專利名稱：給予維生素e衍生物和制劑的動(dòng)物飼養(yǎng)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明一般涉及對飼養(yǎng)的單胃動(dòng)物，例如豬和家禽、以及魚和對蝦，給予維生素E。
維生素E或d-α-生育酚在自然界中主要存在于植物油中；外消旋形式的d，l-α-生育酚(縮寫為Tol)由不同的合成途徑最終獲得。在自然狀態(tài)下，維生素E是油性親脂液體，可以任何比例與任何疏水相或脂質(zhì)相混合。維生素E極端不穩(wěn)定且易于氧化，在其氧化狀態(tài)時(shí)可喪失生物活性。其口服給予時(shí)在動(dòng)物中的生物利用度不超過50％，因?yàn)榫S生素E快速氧化，絕大部分以氧化失活形式吸收。結(jié)果，當(dāng)口服給予時(shí)，維生素E是較穩(wěn)定的衍生物形式，通常選自酯，例如維生素E的乙酸酯和鹽。
在最接近本發(fā)明的現(xiàn)有技術(shù)以及該現(xiàn)有技術(shù)遇到的問題被解決，且本發(fā)明出現(xiàn)之前，生物利用度的定義(如本說明書其余部分所理解的那樣)如下所述。維生素E或維生素E衍生物的生物利用度表示為當(dāng)給予維生素衍生物E時(shí)，釋放入血的維生素E的濃度與給予動(dòng)物的口糧中存在的維生素E濃度所成的比例，或釋放入血的維生素E的濃度與引入動(dòng)物的口糧中的維生素E衍生物(表示為維生素E當(dāng)量)濃度所成的比例。該維生素E生物利用度的表示法因此考慮了維生素E、或維生素E衍生物在消化道小腸中的吸收。
根據(jù)T.Julianto等，International Journal of Pharmaceutics，200(2000)，第53-57頁，作者制備了維生素E的棕櫚油溶液，將該溶液在乳化劑混合物中乳化；用水稀釋該溶液后，作者然后在人體中測定這種溶液形式的維生素E的生物利用度，與以膠囊形式給予的維生素E的生物利用度進(jìn)行比較。根據(jù)作者所述，當(dāng)以上述溶液形式給予維生素E時(shí)，其生物利用度比膠囊形式給予的高3倍。考慮到非酯化形式的維生素E的不穩(wěn)定性，這種性質(zhì)的溶液不能用作食品補(bǔ)充劑。
已知許多動(dòng)物食品補(bǔ)充劑，尤其是本申請人出售的食品補(bǔ)充劑，其中以維生素E乙酸酯或d，l-α-生育酚乙酸酯(Tac)形式，在不同的支持物上，例如吸附在二氧化硅上，或以不同的物理形式，如以水包油乳劑的形式給予維生素E。
根據(jù)H.E.Gallo-Torres，Lipids(1970)，第5卷，第4篇，第379-384頁出版物，已知Tac在人或動(dòng)物體內(nèi)不是直接被吸收的，而是在胃腸道中通過胰酶即膽固醇酯水解酶(縮寫為CEH)的作用水解為維生素E，維生素E最終通過小腸壁吸收。然而，Tac只具有有限的生物利用度，例如無論是何種動(dòng)物，至多40％。
因此，本發(fā)明的目的是改善維生素E衍生物，尤其是Tac的生物利用度。
非常意外地發(fā)現(xiàn)，特定乳化劑的存在能夠顯著地提高維生素E衍生物的生物利用度，所述衍生物能水解形成維生素E的可吸收形式。乳化劑是滋養(yǎng)物，選自山梨醇和脂肪酸的非乙氧基酯。
俄國專利SU-1676572公開了一種組合物，該組合物包含維生素E乙酸酯、聚乙氧化乳化劑和乙醇。將其按比例加入家禽飲用水中，可在給定時(shí)間段內(nèi)確保維生素E的日吸收為3mg數(shù)量級。作者觀察到維生素E的可吸收性，家禽的存活率和體重增加，稍稍大于常規(guī)組合物的結(jié)果。
當(dāng)以口糧形式對飼養(yǎng)的動(dòng)物給予維生素E時(shí)，其生物利用度的問題仍然存在，因?yàn)橛靡阎M合物得到的維生素E水平太低。
申請者表明，本發(fā)明乳化劑對本發(fā)明組合物中維生素E生物利用度的作用明顯較優(yōu)，尤其是比聚乙氧化乳化劑的更優(yōu)。申請者還發(fā)現(xiàn)，所述乳化劑可促進(jìn)維生素E衍生物在胃腸道中水解成其可吸收形式，該現(xiàn)象對可生物利用的維生素E的釋放具有有益的影響。
下面將詳細(xì)描述本發(fā)明；其優(yōu)點(diǎn)將在實(shí)施例中，尤其是對比例中闡明。
根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方式，乳化劑選自長鏈脂肪酸酯，例如具有至少11個(gè)碳原子的飽和或不飽和烴鏈的脂肪酸酯。
因此，本發(fā)明首先涉及動(dòng)物飼養(yǎng)方法，給予飼養(yǎng)的單胃動(dòng)物一種維生素E衍生物的制劑，其中，在同一段時(shí)間內(nèi)保護(hù)維生素E直到它到達(dá)其吸收部位并可被高度生物利用。本發(fā)明方法是非治療方法，包括口服給予飼養(yǎng)的單胃動(dòng)物穩(wěn)定維生素E衍生物或與添加劑和/或飼料混合的穩(wěn)定維生素E衍生物，在至少一種選自山梨醇和脂肪酸的非乙氧基酯的滋養(yǎng)性乳化劑的存在下，所述衍生物水解形成維生素E的可吸收形式。
本發(fā)明脂肪酸優(yōu)選地被解釋為單羧酸，其包含具有n個(gè)碳原子的烴鏈，其中，n是0-30的整數(shù)且所述鏈?zhǔn)秋柡突虿伙柡偷?。根?jù)一個(gè)更優(yōu)選的實(shí)施方式，本發(fā)明脂肪酸有至少11個(gè)碳原子的飽和或不飽和烴鏈。
根據(jù)本發(fā)明方法，可同時(shí)或相繼給予動(dòng)物維生素E衍生物和乳化劑，例如在給予動(dòng)物維生素E衍生物之前給予乳化劑。因此，維生素E衍生物和/或乳化劑可與飼料混合。
本發(fā)明還涉及動(dòng)物營養(yǎng)的食用制劑，該制劑使得特別是實(shí)施上述方法成為可能，該制劑包含穩(wěn)定的維生素E衍生物和選自山梨醇和脂肪酸的非乙氧基酯的至少一種食用乳化劑，所述衍生物可水解形成維生素E的可吸收形式。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式，優(yōu)選使用兩種上述定義的食用乳化劑。
本發(fā)明制劑優(yōu)選滿足至少一種下述特征。
乳化劑與維生素衍生物的重量比為10/1-1/200；優(yōu)選地，為1/5-1/100。
維生素E衍生物優(yōu)選是維生素E酯，尤其是維生素E乙酸酯。
優(yōu)選的乳化劑是山梨醇酯，選自它的單月桂酸酯(SML)、它的單棕櫚酸酯(SMP)、它的單硬脂酸酯(SMS)、它的單油酸酯(SMO)和它的三硬脂酸酯。優(yōu)選的是山梨醇單油酸酯。
如下面實(shí)施例所述，優(yōu)選的本發(fā)明制劑包含維生素E乙酸酯和至少一種選自山梨醇單月桂酸酯和山梨醇單油酸酯的乳化劑。
本發(fā)明主題的另一方面是使用選自山梨醇和脂肪酸的非乙氧基酯的食用乳化劑來制備以維生素E衍生物為基的用于動(dòng)物營養(yǎng)的食用制劑，所述脂肪酸優(yōu)選為上述定義。
本發(fā)明主題的又一方面是，使用上述食用乳化劑來增加維生素E在飼養(yǎng)的單胃動(dòng)物中的生物利用度，其中所述衍生物水解形成維生素E的可吸收形式。
下面的實(shí)施例顯示了本發(fā)明乳化劑對維生素E衍生物生物利用度的影響，其優(yōu)于已知乳化劑的作用，其對維生素E衍生物水解的影響如附圖所示，其中

圖1顯示了由細(xì)胞培養(yǎng)固定的量(為維生素E當(dāng)量，納摩爾(nmol)/cm2)與培育的Tac的量(單位為納摩爾/cm2)的關(guān)系，其中所述的Tac在不存在SMO(空白柱)時(shí)和存在0.05％SMO(影線柱)時(shí)培育所述Tac。
圖2和3顯示了固定的量(為維生素E當(dāng)量)與在和Tac一起培育的乳化劑的存在或不存在及所述乳化劑的性質(zhì)的關(guān)系，黑色柱中相應(yīng)于乙酸視黃酯(retinylacetate)(Rac，內(nèi)標(biāo))、影線柱中相應(yīng)于Tac，以及空白柱中相應(yīng)于d，l-α-生育酚。根據(jù)圖2，乳化劑/維生素E當(dāng)量比為6，而在圖3中為1。
圖4顯示了Tac水解形成Tol的程度與培育時(shí)間和實(shí)施例5，5.2所述條件的關(guān)系。
圖5描述了Tac水解形成Tol的程度與培育時(shí)間和實(shí)施例5，5.1所述條件的關(guān)系。
實(shí)施例1在體外細(xì)胞系統(tǒng)中乳化劑對維生素E乙酸酯(Tac)吸收的影響在合適的細(xì)胞模型上進(jìn)行體外分析，一方面，在Tac本身的存在下，另一方面，在Tac與一種或多種本發(fā)明食用乳化劑的存在下，通過培育相應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)物，測定細(xì)胞固定的以維生素E當(dāng)量表示的Tac的量。
選擇的細(xì)胞模型是稱為CaCo-2的母細(xì)胞系，來自美國典型菌種保藏中心(ATCC)，標(biāo)記為HTB-37(under the reference HTB-37)。
根據(jù)本試驗(yàn)，將過去已鑒定細(xì)胞系的細(xì)胞培養(yǎng)物在由Tac水懸浮液構(gòu)成的膠束中培育3小時(shí)。
測定引入細(xì)胞培養(yǎng)物中膠束的量，以納摩爾的Tac/cm2表示，為4-60納摩爾/cm2。
對于引入細(xì)胞培養(yǎng)物中每個(gè)濃度的Tac，一方面，無乳化劑引入所述培養(yǎng)物中時(shí)測定，另一方面，在0.05％〔質(zhì)量/體積(m/v)〕乳化劑SMO的存在下測定細(xì)胞培養(yǎng)物固定的Tac的量(表示為nmol/cm2的維生素E當(dāng)量)，其中，將引入培養(yǎng)物中乳化劑的質(zhì)量除以引入相同培養(yǎng)物中膠束的體積得到上述百分比。
圖1顯示通過細(xì)胞培養(yǎng)固定的Tac的量(表示為nmol/cm2的維生素E當(dāng)量)與培育Tac的量(表示為nmol/cm2)之間的關(guān)系，空白柱涉及引入不含SMO的膠束，影線柱涉及引入含0.05％SMO的膠束。由圖可見，當(dāng)使用乳化劑SMO時(shí)，直到觀察終點(diǎn)，維生素E當(dāng)量的量隨培育的Tac的量而按比例增加，在最后的試驗(yàn)中，細(xì)胞固定Tac的程度增加六倍。
實(shí)施例2在體外細(xì)胞系統(tǒng)中，乳化劑對維生素E乙酸酯(Tac)吸收和對維生素E吸收的影響2.1)實(shí)驗(yàn)方案使用上述相同的細(xì)胞系，通過將該細(xì)胞在類似于小腸培養(yǎng)基的含有膽固醇酯水解酶(CEH)(一種在動(dòng)物中將Tac水解成維生素E的胰酶)和?；悄懰徕c(它代表膽汁鹽)的生理培養(yǎng)基中孵育3小時(shí)，進(jìn)行吸收試驗(yàn)。該介質(zhì)以水包油乳劑的形式，即膠束形式，以代號(hào)M20市售。將Tac和乳化劑(適當(dāng)時(shí))置于該培養(yǎng)基中。引入每孔中Tac形式的濃度(維生素E當(dāng)量)為156μM。
使用含有上述培養(yǎng)基和各自不同乳化劑的三塊六孔板(每孔面積為9.6cm2)進(jìn)行各個(gè)試驗(yàn)。這樣，每個(gè)試驗(yàn)進(jìn)行三次。
2.2)M20中加入的乳化劑與Tac(維生素E當(dāng)量)的重量比約為6根據(jù)本試驗(yàn)，引入M20培養(yǎng)基中乳化劑的濃度為0.05％(以每體積M20中乳化劑的質(zhì)量表示)，這大致相應(yīng)于M20中加入的乳化劑與Tac的重量比約為6。
使用包括孵育3小時(shí)的如下所述的方案進(jìn)行六個(gè)試驗(yàn)，每個(gè)試驗(yàn)重復(fù)三次1)M20本身，每孔2mM的M20；Tac為其本身，沒有乳化劑；2)M20+SML(山梨醇單月桂酸酯)乳化劑；3)M20+SMP(山梨醇單棕櫚酸酯)乳化劑；4)M20+ESML(聚乙氧化山梨醇單月桂酸酯)乳化劑；5)M20+156μM的Tac與156μM的d，l-α-生育酚的混合物；6)稱為Rac(乙酸視黃酯)的內(nèi)標(biāo)，以驗(yàn)證試驗(yàn)。
對于每個(gè)試驗(yàn)，表示為每孔中固定的維生素E當(dāng)量(單位納摩爾)，圖2顯示了Rac的量，黑色柱表示，細(xì)胞固定的Tac的量，影線柱表示，和水解然后固定得到的維生素E的量，空白柱表示。
如試驗(yàn)2)和3)所示，細(xì)胞培養(yǎng)物吸收的維生素E的量與M20本身吸收的量相比，增加約50％。
相反，觀察到與不含乳化劑的試驗(yàn)1)相比，試驗(yàn)4)中，乳化劑ESML(對應(yīng)于試驗(yàn)2)SML的乙氧化乳化劑)傾向于防止Tac和維生素E的吸收。
意外地發(fā)現(xiàn)乳化劑的乙氧化可抑制本發(fā)明乳化劑對Tac和維生素E吸收的有益影響。
2.3)M20中加入的乳化劑與Tac(維生素E當(dāng)量)的重量比約為1根據(jù)本試驗(yàn)，引入M20中乳化劑的濃度為0.01％(以每體積M20中乳化劑的質(zhì)量表示)，這大致相應(yīng)于M20中加入的乳化劑與Tac的重量比約為1。
使用包括孵育3小時(shí)的如下所述的方案，進(jìn)行六個(gè)試驗(yàn)，每個(gè)試驗(yàn)重復(fù)三次1)M20本身，每孔2mM的M20；代表?；悄懰徕c和Tac本身；2)M20+SML(山梨醇單月桂酸酯)乳化劑；3)M20+SMP(山梨醇單棕櫚酸酯)乳化劑；4)M20+SML乳化劑和SMP乳化劑；5)M20+SMO(山梨醇單油酸酯)乳化劑；6)內(nèi)標(biāo)即Rac，以驗(yàn)證試驗(yàn)。
對于每個(gè)試驗(yàn)，表示為每孔中固定的維生素E當(dāng)量(納摩爾)，圖3描述了Rac的量，黑色柱表示，細(xì)胞固定的Tac的量，影線柱表示，和水解然后固定得到的維生素E的量，空白柱表示。
即使在乳化劑與Tac的量為低比率時(shí)(與2.2)相比)，也可見本發(fā)明乳化劑對Tac和維生素E吸收的影響。
實(shí)施例3在體外細(xì)胞系統(tǒng)中，本發(fā)明乳化劑和相應(yīng)的乙氧化乳化劑對Tac和維生素E吸收的影響的比較3.1)實(shí)驗(yàn)方案方案的一般實(shí)驗(yàn)條件與實(shí)施例2，2.1)所示相同，但孔的面積和引入M20培養(yǎng)基中Tac的濃度不同。孔的面積為6.5cm2，Tac的濃度為23.7μM/cm2。
3.2)比較SML，SMP和ESML進(jìn)行四個(gè)實(shí)驗(yàn)，每個(gè)實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，使用包括37℃孵育1小時(shí)的方案，如下所述1)M20本身，2mM；這樣為不含乳化劑的Tac本身；2)M20+SML(山梨醇單月桂酸酯)乳化劑；3)M20+SMP(山梨醇單棕櫚酸酯)乳化劑；
4)M20+ESML(乙氧化山梨醇單月桂酸酯)。
在試驗(yàn)2)、3)和4)中，加入的乳化劑與Tac(用維生素E當(dāng)量表示)的重量比為1∶6.9。
結(jié)果如表1所示表1
根據(jù)這些結(jié)果的支持，注意到與不含乳化劑的對照試驗(yàn)1)相比，本發(fā)明乳化劑可增加Tol或Tac(以維生素E當(dāng)量表示)的吸收，對于SML，增加的因數(shù)為1.9，對于SMP，因數(shù)為1.78。
相反，觀察到與試驗(yàn)1)相比，乙氧化乳化劑(ESML)可降低維生素E的吸收，降低的因數(shù)為0.76。
3.3)比較SML/SMP和MOSE使用包括37℃孵育1小時(shí)的方案進(jìn)行四個(gè)實(shí)驗(yàn)，每個(gè)實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，如下所述1)M20本身；這樣為不含乳化劑的Tac本身；2)M20+SML(山梨醇單月桂酸酯)乳化劑；3)M20+SMP(山梨醇單棕櫚酸酯)乳化劑；4)M20+MOSE(乙氧化山梨醇單油酸酯)。
在試驗(yàn)2)、3)和4)中，加入的乳化劑與Tac(維生素E當(dāng)量)的重量比為1∶6.9。
結(jié)果如表2所示表2
根據(jù)這些結(jié)果的支持，再次注意到與不含乳化劑的對照試驗(yàn)1)相比，本發(fā)明乳化劑可增加Tol和Tac(以維生素E當(dāng)量表示)的吸收，對于SML，增加的因數(shù)為1.92，對于SMP，因數(shù)為1.81。
還觀察到與試驗(yàn)1)相比，乙氧化乳化劑(MOSE)稍稍增加維生素E的吸收。
實(shí)施例4本發(fā)明乳化劑對Tac從其支持物釋放的影響本實(shí)施例試驗(yàn)本發(fā)明乳化劑即SMO(山梨醇單油酸酯)對吸附在二氧化硅上的Tac釋放的影響。為了這一目的，二氧化硅支持物上的Tac(Tac∶二氧化硅支持物的重量比為1∶1)用于不含乳化劑的試驗(yàn)，并使用二氧化硅上的Tac+乳化劑(SMO)(Tac∶乳化劑∶二氧化硅的質(zhì)量比為50∶5∶45)。
38℃攪拌下，在不同pH條件的下述溶液中，將上述二氧化硅上的10g Tac(適當(dāng)時(shí)+SMO)(Tac的最終濃度為10mM)孵育2.5小時(shí)35mM磷酸鹽，pH6.5，0.15mM NaCl或35mM HCl/甘氨酸，pH 2.5結(jié)果如表3所示表3
在pH 2.5時(shí)，加入SMO可增加Tac從其支持物(二氧化硅)的釋放，增加的因數(shù)為1.18，即超過18％。
在pH 6.5時(shí)，該增加為1.21(即超過21％)。
實(shí)施例5本發(fā)明乳化劑對Tac體外水解為Tol的影響5.1)SMO的影響本實(shí)施例試驗(yàn)本發(fā)明乳化劑即SMO(山梨醇單油酸酯)對Tac水解為Tol的影響。為了這一目的，使用不含乳化劑的Tac進(jìn)行試驗(yàn)，并使用重量比為10∶1的Tac+SMO進(jìn)行試驗(yàn)。
38℃攪拌下，在下述溶液中，將0.5g Tac(適當(dāng)時(shí)+SMO)(Tac的最終濃度為10mM)孵育16小時(shí)35mM磷酸鹽，pH6.5，0.15mM NaCl，胰酶∶Tac的重量比為2∶1的胰酶制劑，以及膽汁鹽∶Tac的重量比為5∶1的膽汁鹽。
胰酶制劑是胰酶提取物，具體包含膽固醇酯水解酶，膽汁鹽包含CEH活化劑。
在上述條件不同的孵育時(shí)間下，測定與Tac的初始量相比維生素E的釋放度。
圖4曲線顯示了溶液中Tol水解度(用濃度表示，％w/w)與孵育時(shí)間之間的關(guān)系。
注意到，與沒有乳化劑的試驗(yàn)(◆)相比，SMO(■)可增加Tac到Tol的水解度22％(從水解曲線斜率比計(jì)算)。
5.2)SMO影響與在孵育溶液中膽汁鹽濃度的關(guān)系本試驗(yàn)研究本發(fā)明乳化劑即SMO(山梨醇單油酸酯)對Tac水解為Tol的作用。為了這一目的，包含乳化劑的試驗(yàn)使用Tac，并使用重量比為10∶1的Tac+SMO。
37℃攪拌下，在下述溶液中，將4mg Tac(適當(dāng)時(shí)+SMO)(Tac的最終濃度為8.45μM)孵育3小時(shí)35mM磷酸鹽，pH 6.5，0.15mM NaCl，2mg胰酶制劑(即胰酶∶Tac的重量比為1∶2)，以及不同濃度的膽汁鹽。
進(jìn)行以下試驗(yàn)1)不含乳化劑的Tac，含10mM膽汁鹽2)Tac+SMO，含10mM膽汁鹽3)不含乳化劑的Tac，含20mM膽汁鹽4)Tac+SMO，含20mM膽汁鹽5)不含乳化劑的Tac，含50mM膽汁鹽6)Tac+SMO，含50mM膽汁鹽上述條件下，分別在孵育前、孵育后1小時(shí)和3小時(shí)測定與Tac初始量相比維生素E的釋放度。
圖4顯示了對于每個(gè)試驗(yàn)，溶液中以濃度表示的Tol的水解度(％w/w)。
再次注意到，SMO通過激活CEH，可強(qiáng)效地增加Tac到Tol的水解度。這種增加依賴于膽汁鹽的濃度即當(dāng)膽汁鹽濃度為50mM時(shí)增加加倍，當(dāng)濃度為20mM時(shí)增加4.1，當(dāng)濃度為10mM時(shí)增加4.7。
實(shí)施例6通過乳化劑對Tac從其支持物釋放和對釋放的Tac水解為Tol的聯(lián)合影響測定得到本發(fā)明乳化劑對來自Tac的維生素E生物利用度的影響。
本實(shí)施例試驗(yàn)本發(fā)明乳化劑即SMO(山梨醇單油酸酯)的作用。為了這一目的，不含乳化劑的試驗(yàn)使用二氧化硅支持物上的Tac(Tac∶二氧化硅支持物的重量比為1∶1)，并使用二氧化硅上的Tac+乳化劑(SMO)(Tac∶SMO∶二氧化硅的重量比為50∶5∶45)。
37℃攪拌下，在下述溶液中，將上述二氧化硅上8mg Tac(適當(dāng)時(shí)+SMO)(Tac的最終濃度為16.9μM)孵育3小時(shí)35mM磷酸鹽，pH 6.5，0.15mM NaCl，胰酶制劑(2mg)和膽汁鹽(20mM)。
上述條件下，分別在孵育前、孵育后1小時(shí)和3小時(shí)，測定與Tac初始量相比、溶液中維生素E的濃度。
結(jié)果如表4所示表4
通過Tac從其二氧化硅支持物的釋放效率和通過Tac到Tol的水解效率評價(jià)，加入SMO可改善Tac的生物利用度。孵育3小時(shí)后這種增加超過90％，使得釋放增加和水解加速。
實(shí)施例7在盲腸切除(caecectomized)公雞中，乳化劑對維生素E排泄的影響對盲腸切除的公雞進(jìn)行兩系列的試驗(yàn)。第一系列包括32只公雞，第二系列包括51只公雞。通過“濕管飼法”用包含Tac(維生素E乙酸酯)或Tac與一種或多種本發(fā)明食用乳化劑(不同比例)混合的飼料喂養(yǎng)。將Tac或混合的Tac配制成明膠膠囊，使用移液槍將預(yù)定量的Tac或混合的Tac沉積于半膠囊殼中，然后蓋上另半個(gè)膠囊殼。
碗喂養(yǎng)消化后48小時(shí)，收集糞便并測定糞便中維生素的排泄。為了這一目的，用維生素E溶劑如己烷提取維生素E，然后用HPLC色譜法測定提取的量。從排泄的比例推斷得知維生素E消化的比例。
7.1)第一系列表5
觀察到，本發(fā)明方法可增加維生素E的消化率，與對照相比多達(dá)31％。
7.2)第二系列表6
類似于第一系列，可見當(dāng)根據(jù)本發(fā)明給予維生素E時(shí)，維生素E的消化率增加。這種增加可達(dá)到Tac本身消化率的40.5％。
實(shí)施例8乳化劑對維生素E衍生物水解的影響8.1)在下述條件下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)細(xì)胞模型CaCo-2細(xì)胞孔的面積6.5cm2Tac的量67nmol/cm2
采用的溶液M40膠束，如Mathias等(Mathias，P.M.，Harries，J.T.，Muller，D.P.R.(1981)使用良好鑒定的膽固醇油酸酯和生育酚乙酸酯膠束溶液進(jìn)行優(yōu)化和驗(yàn)證試驗(yàn)以評價(jià)胰酶酯活性。參見Lipid Research 22，177-184)所述，與1.34nmol膽固醇酯水解酶(EC3.1.1.13)/cm2有關(guān)。
處理A不含乳化劑B含乳化劑(SML+SMS混合物，比率1/1)，Tac/乳化劑比率100/1C含乳化劑(SMP+SMO混合物，比率1/1)，Tac/乳化劑比率100/1孵育時(shí)間37℃1小時(shí)分析分析介質(zhì)中的Tac，計(jì)算水解度。
結(jié)果如表7所示表7
根據(jù)該表，乳化劑的存在使Tac的水解加倍。本發(fā)明乳化劑改善膽固醇酯水解酶的水解條件。
8.2)在下述條件下進(jìn)行試驗(yàn)細(xì)胞模型CaCo-2細(xì)胞孔的面積4.2cm2Tac的量67nmol/cm2采用的溶液如Mathias等所述的M40膠束處理A不含乳化劑B含乳化劑(SMP+SMO混合物，比率1/1)，Tac/乳化劑比率100/1孵育時(shí)間37℃ 2小時(shí)分析分析上述細(xì)胞介質(zhì)中的Tac，計(jì)算水解度。結(jié)果如表8所示表8
乳化劑的存在改善Tac的水解44％。如8.1)所述，乳化劑改善膽固醇酯水解酶的水解條件。
權(quán)利要求
1.一種非治療性動(dòng)物飼養(yǎng)方法，所述方法包括對單胃動(dòng)物口服給予穩(wěn)定的維生素E衍生物或與添加劑和/或飼料混合的穩(wěn)定的維生素E衍生物，所述衍生物可水解形成維生素E的可吸收形式，其特征在于，在至少一種選自山梨醇或脂肪酸的非乙氧基酯的食用乳化劑存在下，給予動(dòng)物所述維生素E衍生物。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，同時(shí)給予動(dòng)物所述維生素E衍生物和所述至少一種乳化劑。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，在給予動(dòng)物維生素E衍生物之前給予動(dòng)物所述乳化劑。
4.如權(quán)利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述維生素E衍生物和/或所述至少一種乳化劑與飼料混合。
5.如權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述至少一種乳化劑選自山梨醇酯和具有至少11個(gè)碳原子的飽和或不飽和烴鏈的脂肪酸酯。
6.一種動(dòng)物營養(yǎng)用食用制劑，所述制劑包含穩(wěn)定的維生素E衍生物，所述衍生物可水解形成維生素E的可吸收形式，其特征在于，所述制劑還包含至少一種選自山梨醇非乙氧基酯的食用乳化劑。
7.如權(quán)利要求6所述的制劑，其特征在于，所述制劑包含兩種選自山梨醇和脂肪酸的非乙氧基酯的食用乳化劑。
8.如權(quán)利要求6或7所述的制劑，其特征在于，所述乳化劑與所述維生素E衍生物的重量比為10/1到1/200。
9.如權(quán)利要求8所述的制劑，其特征在于，所述乳化劑與所述維生素E衍生物的重量比為1/5到1/100。
10.如權(quán)利要求6-9中任一項(xiàng)所述的制劑，其特征在于，所述至少一種乳化劑選自山梨醇酯和具有至少11個(gè)碳原子的飽和或不飽和烴鏈的脂肪酸酯。
11.如權(quán)利要求6-10中任一項(xiàng)所述的制劑，其特征在于，所述維生素E衍生物是維生素E酯。
12.如權(quán)利要求11所述的制劑，其特征在于，所述維生素E衍生物是維生素E乙酸酯。
13.如權(quán)利要求6-12中任一項(xiàng)所述的制劑，其特征在于，所述至少一種乳化劑是選自單月桂酸酯、單棕櫚酸酯、單硬脂酸酯、單油酸酯和三硬脂酸酯的山梨醇酯。
14.如權(quán)利要求6-13中任一項(xiàng)所述的制劑，其特征在于，所述制劑包含維生素E乙酸酯和至少一種選自山梨醇單月桂酸酯和山梨醇單油酸酯的乳化劑。
15.選自山梨醇和脂肪酸的非乙氧基酯的食用乳化劑在制備基于維生素E衍生物的動(dòng)物營養(yǎng)用食用制劑中的應(yīng)用。
16.選自山梨醇和脂肪酸的非乙氧基酯的食用乳化劑與穩(wěn)定的維生素E衍生物的組合在增加飼養(yǎng)的單胃動(dòng)物中維生素E生物利用度中的應(yīng)用，所述衍生物水解形成維生素E的可吸收形式。
全文摘要
本發(fā)明提供了非治療性的動(dòng)物飼養(yǎng)方法，包括對單胃動(dòng)物口服給予穩(wěn)定的維生素E衍生物或與添加劑和/或飼料混合的穩(wěn)定的維生素E衍生物，所述衍生物可水解形成維生素E的可吸收形式，在至少一種選自山梨醇或脂肪酸的非乙氧基酯的食用乳化劑的存在下，給予動(dòng)物所述維生素E衍生物。本發(fā)明還涉及一種制劑，該制劑包含穩(wěn)定的維生素E衍生物和至少一種所述食用乳化劑，本發(fā)明還涉及食用乳化劑在動(dòng)物營養(yǎng)中的應(yīng)用。
文檔編號(hào)A23L1/302GK1870904SQ200480031328
公開日2006年11月29日 申請日期2004年10月22日 優(yōu)先權(quán)日2003年10月22日
發(fā)明者S·M·雅各布, P·-A·熱拉爾 申請人:安迪蘇法國聯(lián)合股份有限公司