專利名稱：獲得無菌乳及其組合物的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及對全乳進行滅菌同時保留相當量的有益生物學物質并且降低生物負荷的方法。本發(fā)明還包括通過本發(fā)明的方法獲得的乳產(chǎn)品。
背景 人乳在治療早產(chǎn)兒、危重疾病及其它免疫力低下的新生兒和兒童中具有重大治療意義。然而，對于這些危重患者，經(jīng)加工的供體人乳具有明顯可測的蠟狀芽孢桿菌(B.cereus)危險，蠟狀芽孢桿菌是在大約4％的人乳樣品中發(fā)現(xiàn)的遍在的食物毒素。蠟狀芽孢桿菌是最麻煩的，因為其具有形成不能被標準巴氏消毒法殺死的孢子的能力。涉及的其它細菌包括產(chǎn)氣莢膜梭菌(Clostridium perfringens)、小球隱孢子蟲(Cryptosporidium parvum)、圓孢子球蟲(Cyclospora cayatenesis)、大腸桿菌(Escherichia coli)、單核細胞增生李斯特氏菌(listeria monocytogenes)、沙門氏菌以及金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)。
更復雜的事情是一些供體提供若干“干凈的”批次(LOTS)(沒有蠟狀芽孢桿菌及其它病原體)，隨之一個批次被污染。當混合合乎條件的供體的乳時，感染蠟狀芽孢桿菌或其它病原體的乳最終污染其它干凈批次，導致整個混合物被破壞。對于這些細菌的菌落形成單位數(shù)目有限制，而且雖然這些限制很少達到，但是超出這些限制的任何混合物均應棄去并且不可用于加工。盡管在混合之前檢測原乳是有益的，但是制備某些產(chǎn)品的蛋白質的濃度有效地濃縮乳中所有物質，包括這些病原體。雖然其它病原體可以用巴氏消毒法消除，但是蠟狀芽孢桿菌病原體不能用巴氏消毒法消除，因此重要的是所述混合的產(chǎn)品經(jīng)鑒定在進行巴氏消毒和填料之前沒有蠟狀芽孢桿菌。進一步地，需要提供在巴氏消毒之前基本上沒有病原體的原乳混合物，以優(yōu)化產(chǎn)品的質量和安全性。
發(fā)明概述 本發(fā)明提供了一種獲得人乳組合物的方法，所述方法包括通過大約100-400微米的過濾器過濾全乳；在大約58-65℃對所述全乳熱處理大約20-40分鐘；將全乳分離成脫脂乳部分和脂肪部分；通過一或多個脫脂乳過濾器過濾脫脂乳部分，獲得滲透物部分和富集蛋白質的脫脂乳部分(即保留物)；將所述脂肪部分加熱至大約90-120℃大約1小時，足以降低脂肪部分的生物負荷；混合經(jīng)處理的脂肪部分的級分與富集蛋白質的脫脂乳部分，獲得人乳組合物。一方面，所述全乳包含混合的人乳。另一方面，所述方法進一步包括在過濾之前檢測所述全乳樣品中HIV、HBV、HCV及其任意組合的存在。再一方面，通過大約200微米的濾網(wǎng)對全乳進行過濾。對全乳進行的熱處理可以在大約63℃進行大約30分鐘。另一方面，分離之后的脫脂乳部分包含大約0.69％脂肪、大約1.07％蛋白質以及大約7.14％乳糖，分離之后的脂肪部分包含大約46％脂肪、大約2％蛋白質以及大約10％乳糖。在一些方面中，所述脂肪部分被進一步加工以獲得額外的脫脂乳，并且將此額外的脫脂乳與所述脫脂乳部分混合。所述方法可進一步包括在過濾脫脂乳部分之前用乳脂部分調節(jié)所述脫脂乳部分以獲得脫脂乳部分中脂肪濃度為脫脂乳部分的蛋白質含量的大約55％至大約65％。另一方面，所述富集蛋白質的脫脂乳部分包含大約8％蛋白質。所述方法可進一步包括洗滌具有滲透物的一或多個脫脂乳過濾器以獲得蛋白質洗滌物并且將所述蛋白質洗滌物加入富集蛋白質的脫脂乳部分中。所述全乳可以是人乳。所述方法可進一步包括對得自所述方法的乳制品進行巴氏消毒。
本發(fā)明還提供了得自本發(fā)明方法的人乳組合物。一方面，所述人乳組合物包含大約20-70mg/ml的蛋白質成分、大約35-85mg/ml的脂肪成分、大約70-115mg/ml的碳水化合物成分，其中所述組合物優(yōu)選包含人IgA。
本發(fā)明提供了人乳組合物，其包含供體自體原乳和異體乳組合物，其中所述人乳組合物包含至少大約2.1g/dL人乳蛋白。一方面， 所述人乳蛋白不是衍生自凍干的蛋白質樣品(例如所述人乳蛋白是非凍干的人蛋白質)。另一方面，所述組合物包含大約2.1g/dL-4.0g/dL人乳蛋白。一方面，最終混合的人乳組合物包含大約2.2至大約4％人蛋白質。
本發(fā)明還提供了一種試劑盒，其包含本發(fā)明的人乳組合物以及用于混合所述人乳組合物與人原乳以獲得混合的配制品的刻度瓶，其中所述混合的配制品與不具有本發(fā)明人乳組合物的原乳相比多包含大約4卡/盎司。
本發(fā)明進一步提供了一種獲得營養(yǎng)乳組合物的方法，包括測量人原乳的營養(yǎng)含量；向所述原乳中加入本發(fā)明的人乳組合物以使得所述原乳的營養(yǎng)價值增加大約4卡路里/盎司。
本發(fā)明提供了為早產(chǎn)兒提供補充營養(yǎng)物的方法，包括將本發(fā)明的人乳組合物加入人原乳中并且將此混合的人乳給予早產(chǎn)兒。
本發(fā)明的一或多個實施方案的詳細描述在附圖和下文中闡述。從發(fā)明描述和附圖以及從權利要求書中可以顯而易見本發(fā)明的其它特征、目的和優(yōu)勢。
附圖簡述

圖1示出了本發(fā)明的方法。
詳細描述 如本文及在權利要求書中所用，除非另外明確指出，單數(shù)形式“一個”、“一種”和“所述”包括復數(shù)形式。因此，例如“一個樣品”包括多個這種樣品，“所述蛋白質”包括本領域技術人員已知的一或多種蛋白質等等。
除非特別指出，則本文所用的所有技術和科學術語均具有其所屬領域技術人員通常已知的相同含義。盡管在實施本發(fā)明的方法和組合物中可以使用與本文描述相似或等價的方法和材料，但本文描述了舉例的方法、裝置和材料。
上文和本文中討論的出版物僅提供用于顯示其在本申請的申請日之前公開。不應解釋為承認本發(fā)明未在所述出版物的公開之前完成。
由于其營養(yǎng)成分和免疫學益處，長久以來一直認為人乳是早產(chǎn)兒和足月兒的理想食品。人乳是這種營養(yǎng)和免疫學益處的最合適的來源。然而，供體乳的營養(yǎng)價值有所不同，并且對供體乳中細菌、病毒及其它污染物有顧慮。對于嬰兒、特別是早產(chǎn)兒而言，理想的營養(yǎng)狀況包含生母的乳。或者，或者另外，母親可以使用吸乳器擠出乳并且貯存以隨后使用。盡管母乳喂養(yǎng)存在一些禁忌癥，這些禁忌癥包括具有半乳糖血癥的嬰兒，以及母親具有活動型肺結核、是HTLV I或II陽性的、被給予放射性同位素、抗代謝物或化療，或者是藥物濫用對象。關于HIV感染，情況更為復雜，危險與益處之間的平衡由專業(yè)人士評估。
盡管充分論證了母乳喂養(yǎng)的積極作用，但是在美國醫(yī)院內的起始比例僅為64％，產(chǎn)后6個月的持續(xù)比例為大約29％。母乳喂養(yǎng)的替代方案是使用人供體乳，補充人乳的配方乳以及單獨的配方乳。對于許多極低出生體重的嬰兒，需要對擠出的乳進行強化。
The Academy of Pediatrics Policy Statement建議對于母親不能或者不愿意(例如社會原因)提供其自身乳的嬰兒而言，貯存的人乳可以是一種合適的可選喂養(yǎng)方案。于1985年建立的The Human Milk Banking Association ofNorth America (HMBANA)已經(jīng)公布了建立和運行供體人乳庫的國家指南。這些指南與用于保護人血庫中供應品的那些類似。
為早產(chǎn)兒通常喂養(yǎng)針對這些嬰兒特別設計的商業(yè)嬰兒配方乳或者其母親的乳。關于這些嬰兒的營養(yǎng)需求仍在進行研究。然而，許多研究證實了未補充的早產(chǎn)兒母親乳和庫存的乳不能提供滿足這些嬰兒需要的足夠量的一些營養(yǎng)物質(Davies，D.P.，″Adequacy of expressed breast milk for earlygrowth of preterm infants″.ARCHIVES OF DISEASE IN CHILDHOOD，52，p.296-301，1997)。低出生體重的嬰兒生長需要的能量估計為大約120卡/kg/天，但是精確的能量需要由于活動性、基本能量消耗、營養(yǎng)物質吸收的效率、疾病以及利用能量進行組合組織合成的能力中的差異而不同。大約50％的能量攝取為基本代謝需要、活動性以及維持體溫而消耗。大約12.5％的能量用于合成新組織，25％的能量被貯存。剩余的12.5％能量被排泄。早產(chǎn)兒人乳通常在特定的營養(yǎng)方面不足。例如，早產(chǎn)兒人乳通常缺少鈣、磷和蛋白質。因此，推薦當用早產(chǎn)兒人乳喂養(yǎng)早產(chǎn)兒時，需要對該人乳進行強化以更好地滿足早產(chǎn)兒的營養(yǎng)需要。
Similac Natural

和

Human Milk Fortifier是可商購的人乳強化劑。該強化劑在形式、成分來源以及能量和營養(yǎng)組成方面不同。另外，這些產(chǎn)品實際上是人工合成的。在新生兒重癥監(jiān)護病房(NICU)中既需要液態(tài)也需要粉狀人乳強化劑。理想地，最佳的強化劑是人源的。目前沒有可利用的人來源的乳強化劑。
液體從女性乳腺中的分泌包括在后文簡便稱作乳的許多成分。擠出的乳不是典型無菌的，即使在無菌條件下獲得時也含有細菌。然而，乳非常迅速地被環(huán)境(空氣、擠乳裝置、與手或者其它非無菌物體接觸、奶罐或者容器等)中的微生物和特殊病原體如即使在經(jīng)巴氏消毒的乳中也迅速增殖的蠟狀芽孢桿菌污染。
由于其碳水化合物、蛋白質、脂肪、礦物質以及維生素組成，乳實際上是所有微生物的理想培養(yǎng)基，乳在短時間內變質。冷藏的乳略微延遲細菌生長，其保質期可以延長幾天。
除了使乳酸腐的細菌如乳酸菌之外，人病原性細菌尤為構成一個大問題。這些細菌包括沙門氏菌屬(Salmonella)、彎曲桿菌屬(Campylobacter)、李斯特氏菌屬(Listeria)和葡萄球菌屬(Staphylococci)的各種病原性菌株，這些菌株可以特別在未經(jīng)巴氏消毒的乳中出現(xiàn)，或者包括梭狀芽孢桿菌(Clostridia)或者芽孢桿菌菌種，由于其耐熱孢子而可以在62-74℃的巴氏消毒中存活。
典型地，乳通過稱作UHT處理的方法滅菌，即在120-145℃熱處理幾秒鐘。除了“煮沸的口味”之外，極端加熱通過例如蛋白質的熱變性而導致生物學活性的喪失。這種蛋白質包括乳中存在的有價值的免疫活性成分，包括例如免疫球蛋白及其它免疫性刺激物質，以及其它重要蛋白質，如乳鐵蛋白、乳過氧化物酶、生長因子等。例如，生物性活性的初乳已經(jīng)示出可用于胃腸病癥等。
此外，通過加熱激活可以使細菌釋放毒素。例如，革蘭氏陰性菌的內毒素不被巴氏消毒法破壞。在UHT滅菌中，革蘭氏陰性菌的殺滅可使內毒素增加6-7倍(Motter，J.，Neth.Milk Dairy Journal，Vol.41，137-145，1987)。
目前處理全乳的方法導致有益的生物學活性蛋白質及其它分子減少。例如，凍干、高溫處理等通過例如降解和變性而減少生物學活性蛋白質、脂質及其它物種。另外，在巴氏消毒法中使用降低的加熱溫度時，結果提供了生物負荷增加并因此增加了消費者風險的乳制品。目前使用的某些過濾步驟降低蛋白質含量及用于濾出乳糖和鹽。
本發(fā)明為需要額外的營養(yǎng)物質以支持其生長的早產(chǎn)兒提供了人乳強化劑。本發(fā)明包含通過本發(fā)明的方法獲得的人乳衍生的強化劑。在一些方面，所述人乳強化劑/人乳衍生的補充產(chǎn)品可以加入人乳中，從而補充蛋白質、脂肪、維生素和礦物質的水平。本發(fā)明進一步提供了為需要額外的營養(yǎng)物質以生長的早產(chǎn)兒提供補充的營養(yǎng)價值的方法。
術語“早產(chǎn)”，“未足月”和“低出生體重(LBW)”嬰兒可互換使用，是指孕齡少于37周出生的嬰兒和/或出生體重低于2500gm的嬰兒。早產(chǎn)兒的需要是特別迫切的。對于極低出生體重(＜1500g)的嬰兒而言，1歲之前的死亡率是25％。對于低體重(＜2500g)嬰兒而言，1年死亡率為2％；正常出生體重(＞2500g)的嬰兒的死亡率仍顯著高于0.25％。
特別關注的是壞死性小腸結腸炎(NEC)，這是在新生兒中未知病因學的一種嚴重胃腸疾病。NEC特征在于部分小腸的粘膜或跨粘膜壞死。在足月之前出生的非常小的患病嬰兒對于NEC最易感。NEC漸增的發(fā)病率部分是由于高危早產(chǎn)兒的存活率改善所致。
一方面，本發(fā)明提供了獲得并加工一個供體或一組供體的人乳的方法。本發(fā)明的方法包括在強化的制品中降低生物負荷同時保留營養(yǎng)價值的過程。通常所述方法包括鑒別并準許合適供體的措施。供體典型是由其主治醫(yī)生推薦的供體。除了其它原因之外，這樣有助于保證供體不是長期患病的個體。準許和監(jiān)測乳集合和分布的方法和系統(tǒng)在美國專利申請No.11/526,127(以其全部內容并入本文作參考)中描述。
通過面試進行篩選以及進行生物學樣品處理。針對病毒(例如HIV 1和2、HTLV I和II、HBV及HCV)和梅毒以及其它原核病原體(例如蠟狀芽孢桿菌)篩選生物學樣品，放棄檢測陽性的捐贈物。
在篩選時發(fā)現(xiàn)是陽性的任何潛在樣品均從處理樣品中除去，并將該供體從進一步的捐贈中除去。采取的另一種措施包括針對藥物濫用情況檢測供體樣品或者乳混合物。
供體可以被定期再準許。例如，要求供體每四個月通過與其最初的準許資格相同的方案進行篩選。未再準許或者不被準許的供體延遲提供乳，直至其完全被再準許。在一些情況中，如果由再準許篩選的結果證明，則該供體被永久推遲。在后者的情況中，由該供體提供的所有剩余的乳均從存貨中除去并銷毀。
準許的供體可以在指定機構(例如乳庫辦公室)捐贈，或者典型在家中擠出乳。一方面，乳庫或者直接由乳品加工商(乳庫和加工商可以是相同或不同實體)為準許的供體提供用品以帶回家。用品典型包含容器上的計算機可讀代碼(例如條形碼標記)以及可進一步包括擠奶器。然后供體可以在家中擠出并冷凍乳，優(yōu)選在-20℃冷凍。一方面，只要在最后到訪供體乳中心10-14天之后的血液檢測結果滿意即可接收供體乳，如果這個結果是滿意的，則約定供體在中心擠出乳或者讓其在家中收集乳。檢測乳和容器的狀況，并且根據(jù)數(shù)據(jù)庫核對條形碼信息。如果滿意，將該單位置于供體乳庫中心或者處理中心冷凍箱(-20℃)中，直至準備進一步檢測和處理。
另一方面，乳由供體在其家中擠出，而不是在乳庫設施中收集，本發(fā)明的方法包括對每個供體的乳樣品加以標記，以保證乳確實來自注冊的供體。這種對象辨識技術為本領域所已知(見例如并入本文作參考的國際申請PCT/US2006/36827所述)?？梢詫θ檫M行貯存(例如在-20℃)和檢疫直至接收到檢測結果。在上述步驟中，棄去任何不合格的乳樣品。與血液捐贈中心一樣，密切控制對供體的所有保密信息、包括血液檢測數(shù)據(jù)的獲得。
將收集的準許的(例如通過危險因子檢測)乳通過單獨或組合進行滅菌過濾和/或巴氏消毒(或者減少生物負荷的其它方法)處理。一方面，通過較大微米(例如大約100-400微米)、典型為大約200微米的濾器或濾網(wǎng)過濾。對過濾的全乳進行熱處理(100，見圖1)以準備分離，將全乳在大約63℃(例如大約50-80℃)加熱大約30分鐘(例如大約20-60分鐘)。一方面，該步驟使過濾之前全乳溫度在可接受的時間升高超過70℃(HTST)。例如，指定用于特殊生產(chǎn)批量的乳品容器的內容物在65℃解凍，并且于隔熱的加工罐中混合。該罐具有連續(xù)溫度監(jiān)控裝置和含有循環(huán)乙二醇冷卻劑的護套。將乙二醇冷卻至2-8℃以用于混合過程，而不經(jīng)渦旋或使乳形成泡沫而攪拌罐式混合器，因為渦旋或使乳形成泡沫可破壞重要的蛋白質成分?？梢苑治龌旌系娜闃悠返纳镓摵?。
另一方面，將加工罐中的全乳配制品通過鉑固化硅橡膠管與高溫短時(HTST)巴氏消毒器連接。在巴氏消毒后，收集乳置于第二個加工罐中并冷卻。可以使用其它巴氏消毒方法(例如槽中巴氏消毒法(vat pasteurization))，這種技術為本領域所已知。例如，在槽中巴氏消毒法中，將罐中的乳加熱至最低62.5℃，并在此溫度保持大約30分鐘。乳之上的空氣經(jīng)蒸汽加熱至高于乳溫度5℃。另一方面，既進行HTST也進行槽中巴氏消毒。
另一方面(如圖1所示)，如本文所述將人全乳100加熱110。然后將加熱的全乳分離成脫脂乳和乳脂(即脂肪)120。通過常規(guī)方法如離心法將乳脫脂為脫脂乳。一方面，脂肪與脫脂乳的分離不包括除去二價離子(例如鈣離子等)。一方面，將混合的乳注入離心器中以從其余乳中分離脂肪(乳脂)，同時將脫脂乳移至第二個加工罐(保持2-8℃)中直至任選進行過濾步驟。在離心后，乳脂流入小的不銹鋼容器中。一方面，然后將該乳脂進行巴氏消毒，隨后定量熱量、蛋白質和脂肪含量。另一方面，在完成分離后，確定所述乳脂的體積、蛋白質和脂肪含量，將一部分該乳脂加回入所述脫脂乳中以達到有助于過濾或者生產(chǎn)特定產(chǎn)品的熱量、蛋白質和脂肪含量。在巴氏消毒和/或過濾之前或之后可以向乳中加入礦物質。
將脫脂乳部分130過濾140以增加保留物150(例如富含蛋白質的脫脂乳部分)中生物學因子的濃度。然后確定富集的脫脂乳部分的熱量含量，如果需要則通過加入先前獲得的乳脂170進行調節(jié)160。一方面，收集通過第一次過濾獲得的滲透物180，并且再過濾190以獲得第二個保留物200，其包含在第一次過濾140期間也許已經(jīng)透過進入滲透物180中的額外的生物學因子。可以將此第二個保留物200加入第一個保留物150中以增加生物學物質濃度(例如蛋白質濃度)?？梢詫⒌米缘谝淮畏蛛x120的乳脂170進一步加工220以獲得額外的脫脂乳230。例如，乳脂170可以通過進一步分離220以獲得黃油240和脫脂乳230?？梢詫⑺鲱~外的脫脂乳230加入脫脂乳部分130中。
“全乳”是指從中未除去脂肪的乳。“脫脂乳”是指除去了全部或部分脂肪含量的全乳。因此意識到“脫脂乳”包括“低脂乳”這種變體，其中已經(jīng)除去了基本上所有的脂肪含量?！叭橹被颉爸静糠帧笔侵概c脫脂乳分離的全乳的部分。典型地，乳脂包含長鏈、中鏈和短鏈脂肪酸，濃度高于得自相同制品的脫脂乳的相應濃度。
根據(jù)一個實施方案，用于過濾脫脂乳的超濾膜具有規(guī)定大小以防止分子量大于40kDa的任何物質通過。這種除外的物質包括但不限于乳蛋白和乳脂肪?；蛘?，也可以使用防止分子量大于1-40kDa及在其中任何范圍的任何物質通過的超濾膜。典型地，可以使用包含0.45μm或更小的(例如0.2μm)的濾膜。典型地，使用0.2μm濾膜。在一些實施方案中，可以使用梯度過濾(例如首先使用0.45μm過濾，其次使用0.3μm過濾以及再用0.2μm過濾，或者這些過濾方式的任意組合)。脂肪從脫脂乳中的分離使得易于過濾。可以通過已知方法進行滅菌，例如過濾或者切向過濾，使用適當深度過濾器或者膜過濾器進行。
如下乳蛋白可以由超濾膜捕獲(分子量在括號中標示)乳清蛋白(～14kDa)、酪蛋白(～23kDa)、乳球蛋白(～37kDa)、白蛋白(～65kDa)以及免疫球蛋白(＞100kDa)。
可利用3.5kDa或更低分子量截斷值的超濾膜，例如分別得自AdvancedMembrane Technology，San Diego，Calif和Dow Denmark，Naskov，Denmark。也可以使用由陶瓷材料制成的超濾膜。陶瓷過濾器具有超過合成過濾器的優(yōu)勢。陶瓷過濾器可以用流通蒸氣滅菌。
典型地應用跨過超濾膜的壓力梯度以便于過濾。典型地，調節(jié)所述壓力梯度以保持希望的通過該膜的過濾流量。一方面，首先將超濾膜用少量的乳啟動，并棄去滲透物，之后開始過濾。確信以這種方式啟動過濾器對于過濾效率是有益的。
在經(jīng)巴氏消毒之后，對乳品進行無菌加工。在冷卻至大于2℃至大約8℃之后，可以檢測經(jīng)巴氏消毒的乳的營養(yǎng)含量、蛋白質含量、特殊因子，并且調節(jié)至希望的水平。一方面，測量富集的脫脂乳/保留物的營養(yǎng)含量、蛋白質含量、特殊因子，并且調節(jié)至希望的水平，例如通過加入巴氏消毒的乳脂以獲得希望的熱量含量。將該產(chǎn)品從加工罐中泵入灌裝單元中以分送至注射器或瓶子中。檢測終產(chǎn)品的病毒和細菌污染情況，之后進行包裝和分送。
本發(fā)明的方法和組合物保留了希望的重要蛋白質和維生素的活性，同時降低了生物負荷。在對乳進行加工至終產(chǎn)品期間的不同階段檢測各種生物體的存在情況。在確定污染情況的確認研究中使用的生物體包括細菌大腸桿菌、金黃色葡萄球菌(S.aureus)和無乳鏈球菌(S.agalactiae)，以及病毒人免疫缺陷病毒(HIV)、甲型肝炎病毒(HAV)、牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)和偽狂犬病病毒(PSR)，后者用作CMV的標志物。已知HIV和HAV是人乳的潛在污染物，并因此被選擇作為相關病毒。已知丙型肝炎病毒(HCV)也是人乳的潛在污染物。使用本發(fā)明的方法，獲得如下結果 表1檢測的生物體的Log10下降值
這些病毒的log下降值不代表通過本發(fā)明的方法可以達到的最大下降值。特別感興趣的是不受乳業(yè)傳統(tǒng)使用的巴氏消毒條件(62.5±1.0℃，15分鐘)影響的小的無脂質包膜的復原病毒(resilient virus)甲型肝炎病毒(HAV)的殺滅。此外，盡管金黃色葡萄球菌對于熱處理具有相當抗性，但是通過本發(fā)明方法的處理這個生物體示出降低～15log。
本發(fā)明還提供了強化劑組合物。所述強化劑組合物是如本文所述通過進行收集和過濾和/或巴氏消毒步驟而獲得的。本發(fā)明的強化劑包含重要的乳蛋白和生物學因子。
人乳包含大約100000種不同的生物學因子蛋白質、脂質、碳水化合物、維生素和微量礦物質。關鍵成分包括單體免疫球蛋白A(IgA)和二聚體分泌型IgA(s[IgA]2)、溶菌酶和乳鐵蛋白。因此，有助于保證乳品安全性的巴氏消毒方法應理想地也保存足夠數(shù)量的這些潛在不耐熱的必需成分。
使用夾心ELISA方法定量人乳樣品中免疫球蛋白A(IgA)和分泌型IgA(s[IgA]2)。在使用Prolacta HTST方法進行巴氏消毒之后，與未處理的人乳樣品中相應數(shù)值相比，IgA濃度平均降低大約27％(例如從大約7％至大約47％)，分泌型IgA水平平均降低17％(例如從大約7％至大約27％)。
溶菌酶活性通過微滴定測定法確定，使用溶壁微球菌(Micrococcuslysodeikticus)懸浮液作為底物。在經(jīng)巴氏消毒后的人乳中溶菌酶活性為大約22000IU/mL，是人原乳中初始活性(39000IU/MI)的57％(例如從大約47％至大約67％或更多)。
乳鐵蛋白濃度通過ELISA技術確定。使用本發(fā)明的方法經(jīng)巴氏消毒之后人乳的乳鐵蛋白含量為大約0.033g/100mL，是人原乳中初始濃度(0.24g/100mL)的大約14％(例如大約4-24％)。
通過確認的HPLC程序進行維生素分析。在經(jīng)巴氏消毒之后維生素A、維生素C和α-、γ-和δ-生育酚水平保持不變。人乳中維生素B6含量略微降低至大約7.8μg/100mL，是初始濃度8.8μg/100mL的大約89％。這些結果在表2中示出。
表2巴氏消毒對人乳成分的作用
本發(fā)明的乳組合物和強化劑的蛋白質成分提供了蛋白質來源。蛋白質是生長、酶和激素的合成所必需的，并且替代從皮膚和尿液以及糞便中喪失的蛋白質。這些代謝過程決定了需要在喂食的食物中的蛋白質總量以及特定氨基酸的相對量。嬰兒喂食中蛋白質的量和類型的適合性通過測量生長、氮的吸收和保持、血漿氨基酸、某些血液分析物以及代謝反應而確定。本發(fā)明的特別優(yōu)勢之處是在所述組合物中存在人IgA蛋白、溶菌酶和乳鐵蛋白。
盡管非必需，但應意識到本發(fā)明的人乳組合物可以用非天然發(fā)生的或異源/異質成分修飾或者補充這些成分。例如，蛋白質含量可以通過使用適于人攝取的氮源加以調節(jié)或修飾。這種蛋白質為本領域技術人員所熟知，而且當制備這種組合物時可易于選擇。可以添加的合適蛋白質成分的例子包括酪蛋白、乳清、濃縮脫脂乳(condensed skim milk)、無脂乳、大豆、豌豆、大米、玉米、水解蛋白、游離氨基酸、在具有蛋白質的膠態(tài)懸浮液中含有鈣的蛋白質來源及其混合物。
本發(fā)明的乳組合物的另一成分包含脂肪來源。脂肪通常是LBW嬰兒的能量來源，不僅因為其高熱量密度而且還因為其在溶液中的低滲透活性。而且，盡管非必需，但是可以為本發(fā)明的乳組合物補充脂肪成分。這種異源/異質脂肪成分包括高油紅花油、大豆油、分餾的椰子油(中鏈甘油三酯，MCT油)、高油葵花油、玉米油、菜籽油、椰子油、棕櫚油和棕櫚仁油、海上油(marine oil)、棉籽油和特定的脂肪酸如二十二碳六烯酸(DHA)和花生四烯酸。
二十二碳六烯酸是一種Ω-3脂肪酸。DHA是在人乳中最富集的20碳o-3 PUFA。然而，人乳DHA含量根據(jù)母親的飲食而明顯不同。如果母親食用高DHA的魚類，則通常其乳中含有較高DHA水平；如果母親很少食用魚類，則其乳中DHA水平較低。因此，人乳可需要補充DHA以保證早產(chǎn)兒接受足量的DHA。補充DHA典型伴隨補充花生四烯酸。Kyle等的美國專利No.5,492,938描述了從溝鞭藻類中獲得DHA的方法以及其在藥物組合物和飲食補充劑中的應用。
碳水化合物是本發(fā)明組合物的另一成分。碳水化合物提供可易于利用的能量來源，有助于生長以及降低了組織分解代謝導致營養(yǎng)不良的快速發(fā)育嬰兒的危險。在人乳和最標準的基于乳的嬰兒配方乳中，主要的碳水化合物是乳糖。LBW嬰兒可能不能充分消化乳糖，因為直至妊娠晚期(36-40周)胎兒腸道中乳糖酶活性仍未完全發(fā)育。另一方面，蔗糖酶活性在妊娠32周達最大，而消化淀粉糖漿干粉(葡萄糖聚合物)的葡糖淀粉酶(glucosoamylase)活性在孕晚期(third trimester)與乳糖酶活性一樣快速地增加兩倍?？梢詾楸景l(fā)明的人乳組合物補充碳水化合物。可用于補充本發(fā)明人乳組合物的碳水化合物的例子包括但非限于水解的玉米淀粉、麥芽糖糊精、葡萄糖聚合物、蔗糖、玉米糖漿、淀粉糖漿干粉、大米糖漿、葡萄糖、果糖、乳糖、高果糖玉米糖漿以及難消化的寡糖如果寡糖(FOS)。
維生素和礦物質對于嬰兒的正常營養(yǎng)和發(fā)育是重要的。早產(chǎn)兒或者LBW嬰兒需要電解質如鈉、鉀和氯以維持生長和酸堿平衡。這些電解質的足夠攝取也是替代從尿液、糞便以及從皮膚喪失的電解質所需的。鈣、磷和鎂是正常骨礦化所需的。對于骨生長，在喂食食物中必須存在足夠量的這些礦物質。
微量礦物質與細胞分裂、免疫功能和生長相關。因此，嬰兒生長和發(fā)育需要為其提供足量的微量礦物質。重要的微量礦物質包括銅、鎂和鐵(其對于血紅蛋白、肌紅蛋白和含鐵酶的合成至關重要)。鋅是為生長、多種酶的活性以及DNA、RNA和蛋白質合成所需的。銅是為幾種重要酶的活性所需的。錳是為骨和軟骨的發(fā)育所需的，并且在多糖和糖蛋白的合成中至關重要。因此，可以為本發(fā)明的人乳和強化劑組合物補充維生素和礦物質。
維生素A是為生長、細胞分化、視覺和免疫系統(tǒng)所必需的一種脂溶性維生素。維生素D對于鈣的吸收以及骨的發(fā)育起重要作用，對于磷的吸收影響較小。維生素E(生育酚)防止細胞中多不飽和脂肪酸的過氧化，因此防止組織損傷。葉酸在氨基酸和核苷酸代謝中起重要作用。已經(jīng)示出在低葉酸攝取的LBW嬰兒中，血清葉酸濃度在2周齡后下降至低于正常水平。此外，一些B族維生素在早產(chǎn)兒母乳中低濃度存在。
如上所述，人乳維生素和礦物質濃度的可變性以及早產(chǎn)兒增加的需要要求最小的強化以保證發(fā)育中的嬰兒接受足夠量的維生素和礦物質。在本發(fā)明的人乳組合物和強化劑中補充的維生素和礦物質的例子包括維生素A、維生素B1、維生素B2、維生素B6、維生素B12、維生素C、維生素D、維生素E、維生素K、生物素、葉酸、泛酸、煙酸、m-肌醇、鈣、磷、鎂、鋅、錳、銅、鈉、鉀、氯、鐵和硒。也需要補充其它營養(yǎng)物質鉻、鉬、碘、?；撬?、肉堿和膽堿。
本發(fā)明提供了組合物，其包含67Kcal/dL(20卡路里每盎司)全乳產(chǎn)品、80Kcal/dL(24卡路里每盎司)全乳產(chǎn)品以及人乳強化劑。所述乳強化劑組合物包含大約20-70mg/ml蛋白質、大約35-85mg/ml脂肪、大約70-115mg/ml碳水化合物并且含有人IgA。使用本發(fā)明的方法可獲得各種熱量的組合物。所述組合物的例子是24卡路里乳組合物和強化劑乳組合物。
所述24卡路里全乳組合物包含如下成分人乳、甘油磷酸鈣、檸檬酸鉀、葡糖酸鈣、碳酸鈣、磷酸鎂、氯化鈉、檸檬酸鈉、硫酸鋅、硫酸銅以及硫酸錳。每單位份(serving)(10ml)的所述24卡路里組合物具有如下特征(注意所述數(shù)值是近似值，本領域意識到這些數(shù)值由于檢測方法、使用的機器等而可以有所不同) 卡路里 8.5 總脂肪 0.44g 鈉 2.3mg 鉀 6.3mg 總碳水化合物(Carbs.)0.79g 糖 0.64g 蛋白質 0.31g 維生素A 21.1IU 維生素C ＜0.10mg 鈣 8.0mg 鐵 13.3mcg 磷 3.8mg 鎂 0.74mg 氯 5.0mg 鋅 0.12mcg 銅 17.3mcg 錳 ＜6.2mcg 摩爾滲透壓濃度～322mOsm/Kg H2O 所述強化劑組合物包含如下成分人乳、碳酸鈣、磷酸鉀、磷酸鈣、甘油磷酸鈣、葡糖酸鈣、檸檬酸鈉、氯化鎂、氯化鈣、磷酸鎂、硫酸鋅、硫酸銅以及硫酸錳。每單位份(2ml)的所述強化劑組合物具有如下特征(注意所述數(shù)值是近似值，本領域意識到這些數(shù)值由于檢測方法、使用的機器等而可以有所不同) 卡路里 2.7 總脂肪 0.15g 鈉 1.2mg 鉀 2.3mg 總碳水化合物0.21g 糖 0.15g 蛋白質 0.10g 維生素A 5.5IU 維生素C ＜0.02mg 鈣8.9mg 鐵0.01mg 磷3.6mg 鎂0.38mg 氯0.4mg 鋅0.05mg 銅2.7mcg 錳＜1.3mcg 摩爾滲透壓濃度～343mOsm/Kg H2O(當與原乳混合時) 本發(fā)明的人乳組合物和強化劑的摩爾滲透壓濃度對于所述組合物的吸附、吸收和消化至關重要。不適當?shù)哪枬B透壓濃度可導致嬰兒腹脹和嘔吐。本發(fā)明的人乳組合物和強化劑的摩爾滲透壓濃度(一旦與原乳混合)典型低于大約400mOsm/Kg H2O。典型地，所述摩爾滲透壓濃度為大約310mOsm/Kg的水至大約380mOsm/Kg的水。在為本發(fā)明的組合物補充碳水化合物或者脂肪成分時，應該調節(jié)該組合物的摩爾滲透壓濃度。例如，成分的類型(例如碳水化合物或脂肪)影響所述強化人乳的摩爾滲透壓濃度。碳水化合物水解的越多，則滲透活性越高。另外，當與人乳重配時，由于人乳淀粉酶的進一步水解，使得部分水解的碳水化合物來源可進一步提高摩爾滲透壓濃度。本領域技術人員可容易地選擇將導致適當?shù)闹嘏涞膹娀瘎?人乳組合物的摩爾滲透壓濃度的碳水化合物或者碳水化合物組合。
所述強化劑典型地與人乳混合以增加4卡/盎司。典型地這是原乳∶強化劑的80∶20混合物(例如8ml原乳和2ml強化劑)，在下表中示作“Plus 4”。雖然任何或者所有相關比率或量的原乳與強化劑均包含在本發(fā)明中，但是其它典型的混合物包括70∶30(Plus 6)、60∶40(Plus 8)和50∶50(Plus 10)。表3示出了人原乳(例如母親自己的乳)組合本發(fā)明的人乳組合物的混合物的例子。表4示出人原乳與本發(fā)明乳組合物的混合物的熱量計算實例。
表3
表4
所述強化劑典型地置于10ml注射器或者20ml瓶子中。可以包括帶有注射器的瓶子。在注射器套件(例如注射器和瓶子)或者20ml瓶子的情況中，所述瓶子可包含刻度標記以助于正確稀釋。例如，可以檢測母親的原乳以確定該原乳的營養(yǎng)價值。典型的原乳平均包含1.1％蛋白質、4.2％脂肪、7.0％乳糖(糖)，并且提供每100克72kcal的能量?？梢詸z測母親原乳的營養(yǎng)價值，然后使用本發(fā)明的強化劑組合物調節(jié)，使母親原乳增加4卡/盎司。
“單位劑量”是指含有用于嬰兒乳制品的量的強化劑的強化劑的單獨包裝。準備用于早產(chǎn)兒的強化的人乳的量典型在每天25ml至150ml范圍內。因此，單一的單位劑量是強化8-40ml原乳制品的適量強化劑。對于較大的體積，可以加入額外的單位劑量。因此，單位劑量是2ml強化劑每8ml原乳或者10ml強化劑每40ml原乳。一方面，所述單位劑量包含10ml注射器，且可包含2ml足以制備多個乳制品的刻度標記。
典型地，制備的人乳的量是基于需要提供給嬰兒的24小時營養(yǎng)供應的乳的量。例如，1500gm的嬰兒每天喂食150ml乳。如果使用冷凍的乳，則將該冷凍的乳置于溫水浴中直至完全解凍。在強化劑中混合要特別注意。需要輕輕混合以避免破壞乳脂肪球，乳脂肪球的破壞可增加乳脂肪粘附在喂食容器的側壁上，導致脂肪(能量)顯著喪失。用注射器抽取指定量的強化乳，并用標志加以標示。當乳制品完成時，將標記的等份喂食食物交給嬰兒室，置于冰箱中以便于護理人員方便取用。典型地，在喂食之前將冷藏的強化乳加溫。例如，在干燥加熱實驗室培養(yǎng)箱中在大約35-45℃范圍內加溫大約15分鐘。這樣使得所述強化乳的溫度達到室溫?？梢詫⒃搹娀橥ㄟ^批次喂食(bolus feeding)方式或者通過注射器輸液泵持續(xù)喂食方式給予嬰兒。如果使用輸液泵，將注射器針頭垂直放置以使得脂肪持續(xù)注入，并且將注射器直接附于喂食管上以降低脂肪和免疫成分可能粘附的潛在表面積。
本發(fā)明提供了非異種的人乳及強化劑組合物并且提供了經(jīng)證實促進免疫學進展和嬰兒生長的人蛋白質。此外，本發(fā)明的人乳和強化劑組合物是充分被耐受的且使得人乳的健康益處最大化，同時解決了人乳作為能量、蛋白質、鈣、磷、鈉及其它微量營養(yǎng)物的來源的變異性。
在散裝時典型使用單獨的單位劑量規(guī)格包裝。由于在每天喂養(yǎng)期間給予早產(chǎn)兒的乳的體積較小，因此制備小體積的強化人乳。已經(jīng)重復開啟、等分和貯存的散裝容器中的無菌性在醫(yī)院環(huán)境中總是一個擔憂。單獨的單位劑量使得可以向人乳中加入少量強化劑，但是不存在污染剩余強化劑的可能性。
本領域技術人員易于獲得并已知許多類型的容器?？捎糜诒景l(fā)明的方法和組合物中的容器的類型的例子包括瓶子、注射器和罐子(例如金屬、玻璃或者塑料罐)。
如上所述，本發(fā)明還涉及為早產(chǎn)兒提供營養(yǎng)的方法，通過將本發(fā)明的強化劑加入人乳中以調節(jié)人原乳達到希望的營養(yǎng)含量，并且將此強化的人乳給予早產(chǎn)兒。本發(fā)明進一步提供了通過給予早產(chǎn)兒強化的人乳以促進早產(chǎn)兒生長的方法。
可以使用本發(fā)明的方法對得自人或牛的乳進行加工。一方面，所述乳包含初乳。典型地，所述初乳在無菌水中適當稀釋(例如與水1∶1)。
通過本發(fā)明的方法獲得的乳與原乳基本上相同，但是包含減少量的生物負荷或者無病原體如蠟狀芽孢桿菌。所得無菌乳產(chǎn)品包含生物學活性(例如包含蛋白質和抗體組合物)，然而沒有在原乳中發(fā)現(xiàn)的細菌、真菌和孢子。
獲得的脫脂乳部分無細菌、真菌和孢子。然后將過濾的脫脂乳單獨貯存或者與過濾后的脂肪部分再次組合。在脫脂乳單獨貯存的情況中，隨后可以在食用之前將其與脂肪部分再次組合?；蛘撸梢允秤迷撁撝椴糠?。所述脫脂乳和/或再次組合的乳可以長期貯存，優(yōu)選在低于室溫下貯存，更優(yōu)選在4℃貯存。
如下實施例進一步例證了本發(fā)明，但無限制本發(fā)明之意。
實施例 在Class100000凈化室中進行處理，在Class10000凈化室中進行充填?；旌瞎w乳，取樣品進行危險因子確定(例如進行PCR以確定HIV、HBV、HCV污染和感染)。通過200微米濾網(wǎng)過濾供體乳以除去塊和大的特定物質。
然后將過濾的全乳在大約63℃加熱處理30分鐘或者在大約73℃處理16秒(例如HTST)。這種熱處理用于降低生物負荷以及制備準備分離的乳。將此過濾的加熱的乳分離成脫脂乳和脂肪(乳脂)。在分離后進行的脫脂乳和乳脂的分析包括(a)脫脂乳-大約0.69％脂肪、大約1.07％蛋白質、大約7.14％乳糖；(b)乳脂-大約46％脂肪、大約2％蛋白質、大約10％乳糖。
除去大約50％的乳脂并通過分離器再次分離。這個步驟產(chǎn)生更多的脫脂乳，將增加蛋白質產(chǎn)量。來自分離器非脫脂乳側的產(chǎn)物是黃油，其可以被保留并用于其它工藝中。
將乳脂或脂肪部分加入脫脂乳中以調節(jié)所述脫脂乳含量以更好的超濾。例如，所述脫脂乳中脂肪需要是蛋白質含量的大約55％至大約65％。超濾步驟的一個目的是除去過多的水并且濃縮蛋白質。用于超濾的過濾器具有大約40kDa截斷值。水被認為是滲透物。對超濾后收集的脫脂乳進行分析，其具有大約8％蛋白質?？梢允褂脻B透物進行過濾器洗滌或者后洗滌(post wash)以回收在超濾步驟期間被捕獲在過濾器上的任何蛋白質。將后洗滌物加入濃縮的脫脂乳中以使得蛋白質含量為大約7.2％。
在加入后洗滌物之后，將乳脂加入濃縮的脫脂乳中，以使卡路里增加至正確目標。在這一點上，產(chǎn)物具有大約9.2％脂肪、大約6.3％蛋白質和大約10.5％乳糖。對Final Bulk的樣品進行礦物質分析。這是測量大批次中的礦物質。將所述Final Bulk在-20℃或更低的溫度下冷凍。當?shù)V物質結果送回實驗室時，將Final Bulk解凍?；贔inal Bulk中起始礦物質含量，計算如果有的話，要加入的任何額外礦物質的量。最終的目標是大約(a)對于低熱量含量大批產(chǎn)物(例如ProlactTM+4，也稱作Plus 4；或者ProlactTM+6，也稱作Plus 6)而言，鈣-471.6mg/dL、磷-225.2mg/dL、鈉-75mg/dL、鉀-208.1mg/dL、鎂-24.4mg/dL、氯-69.1mg/dL、鋅-3.1mg/dL、銅-0.1mg/dL以及錳-9.2μg/dL；(b)對于ProlactTM+8、也稱作Plus 8以及ProlactTM+10、也稱作Plus 10而言，鈣-235.8mg/dL、磷-112.6mg/dL、鈉-37.5mg/dL、鉀-104mg/dL、鎂-12.2mg/dL、氯-34.6mg/dL、鋅-1.6mg/dL、銅-0.05mg/dL以及錳-4.6μg/dL。將Final Bulk加熱至50℃，并且將礦物質混合入FinalBulk中。
在已經(jīng)混合礦物質之后，將該產(chǎn)物在罐中進行巴氏消毒。該罐外面加護套并且使用熱的乙二醇加熱該罐(產(chǎn)物溫度為大約67℃，空氣溫度高于產(chǎn)物溫度，為大約70℃)，將產(chǎn)物經(jīng)巴氏消毒30分鐘。使用冷卻的乙二醇在加護套的罐中使產(chǎn)物溫度降低至大約5℃。然后將該產(chǎn)物根據(jù)需要等分進可灌裝的容器中。例如，灌裝規(guī)格包括ProlactTM+4 10mL、ProlactTM+4 20mL、ProlactTM+615mL、ProlactTM+6 30mL、ProlactTM+8 20mL、ProlactTM+8 40mL、ProlactTM+10 25mL及ProlactTM+10 50mL。當進行充填時，可以隨機取瓶子檢測營養(yǎng)價值和生物負荷?？梢詸z測如下病原體總需氧計數(shù)＜10菌落形成單位/mL，蠟狀芽孢桿菌-1菌落形成單位/mL，大腸桿菌-1菌落形成單位/mL，大腸菌(Coliform)-1菌落形成單位/mL，假單胞菌-1菌落形成單位/mL，沙門氏菌-1菌落形成單位/mL，葡萄球菌-1菌落形成單位/mL，酵母-1菌落形成單位/mL，霉菌-1菌落形成單位/mL。通過上述方法產(chǎn)生的產(chǎn)物可包括如下含量對于(a)Prolact+4和Prolact+6而言，(i)總卡路里為大約1.35Cal/mL至大約1.55Cal/mL，(ii)蛋白質為大約5.5g/dL至大約6.5g/dL，(iii)脂肪為大約8.5g/dL至大約9.5g/dL，(iv)鈣為大約417.6mg/dL，(v)氯為大約69.1mg/dL，(vi)銅為大約0.1mg/dL，(vii)鎂為大約24.4mg/dL，(viii)錳為大約9.2μg/dL，(ix)磷為大約225.2mg/dL，(x)鉀為大約208.1mg/dL，(xi)鈉為大約75mg/dL以及(xii)鋅為大約3.1mg/dL；(b)對于Prolact+8和Prolact+10而言，(i)總卡路里為大約1.35Cal/mL至大約1.55Cal/mL，(ii)蛋白質為大約5.5g/dL至大約6.5g/dL，(iii)脂肪為大約8.5g/dL至大約9.5g/dL，(iv)鈣為大約208.8mg/dL，(v)氯為大約34.6mg/dL，(vi)銅為大約0.05mg/dL，(vii)鎂為大約12.2mg/dL，(viii)錳為大約4.6μg/dL，(ix)磷為大約112.6mg/dL，(x)鉀為大約104.1mg/dL，(xi)鈉為大約37.5mg/dL以及(xii)鋅為大約1.6mg/dL。
在不偏離本發(fā)明的精神和范圍的前提下，可以使用與本文所述不同的方式進行本發(fā)明的實施方案。所述實施方案因此只是例證了本發(fā)明而無限制之意，所有改變和等價物均包含在本發(fā)明的描述中。
權利要求
1.一種獲得人乳組合物的方法，包括
通過大約100-400微米過濾器過濾全乳；
在大約58-65℃熱處理該全乳大約20-40分鐘；
將該全乳分離成脫脂乳部分和脂肪部分；
通過一或多個脫脂乳過濾器過濾該脫脂乳部分以獲得滲透物部分和富集蛋白質的脫脂乳部分；
在大約90-120℃加熱脂肪部分大約1小時，足以降低脂肪部分的生物負荷；及
混合經(jīng)處理的脂肪部分的級分與富集蛋白質的脫脂乳部分以獲得人乳組合物。
2.權利要求1的方法，其中所述全乳包括混合的人乳。
3.權利要求1的方法，進一步包括在過濾前檢測所述全乳的樣品中是否存在HIV、HBV、HCV或者其任意組合。
4.權利要求1的方法，其中通過大約200微米的濾網(wǎng)對全乳進行過濾。
5.權利要求1的方法，其中對所述全乳在大約63℃熱處理大約30分鐘。
6.權利要求1的方法，其中分離后的脫脂乳部分包含大約0.69％脂肪、大約1.07％蛋白質和大約7.14％乳糖。
7.權利要求1的方法，其中分離后的脂肪部分包含大約46％脂肪、大約2％蛋白質和大約10％乳糖。
8.權利要求1或7的方法，其中所述脂肪部分被進一步加工以獲得額外的脫脂乳。
9.權利要求8的方法，其中將所述額外的脫脂乳與所述脫脂乳部分混合。
10.權利要求1的方法，進一步包括在過濾所述脫脂乳部分之前用脂肪部分調節(jié)脫脂乳部分以獲得所述脫脂乳部分中脂肪濃度為所述脫脂乳部分的蛋白質含量的大約55％至大約65％。
11.權利要求1的方法，其中所述富集蛋白質的脫脂乳部分包含大約8％的蛋白質。
12.權利要求1或11的方法，進一步包括洗滌具有滲透物的所述一或多個脫脂乳過濾器以獲得蛋白質洗滌物，并將該蛋白質洗滌物加入富集蛋白質的脫脂乳部分中。
13.權利要求1的方法，其中所述全乳是人乳。
14.權利要求1的方法，其中對所述人乳組合物進行巴氏消毒。
15.通過權利要求14的方法獲得的人乳組合物。
16.人乳組合物，其包含
大約20-70mg/ml的蛋白質成分，
大約35-85mg/ml的脂肪成分，
大約70-115mg/ml的碳水化合物成分；以及
其中所述組合物包含人IgA。
17.經(jīng)巴氏消毒的權利要求16的人乳組合物，其中所述組合物包含
50mg/ml蛋白質成分，
75mg/ml脂肪成分，及
105mg/ml碳水化合物成分。
18.經(jīng)巴氏消毒的權利要求16的人乳組合物，其中所述組合物包含
31mg/ml蛋白質成分，
44mg/ml脂肪成分，及
79mg/ml碳水化合物成分。
19.經(jīng)巴氏消毒的權利要求16的人乳組合物，其進一步包含選自維生素A、維生素C、鈣、鐵、磷、鎂、氯、鋅、銅、錳、鈉、鉀、溶菌酶、乳鐵蛋白、維生素B6及其任意組合的成分。
20.經(jīng)巴氏消毒的權利要求16的人乳組合物，其中所述人IgA包含分泌型IgA。
21.經(jīng)巴氏消毒的權利要求16的人乳組合物，其中所述IgA是大約100-600mg/ml。
22.經(jīng)巴氏消毒的權利要求16的人乳組合物，其中所述IgA是大約230mg/ml。
23.經(jīng)巴氏消毒的權利要求19的人乳組合物，其中所述溶菌酶是22000IU/ml。
24.經(jīng)巴氏消毒的權利要求19的人乳組合物，其中所述乳鐵蛋白是0.33mg/ml。
25.一種試劑盒，其包含權利要求15或16的人乳組合物及一個刻度瓶，所述刻度瓶用于混合所述人乳組合物與人原乳以獲得混合的配制品，其中所述混合的配制品與不含所述經(jīng)巴氏消毒的人乳組合物的原乳相比多包含大約4卡路里/盎司。
26.一種獲得營養(yǎng)乳組合物的方法，包括
測量人原乳的營養(yǎng)含量，
向所述原乳中加入經(jīng)巴氏消毒的權利要求15或16的人乳組合物以使得所述原乳的營養(yǎng)價值提高大約4卡路里/盎司。
27.一種為早產(chǎn)兒提供補充營養(yǎng)物的方法，包括將權利要求15或16的人乳組合物加入人乳中并且將獲得的混合人乳給予早產(chǎn)兒。
28.一種包含供體自體原乳和異體乳組合物的人乳組合物，其中所述人乳組合物包含至少大約2.1g/dL人蛋白質。
29.權利要求28的人乳組合物，其中所述人蛋白質是非凍干的人蛋白質。
30.權利要求28的人乳組合物，其中所述組合物包含大約2.1g/dL(21mg/ml)至大約3.75g/dL(37.5mg/ml)人蛋白質。
31.權利要求28的人乳組合物，其中所述組合物包含大約2.1％至大約3.75％的蛋白質。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種對乳進行滅菌但不降解或損失乳中生物活性物質的簡便有效的方法，以及通過這種方法生產(chǎn)的產(chǎn)品。
文檔編號A23C9/12GK101605470SQ200780040261
公開日2009年12月16日 申請日期2007年8月30日 優(yōu)先權日2006年8月30日
發(fā)明者E·M·梅多, A·蒙托亞, M·L·李, D·雷希特曼 申請人:普羅萊克塔生物科學公司