一種糖尿病分型用層析試條的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本實(shí)用新型涉及糖尿病檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種糖尿病分型用層析試條。
【背景技術(shù)】
[0002] 糖尿病是一組以高血糖為特征的代謝性疾病，因其帶來(lái)的慢性并發(fā)癥已成為腎功 能衰竭、失明和心腦血管疾病的主要原因。
[0003] 近十余年來(lái)，隨著對(duì)糖尿病病因、分子生物學(xué)和免疫學(xué)的研究獲得了大量突破性 進(jìn)展，美國(guó)糖尿協(xié)會(huì)委員會(huì)提出了更新糖尿病分型和診斷標(biāo)準(zhǔn)的建議，并被世界衛(wèi)生組織 咨詢委員會(huì)認(rèn)可，在新標(biāo)準(zhǔn)中，根據(jù)病病因的不同，糖尿病主要分為I型糖尿病和Π型糖尿 病，但不論哪種類型糖尿病，均存在明顯的遺傳異質(zhì)性。
[0004] 根據(jù)臨床研究，目前I型糖尿病的診斷主要通過(guò)檢測(cè)自身免疫性抗體實(shí)現(xiàn)，現(xiàn)在已 經(jīng)用于I型糖尿病診斷的抗體有谷氨酸脫羧酶抗體(GAD)、胰島素自身抗體(IAA)、胰島細(xì)胞 抗體(ICA)、鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8抗體(ZnT8)，其中以GAD抗體、ZnT8抗體陽(yáng)性率高、持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)而對(duì) I型糖尿病的診斷價(jià)值很大。
[0005] 目前，實(shí)現(xiàn)GAD抗體和ΖηΤ8抗體檢測(cè)的方法有酶聯(lián)免疫吸附法、蛋白質(zhì)雜交法或化 學(xué)發(fā)光檢測(cè)法。這些檢測(cè)法靈敏度高、樣本用量少、非常適合大型醫(yī)院的確診檢測(cè)。但是相 伴而來(lái)，這些檢測(cè)方法也有檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)、檢測(cè)費(fèi)用高、操作復(fù)雜的缺點(diǎn)，并不利于早期診斷 及篩選。
[0006] 因此，如何提供一種新的檢測(cè)方法、實(shí)現(xiàn)糖尿病類型的快速低成本檢測(cè)，是醫(yī)藥領(lǐng) 域技術(shù)人員需要考慮的問(wèn)題。 【實(shí)用新型內(nèi)容】
[0007] 本實(shí)用新型提供一種糖尿病分型用層析試條，可用于糖尿病的快速分型檢驗(yàn)，其 使用方便、測(cè)試時(shí)間短。
[0008] 本實(shí)用新型提供一種糖尿病分型用層析試條，包括包被有被顏色標(biāo)記且與人體胰 島素細(xì)胞抗體結(jié)合的第一抗體的結(jié)合墊，還包括與所述結(jié)合墊連接的層析膜;所述層析膜 上具有包被人體胰島素細(xì)胞抗原的測(cè)試線。
[0009] 可選的，所述層析膜上還具有包被有與第一抗體結(jié)合的第二抗體的質(zhì)控線;所述 測(cè)試線位于所述結(jié)合墊和所述質(zhì)控線間。
[0010] 可選的，還具有與所述結(jié)合墊連接的樣品墊。
[0011] 可選的，還具有與所述層析膜連接的吸水墊。
[0012] 可選的，所述結(jié)合墊為膠體金結(jié)合墊或乳膠顆粒結(jié)合墊。
[0013] 可選的，所述層析膜為硝酸纖維素膜或聚偏二氟乙烯膜。
[0014] 可選的，所述樣品墊和所述結(jié)合墊、所述結(jié)合墊和所述層析膜、所述層析膜和所述 吸水墊之間均重疊1.0-2.0mm。
[0015] 可選的，還具有底板;所述樣品墊、所述結(jié)合墊、所述層析膜和所述吸水墊均固定 在所述底板上。
[0016] 可選的，所述結(jié)合墊為包被與人抗GAD65抗體結(jié)合的第一抗體的結(jié)合墊且所述測(cè) 試線為包被GAD65抗原的測(cè)試線；或所述結(jié)合墊為包被與人抗ZnT8抗體結(jié)合的第一抗體的 結(jié)合墊且所述測(cè)試線為包被ΖηΤ8抗原的測(cè)試線。
[0017] 可選的，所述結(jié)合墊為包被所述第一抗體為羊抗人IgG抗體的結(jié)合墊;所述質(zhì)控線 為包被所述第二抗體為兔抗羊IgG抗體的質(zhì)控線。
[0018] 本實(shí)用新型提供的糖尿病分型用層析試條，具有包被有被顏色標(biāo)記且與人體胰島 素細(xì)胞抗體結(jié)合的第一抗體的結(jié)合墊，還包括與結(jié)合墊連接的層析膜;層析膜上具有包被 人體胰島素細(xì)胞抗原的測(cè)試線；如被檢測(cè)樣本中具有人體胰島素細(xì)胞抗體，滴定在結(jié)合墊 上的人體胰島素細(xì)胞抗體可與被顏色標(biāo)記的第一抗體結(jié)合、并隨檢測(cè)樣本溶液流動(dòng)至測(cè)試 線再與測(cè)試線上的人體胰島素細(xì)胞抗原結(jié)合層析在測(cè)試線上呈現(xiàn)被標(biāo)記顏色，實(shí)現(xiàn)相應(yīng)糖 尿病類型的監(jiān)測(cè)。這一層析試條使用方便、操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)費(fèi)用低，尤其適用于糖尿病分型 的早期診斷和篩查。
[0019] 在本實(shí)用新型一種【具體實(shí)施方式】中，在層析膜上還設(shè)置包被可與第一抗體結(jié)合的 第二抗體的質(zhì)控線，利用質(zhì)控線中第二抗體和第一抗體結(jié)合判斷試條是否有效，防止因?qū)?析試條中第一抗體變性而造成的檢測(cè)失誤，提高測(cè)試可靠性。
[0020] 在本實(shí)用新型一【具體實(shí)施方式】中，設(shè)置與結(jié)合墊連接的樣品墊，利用樣品墊中物 質(zhì)復(fù)溶調(diào)節(jié)檢測(cè)樣本特性，提高檢測(cè)樣本流動(dòng)性;進(jìn)一步地，設(shè)置與層析膜結(jié)合的吸水墊， 可提高檢測(cè)樣本溶液的流動(dòng)速度，提高層析效果并防止額外檢測(cè)樣本的泄漏污染。
[0021] 在本實(shí)用新型一【具體實(shí)施方式】中，樣品墊和結(jié)合墊、結(jié)合墊和層析膜、層析膜和吸 水墊之間均重疊1.0-2.0_，保證測(cè)試樣本溶液能夠可靠地轉(zhuǎn)移，提高測(cè)試效率。
[0022] 在本實(shí)用新型一【具體實(shí)施方式】中，設(shè)置相應(yīng)的底板可方便取放整個(gè)層析試條而不 會(huì)對(duì)其中的測(cè)試部分造成污染。
【附圖說(shuō)明】
[0023] 為了更清楚地說(shuō)明本實(shí)用新型實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對(duì)實(shí)施例 或現(xiàn)有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡(jiǎn)單地介紹，顯而易見(jiàn)地，下面描述中的附圖僅僅 是本實(shí)用新型的實(shí)施例，對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來(lái)講，在不付出創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下，還 可以根據(jù)提供的附圖獲得其他的附圖。
[0024] 圖1為本實(shí)用新型【具體實(shí)施方式】中糖尿病分型用層析試條結(jié)構(gòu)示意圖；
[0025] 其中：1_結(jié)合墊、2-層析膜、21-測(cè)試線、22-質(zhì)控線、3-樣品墊、4-吸水墊。
【具體實(shí)施方式】
[0026] 本實(shí)用新型提供一種糖尿病分型用層析試條，可通過(guò)簡(jiǎn)單滴定方法確定患者患有 糖尿病類型。
[0027] 下面將結(jié)合本實(shí)用新型實(shí)施例中的附圖，對(duì)本實(shí)用新型實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行 清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本實(shí)用新型一部分實(shí)施例，而不是全部的 實(shí)施例?；诒緦?shí)用新型中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒(méi)有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下 所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本實(shí)用新型保護(hù)的范圍。
[0028] 如圖1，圖1為本實(shí)用新型【具體實(shí)施方式】中糖尿病分型用層析試條結(jié)構(gòu)示意圖，這 一糖尿病分型用層析試條包括依次連接的樣品墊3、結(jié)合墊1、層析膜2和吸水墊4四個(gè)部分。 其中結(jié)合墊1上包被有被顏色標(biāo)記的、可與人體胰島素細(xì)胞抗體結(jié)合的第一抗體，層析膜2 上具有包被人體胰島素細(xì)胞抗原的測(cè)試線21。
[0029] 當(dāng)將檢測(cè)樣本滴加到樣品墊3上后，檢測(cè)樣本將樣品墊3中的物質(zhì)進(jìn)行復(fù)溶而調(diào)節(jié) 檢測(cè)樣本的流動(dòng)性等性質(zhì)；在吸水墊4的吸附作用和毛細(xì)吸管力作用下樣本溶液流動(dòng)至結(jié) 合墊1上并將樣品墊3上的顆粒復(fù)溶;如檢測(cè)樣本中具有人體胰島素細(xì)胞抗體，其將與顆粒 上被標(biāo)記的第一抗體反應(yīng)結(jié)合并隨著檢測(cè)樣本流動(dòng)；隨著檢測(cè)樣本的繼續(xù)流動(dòng)，包含被顏 色標(biāo)記的第一抗體的樣本溶液流動(dòng)至層析膜2的測(cè)試線21上；由于測(cè)試線21上具有人體胰 島素細(xì)胞抗原，人體胰島素細(xì)胞抗原和人體胰島素細(xì)胞抗體反應(yīng)結(jié)合，由于人體胰島素細(xì) 胞抗體的中間聯(lián)系作用，人體胰島素細(xì)胞抗原、人體胰島素細(xì)胞抗體和第一抗體形成夾心 結(jié)構(gòu)的復(fù)合物并降低流動(dòng)速度層析在測(cè)試線21上；由于第一抗體被顏色標(biāo)記，因此測(cè)試線 21上相應(yīng)地顯現(xiàn)標(biāo)記顏色，呈現(xiàn)陽(yáng)性。相反的，如檢測(cè)樣本中沒(méi)有人體胰島素細(xì)胞抗體，則 樣品墊3被檢測(cè)樣本溶液復(fù)溶流動(dòng)的第一抗體不能與測(cè)試線21上的人體胰島素細(xì)胞抗原形 成夾心結(jié)構(gòu)的復(fù)合物、不會(huì)降低流動(dòng)速度，也就不會(huì)在測(cè)試線21上留下標(biāo)記顏色，整個(gè)層析 膜2的顏色基本一致，呈現(xiàn)陰性。
[0030] 本實(shí)用新型中層析試條采用膜層析技術(shù)和雙抗體夾心法，利用人體胰島素細(xì)胞抗 體被顏色標(biāo)記的第一抗體和人體胰島素細(xì)胞抗原的夾心結(jié)合實(shí)現(xiàn)相應(yīng)的糖尿病類型的檢 測(cè)，相比于現(xiàn)有的酶聯(lián)免疫吸附法、蛋白質(zhì)雜交或化學(xué)發(fā)光檢測(cè)法等方法操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)時(shí) 間短、檢測(cè)費(fèi)用低很多，可用于早期診斷和篩選。
[0031] 由于樣品墊3、層析膜2上的第一抗體、人體胰島素細(xì)胞抗原在惡劣條件下會(huì)發(fā)生 變性而影響層析試條中檢測(cè)的準(zhǔn)確性，在使用測(cè)試線21進(jìn)行檢測(cè)的同時(shí)需要保證層析試條 為有效試條;為此，還可在層析膜2上設(shè)置包被有與第一抗體結(jié)合的第二抗體的質(zhì)控線22， 質(zhì)控線22位于層析膜2上靠近吸水墊4墊的一側(cè)。如第一抗體和第二抗體均沒(méi)有發(fā)生變性， 被檢測(cè)樣本溶液復(fù)溶第一抗體后攜帶第一抗體流動(dòng)至質(zhì)控線22處后，第一抗體和第二抗體 結(jié)合而降低流動(dòng)速度層析至質(zhì)控線22上，同樣由于第一抗體被顏色標(biāo)記而使得質(zhì)控線22顯 色，此時(shí)可判定層析試條為有效試條，根據(jù)測(cè)試線21就可判定糖尿病類型。相反的，如第一 抗體或第二抗體中一個(gè)發(fā)生變性，被檢測(cè)樣本復(fù)溶第一抗體流動(dòng)至質(zhì)控線22后并不與第二 抗體反應(yīng)、也就不會(huì)使質(zhì)控線22顯色，因此可判定層析試條為無(wú)效試條。當(dāng)然，在可保證質(zhì) 量層析試條的前提下，也可不設(shè)置包被第二抗體的質(zhì)控線22。
[0032] 從實(shí)際應(yīng)用角度考慮樣品墊3的作用主要目的是實(shí)現(xiàn)測(cè)試樣本性質(zhì)的調(diào)節(jié)、吸水 墊4主要是提高測(cè)試樣本的流動(dòng)速度，提高測(cè)試的速率和測(cè)試的可靠性，同時(shí)吸水墊4也可