，造成資源的極大浪費(fèi)。這些青占魚經(jīng)濟(jì)價(jià)值仍然未得 到充分的利用，青占魚骨中蛋白含量高，蛋白中支鏈蛋白含量也較高，若將這
些青占魚魚骨生產(chǎn)高F值復(fù)合多肽液，不僅可滿足我省大力發(fā)展的體育事業(yè)對(duì)高 品質(zhì)營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)給劑的要求，而且可以拓寬青占魚骨深加工途徑，并將成為海洋經(jīng) 濟(jì)的新的增長(zhǎng)點(diǎn)。因此，本項(xiàng)目擬研究利用青占魚魚骨為原料，通過多酶聯(lián)合 水解，將其加工成富含高F值小肽的，具有顯著抗疲勞功效的多肽營(yíng)養(yǎng)液。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種工藝簡(jiǎn)單、氨基態(tài)氮濃度較高的青占魚魚骨中 提取復(fù)合多肽液的方法。
本發(fā)明為達(dá)到以上目的，是通過這樣的技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的 一種從青占魚魚骨中提取復(fù)合多肽液的方法，依次包括以下步驟
1) 預(yù)處理青占魚魚骨，將其洗凈、絞碎，用去離子水浸泡2-4小時(shí)；
2) 酶解用亞麻布過濾除去去離子水，將上述魚骨按l: 5-l:10的質(zhì)量比例 的加入水，按魚骨質(zhì)量的1%-5%量按動(dòng)物蛋白水解酶和中性蛋白酶的質(zhì)量比為 3:1-1:3的比例加入酶，調(diào)節(jié)pH在5.5-8.5，然后在45-70。C溫度下酶解3-7個(gè)小時(shí)；
3) 滅酶將上述酶解液90-10(TC加熱15-30分鐘，以使酶失活；
4) 過濾將上述酶解液用亞麻布過濾，濾液在2000-4000rpm離心10-15min， 得到的上清液通過GPC凝膠凈化，再通過0.22pm孔徑的濾膜過濾除菌，即得到 無菌的復(fù)合多肽液；其中氨基態(tài)氮濃度為955.48 mg'(100ml)"—l 169.32 mg.(100m1)-1。所述中性蛋白酶為酶活7萬、11萬或13萬的中性蛋白酶。 本發(fā)明具有的有益效果是該發(fā)明首次使用青占魚魚骨提取復(fù)合多肽液，
廢物利用，提取工藝簡(jiǎn)單、氨基態(tài)氮濃度較高，動(dòng)物試驗(yàn)證明抗疲勞效果顯著。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例l: 一種從青占魚魚骨中提取復(fù)合多肽液的方法，依次包括以下步驟:
1) 、預(yù)處理稱取30克青占魚魚骨，將其洗凈、絞碎，用去離子水浸泡2小
時(shí)；
2) 、酶解用亞麻布過濾除去去離子水，將上述魚骨加入150毫升的水，加 入龐博公司的動(dòng)物蛋白水解酶0.225§，酶活7萬的中性蛋白酶0.075g，調(diào)節(jié)pH為 5.5，然后在45t:溫度下酶解3個(gè)小時(shí)；
3) 、滅酶將上述酶解液9(TC加熱30分鐘，以使酶失活；
4) 、過濾將上述酶解液用用亞麻布過濾，濾液在2000rpm離心10min，得 到的上清液通過GPC凝膠凈化，再通過0.22pm孔徑的濾膜過濾除菌，即得到無 菌的復(fù)合多肽液，其中氨基態(tài)氮濃度為955.48 mg乂lOOml)-1。
實(shí)施例2: —種從青占魚魚骨中提取復(fù)合多肽的方法，依次包括以下步驟
1) 、預(yù)處理稱取30克青占魚魚骨，將其洗凈、絞碎，用去離子水浸泡4小
時(shí)；
2) 、酶解用亞麻布過濾除去去離子水，將上述魚骨加入300毫升的水，加 入龐博公司的動(dòng)物蛋白水解酶0.6g，酶活13萬的中性蛋白酶0.3g，調(diào)節(jié)pH為7.5， 然后在50'C酶解4.5小時(shí)；
3) 、滅酶將上述酶解液10(TC加熱15分鐘，以使酶失活；
4) 、過濾將上述酶解液用亞麻布過濾，濾液在4000rpm離心15min，得到 的上清液通過GPC凝膠凈化，再通過0.22)im孔徑的濾膜過濾除菌，即得到無菌 的復(fù)合多肽液；其中氨基態(tài)氮濃度為1169.32 mg'(lOOml)"。
實(shí)施例3: —種從青占魚魚骨中提取復(fù)合多肽的方法，依次包括以下步驟
1) 、預(yù)處理稱取30克青占魚魚骨，將其洗凈、絞碎，用去離子水浸泡3小
時(shí)；
2) 、酶解用亞麻布過濾除去去離子水，將上述魚骨加入240毫升的水，加 入龐博公司的動(dòng)物蛋白水解酶0.375g，酶活ll萬的中性蛋白酶1.125g，調(diào)節(jié)pH為 8.5，然后在7(TC酶解7小時(shí)；
3) 、滅酶將上述酶解液95。C加熱25分鐘，以使酶失活；
4) 、過濾將上述酶解液用亞麻布過濾，濾液在3000rpm離心12min，得到的上清液通過GPC凝膠凈化，再通過0.22,孔徑的濾膜過濾除菌，即得到無 菌的復(fù)合多肽液，其中氨基態(tài)氮濃度為1055.48 mg《100mi;r1。
最后，還需要注意的是，以上列舉的僅是本發(fā)明的若干個(gè)具體實(shí)施例。顯 然，本發(fā)明不限于以上實(shí)施例，還可以有許多變形。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員能 從本發(fā)明公開的內(nèi)容直接導(dǎo)出或聯(lián)想到的所有變形，均應(yīng)認(rèn)為是本發(fā)明的保護(hù) 范圍。
權(quán)利要求
1、一種從青占魚魚骨中提取復(fù)合多肽液的方法，其特征在于包括以下步驟1)預(yù)處理青占魚魚骨，將其洗凈、絞碎，用去離子水浸泡2-4小時(shí)；2)酶解用亞麻布過濾除去去離子水，將上述魚骨按1∶5-1∶10的質(zhì)量比例的加入水，按魚骨質(zhì)量的1％-5％量按動(dòng)物蛋白水解酶和中性蛋白酶的質(zhì)量比為3∶1-1∶3的比例加入酶，調(diào)節(jié)pH在5.5-8.5，然后在45-70℃溫度下酶解3-7個(gè)小時(shí)；3)滅酶將上述酶解液90-100℃加熱15-30分鐘，以使酶失活；4)過濾將上述酶解液用亞麻布過濾，濾液在2000-4000rpm離心10-15min，得到的上清液通過GPC凝膠凈化，再通過0.22μm孔徑的濾膜過濾除菌，即得到無菌的復(fù)合多肽液；其中氨基態(tài)氮濃度為955.48mg·(100ml)-1—1169.32mg·(100ml)-1。
2、 根據(jù)權(quán)利要求所述的一種從青占魚魚骨中提取復(fù)合多肽液的方法，其特征在于所述中性蛋白酶為酶活7萬、11萬或13萬的中性蛋白酶。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種從青占魚魚骨中提取復(fù)合多肽液的方法。包括以下步驟將青占魚魚骨洗凈、絞碎，用去離子水浸泡；過濾除去去離子水，將魚骨按1∶5-1∶10的質(zhì)量比例的加入水，按魚骨質(zhì)量的1％-5％量按動(dòng)物蛋白水解酶和中性蛋白酶的質(zhì)量比為3∶1-1∶3的比例加入酶，調(diào)節(jié)pH在5.5-8.5，然后在45-70℃溫度下酶解；將上述酶解液90-100℃加熱，以使酶失活；用亞麻布過濾，濾液在2000-4000rpm離心10-15min，得到的上清液通過GPC凝膠凈化，再過濾除菌得到復(fù)合多肽液；其中氨基態(tài)氮濃度為955.48mg·(100ml)^-1-1169.32mg·(100ml)^-1。該發(fā)明廢物利用，提取工藝簡(jiǎn)單、氨基態(tài)氮濃度較高，動(dòng)物試驗(yàn)證明抗疲勞效果顯著。
文檔編號(hào)C12P21/06GK101503728SQ20081016417
公開日2009年8月12日 申請(qǐng)日期2008年12月29日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月29日
發(fā)明者春 張, 施佳慧, 郭海英 申請(qǐng)人:浙江體育科學(xué)研究所