荷葉離褶傘菌株Finc-L6及其栽培方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于食用菌技術(shù)領(lǐng)域，具體設(shè)及荷葉離權(quán)傘Finc-L6菌株及其栽培方法和 應(yīng)用。
【背景技術(shù)】 陽00引荷葉離權(quán)傘（拉下文名稱Lyophyllumdecastes)，隸屬擔(dān)子菌亞口 度asidiomycotina)、層菌綱化ymeno-myceyes)、傘菌目（Agaricales)、白磨科 燈richolomataceae)、離權(quán)傘屬化yo地ylhim)，是國內(nèi)外食用菌界競相研究培育的優(yōu)良食 用菌。荷葉離權(quán)傘菌肉肥厚細膩、清香撲鼻、口感脆滑、味道鮮美、營養(yǎng)豐富，并且在對人體 細胞的修復(fù)作用和在治療屯、血管性疾病、抗衰老等方面已顯示出極大的優(yōu)越性，是一種食 藥兼用的名貴食用菌，其食藥用價值被越來越多的人所接受和認可，未來具有廣闊的市場 前景。
[0003] 食用菌的常規(guī)育種方法主要包括選擇育種、雜交育種、誘變育種和原生質(zhì)體融合 育種。選擇育種是指人工定向選擇自然條件下發(fā)生的有益變異，通過長期去劣存優(yōu)逐步選 育出新品種的方法。雜交育種是指種內(nèi)不同品種間進行雜交，使遺傳基因重新組合，并在雜 交后代中篩選出優(yōu)良新品種的方法。雜交育種的方向性和目的性都比較明確，與選擇育種 相比，育種周期短并且收效顯著。
[0004] 迄今為止，荷葉離權(quán)傘新品種主要W野生馴化即選擇育種方法獲得，但是，由于過 度的采摘，野生的荷葉離權(quán)傘已經(jīng)少之又少，選擇育種愈加困難。而目前的荷葉離權(quán)傘品種 單產(chǎn)還較低，另外，如果希望獲得較長的保鮮期則需要大大延長培養(yǎng)周期，對于工業(yè)化生產(chǎn) 市場化供應(yīng)來說是一大缺陷。

【發(fā)明內(nèi)容】
陽0化]本發(fā)明提供了一種荷葉離權(quán)傘菌株Finc-L6及其栽培方法和應(yīng)用，用W解決目前 菌株單產(chǎn)低，保鮮期短，無法滿足工廠化栽培及大批量市場供應(yīng)的要求。
[0006] 本發(fā)明提供的荷葉離權(quán)傘菌株名稱為Finc-L6,其是通過菌株Finc-LD-2和菌株 Finc-LD-3作為親本雜交，經(jīng)系統(tǒng)選育獲得，屬于荷葉離權(quán)傘化7〇地如111111decastes)，保藏 于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中屯、，地址：中國北京市朝陽區(qū)北辰西路1 號院3號，保藏編號為CGMCCNo. 11201，保藏日期為2015年8月13日。
[0007] 其中荷葉離權(quán)傘菌株Finc-LD-2已在中國專利CN103202175A中公開，保藏于中國 典型培養(yǎng)物保藏中屯、，地址：中國武漢市武漢大學(xué)，保藏編號為CCTCCNo.M2013006。
[0008] 荷葉離權(quán)傘菌株Finc-LD-3已在中國專利CN103210849A中公開，保藏于保藏于中 國典型培養(yǎng)物保藏中屯、，地址：中國武漢市武漢大學(xué)，保藏編號為CCTCCNo.M2013007。
[0009] 培養(yǎng)所述荷葉離權(quán)傘Finc-L6得到的抱子也屬于本發(fā)明的保護范圍。
[0010] 所述荷葉離權(quán)傘Finc-L6作為親本進行雜交育種中的應(yīng)用也屬于本發(fā)明的保護 范圍。
[0011] 培養(yǎng)所述荷葉離權(quán)傘Finc-L6得到的菌絲體也屬于本發(fā)明的保護范圍。
[0012] 栽培所述荷葉離權(quán)傘Finc-L6得到的子實體也屬于本發(fā)明的保護范圍。
[0013] 本發(fā)明還提供了所述荷葉離權(quán)傘Finc-L6的子實體的一種栽培方法，包括如下步 驟：
[0014] 1)接種與發(fā)菌：將所述荷葉離權(quán)傘Finc-L6的栽培種接入栽培種培養(yǎng)基，在溫度 23~28°C，空氣相對濕度75%，二氧化碳濃度2000~3500ppm條件下培養(yǎng)50~55天； 陽01引。子實體原基形成：出茹溫度設(shè)定為15°C~18°C，空氣相對濕度93 %~100%， 二氧化碳濃度1000~2000ppm，前6天，光照強度10~50LUX，之后光照強度200~300LUX， 每天間隙式開啟層架燈刺激出茹，茹蓋接近成熟時采收。
[0016] 優(yōu)選地是，步驟1)中，所述栽培種培養(yǎng)基按重量百分比計，包括34-36%的栽培 種培養(yǎng)料和64~66%的水，所述栽培種培養(yǎng)料包括木屑20%、玉米忍15%、森林腐殖質(zhì) 40%、米慷10%、教皮5%和玉米粉10%。
[0017] 本發(fā)明所述荷葉離權(quán)傘Finc-L6的形態(tài)特征如下：
[0018] 菌絲：白色，氣生菌絲發(fā)達，菌絲致密，菌落邊緣圓整；
[0019] 菌蓋：直徑為3 + 1. 8cm，顏色為黃褐色，菌蓋邊緣有一圈灰白色圓圈狀環(huán)紋，斷面 呈圓山型，菌蓋表面有細小絨毛，質(zhì)地脆嫩；
[0020] 菌權(quán)：乳白色、筆直排列；抱子印顏色為白色；
[0021] 菌柄：長度為6-15畑1，中粗、菌柄上部淺黃色，下部乳白色，靠近菌蓋處的菌柄內(nèi) 部致密緊實，遠離菌蓋處菌柄中空，菌柄有鱗片，主要著生在靠近菌蓋的中上部，呈星點狀 分布，菌柄簇生。
[0022] 通過對其子實體、菌絲體及抱子形態(tài)特征的觀察，判斷該菌株的生物學(xué)分類命名。
[0023] 所述荷葉離權(quán)傘Finc-L6的子實體在食品加工中的應(yīng)用也屬于本發(fā)明的保護范 圍。
[0024] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明荷葉離權(quán)傘菌株Finc-L6具有W下優(yōu)點：
[00巧](1)子實體培養(yǎng)和栽培周期短，單產(chǎn)高，大大提高了生產(chǎn)效率，降低了生產(chǎn)成本； [00%] (2)單株之間W及單株內(nèi)單根子實體之間的外觀均一度高，有利于機械化和自動 化作業(yè)；
[0027] (3)有效莖重量比例局達95%W上，大幅提局了廣品的可食率；
[0028] (4)采收周期集中，適宜大面積推廣種植；
[0029] (5)保鮮期長，有利于存儲；
[0030] (6)目前荷葉離權(quán)傘種植資源稀缺，本發(fā)明提供的菌株綜合特性優(yōu)良，可W作為重 要親本從而培育出更多性能優(yōu)良的菌株，豐富荷葉離權(quán)傘種類。
[0031]綜上所述，本發(fā)明提供的技術(shù)方案，填補了荷葉離權(quán)傘雜交育種的空白，并且獲得 的新菌株具有栽培周期短出茹時間較為集中，單產(chǎn)高，朵型優(yōu)美，保鮮期長，非常適合于大 面積推廣種植，市場前景廣闊。
【附圖說明】
[0032] 圖1是實施例2中荷葉離權(quán)傘Finc-L6和Finc-LD-1的括抗試驗正面圖；
[0033]圖2是實施例2中荷葉離權(quán)傘Finc-L6和Finc-LD-1的括抗試驗背面圖；
[0034] 圖3是實施例2中荷葉離權(quán)傘Finc-L6和Finc-LD-2的括抗試驗正面圖；
[0035] 圖4是實施例2中荷葉離權(quán)傘Finc-L6和Finc-LD-2的括抗試驗背面圖；
[0036] 圖5是實施例2中荷葉離權(quán)傘Finc-L6和Finc-LD-3的括抗試驗正面圖；
[0037] 圖6是實施例2中荷葉離權(quán)傘Finc-L6和Finc-LD-3的括抗試驗背面圖； 陽03引圖7是實施例2中荷葉離權(quán)傘Finc-L6和Finc-LD-4的括抗試驗正面圖；
[0039] 圖8是實施例2中荷葉離權(quán)傘Finc-L6和Finc-LD-4的括抗試驗背面圖；
[0040] 圖9本發(fā)明所述荷葉離權(quán)傘Finc-L6栽培的子實體照片；
[0041] 圖10本發(fā)明所述荷葉離權(quán)傘Finc-LD-1栽培的子實體照片；
[0042] 圖11本發(fā)明所述荷葉離權(quán)傘Finc-LD-2栽培的子實體照片；
[0043] 圖12本發(fā)明所述荷葉離權(quán)傘Finc-LD-3栽培的子實體照片；
[0044] 圖13本發(fā)明所述荷葉離權(quán)傘Finc-LD-4栽培的子實體照片。
[0045] 圖中所示：
[0046]l-Finc_L6、2-Finc-LD-l、3-Finc-LD_2，4-Finc-LD_3，5-Finc-LD_4。
【具體實施方式】
[0047] 下述實施例中所使用的試驗方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。
[0048] 下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。
[0049]W下實施例中的Finc-LD-1、Finc-LD-2、Finc-LD-3 和Finc-LD-4 菌株是上海豐科 生物科技股份有限公司自主馴化的菌株，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中屯、，F(xiàn)inc-LD-l菌 株保藏號CCTCCN0:M2013005 ;Finc-LD-2菌株保藏號CCTCCN0:M2013006 ;Finc-LD-3菌株 保藏號CCTCCN0:M2013007;Finc-LD-4 菌株保藏號CCTCCN0:M2013008。
[0050] 下述實施例所用各種培養(yǎng)基的配方如下：
[0051] 母種培養(yǎng)基（PDA培養(yǎng)基）：每1L培養(yǎng)基用馬鈴馨200g，葡萄糖20g，瓊脂20g ;
[0052] 原種培養(yǎng)基：按重量百分比計包括38-40 %的原種培養(yǎng)料和60%~62%的水，所 述原種培養(yǎng)料按重量百分比計包括木屑50%、米慷25%、教皮15%和玉米粉10%。
[0053] 栽培種培養(yǎng)基：按重量百分比計包括34-36 %的栽培種培養(yǎng)料和64 %~66 %的 水，所述栽培種培養(yǎng)料按重量百分比計包括木屑20%、玉米忍15%、森林腐殖質(zhì)40%、米慷 10%、教皮5%和玉米粉10%。
[0054] 實施例1雜交獲得Finc-L6 陽化日]采用雜交育種方法獲取荷葉離權(quán)傘菌株Finc-L6。
[0056] 具體步驟如下：
[0057]1)選擇親本菌株：選取由上海豐科生物科技股份有限公司通過野生馴化的菌株 Finc-LD-2和Finc-LD-3為親本；
[0058]2)配制母種培養(yǎng)基、原種培養(yǎng)基和栽培種培養(yǎng)基：各培養(yǎng)基配方已經(jīng)給出，在此 不再寶述；
[0059] 3)擔(dān)抱子的分離：將Finc-LD-2和Finc-LD-3的菌蓋分別置于培養(yǎng)皿中，24小 時后，收集落在培養(yǎng)皿中的抱子，在無菌水中稀釋成適當(dāng)?shù)臐舛龋⑼坎荚赑DA培養(yǎng)基平板 上。在23°C下培養(yǎng)25天，待抱子萌發(fā)后用接種環(huán)分別接種到PDA斜面試管上。將運些試 管在23°C下培養(yǎng)25天，然后從所述的試管中分離出菌絲，并在顯微鏡下觀察鎖狀聯(lián)合的形 成。將沒有鎖狀聯(lián)合的菌株儲存在冰箱中備用；
[0060] 4)雜交：將一個單核體和另一個單核體彼此相隔2. 5cm接種到新鮮的馬鈴馨瓊脂 板中，然后在恒溫培養(yǎng)箱中23°C下培養(yǎng)20天。分離菌絲并通過顯微鏡觀察W確定鎖狀聯(lián)合 的形成，選擇具有鎖狀聯(lián)合的菌株。通過所述單單雜交的方法獲得雜合子300個；
[0061] 5)把獲得的雜合子根據(jù)常規(guī)的方法進行栽培試驗和篩選；
[0062] 6)獲得目標(biāo)菌株：通過系統(tǒng)篩選，從300個雜合子中，獲得一個荷葉離權(quán)傘菌株， 培養(yǎng)及栽培周期短，單產(chǎn)高，朵型優(yōu)美，瘤蓋茹出現(xiàn)率低，可食率高，保鮮期長，該菌株被命 名為Finc-L6。
[0063] 實施例2括抗實驗
[0064] 本發(fā)明Finc-L6和2個親本菌株Finc-LD-2、Finc-LD-3W及2株對照菌株 Finc-LD-3,Finc-LD-4為試驗材料，所用培養(yǎng)基為PDA培養(yǎng)基。 陽0化]Finc-L6 和Finc-LD-l，F(xiàn)inc-LD-2，F(xiàn)inc-LD-3,Finc-LD-4 在平板培養(yǎng)基上分別對 時接種和抬養(yǎng)，接種點相距2. 5cm, 23Ct旦溫抬養(yǎng)25天,本試驗結(jié)果請參閱表1。
[0066] 表1不同荷葉離權(quán)傘菌株間括抗試驗
[0067]
[0068] 如圖1-8所示，在對時培養(yǎng)菌落交界處，F(xiàn)inc-L6和Finc-LD-1，F(xiàn)inc-LD-2， Finc-LD-3,Finc-LD-4 之間有明顯括抗線，說明Finc-L6 是與Finc-LD-1，F(xiàn)inc-LD-2， Finc-LD-3,Finc-LD-4不同的荷葉離權(quán)傘菌株。
[0069] 實施例3栽培實驗
[0070] 本發(fā)明荷葉離權(quán)傘菌株Finc-L6、與親本菌株Finc-LD-2和Finc-LD-3,W及現(xiàn)有 品種Finc-LD-1，F(xiàn)inc-LD-4分別進行培養(yǎng)和栽培，每個