一種視網(wǎng)膜光損傷測量裝置的制造方法
【專利摘要】本實(shí)用新型提供了一種視網(wǎng)膜光損傷測量裝置，屬于生物化學(xué)檢測領(lǐng)域。其包括第一溫濕度調(diào)節(jié)單元、溫濕度傳感器、固定隔光板、細(xì)胞培養(yǎng)皿、第二溫濕度調(diào)節(jié)單元、測試平臺、測量箱、第一濾光系統(tǒng)、第二濾光系統(tǒng)、測試光源放置臺、測試光源、第一減速機(jī)電機(jī)、第二減速機(jī)電機(jī)和控制和顯示單元。本實(shí)用新型的視網(wǎng)膜光損傷測量裝置能提供穩(wěn)定的測試環(huán)境和測試條件，實(shí)現(xiàn)定量且準(zhǔn)確有效地評定光源對視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞的光損傷程度。本實(shí)用新型有效解決了目前利用視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞系評價有無光損傷等的評價結(jié)果存在可重復(fù)性、精確性方面的重大問題，從而為相關(guān)的照明產(chǎn)品研發(fā)和科研提供數(shù)據(jù)支持。
【專利說明】
一種視網(wǎng)膜光損傷測量裝置
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本實(shí)用新型屬于生物化學(xué)檢測領(lǐng)域，具體涉及用于定量評定光源對視網(wǎng)膜色素上 皮細(xì)胞的光損傷的測量裝置。
【背景技術(shù)】
[0002] 為了評價不同光源對人眼視網(wǎng)膜的安全性，通常使用主觀的反饋式調(diào)查或者動物 個體進(jìn)行大量的光損傷試驗(yàn)。這些試驗(yàn)中，將光照所產(chǎn)生的對人眼的刺激與組織損傷統(tǒng)稱 為光化學(xué)損傷試驗(yàn)。
[0003] 在近40年來研究中，許多學(xué)者利用各種實(shí)驗(yàn)動物(主要是小動物)進(jìn)行了大量的有 關(guān)視網(wǎng)膜光損傷及其機(jī)制的研究。作為光損傷試驗(yàn)方法中應(yīng)用最廣的方法，已知的有例如 對小動物進(jìn)行高強(qiáng)度光照或持續(xù)光照損傷。該試驗(yàn)方法如下:使用小鼠或大鼠，放置于設(shè)有 高強(qiáng)度光照的鼠籠中，一定時間之后對動物眼睛進(jìn)行視功能評估，或取動物眼球固定切片 后評價視網(wǎng)膜細(xì)胞的凋亡程度，試驗(yàn)時取非光照動物作為陰性對照，對所取得的判斷結(jié)果 進(jìn)行比較，并由此評價光對動物眼睛的損傷程度。
[0004] 然而，但由于實(shí)驗(yàn)動物是運(yùn)動的個體，對接收恒定光照強(qiáng)度這一實(shí)驗(yàn)條件往往無 法達(dá)到，以致其實(shí)驗(yàn)研究的穩(wěn)定性、可重復(fù)性及科學(xué)可信度也就大大下降。此外，由于近年 來的動物福利問題、歐洲等出現(xiàn)的強(qiáng)化動物實(shí)驗(yàn)規(guī)范，對開發(fā)不使用實(shí)驗(yàn)動物的光損傷試 驗(yàn)方法用的替代法的要求強(qiáng)烈。
[0005]另一方面，部分研究證明體外（in vitro)培養(yǎng)細(xì)胞會在光照射的影響下發(fā)生細(xì)胞 凋亡。試驗(yàn)方法。目前，國內(nèi)外開始關(guān)注和側(cè)重于對體外培養(yǎng)視網(wǎng)膜細(xì)胞(光感受器細(xì)胞)進(jìn) 行光損傷機(jī)制及藥物開發(fā)的研究。Aicha Laabich等利用體外培養(yǎng)的牛視網(wǎng)膜細(xì)胞，在A2E 和強(qiáng)光條件下使用不同黃酮醇物質(zhì)研究其防護(hù)作用(Exp Eye Res 2007;85:154-165.)。 Gerassimos Lascaratos等人利用視網(wǎng)膜細(xì)胞對可見光影響線粒體作用誘導(dǎo)神經(jīng)性死亡進(jìn) 行了相關(guān)研究(Vision Res 2007;47:1191-1201.) jicba Laabicb等也利用牛原代培養(yǎng)的 視網(wǎng)膜細(xì)胞，探究了藏紅花原色素對藍(lán)白光介導(dǎo)細(xì)胞死亡的防護(hù)作用進(jìn)行了研究（Invest Ophthalmol Vis Sci 2006;47:3156-3163.)。從上述研究可以看出，體外培養(yǎng)的視網(wǎng)膜細(xì) 胞可以作為評估視網(wǎng)膜光損傷的模型。
[0006] 然而，目前仍然沒有一個穩(wěn)定體系可以精確評價特定光源對視網(wǎng)膜細(xì)胞的光化學(xué) 損傷程度。首先是細(xì)胞選擇問題。有些研究使用了原代培養(yǎng)的動物視網(wǎng)膜感光細(xì)胞，但這類 細(xì)胞在體外培養(yǎng)過程中無法穩(wěn)定擴(kuò)增，因此試驗(yàn)的可重復(fù)性較差;有些研究使用了視網(wǎng)膜 色素上皮細(xì)胞株，但該類細(xì)胞在培養(yǎng)的不同階段呈現(xiàn)完全不同的細(xì)胞生理特性，因此也導(dǎo) 致了不同研究的結(jié)果差異性很大。
[0007] 目前利用視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞系評價有無光損傷等的評價結(jié)果存在可重復(fù)性、精 確性方面的重大問題，而且在實(shí)際預(yù)測對人眼視網(wǎng)膜的安全性方面，這種方法也并不是總 能充分令人滿意，人們期望開發(fā)一套穩(wěn)定的、高精度的體外光化學(xué)損傷試驗(yàn)裝置和方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 為克服公知技術(shù)中存在的上述缺陷，本實(shí)用新型提供一種視網(wǎng)膜光損傷測量裝置 與定量評價方法。該裝置能提供穩(wěn)定的測試環(huán)境和測試條件，通過定量的評價方法能夠準(zhǔn) 確有效的評定光源對視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞的光損傷程度，從而為相關(guān)的照明產(chǎn)品研發(fā)和科 研提供數(shù)據(jù)支持。
[0009] 本實(shí)用新型提供了一種測量裝置，包括第一溫濕度調(diào)節(jié)單元1、溫濕度傳感器2、固 定隔光板3、細(xì)胞培養(yǎng)皿4,第二溫濕度調(diào)節(jié)單元2、測試平臺6、測量箱7、第一濾光系統(tǒng)(第一 升降軸軸71和第一濾光膜層8)、第二濾光系統(tǒng)(第二升降軸72和第二濾光膜層9)、測試光源 放置臺1 〇、升降軸固定卡件11、測試光源1 〇 1、第一減速機(jī)電機(jī)13、第二減速機(jī)電機(jī)12、控制 和顯示單元14、氣體分析裝置15。
[0010] 其中測量箱整體結(jié)構(gòu)為一個密閉的圓筒型，外部光線不會照入內(nèi)部，密閉的圓筒 可以從頂部或底部打開，進(jìn)行內(nèi)部結(jié)構(gòu)的調(diào)整和放置。測試平臺位于中上部，第一二濾光系 統(tǒng)位于中部，測試光源放置臺位于中下部。可將多個細(xì)胞培養(yǎng)皿4分組(測試組和對照組)放 置于測試平臺6上，用于定量分析視網(wǎng)膜細(xì)胞的光損傷程度。對照組區(qū)域會放置遮光層41完 全屏蔽光源的照射。測試光源101以分布均勻的方式放置在測試光源放置臺10內(nèi)，并通過測 試光源放置臺10的控制單元14對測試光源101進(jìn)行打開和關(guān)閉的控制。測試光源101可以是 根據(jù)測試需求，配置不同的光源，例如LED、熒光燈、球泡燈等，如圖1所示。
[0011] 所述第一溫濕度調(diào)節(jié)單元1包括進(jìn)風(fēng)機(jī)、出風(fēng)機(jī)和加濕機(jī)，第二溫濕度調(diào)節(jié)單元2 包括一個進(jìn)風(fēng)機(jī)、出風(fēng)機(jī)和除濕機(jī)，能依據(jù)溫濕度傳感器2實(shí)時采集的溫濕度信號，進(jìn)行溫 濕度的調(diào)控，保證測量箱內(nèi)的溫度穩(wěn)定在37±1°C，濕度小于等于85%。
[0012] 其中，第一濾光系統(tǒng)由第一濾光膜層8和第一升降軸71組成，第一濾光膜層8可衰 減光強(qiáng)度，第一濾光膜層8固定在第一升降軸71上，可以上下升降有效調(diào)節(jié)照在培養(yǎng)皿4上 的不同比例光照強(qiáng)度。第一濾光膜層可以手動進(jìn)行更換不同透射比的濾光膜。第二濾光系 統(tǒng)由第二濾光膜層9和第二升降軸72組成，第二濾光膜層9改變光譜成分，第二濾光膜層9固 定在第二升降軸72上，可以調(diào)節(jié)光的不同光譜的透射比，達(dá)到評測不同光譜的目的。第二濾 光膜層9可以手動進(jìn)行更換不同透射光譜的濾光膜。
[0013] 所述第一升降軸71位于第二升降軸72的內(nèi)部，兩個軸可以各自獨(dú)立相對運(yùn)動。第 一減速機(jī)電機(jī)13驅(qū)動第一升降軸71的升降，第二減速機(jī)電機(jī)12驅(qū)動第一升降軸72的升降。
[0014] 所述控制和顯示單元14可以控制第一減速機(jī)電機(jī)13和第二減速機(jī)電機(jī)12的開啟 和關(guān)閉，可以控制測試平臺10的通電開關(guān)，可以實(shí)時顯示溫濕度傳感器2的實(shí)時溫濕度，并 根據(jù)溫度變化控制第一溫濕度調(diào)節(jié)單元和第二溫濕度調(diào)節(jié)單元實(shí)時調(diào)節(jié)裝置內(nèi)的溫濕度。 控制和顯示單元14可以是固定終端（臺式機(jī))和便攜式(手機(jī)或Pad)終端的一種或幾種的組 合。
[0015] 所述第一溫濕度調(diào)節(jié)單元1能依據(jù)溫濕度傳感器2實(shí)時采集的溫濕度信號，進(jìn)行溫 濕度的調(diào)控，保證測量箱內(nèi)的溫度穩(wěn)定在37±1°，濕度小于等于85%。所述細(xì)胞培養(yǎng)皿2在 定量測試過程中應(yīng)放置在測試平臺6上。
[0016] 所述測試平臺6是透明結(jié)構(gòu)，保證下部在測試光源放置臺10所裝配的測試光源101 發(fā)射的光線能夠透過測試平臺6照射到細(xì)胞培養(yǎng)皿中，測試平臺6上可放置多個培養(yǎng)皿4,并 均勻排布，測試平臺6上的培養(yǎng)皿4將分成測試組和對照組用于定量分析視網(wǎng)膜細(xì)胞的光損 傷程度，對照組區(qū)域會放置遮光層9完全屏蔽光源的照射。
[0017] 所述溫濕度傳感器2可以設(shè)置一個或多個放置在測試平臺6上，用于監(jiān)控細(xì)胞培養(yǎng) 皿4所處的溫濕度狀態(tài)。
[0018] 所述測試光源放置臺10位于測量箱7的底部，測試時，將測試光源101均勻的分布 固定在測試光源放置區(qū)臺上。測試光源放置臺（10)的中心位置設(shè)有容納第二升降軸(72)穿 過的通孔。
[0019] 所述測量箱7為一個密閉的圓筒型箱體，能有效屏蔽外界的光照對測試光源的影 響，確保照射到細(xì)胞培養(yǎng)皿的光刺激均來自測試光源。
[0020] 所述控制和顯示終端14可以是固定終端（臺式機(jī))和便攜式(手機(jī)或Pad)終端的一 種或幾種的組合?？刂坪惋@示單元（14)分別與第一溫濕度調(diào)節(jié)單元（1)、溫濕度傳感器(2)、 第二溫濕度調(diào)節(jié)單元(5)相連，接收并實(shí)時顯示溫濕度傳感器(2)采集的溫濕度數(shù)據(jù)，控制 第一溫濕度調(diào)節(jié)單元(1)或第二溫濕度調(diào)節(jié)單元(5)進(jìn)行溫濕度調(diào)節(jié)；。
[0021] 所述固定隔光板(3)垂直安裝在測試平臺（6)的上表面，其高度為測試平臺（6)的 上表面到圓筒結(jié)構(gòu)頂部的距離，寬度為圓筒結(jié)構(gòu)內(nèi)直徑；
[0022] 所述遮光層41位于測試平臺6的下方，可以完全屏蔽測試光源101從下部照射上來 的光福射。
[0023] 所述氣體分析裝置（15)，用于檢測二氧化碳、微顆粒物、有害氣體的濃度，其安裝 于測試平臺（6)內(nèi)，與控制和顯示單元(14)相連。
[0024] 總體而言，通過本實(shí)用新型所構(gòu)思的以上技術(shù)方案與現(xiàn)有技術(shù)相比，由于提供了 穩(wěn)定的測試環(huán)境和測試條件，取得了以下有益效果:能夠達(dá)到準(zhǔn)確定量檢測視網(wǎng)膜細(xì)胞光 損傷程度。
【附圖說明】
[0025] 圖1為本實(shí)用新型的測量裝置矢狀位剖面結(jié)構(gòu)示意圖。
[0026] 圖2為本實(shí)用新型的測量裝置整體結(jié)構(gòu)示意圖
[0027] 圖3為本實(shí)用新型的測試平臺上放置細(xì)胞培養(yǎng)皿的一種示例圖。
[0028] 圖4為人皮膚成纖維細(xì)胞和人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞在光照后的CV變化結(jié)果。
[0029] 圖5為人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞的CV隨光照時間的變化情況。
[0030] 圖6為控制和顯示單元的控制部件示意圖
【具體實(shí)施方式】
[0031] 下面將結(jié)合本實(shí)用新型實(shí)施例中的附圖，對本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清 楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例。
[0032] 如圖1所示，本實(shí)用新型的測量裝置包括:第一溫濕度調(diào)節(jié)單元1、溫濕度傳感器2、 固定隔光板3、細(xì)胞培養(yǎng)皿4,第二溫濕度調(diào)節(jié)單元5、測試平臺6、測量箱7、第一升降軸軸71、 第一濾光膜層8、第二升降軸72、第二濾光膜層9、測試光源放置臺10、升降軸固定卡件11、測 試光源101、第一減速機(jī)電機(jī)13、第二減速機(jī)電機(jī)12、控制和顯示單元14、氣體分析裝置15。
[0033] 如圖2所示，本實(shí)用新型的測量箱7整體結(jié)構(gòu)為一個密閉的圓筒型，外部光線不會 照入內(nèi)部，密閉的圓筒可以從頂部或底部打開，進(jìn)行內(nèi)部結(jié)構(gòu)的調(diào)整和放置。測試平臺位于 中上部，第一二濾光膜層位于中部，測試光源放置臺位于中下部。
[0034] 細(xì)胞培養(yǎng)皿4中鋪下細(xì)胞后持續(xù)培養(yǎng)3周至細(xì)胞呈現(xiàn)鋪滿（confluent)狀態(tài)后，將 多個細(xì)胞培養(yǎng)皿4分組放置于測試平臺6上，細(xì)胞培養(yǎng)皿數(shù)量為雙數(shù)個（圖3所示為6個），分 為兩組，測試組和對照組，用于定量分析視網(wǎng)膜細(xì)胞的光損傷程度。對照組區(qū)域會放置遮光 層41完全屏蔽光源的照射。
[0035] 測試光源101以分布均勻的方式放置在測試光源放置臺10內(nèi)，并通過測試光源放 置臺10的控制單元14對測試光源101進(jìn)行打開和關(guān)閉的控制。測試光源101可以是根據(jù)測試 需求，配置不同的光源，例如LED、熒光燈、球泡燈等，如圖1所示。
[0036] 第一溫濕度調(diào)節(jié)單元1包括進(jìn)風(fēng)機(jī)、出風(fēng)機(jī)和加濕機(jī)，第二溫濕度調(diào)節(jié)單元2包括 一個進(jìn)風(fēng)機(jī)、出風(fēng)機(jī)和除濕機(jī)，能依據(jù)溫濕度傳感器2實(shí)時采集的溫濕度信號，進(jìn)行溫濕度 的調(diào)控，保證測量箱內(nèi)的溫度穩(wěn)定在37 ±1°C，濕度小于等于85 %。
[0037] 第一濾光系統(tǒng)由第一濾光膜層8和第一升降軸71組成，第一濾光膜層8可衰減光強(qiáng) 度，第一濾光膜層8固定在第一升降軸71上，可以上下升降有效調(diào)節(jié)照在培養(yǎng)皿4上的不同 比例光照強(qiáng)度。第一濾光膜層可以手動進(jìn)行更換不同透射比的濾光膜。
[0038] 第二濾光系統(tǒng)由第二濾光膜層9和第二升降軸72組成，第二濾光膜層8改變光譜成 分，第二濾光膜層9固定在第二升降軸72上，可以調(diào)節(jié)光的不同光譜的透射比，達(dá)到評測不 同光譜的目的。第二濾光膜層72可以手動進(jìn)行更換不投透射光譜的濾光膜。
[0039]第一升降軸71位于第二升降軸72的內(nèi)部，兩個軸可以各自獨(dú)立相對運(yùn)動。第一減 速機(jī)電機(jī)13控制第一升降軸71的升降，第二減速機(jī)電機(jī)12控制第一升降軸72的升降。第一 和第二升降軸通過升降軸固定卡件11固定于圓筒的正中部，測試光源放置臺10下方具有安 裝固定卡件的固定隔板，固定隔板為圓盤結(jié)構(gòu)，其邊緣與圓筒內(nèi)壁固定連接?？?1固定在 安裝座的中央位置。
[0040] 所述固定隔光板(3)垂直安裝在測試平臺（6)的上表面，其高度為測試平臺（6)的 上表面到圓筒結(jié)構(gòu)頂部的距離，寬度為圓筒結(jié)構(gòu)內(nèi)直徑；
[0041] 對照組區(qū)域放置遮光層(41)以完全屏蔽光源的照射;所述遮光層(41)粘貼在測試 平臺（6)的下表面。
[0042] 氣體分析裝置（15)為可選部件，用于檢測二氧化碳、微顆粒物、有害氣體的濃度， 其安裝于測試平臺（6)內(nèi)，與控制和顯示單元(14)相連。
[0043] 如圖6所示，控制和顯示單元14可以控制所述控制和顯示單元14可以控制第一減 速機(jī)電機(jī)13和第二減速機(jī)電機(jī)12的開啟和關(guān)閉，并通過減速機(jī)電機(jī)控制升降軸的上下位 移，通過已經(jīng)設(shè)置好的光源參數(shù)、濾光膜參數(shù)，以及第一升降軸71與第二升降軸72相對位置 自動計(jì)算得出照到測試平臺上的光參數(shù)信息。所述光參數(shù)信息為光源的照度參數(shù)，計(jì)算照 度參數(shù)的方法如公式二所示：
[0044]
[0045] 式中：
[0046] E為光照度；
[0047] I為光源輻射強(qiáng)度；
[0048] T1為第一濾光膜層的透射率，T2為第二濾光膜層的透射率；
[0049] k為環(huán)境系數(shù)，一般為1;
[0050] Cl1為培養(yǎng)皿到第一濾光膜層的垂直距離，辦為第一濾光膜層到第二濾光膜層的垂 直距離，d3為第二濾光膜層到測試光源的垂直距離。
[0051 ] 控制和顯示單元14可以控制測試平臺10的通電開關(guān)，可以實(shí)時顯示溫濕度傳感器 2的實(shí)時溫濕度，并根據(jù)溫度變化自動調(diào)控第一溫濕度調(diào)節(jié)單元1和第二溫濕度調(diào)節(jié)單元5 實(shí)時調(diào)節(jié)裝置內(nèi)的溫濕度?？刂坪惋@示單元14可以是固定終端（臺式機(jī))和便攜式(手機(jī)或 Pad)終端的一種或幾種的組合。
[0052]利用本實(shí)用新型的測量裝置，能夠?qū)嵤┗谝暰W(wǎng)膜光損傷測量裝置的量化評價方 法，該方法能夠快速、有效、準(zhǔn)確的評價視網(wǎng)膜光損傷的量化指標(biāo)。
[0053]具體的光損傷試驗(yàn)方法包括以下步驟：
[0054] (1)第一步驟:穩(wěn)定培養(yǎng)人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞，采用特定成分培養(yǎng)基，在細(xì)胞培 養(yǎng)皿4中鋪下細(xì)胞后持續(xù)培養(yǎng)3周至細(xì)胞呈現(xiàn)鋪滿(confluent)狀態(tài)；
[0055] (2)第二步驟:將多個穩(wěn)定培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)皿4分組放置于測試平臺6上，細(xì)胞培養(yǎng) 皿數(shù)量為雙數(shù)個（圖3所示為6個），分為兩組，測試組和對照組，用于定量分析視網(wǎng)膜細(xì)胞的 光損傷程度。對照組區(qū)域會放置遮光層41完全屏蔽光源的照射，通過控制單元14打開測試 光源1〇1(可置換)并照射穩(wěn)定的時間（一般為4.5-12小時）；
[0056] (3)第三步驟：回收所述第二步驟中光照的人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞，測定回收的測 試組和對照組培養(yǎng)細(xì)胞中的細(xì)胞活力(Cell Viability，CV)或與細(xì)胞凋亡相關(guān)的線粒體膜 電位；
[0057] (4)第四步驟:根據(jù)第三步驟測定的數(shù)字化結(jié)果評價特定光源在特定光強(qiáng)條件下 對細(xì)胞有無產(chǎn)生光化學(xué)損傷及其程度；
[0058]上述第一步驟所述的特定成分培養(yǎng)基是不含L-色氨酸、L-酪氨酸、葉酸、核黃素和 酚紅的DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基；
[0059] 上述第一步驟所述的細(xì)胞培養(yǎng)至少3周，保證其在細(xì)胞培養(yǎng)皿2中達(dá)到鋪滿 (confluent)狀態(tài)；
[0060] 進(jìn)一步的，所述人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞包括兩類：一類是來自干細(xì)胞的視網(wǎng)膜色 素上皮細(xì)胞;另一類是永生化的人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞株(ARPE-19型）；所述干細(xì)胞包括人 類胚胎干(ES)細(xì)胞、誘導(dǎo)多能干（iPS)細(xì)胞;所述的視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞已知在一種既定 LED照射下會發(fā)生顯著的細(xì)胞活性下降和線粒體膜電位改變，作為陽性對照組;此外，將同 批培養(yǎng)的細(xì)胞置于無光照條件下，作為陰性對照組；
[0061] 進(jìn)一步的，所述的細(xì)胞活力檢測方法，采用水溶性四唑鹽WST-8【化學(xué)名（2-(2-甲 氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4_二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽】用于測定細(xì)胞增殖或 毒性實(shí)驗(yàn)中活細(xì)胞數(shù)目。在電子耦合試劑存在的情況下，被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原生成橙 黃色的甲臜染料Formazan。甲臜染料能夠溶解在組織培養(yǎng)基中，與活細(xì)胞數(shù)量成正比。通過 檢測吸光值比色，可以動態(tài)地量化活細(xì)胞的數(shù)量，從而對細(xì)胞增殖或藥物毒性進(jìn)行檢測。 [0062] (5)第五步驟:獲得測試光照細(xì)胞的細(xì)胞活力值CVs。每次設(shè)定陰性對照（非光照） 組，同樣條件下同時進(jìn)行活力檢測后獲得細(xì)胞活力值CVC。細(xì)胞光損傷程度CV計(jì)算如公式一 所示：
[0063]
[0064] 式中：
[0065] CVs光照細(xì)胞（陽性組)的細(xì)胞活力值；
[0066] CVc為非光照細(xì)胞(陰性組)的細(xì)胞活力值 [0067] η為配對測試有效樣本的組數(shù)。
[0068] 圖4所示的CV結(jié)果分析圖表示人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞在光照后的細(xì)胞活力（cell viability)發(fā)生顯著下降(p<0.001)，而人皮膚成纖維細(xì)胞在相同光照條件下細(xì)胞活力不 變。證明人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞是評估光損傷的有效細(xì)胞模型。其中，NS-一沒有顯著性差 異，*** 有極其顯著性差異。
[0069] 圖5顯示隨著光照時間的增加，人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞的細(xì)胞活力呈現(xiàn)持續(xù)性降 低趨勢。
[0070] 盡管本實(shí)用新型已經(jīng)參照實(shí)施例描述，本領(lǐng)域內(nèi)技術(shù)人員將理解可做出各種改變 并且可代替等同物而不偏離本實(shí)用新型的范圍。另外，可做出許多修改以使特定情況或材 料適應(yīng)于本實(shí)用新型的教導(dǎo)而不偏離它的范圍。因此，規(guī)定本實(shí)用新型不限于公開的特定 實(shí)施例，而本實(shí)用新型將包括落入附上的權(quán)利要求的范圍內(nèi)的所有實(shí)施例。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種視網(wǎng)膜光損傷測量裝置，其特征在于:所述裝置包括第一溫濕度調(diào)節(jié)單元（I)、 溫濕度傳感器（2)、固定隔光板（3)、細(xì)胞培養(yǎng)皿（4)、第二溫濕度調(diào)節(jié)單元（5)、測試平臺 (6)、測量箱(7)、第一濾光系統(tǒng)、第二濾光系統(tǒng)、測試光源放置臺（10)、測試光源（101)、第一 減速機(jī)電機(jī)(13)、第二減速機(jī)電機(jī)(12)和控制和顯示單元(14); 測量箱(7)為密閉的圓筒結(jié)構(gòu)，其頂部或底部能夠打開;測試平臺（6)位于測量箱(7)的 中上部，第一濾光系統(tǒng)和第二濾光系統(tǒng)位于測量箱(7)的中部，測試光源放置臺（10)位于測 量箱(7)的中下部； 固定隔光板(3)垂直安裝在測試平臺（6)的上表面； 測試光源（101)放置在測試光源放置臺（10)內(nèi)； 第一濾光系統(tǒng)由第一濾光膜(8)和第一升降軸(71)組成，第一濾光膜(8)固定在第一升 降軸(71)上； 第二濾光系統(tǒng)由第二濾光膜(9)和第二升降軸(72)組成，第二濾光膜(9)固定在第二升 降軸(72)上； 所述第一升降軸（71)位于第二升降軸（72)的內(nèi)部，兩個軸能各自獨(dú)立地相對運(yùn)動;第 一減速機(jī)電機(jī)(13)驅(qū)動第一升降軸(71)的升降，第二減速機(jī)電機(jī)(12)驅(qū)動第二升降軸(72) 的升降； 測試光源放置臺（10)的中心位置設(shè)有容納第二升降軸(72)穿過的通孔； 細(xì)胞培養(yǎng)皿(4)放置于測試平臺（6)上； 控制和顯示單元（14)分別與第一溫濕度調(diào)節(jié)單元（1)、溫濕度傳感器（2)、第二溫濕度 調(diào)節(jié)單元(5)、第一減速機(jī)電機(jī)(13)、第二減速機(jī)電機(jī)(12)、測試光源放置臺（10)相連。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的測量裝置，其特征在于:第一濾光膜(8)可衰減光強(qiáng)度，第二濾 光膜(9)改變光譜成分。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的測量裝置，其特征在于:第一溫濕度調(diào)節(jié)單元（1)包括進(jìn)風(fēng)機(jī)、 排風(fēng)機(jī)、加濕機(jī);第二溫濕度調(diào)節(jié)單元(5)包括進(jìn)風(fēng)機(jī)、排風(fēng)機(jī)、除濕機(jī)。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的測量裝置，其特征在于:細(xì)胞培養(yǎng)皿(4)的數(shù)量是偶數(shù)個，且分 成測試組和對照組，對照組區(qū)域放置遮光層(41)以完全屏蔽光源的照射;所述遮光層(41) 粘貼在測試平臺（6)的下表面。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的測量裝置，其特征在于:第一升降軸(71)和第二升降軸(72)通 過固定卡件（11)固定于圓筒結(jié)構(gòu)的正中部;所述測試光源放置臺（10)下方設(shè)有圓盤結(jié)構(gòu)的 固定隔板，固定隔板邊緣與圓筒內(nèi)壁固定連接;固定卡件(11)固定在固定隔板的中央位置。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的測量裝置，其特征在于:控制和顯示單元（14)控制測量箱(7) 內(nèi)的溫度穩(wěn)定在37 ± 1°、濕度小于等于85 %。7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的測量裝置，其特征在于:控制和顯示單元（14)是固定終端和/ 或便攜式終端。8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的測量裝置，其特征在于:還包括氣體分析裝置，用于檢測二氧 化碳、微顆粒物、有害氣體的濃度，其安裝于測量箱(7)內(nèi)，與控制和顯示單元(14)相連。9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的測量裝置，其特征在于:測試光源采用LED、熒光燈或球泡燈。
【文檔編號】G01N21/84GK205538701SQ201620047436
【公開日】2016年8月31日
【申請日】2016年1月19日
【發(fā)明人】蔡建奇, 楊帆, 杜鵬
【申請人】北京陽明智道光電科技有限公司