一種以小分子水為原料生產(chǎn)富微藥用菌菌絲體的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種以小分子水為原料生產(chǎn)富微藥用菌菌絲體的方法，該方法包括：(1)將菌株轉(zhuǎn)接于斜面培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)、活化，得到斜面菌種；(2)將斜面菌種制成孢子懸液，接于液體培養(yǎng)基中，搖瓶培養(yǎng)，得到液體菌種；(3)發(fā)酵培養(yǎng)基高溫滅菌后冷卻，再將液體菌種接入，搖瓶培養(yǎng)，得到含菌絲體的發(fā)酵液；(4)通過過濾將菌絲體及發(fā)酵液分離，純凈水沖洗菌絲，洗去培養(yǎng)基，收集菌絲體，烘至恒重，制得干菌絲體。技術(shù)關(guān)鍵是在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加微量元素，同時(shí)整個(gè)培養(yǎng)過程使用的水均為小分子水(用核磁共振譜檢測(cè)，半幅寬54.62Hz)。本方法可以增加藥用菌菌絲體中微量元素的含量，其他的功效性成分也明顯提高。本方法易操作，成本低，適于工業(yè)生產(chǎn)。
【專利說明】一種以小分子水為原料生產(chǎn)富微藥用菌菌絲體的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及真菌發(fā)酵工程，具體而言涉及以小分子水為原料生產(chǎn)富微藥用菌菌絲體的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]廣義的藥用菌指一切可以用于制藥的菌物，狹義指用于醫(yī)藥的大型真菌(蕈菌)。野生有冬蟲夏草、蟬花、雷丸、安絡(luò)皮傘等；目前，人工栽培的有靈芝、茯苓、豬苓、天麻、桑黃、木耳、云芝等。這些藥用菌在我國都有上千年的應(yīng)用歷史，它們雖功效不同，但最大的優(yōu)點(diǎn)，也是它們的共同點(diǎn)就是無毒副作用。近代醫(yī)學(xué)研究表明，它們不僅是傳統(tǒng)的益氣、強(qiáng)身、祛病、通經(jīng)、益壽等功能，還具增強(qiáng)人體免疫力，抗腫瘤抗癌的功效。許多食用菌兼具有藥用價(jià)值。
[0003]人們對(duì)藥用菌的藥理作用進(jìn)行了大量的研究，證實(shí)其具有廣泛的藥理學(xué)活性及臨床作用。經(jīng)大量的研究證明，藥用菌液體發(fā)酵生產(chǎn)的菌絲體與天然藥用菌的成份極相似，并證明了它與天然藥用菌有相似的藥理作用與臨床效果。
[0004]藥用菌的使用，在我國有著悠久的歷史。早在6000~7000年之前的仰韶文化時(shí)期，我們的祖先就采食蘑菇等食用菌了。2000年前的《禮記》、《呂氏春秋》和《齊民要術(shù)》等古籍文獻(xiàn)中都有人類食用菇類的記載。東漢時(shí)的《神農(nóng)本草經(jīng)》記載藥物365種，其中就有茯苓、豬苓、雷丸、木耳等10多種真菌。南北朝時(shí)期的陶弘景《本草經(jīng)集注》和《名醫(yī)別錄》中增添了馬勃和蟬花等。明代李時(shí)珍的《本草綱目》增加了六芝、桑耳、槐耳、柳耳、皂莢菌、香蕈、天花蕈、羊肚菜、雞、鬼蓋、鬼筆、竹蓀、桑黃、蟬花、雪蠶以及茯苓、豬苓、雷丸及馬勃等40余種。清代的汪昂《本草備要》首次明確記載了冬蟲夏草并作為藥用保健品。
[0005]藥用菌屬的化學(xué)成分較為復(fù)雜，且因所用菌種、菌種產(chǎn)地、栽培方法、提取工藝、制劑方法不同而各異。藥用菌屬的子實(shí)體、菌絲體和孢子中含有多糖類、核苷類、呋喃類衍生物、甾酵類、生物堿類、蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸類、三萜類、倍半萜、有機(jī)鍺、無機(jī)鹽等。藥用菌多糖是藥用菌的主要有效成分之一，具有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、降血糖、抗氧化、降血脂與抗衰老作用。藥用菌所含三萜類不下百余種，其中以四環(huán)三萜類為主，藥用菌的苦味與所含三萜類有關(guān)。三萜類也是藥用菌的有效成分之一，對(duì)人肝癌細(xì)胞具有細(xì)胞毒作用，也能抑制組織胺的釋放，具有保肝作用和具有抗過敏作用等。
[0006]人體總重量的萬分之一以下的元素，如鋅、銅、錳、鉻、硒、鑰、鈷、氟等，稱為微量元素。微量元素在人體內(nèi)的含量真是微乎其微，如鋅只占人體總重量的百萬分之三十三。
[0007]到目前為止，已被確認(rèn)與人體健康和生命有關(guān)的必需微量元素有18種，即有鐵、銅、鋅、鈷、猛、鉻、硒、碘、鎳、氟、鑰、銀、錫、娃、銀、硼、銣、砷等。這每種微量元素都有其特殊的生理功能。盡管它們?cè)谌梭w內(nèi)含量極小，但它們對(duì)維持人體中的一些決定性的新陳代謝卻是十分必要的。一旦缺少了這些必需的微量元素，人體就會(huì)出現(xiàn)疾病，甚至危及生命。
[0008]小分子水，由3-6個(gè)水分子締結(jié)而成，其運(yùn)動(dòng)速度快，具有極強(qiáng)的滲透力、擴(kuò)散力、溶解力、代謝力，更容易通過細(xì)胞內(nèi)外水的交換，清除自由基、有害酸性代謝物和各種廢物，促進(jìn)細(xì)胞的生長發(fā)育，保持細(xì)胞的生命活力。1991年諾貝爾醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)和生理學(xué)獎(jiǎng)獲得者德國科學(xué)家Dr.Erwin Neher和Dr.Bert Sakmann研究結(jié)果表明:只有小分子團(tuán)水才能通過2納米的人體細(xì)胞離子通道，進(jìn)入細(xì)胞核和DNA，活化細(xì)胞酶組織，激發(fā)生命活力，而其他自來水、純凈水都無法通過離子通道進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。
[0009]目前針對(duì)藥用菌富集微量元素研究已經(jīng)很深入，就調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的配方和培養(yǎng)條件，研究的都已經(jīng)很透徹，為此，我們引入小分子水，以小分子水替代普通自來水，通過該工藝的改進(jìn)，提高藥用菌菌絲體中微量元素的含量和其他的功效性成分。人們長期食用可以促進(jìn)機(jī)體新陳代謝，增進(jìn)食欲，提高免疫力，保健美容，對(duì)防治結(jié)石、類風(fēng)濕、高血壓等疾病有明顯作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0010]本發(fā)明的目的在于提供一種以小分子水為原料生產(chǎn)富微藥用菌菌絲體的方法，以克服現(xiàn)有技術(shù)藥用菌菌絲體中微量元素和功效性成分含量低的缺陷。
[0011]經(jīng)過系統(tǒng)的研究和試驗(yàn)后，提出了通過引入小分子水和添加微量元素提高藥用菌菌絲體中微量元素和其他的功效性成分的生產(chǎn)方法，方法包括:
[0012](I)將菌株轉(zhuǎn)接于斜面培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)、活化，得到斜面菌種； [0013](2)將斜面菌種制成孢子懸液，接于液體培養(yǎng)基中，搖瓶培養(yǎng)，得到液體菌種；
[0014](3)發(fā)酵培養(yǎng)基高溫滅菌后冷卻，再將液體菌種接入，搖瓶培養(yǎng)，得到含菌絲體的發(fā)酵液；
[0015](4)通過過濾將菌絲體及發(fā)酵液分離，純凈水沖洗菌絲，洗去培養(yǎng)基，收集菌絲體，烘至恒重，制得干菌絲體。
[0016]所述方法的第二步中，所用的液體菌種培養(yǎng)基配方為微量元素0.05% -0.5%，蛋白胨 1.5%，蔗糖 3%, KH2PO4 0.1-0.2%,7jC 1000mL, pH7.5-8。
[0017]所述方法的第二步中，所用工藝條件是:液體菌種培養(yǎng)基裝液量為60mL/250mL三角瓶；液體菌種于24°C、轉(zhuǎn)速160r/min下培養(yǎng)4d。
[0018]所述方法的第三步中，所用的培養(yǎng)基配方為微量元素0.1 % _1.6%，蛋白胨
1.5%，蔗糖 3%, KH2PO40.1-0.2%,7jC 1000mL, pH7.5-8。
[0019]所述方法的第三步中，所用工藝條件是:裝液量200mL/500mL三角瓶，采用6%接種量將種子液接入發(fā)酵搖瓶中，在23°C下?lián)u150r/min轉(zhuǎn)速培養(yǎng)10d。
[0020]所述微量元素及其比例為硒元素、鉻元素、鋅元素、錳元素和硼元素的比例為:10: 10: 3: 3:1。本發(fā)明的關(guān)鍵技術(shù)在于在發(fā)酵培養(yǎng)基中，同時(shí)加入硒元素、鉻元素、鋅元素、錳元素和硼元素。
[0021]所述的小分子水半幅寬54.62Hz，用核磁共振譜檢測(cè)。
[0022]本發(fā)明提高了藥用菌菌絲體中微量元素和功效性成分的含量，進(jìn)而提高藥用菌菌絲體的藥效，具有重要意義，生產(chǎn)的菌絲可作為功能性食品、保健品，藥品的原料；本方法易操作，成本低，適于工業(yè)生產(chǎn)。
【具體實(shí)施方式】
[0023]實(shí)施例1:將菌株轉(zhuǎn)接于PDA斜面培養(yǎng)基上25°C下培養(yǎng)7d、活化2次，得到斜面菌種；輕輕刮洗斜面菌種并將之制成孢子懸液，然后用無菌紗布出層)過濾掉懸液里的菌絲，每瓶液體菌種接入濃度適中的藥用菌孢子，使制作的液體中的菌絲球細(xì)小而均勻，發(fā)酵液澄清透明。液體菌種培養(yǎng)基配方為:微量元素0.05% -0.5%，蛋白胨1.5%，蔗糖3%，KH2P04 0.1-0.2%，水lOOOmL，pH7.5-8，液體菌種培養(yǎng)基裝液量為60mL/250mL三角瓶；液體菌種于24°C、轉(zhuǎn)速160r/min下培養(yǎng)4d,得到液體菌種。
[0024]使用最優(yōu)化的發(fā)酵培養(yǎng)基:微量元素0.1% -1.6%，蛋白胨1.5%，蔗糖3%，KH2P04 0.1-0.2%，水lOOOmL，pH7.5-8。所用工藝條件是:裝液量200mL/500mL三角瓶，采用6%接種量將種子液接入發(fā)酵搖瓶中，在23°C下?lián)u150r/min轉(zhuǎn)速培養(yǎng)10d。得到大部分菌絲體形態(tài)為菌絲球的發(fā)酵液；經(jīng)過濾將菌絲體與發(fā)酵液分離，再用純凈水沖洗菌絲，洗去培養(yǎng)基后，收集菌絲體，烘至恒重。 [0025]本方法可以增加藥用菌菌絲體中微量元素的含量，其他的功效性成分也明顯提高。人們長期食用可以促進(jìn)機(jī)體新陳代謝，增進(jìn)食欲，提高免疫力，保健美容，對(duì)防治結(jié)石、類風(fēng)濕、高血壓等疾病有明顯作用。
【權(quán)利要求】
1.一種以小分子水為原料生產(chǎn)富微藥用菌菌絲體的方法，其特征在于:該方法包括以下四個(gè)步驟:(1)將菌株轉(zhuǎn)接于斜面培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)、活化，得到斜面菌種；(2)將斜面菌種制成孢子懸液，接于液體培養(yǎng)基中，搖瓶培養(yǎng)，得到液體菌種；(3)發(fā)酵培養(yǎng)基高溫滅菌后冷卻，再將液體菌種接入，搖瓶培養(yǎng)，得到含菌絲體的發(fā)酵液；(4)通過過濾將菌絲體及發(fā)酵液分離，純凈水沖洗菌絲，洗去培養(yǎng)基，收集菌絲體，烘至恒重，制得干菌絲體。技術(shù)關(guān)鍵是在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加微量元素。本方法顯可以提高藥用菌菌絲體中微量元素的含量。
2.按照權(quán)利要求1所述的以小分子水為原料生產(chǎn)富微藥用菌菌絲體的方法，其特征在于:所述方法的第二步中，所用的液體菌種培養(yǎng)基配方為:微量元素0.05% _0.5%，蛋白胨1.5%，蔗糖 3%, KH2PO4 0.1-0.2%,7jC 1000mL, pH7.5-8。
3.按照權(quán)利要求1所述的以小分子水為原料生產(chǎn)富微藥用菌菌絲體的方法，其特征在于:所述方法的第二步中，所用工藝條件是:液體菌種培養(yǎng)基裝液量為60mL/250mL三角瓶；液體菌種于24°C、轉(zhuǎn)速160r/min下培養(yǎng)4d。
4.按照權(quán)利要求1所述的以小分子水為原料生產(chǎn)富微藥用菌菌絲體的方法，其特征在于:所述方法的第三步中，所用的培養(yǎng)基配方為微量元素0.1% -1.6%，蛋白胨1.5%，蔗糖3%, KH2PO4 0.1-0.2%,7jC 1000mL, pH7.5-8。
5.按照權(quán)利要求1所述的以小分子水為原料生產(chǎn)富微藥用菌菌絲體的方法，其特征在于:所述方法的第三步中，所用工藝條件是:裝液量200mL/500mL三角瓶，采用6%接種量將種子液接入發(fā)酵搖瓶中，在23°C下?lián)u150r/min轉(zhuǎn)速培養(yǎng)10d。
6.按照權(quán)利要求1所述的以小分子水為原料生產(chǎn)富微藥用菌菌絲體的方法，其特征在于:所述微量元素及其比例為硒元素、鉻元素、鋅元素、錳元素和硼元素的比例為:10: 10: 3: 3:1。
7.按照權(quán)利要求1所述的以小分子水為原料生產(chǎn)富微藥用菌菌絲體的方法，其特征在于:所述的小分子水半幅寬54.62Hz，用核磁共振譜檢測(cè)。
【文檔編號(hào)】A01G1/04GK103749150SQ201310729426
【公開日】2014年4月30日 申請(qǐng)日期:2013年12月14日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月14日
【發(fā)明者】凌中鑫 申請(qǐng)人:凌中鑫