一種肺炎支原體IgM抗體檢測卡的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型屬于醫(yī)學(xué)免疫學(xué)檢測的范疇，涉及一種肺炎支原體IgM抗體的檢測卡。
【背景技術(shù)】
[0002]肺炎支原體(Mycoplasma Pneumoniae, MP)是引起兒童呼吸道感染性疾病的重要病原體，感染后可引起包括心臟、中樞神經(jīng)系統(tǒng)和泌尿系統(tǒng)在內(nèi)的多臟器和系統(tǒng)的肺外并發(fā)癥。據(jù)統(tǒng)計(jì)，MP的發(fā)病率從0.6%-47%不等，MP占兒童社區(qū)獲得性肺炎病原的70%，以4_20歲為最易感人群，并有前移的趨勢。四季均可發(fā)病，以春冬季節(jié)抵抗力下降多發(fā)，可周期爆發(fā)流行。
[0003]MP的發(fā)病機(jī)制主要是呼吸道上皮細(xì)胞吸附機(jī)制:MP的發(fā)病主要是由飛沫傳播，當(dāng)病原體由呼吸道進(jìn)入后，在黏膜表面與呼吸道黏膜上皮細(xì)胞的神經(jīng)氨酸受體緊密結(jié)合而附著，從而造成黏膜上皮的破壞，這是MP的主要致病方式。如果人為的抑制黏膜上皮細(xì)胞的神經(jīng)氨酸受體，MP所致的上皮細(xì)胞損害會大為減弱。與此同時，MP與粘膜上皮細(xì)胞膜有相似的抗原成分，逃避宿主細(xì)胞的免疫監(jiān)視(稱為“MP免疫逃逸”)，牢固吸附在粘膜表面，不易清除，且會釋放其有毒代謝產(chǎn)物，如氨、過氧化氫、蛋白酶及神經(jīng)毒素等，可引起相應(yīng)部位的病變。有學(xué)者曾從MP呼吸道感染者的血液中直接分離到MP，還有學(xué)者從皮損皰疹液和胸腔積液中培養(yǎng)到MP，證明MP可通過血行播散到達(dá)全身任何器官組織。
[0004]MP的臨床表現(xiàn)多種多樣，無典型癥狀，X射線征象缺乏特異性，難以與其他病原體引起感染相鑒別。如不能及時發(fā)現(xiàn)并采取有效的控制措施，可能會進(jìn)展為呼吸道感染、支氣管炎、肺炎及肺外并發(fā)癥。IgM抗體是早期診斷肺炎支原體的特異性抗體。MP感染后，體內(nèi)先產(chǎn)生IgM抗體,一般在感染后一周出現(xiàn),3-4周達(dá)高峰，以后逐漸降低，12-16周轉(zhuǎn)陰。而IgG抗體要在癥狀出現(xiàn)后的7-10天才能被檢測到，因此MP IgG抗體無法應(yīng)用于MP感染的早期診斷，多用于回顧性診斷。MP的早期診斷及早期治療可縮短病程，防止并發(fā)癥的發(fā)生，實(shí)驗(yàn)室檢查是MP感染的一項(xiàng)重要的診斷依據(jù)。
[0005]目前使用的實(shí)驗(yàn)室診斷方法有MP分離培養(yǎng)、血清學(xué)檢測和核酸PCR法等。分離培養(yǎng)是診斷感染的金標(biāo)準(zhǔn)，但操作繁瑣、耗時長，技術(shù)要求高；核酸PCR法需特殊設(shè)備，價(jià)格昂貴，基層醫(yī)院開展比較困難，因此兩者均不適合MP感染的臨床初步診斷。血清學(xué)檢測包括冷凝集試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、明膠顆粒凝集法、ELISA法、MG鏈球菌凝集試驗(yàn)、膠體金免疫層析法及免疫熒光法。其中膠體金免疫層析法和ELISA法是國內(nèi)實(shí)驗(yàn)室方法中比較常用的檢測肺炎支原體的有效方式，ELISA法檢測需要專業(yè)人員和設(shè)備，使用不夠靈活，而膠體金免疫層析法具有5分鐘快速檢測，操作簡單等優(yōu)點(diǎn)，適合對可疑肺炎支原體感染的早期初步篩查，檢測出陽性的病例，再結(jié)合核酸PCR試驗(yàn)或細(xì)胞培養(yǎng)做進(jìn)一步確認(rèn)試驗(yàn)，以明確診斷。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本實(shí)用新型所要解決的技術(shù)問題是提供一種肺炎衣原體IgM抗體檢測卡，加樣前不會對觀察窗口及加樣孔造成污染，可定性檢測人血清樣本中的肺炎支原體IgM抗體，可用于臨床肺炎支原體感染的輔助診斷。具有操作簡便、檢測成本低、靈敏度高、特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，可在醫(yī)療條件不足的邊遠(yuǎn)山區(qū)、基層醫(yī)院、診所開展必要的急救措施。
[0007]本實(shí)用新型采用以下技術(shù)方案:它包括塑料卡殼和試紙部分，所述卡殼為扁平的長方體，卡殼上表面依次設(shè)有觀察窗和加樣孔，試紙固定于卡殼內(nèi)部，所述觀察窗及加樣孔上都密封有可移動塑料隔板，所述的加樣孔和觀察窗上設(shè)有可移動塑料隔板以及漏斗形設(shè)計(jì)有防止加樣前或加樣過程中試紙條受到污染的功效。
[0008]所述卡殼包括上卡殼及下卡殼，上卡殼為面板，下卡殼為底板，面板的檢測端設(shè)有一段拋光面。
[0009]所述上卡殼及下卡殼通過卡扣封閉，所述上卡殼上表面設(shè)有兩個內(nèi)凹孔，一個為底部開口大小為6mm*2.5mm的漏斗形加樣孔,一個為底部開口大小為的長條觀察窗，加樣孔的漏斗設(shè)計(jì)可防止一次性加樣過多造成的樣品外露所述下卡殼內(nèi)部設(shè)有星狀分布的塑料突起構(gòu)成的點(diǎn)狀槽，所述點(diǎn)狀槽用以固定試紙條，防止試紙條的偏移。
[0010]在采用上述技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，本實(shí)用新型還可以采用以下進(jìn)一步方案:
[0011]所述試紙2包括塑料背襯及在塑料背襯上依次粘貼的硝酸纖維素膜、膠體金墊和樣品墊。
[0012]所述試紙2固定于點(diǎn)狀槽6內(nèi)，依次設(shè)置有加樣區(qū)、反應(yīng)區(qū)、吸水區(qū)，其中觀察窗3與反應(yīng)區(qū)的位置相對應(yīng)，加樣孔4與加樣區(qū)的位置相對應(yīng)。
[0013]所述的硝酸纖維素膜上的檢測線上包被有鼠抗人-1gM μ鏈抗體，質(zhì)控線上包被有抗MP抗體。
[0014]采用了本實(shí)用新型方案后，提供了一種肺炎支原體IgM抗體檢測卡，可移動塑料隔板和加樣孔的漏斗型設(shè)計(jì)保證了加樣前不對試紙條造成污染，加樣時不引起交叉污染，能清楚直觀的觀察到測試結(jié)果。同時，本實(shí)用新型操作簡單、反應(yīng)快速、靈敏度高、特異性好，可實(shí)現(xiàn)對肺炎支原體的檢測，用于臨床上對可疑肺炎支原體感染人群的初步篩查。
【附圖說明】
[0015]圖1為本實(shí)用新型的總體結(jié)構(gòu)示意圖。
[0016]圖2為本實(shí)用新型底板的內(nèi)側(cè)圖。
[0017]圖3為本實(shí)用新型面板的內(nèi)側(cè)圖。
【具體實(shí)施方式】
[0018]以下結(jié)合附圖和實(shí)施例對本實(shí)用新型進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。
[0019]本實(shí)用新型包括塑料卡殼I和試紙2部分，其特征在于所述卡殼I為扁平的長方體，卡殼I上表面依次設(shè)有觀察窗3和加樣孔4,試紙2固定于卡殼I內(nèi)部，所述觀察窗3及加樣孔4上都密封有可移動塑料隔板5，所述卡殼I包括上卡殼及下卡殼，所述上卡殼及下卡殼通過卡扣封閉，所述上卡殼上表面設(shè)有兩個內(nèi)凹孔，一個為底部開口大小為6mm*2.5mm的漏斗形加樣孔4，一個為底部開口大小為15mm*3mm的長條觀察窗3，所述下卡殼內(nèi)部設(shè)有星狀分布的塑料突起構(gòu)成的點(diǎn)狀槽6，所述點(diǎn)狀槽(6)用以固定試紙條，加樣孔的漏斗設(shè)計(jì)可防止一次性加樣過多造成的樣品外露，所述下卡殼內(nèi)部設(shè)有星狀分布的塑料突起構(gòu)成的點(diǎn)狀槽(6)，所述點(diǎn)狀槽(6)用以固定試紙條，防止試紙條的偏移。
[0020]所述塑料外殼分為上卡殼和下卡殼，即面板和底板。所述面板和底板內(nèi)面設(shè)有凹凸點(diǎn)和凹凸槽，可實(shí)現(xiàn)兩板的緊密扣合。上卡殼(面板)的檢測端設(shè)有一段拋光橫截面，易持握，試紙條固定在底板的點(diǎn)狀塑料槽內(nèi)，穩(wěn)定性好，試紙條由下至上分別是塑料背襯、硝酸纖維素膜、膠體金墊、樣品墊、吸水墊。
[0021]試紙2固定于點(diǎn)狀槽6內(nèi)，依次設(shè)置有加樣區(qū)、反應(yīng)區(qū)、吸水區(qū)，其中觀察窗3與反應(yīng)區(qū)的位置相對應(yīng)，加樣孔4與加樣區(qū)的位置相對應(yīng)。
[0022]實(shí)施例:
[0023]一種肺炎支原體IgM抗體檢測卡，如圖1所示,包括塑料外殼I和免疫層析試紙條2，外殼I為扁平長方體，底板和面板通過凸點(diǎn)和凹槽嵌合，面板分為測試端和手持端，測試端設(shè)有加樣孔4和觀察窗3，試紙條2通過底板凹槽6固定在底板內(nèi)，所述加樣孔4和觀察窗3用可移動塑料擋板5密封，加樣時拉開塑料擋板進(jìn)行加樣、測試，觀察測試結(jié)果，避免加樣前對試紙條的污染或加樣不當(dāng)引起的交叉污染，手持端設(shè)一段拋光橫截面，具有防滑、易持握的功能。
[0024]底板內(nèi)側(cè)觀，由大小不同散落分布的凸點(diǎn)形成用以固定試紙條的槽，使試紙條2不易發(fā)生偏移，免疫層析試紙條2包括依次設(shè)置的加樣區(qū)、反應(yīng)區(qū)、吸水區(qū)，其中加樣區(qū)與面板上的加樣孔4位置相對應(yīng)，反應(yīng)區(qū)與面板上的觀察窗3相對應(yīng)，反應(yīng)區(qū)有測試線T線和質(zhì)控線C線。
[0025]免疫層析試紙條2包括塑料背襯、樣品墊、膠體金墊、硝酸纖維素膜和吸水墊，塑料背襯上依次粘貼有硝酸纖維素膜、膠體金墊、樣品墊、吸水墊。硝酸纖維素膜上有包被質(zhì)控線和檢測線，觀察窗3與硝酸纖維素膜的位置相對應(yīng)，加樣孔4與樣品墊的位置相對應(yīng)。其中質(zhì)控線為包被在硝酸纖維素膜上的抗Mp抗體構(gòu)成，包被檢測線為包被在硝酸纖維素膜上的鼠抗人-1gM μ鏈抗體構(gòu)成，以膠體金標(biāo)記的MP重組抗原作為指示標(biāo)記物。
[0026]檢測時，血清樣本在毛細(xì)效應(yīng)下層析。如被檢樣本中含有MP IgM抗體時，金標(biāo)MP重組抗原與MP IgM抗體結(jié)合形成復(fù)合物，在層析過程中與固定在檢測線處的鼠抗人-1gMμ鏈抗體結(jié)合形成“Au-MP-Ag — MP-1gM —鼠抗人-1gM μ鏈抗體”夾心物，從而在檢測區(qū)(T)出現(xiàn)一條紫紅色條帶；反之，檢測區(qū)(T)不出現(xiàn)紫紅色條帶。無論被檢樣本中是否存在MP抗體，復(fù)合物都會繼續(xù)向上層析至控制區(qū)(C)，與抗MP抗體反應(yīng)出現(xiàn)一條紫紅色條帶。控制區(qū)(C)所呈現(xiàn)的紫紅色條帶是判斷層析過程是否正常的標(biāo)準(zhǔn)，同時也作為試劑的內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)。
[0027]本實(shí)用新型以上描述不應(yīng)該被認(rèn)為是對本實(shí)用新型的限制。在對本實(shí)用新型的多次顯而易見的修改和替代，也包括在本實(shí)用新型的范圍內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種肺炎支原體IgM抗體檢測卡，它包括塑料卡殼(I)和試紙(2)部分，其特征在于所述卡殼(I)為扁平的長方體，卡殼(I)上表面依次設(shè)有觀察窗(3)和加樣孔(4)，試紙(2)固定于卡殼(I)內(nèi)部，所述觀察窗(3)及加樣孔(4)上都密封有可移動塑料隔板(5)，所述卡殼(I)包括上卡殼及下卡殼，上卡殼為面板，下卡殼為底板，所述上卡殼及下卡殼通過卡扣封閉，所述上卡殼上表面設(shè)有兩個內(nèi)凹孔，一個為底部開口大小為6mm*2.5mm的漏斗形加樣孔(4)，一個為底部開口大小為的長條觀察窗(3)，所述下卡殼內(nèi)部設(shè)有星狀分布的塑料突起構(gòu)成的點(diǎn)狀槽(6)，所述點(diǎn)狀槽(6)用以固定試紙條，面板的檢測端設(shè)有一段拋光面。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種肺炎支原體IgM抗體檢測卡，其特征在于所述試紙(2)包括塑料背襯及在塑料背襯上依次粘貼的硝酸纖維素膜、膠體金墊和樣品墊。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種肺炎支原體IgM抗體檢測卡，其特征在于所述試紙(2)固定于點(diǎn)狀槽(6)內(nèi)，依次設(shè)置有加樣區(qū)、反應(yīng)區(qū)、吸水區(qū)，其中觀察窗(3)與反應(yīng)區(qū)的位置相對應(yīng)，加樣孔(4)與加樣區(qū)的位置相對應(yīng)。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種肺炎支原體IgM抗體檢測卡，其特征在于所述硝酸纖維素膜上的檢測線上包被有鼠抗人-1gM μ鏈抗體，質(zhì)控線上包被有抗MP抗體。
【專利摘要】本實(shí)用新型提供了一種操作簡便、檢測成本低、靈敏度高、特異性強(qiáng)的肺炎衣原體IgM抗體檢測卡，它包括塑料卡殼和試紙部分，所述卡殼為扁平的長方體，卡殼上表面依次設(shè)有觀察窗和加樣孔，試紙固定于卡殼內(nèi)部，所述觀察窗及加樣孔上都密封有可移動塑料隔板。采用了本實(shí)用新型方案后，提供了一種肺炎支原體IgM抗體檢測卡，可移動塑料隔板和加樣孔的漏斗型設(shè)計(jì)保證了加樣前不對試紙條造成污染，加樣時不引起交叉污染，能清楚直觀的觀察到測試結(jié)果。同時，本實(shí)用新型操作簡單、反應(yīng)快速、靈敏度高、特異性好，可實(shí)現(xiàn)對肺炎支原體的檢測，用于臨床上對可疑肺炎支原體感染人群的初步篩查。
【IPC分類】G01N33-569
【公開號】CN204405675
【申請?zhí)枴緾N201420811000
【發(fā)明人】鄭曙劍, 陳國琴, 應(yīng)旭霞
【申請人】杭州隆基生物技術(shù)有限公司
【公開日】2015年6月17日
【申請日】2014年12月18日