一種洋桔梗開放式組織培養(yǎng)基及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種洋桔梗開放式組織培養(yǎng)基及其制備方法,按1L培養(yǎng)基重量計,所述培養(yǎng)基包括以下組分:蔗糖25?35g,瓊脂6?12g,大蒜粗提液80?120 ml,大量元素4090mg,CaCl2·2H2O 440 mg,微量元素38.23mg;細胞分裂素1mg,鐵鹽65.1mg;有機物3.1mg;肌酸100mg。本發(fā)明培養(yǎng)基使用時無需高壓滅菌,同時也無需嚴格的無菌操作即能實現(xiàn)植物在相對開放的條件下良好生長,大大降低成本,有利于將植物組織培養(yǎng)技術的應用與推廣。
【專利說明】
一種洋桔梗開放式組織培養(yǎng)基及其制備方法
技術領域
[0001]本發(fā)明涉及組培技術領域,尤其涉及一種洋桔梗開放式組織培養(yǎng)基及其制備方法。
【背景技術】
[0002]由于傳統(tǒng)的植物組織培養(yǎng)需要在嚴格的無菌環(huán)境條件下進行操作,對工作條件要求苛刻,操作不容易掌控,需要投入大量的人力、物力,且傳統(tǒng)組培苗存在生長緩慢,污染嚴重,存活率低等問題,使得植物組織培養(yǎng)在實際的工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中難以得到廣泛應用與推廣。目前興起的開放式組織培養(yǎng)則是通過專門配置的培養(yǎng)基來使組培植物在抑菌環(huán)境下生長,使植物在相對開放的條件下可以良好生長。既能夠降低成本,又利于將植物組織培養(yǎng)技術應用與推廣到工廠化育苗生產(chǎn)實踐中,本發(fā)明即是開發(fā)的專門針對洋桔梗開放式組培液。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]鑒于現(xiàn)有技術的不足,本發(fā)明在于提供一種洋桔梗開放式組織培養(yǎng)基及其制備方法,用以實現(xiàn)洋桔梗的開放式組織培養(yǎng)方法。
[0004]本發(fā)明的技術方案如下:
一種洋桔梗開放式組織培養(yǎng)基,其中,按IL培養(yǎng)基重量計,所述培養(yǎng)基包括以下組分: 鹿糖25-35g;
瓊脂6-12g;
大蒜粗提液 80-120 ml;
細胞分裂素 Img ;
萘乙酸0.5mg;
KNO31900mg;
NH4NO31650mg;
MgSO4.7H20 370mg;
KH2PO4170mg;
CaCl2.2H20 440mg;
MnSO4.4H20 22.3mg;
ZnSCU.7H2O 8.6mg ;
H3BO36.2mg ;
KI0.83mg;
Na2MoC>4.7H2O 0.25mg;
CoCL2.6H2O 0.025mg;
CuSO4.5H20 0.025mg;
鐵鹽65.lmg;
有機物3.lmg; 肌酸10mg;
其中,大蒜粗提物濃度為3g/ml。
[0005]所述的洋桔梗開放式組織培養(yǎng)基,其中,按IL培養(yǎng)基重量計,所述培養(yǎng)基包括以下組分:
鹿糖30g;
瓊脂9g;
大蒜粗提液 100 ml ;
細胞分裂素 Img ;
萘乙酸0.5mg;
KNO31900mg;
NH4N031650mg;
MgSO4.7H20 370mg;
KH2PO4170mg;
CaCl2.2H20 440mg;
MnSO4.4H20 22.3mg;
ZnS04.7H2O 8.6mg;
H3BO36.2mg ;
KI0.83mg;
Na2Mo04.7H2O 0.25mg;
CoCL2.6H2O 0.025mg;
CuSO4.5H20 0.025mg;
鐵鹽65.lmg;
有機物3.lmg;
肌酸10mg;
其中,大蒜粗提物濃度為3g/ml。
[0006]所述的洋桔梗開放式組織培養(yǎng)基,其中,按IL培養(yǎng)基重量計,所述鐵鹽由以下組分組成:
Na2~EDTA 37.3mg;
FeSO4.4H20 27.8mg0
[0007]所述的洋桔梗開放式組織培養(yǎng)基,其中,按IL培養(yǎng)基重量計,所述有機物由以下組分組成:
甘氨酸2mg;
鹽酸吡哆醇VB6 0.5mg;
鹽酸硫銨素VB1 0.lmg;
煙酸0.5mg。
[0008]所述的洋桔梗開放式組織培養(yǎng)基,其中,所述大蒜粗提物通過如下過程制備:取去皮大蒜,剁碎后加適量70%乙醇,用榨汁機榨取蒜汁,然后通過2層紗布過濾,取濾液,將濾液通過40001'/111;[11離心機離心8111;[11,取上清液,用70%乙醇定容至1001111,得到3.(^/111]^的大蒜粗提液,于4°C保存。
[0009]—種如上所述的洋桔梗開放式組織培養(yǎng)基的制備方法,其中,所述方法為:將除蔗糖、瓊脂、大蒜粗提物之外的組分按照預定分量稱取并混合,使用0.5mol/L鹽酸溶液和
0.5mol/L氫氧化鈉溶液將培養(yǎng)基液調(diào)PH5.8-5.9,按比例稱取加入蔗糖、瓊脂后加熱煮融混勻,待培養(yǎng)基冷卻至50°C時加入大蒜粗提物,制得所需培養(yǎng)基。
[0010]有益效果:本發(fā)明提供一種洋桔梗開放式組織培養(yǎng)基及其制備方法,該培養(yǎng)基使用時無需高壓滅菌,同時也無需嚴格的無菌操作即能實現(xiàn)植物在相對開放的條件下良好生長,大大降低成本,有利于將植物組織培養(yǎng)技術的應用與推廣。
【具體實施方式】
[0011]本發(fā)明提供一種洋桔梗開放式組織培養(yǎng)基及其制備方法,為使本發(fā)明的目的、技術方案及效果更加清楚、明確,以下對本發(fā)明進一步詳細說明。應當理解,此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發(fā)明,并不用于限定本發(fā)明。
[0012]本發(fā)明的洋桔梗開放式組織培養(yǎng)基,其中,按IL培養(yǎng)基重量計,所述培養(yǎng)基包括以下組分:
鹿糖25-35g;
瓊脂6-12g;
大蒜粗提液 80-120 ml;
細胞分裂素 Img ;
萘乙酸0.5mg;
KNO31900mg;
NH4NO31650mg;
MgSO4.7H20 370mg;
KH2PO4170mg;
CaCl2.2H20 440g;
MnSO4.4H20 22.3mg;
ZnSCU.7H2O 8.6mg ;
H3BO36.2mg ;
KI0.83mg;
Na2Mo04.7H2O 0.25mg;
CoCL2.6H2O 0.025mg;
CuSO4.5H20 0.025mg;
鐵鹽65.lmg;
有機物3.lmg;
肌酸10mg;
其中,大蒜粗提物濃度為3g/ml ο
[0013]較佳實施例中,按IL培養(yǎng)基重量計,所述培養(yǎng)基包括以下組分:
庶糖30g;
瓊脂9g;
大蒜粗提液 100 ml; 細胞分裂素 Img ;
萘乙酸0.5mg;
KNO31900mg;
NH4N031650mg;
MgSO4.7H20 370mg;
KH2PO4170mg;
CaCl2.2H20 440g;
MnSO4.4H20 22.3mg;
ZnS04.7H2O8.6mg;
H3BO36.2mg ;
KI0.83mg;
Na2Mo04.7H2O 0.25mg;
CoCL2.6H2O 0.025mg;
CuSO4.5H20 0.025mg;
鐵鹽65.lmg;
有機物3.lmg;
肌酸10mg;
其中,大蒜粗提物濃度為3g/ml ο而所述鐵鹽由以下組分組成:
Na2~EDTA37.3mg;
FeSO4.4H20 27.8mg0
[0014]進一步地,所述有機物由以下組分組成:
甘氨酸2mg;
鹽酸吡哆醇VB6 0.5mg;
鹽酸硫銨素VB1 0.lmg;
煙酸0.5mg。
[0015]具體實施例中,所述大蒜粗提物通過如下過程制備:取去皮大蒜,剎碎后加適量70%乙醇,用榨汁機榨取蒜汁,然后通過2層紗布過濾,取濾液,將濾液通過4000r/min離心機離心8min,取上清液,用70%乙醇定容至10ml,得到3.0g/mL的大蒜粗提液,于4°C保存。
[0016]本發(fā)明還提供一種如上所述的洋桔梗開放式組織培養(yǎng)基的制備方法,其中,所述方法為:將除蔗糖、瓊脂、大蒜粗提物之外的組分按照預定分量稱取并混合,使用0.5mol/L鹽酸溶液和0.5mol/L氫氧化鈉溶液將培養(yǎng)基液調(diào)PH5.8-5.9,按比例稱取加入蔗糖、瓊脂后加熱煮融混勻,待培養(yǎng)基冷卻至50°C時加入大蒜粗提物,制得所需培養(yǎng)基。
[0017]本發(fā)明提供一種洋桔梗開放式組織培養(yǎng)基及其制備方法,該培養(yǎng)基使用時無需高壓滅菌,同時也無需嚴格的無菌操作即能實現(xiàn)植物在相對開放的條件下良好生長,大大降低成本,有利于將植物組織培養(yǎng)技術的應用與推廣。
[0018]應當理解的是,本發(fā)明的應用不限于上述的舉例,對本領域普通技術人員來說,可以根據(jù)上述說明加以改進或變換,所有這些改進和變換都應屬于本發(fā)明所附權(quán)利要求的保護范圍。
【主權(quán)項】
1.一種洋桔梗開放式組織培養(yǎng)基,其特征在于,按IL培養(yǎng)基重量計,所述培養(yǎng)基包括以下組分: 鹿糖25-35g; 瓊脂6-12g; 大蒜粗提液80-120 ml; 細胞分裂素Img; 萘乙酸0.5mg; KNO31900mg; NH4NO31650mg; MgSO4.7H20370mg; KH2PO4170mg; CaCl2.2H20440mg; MnSO4.4H2022.3mg; ZnSCU.7H2O8.6mg; H3BO36.2mg ; KI0.83mg; Na2Mo04.7H2O0.25mg; CoCL2.6H2O0.025mg; CuSO4.5H200.025mg; 鐵鹽65.1mg; 有機物3.1mg; 肌酸10mg; 其中,大蒜粗提物濃度為3g/ml ο2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的洋桔梗開放式組織培養(yǎng)基,其特征在于,按IL培養(yǎng)基重量計,所述培養(yǎng)基包括以下組分: 庶糖30g; 瓊脂9g; 大蒜粗提液100 ml; 細胞分裂素Img; 萘乙酸0.5mg; KNO31900mg; NH4N0s1650mg; MgSO4.7H20370mg; KH2PO4170mg; CaCl2.2H20440mg; MnSO4.4H2022.3mg; ZnSCU.7H2O8.6mg; H3BO36.2mg ; KI0.83mg; Na2Mo04.7H2O 0.25mg; CoCL2.6H2O 0.025mg; CuSO4.5H20 0.025mg; 鐵鹽65.1mg; 有機物3.1mg ; 肌酸10mg; 其中,大蒜粗提物濃度為3g/ml。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的洋桔梗開放式組織培養(yǎng)基,其特征在于,按IL培養(yǎng)基重量計,所述鐵鹽由以下組分組成: Na2~EDTA37.3mg; FeSO4.4H20 27.8mg04.根據(jù)權(quán)利要求2所述的洋桔梗開放式組織培養(yǎng)基,其特征在于,按IL培養(yǎng)基重量計,所述有機物由以下組分組成: 甘氨酸2mg; 鹽酸吡哆醇VB6 0.5mg; 鹽酸硫銨素VB1 0.lmg; 煙酸0.5mg。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的洋桔梗開放式組織培養(yǎng)基,其特征在于,所述大蒜粗提物通過如下過程制備:取去皮大蒜,剁碎后加適量70%乙醇,用榨汁機榨取蒜汁,然后通過2層紗布過濾,取濾液,將濾液通過4000r/min離心機離心8min,取上清液,用70%乙醇定容至10ml,得到3.0g/mL的大蒜粗提液,于4°C保存。6.—種如權(quán)利要求1-5任一項所述的洋桔梗開放式組織培養(yǎng)基的制備方法,其特征在于,所述方法為:將除蔗糖、瓊脂、大蒜粗提物之外的組分按照預定分量稱取并混合,使用0.5mol/L鹽酸溶液和0.5mol/L氫氧化鈉溶液將培養(yǎng)基液調(diào)PH5.8-5.9,按比例稱取加入蔗糖、瓊脂后加熱煮融混勻,待培養(yǎng)基冷卻至50°C時加入大蒜粗提物,制得所需培養(yǎng)基。
【文檔編號】A01H4/00GK105850744SQ201610309908
【公開日】2016年8月17日
【申請日】2016年5月11日
【發(fā)明人】周權(quán)駒, 許桂蓮, 陳春曉, 楊泉女, 王蘊波
【申請人】佛山科學技術學院