專利名稱：一種卡式肺炎支原體抗體檢測試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實用新型涉及一種試劑盒，具體的說，涉及一種卡式肺炎支原體抗體檢 測試劑盒。
技術(shù)背景肺炎支原體屬于一種特殊的微生物，可寄生在人的口腔、腮腺等處。肺炎 支原體既不是病毒，也不是細菌，而是介于病毒與細菌兩者之間的一種微生物， 它主要引起學齡兒童和青少年下呼吸道感染，可以通過呼吸道飛沫傳播。大約每隔4 5年支原體肺炎就會發(fā)生一次流行，以冬春季發(fā)病為主，肺炎支原體感 染的臨床癥狀具備多樣性并且與其它原因引起的呼吸道感染很難區(qū)別，肺炎支 原體可使氣管、支氣管以及細支氣管上皮細胞增生。感染后10 20天后才出現(xiàn) 一些非特異癥狀，如發(fā)燒、頭疼、無痰干咳等，在感染期間還可能發(fā)展成間質(zhì) 性肺炎。肺炎支原體是人類急性呼吸道感染的重要病因之一，可引起非典型肺炎、 氣管炎、支氣管炎等，有大約10%的成人肺炎和20% 25%的兒童肺炎由肺炎 支原體引起，還可以引起其他系統(tǒng)的肺外并發(fā)癥，如腦膜炎、腦干炎、心肌炎、 心包炎、腎炎等。由于肺炎支原體對一般藥物耐藥，所以及時確診可特效治療， 縮短療程，減少并發(fā)癥和不良預后發(fā)生。目前常用的診斷方法有代謝抑制試驗、 補體結(jié)合試驗和酶聯(lián)免疫法等，代謝抑制試驗、補體結(jié)合試驗和酶聯(lián)免疫法操 作繁瑣，需要一些大型的儀器設(shè)備，需專門人員操作實驗，使用不方便。 發(fā)明內(nèi)容本實用新型的目的是提供一種特異性強、靈敏度高、快捷方便、安全、結(jié) 果準確、適應臨床需要的一種卡式肺炎支原體抗體檢測試劑盒。為達到上述目的，本實用新型采用的技術(shù)方案是 一種卡式肺炎支原體抗 體檢測試劑盒，其特征是所述試劑盒包括-檢測板，所述檢測板為包括板體、板蓋的盒狀體，所述板蓋與板體固定連 接，所述板蓋上設(shè)有檢測孔，所述板體內(nèi)與檢測孔位置對應處設(shè)有反應膜，所 述反應膜的一端設(shè)有包被MP抗原的檢測區(qū)，另一端設(shè)有包被抗鼠抗體的對照區(qū)， 所述反應膜的下部設(shè)有吸水墊；一金標液瓶，所述金標液瓶內(nèi)盛有膠體金納米粒子與單克隆抗體的標記結(jié) 合物；和一洗滌液瓶，盛有洗滌液，用以浸潤膜片、洗滌本底和去非特異性反應。 作為上述技術(shù)方案的優(yōu)化方案，所述反應膜為硝酸纖維素膜。 作為上述技術(shù)方案的另一種優(yōu)化方案，所述板蓋的底面上設(shè)有若干個用來固定板蓋和板體的定位銷，所述板體上設(shè)有與定位銷配合的定位槽。作為上述技術(shù)方案的再一種優(yōu)化方案，所述板蓋上對應檢測區(qū)的位置標注有字母"T"，對應對照區(qū)的位置標注有字母"C"。作為上述技術(shù)方案進一步的優(yōu)化方案，所述試劑盒包括-一外包裝盒，所述外包裝盒內(nèi)盛有40片用鋁箔袋包裝的檢測板、 一個金標 液瓶、 一個洗滌液瓶。所述試劑盒的使用方法包括以下步驟(1) 樣本收集采取靜脈血于干凈未加抗凝劑的容器內(nèi)，靜置使血凝固，分離血清準備檢(2) 檢測a、 取出檢測板，室溫平衡20 30分鐘；b、 滴加洗滌液l滴于檢測孔中，待液體將硝酸纖維素膜完全濕潤；c、 加待測血清150ul于檢測孔中，待液體充分吸入；d、 滴加金標液3滴于檢測孔中，待液體充分吸入；e、 滴加洗滌液3滴于檢測孔中，待液體充分吸入后于3分鐘內(nèi)觀察結(jié)果。(3) 結(jié)果判斷檢測板的檢測孔內(nèi)滴入液體后，吸水材料使液體緩慢下滲濾過，在滲濾的 同時完成特異性的抗原抗體反應。
a、 陰性若被檢樣品中沒有肺炎支原體抗體，反應體系中的金標單克隆抗體與包被 的MP抗原無法形成間接抗原抗體反應，即在標注有字母"T"的檢測區(qū)內(nèi)無紅色反應標記出現(xiàn)。同時，反應體系中的金標單克隆抗體與對照區(qū)包被的抗鼠IgG多抗反應結(jié)合，在標注有字母"c"的對照區(qū)處形成一個紅色沉積反應標記，這表明被測樣品中無肺炎支原體抗體，為陰性結(jié)果；同時說明試劑整體反應系統(tǒng) 工作正常。b、 陽性若被檢樣品中存在肺炎支原體抗體，則其先與硝酸纖維素膜上包被的MP抗原發(fā)生抗原抗體反應，形成抗原一抗體復合物而滯留在膜上，其它無關(guān)抗體和 物質(zhì)則被濾過，當再加入金標抗人單克隆抗體時，便與之發(fā)生反應，形成金標抗人單克隆抗體一MP抗體一MP抗原的免疫復合物，即在標注有字母"T"的檢 測區(qū)內(nèi)有紅色反應標記出現(xiàn)。同時，反應體系中的金標單克隆抗體與對照區(qū)包 被的抗鼠IgG多抗反應結(jié)合，在標注有字母"C"的對照區(qū)處形成一個紅色沉積 反應標記。檢測區(qū)有檢測標記出現(xiàn)，這表明被測樣品中有肺炎支原體抗體，為 陽性結(jié)果。C、無效反應后，在標注有字母"C"的對照區(qū)處不顯色，表明本次檢測無效。(4)注意事項a、 必須使用新鮮血清測定。少數(shù)標本如高脂血、溶血等可使背景偏深，一 般不影響結(jié)果判斷。b、 加液體的各步操作之間不得有時間間隔；同一步驟中所加液體應迅速一 次加入后等其滲入。c、 超過規(guī)定時間出現(xiàn)的結(jié)果無效。d、 對照區(qū)標記的強弱并不代表試劑質(zhì)量的優(yōu)劣，只要其顯色清楚可見，即表明試劑有效。e、 不同產(chǎn)品、同產(chǎn)品不同批次之間的金標液嚴禁混用。有益效果本實用新型采用以上技術(shù)方案，具有特異性強、靈敏度高、快捷、 簡便、直觀，不需要特殊的儀器設(shè)備，適應臨床需要的優(yōu)點，因此，本實用新 型具有較高的社會價值和經(jīng)濟價值。
以下結(jié)合附圖和實施例對本實用新型作進一步說明。

附圖1為本實用新型實施例1的結(jié)構(gòu)示意圖； 附圖2為附圖1中A-A向的結(jié)構(gòu)示意圖； 附圖3為本實用新型實施例2的結(jié)構(gòu)示意圖； 附圖4為附圖3中B-B向的結(jié)構(gòu)示意圖。
具體實施方式
實施例l，如圖l、圖2所示， 一種卡式肺炎支原體抗體檢測試劑盒，包括 一外包裝盒，外包裝盒內(nèi)盛放有40片用鋁箔袋包裝的檢測板1、 一個金標液瓶、 一個洗滌液瓶， 一個鋁箔袋內(nèi)裝有一片檢測板l，金標液瓶內(nèi)盛有膠體金納米粒 子與單克隆抗體的標記結(jié)合物，洗滌液瓶內(nèi)盛有用以浸潤膜片、洗滌本底和去 非特異性反應的洗滌液，檢測板1為包括板體12、板蓋11的盒狀體，板蓋11 的底面上設(shè)有若干個用來固定板蓋11和板體12的定位銷7，板體12上設(shè)有與 定位銷7配合的定位槽8，板蓋11上開有方形的檢測孔2，板體12內(nèi)與檢測孔 2位置對應處設(shè)有反應膜3，反應膜3為硝酸纖維素膜，反應膜3的左側(cè)為包被 有MP抗原的線形檢測區(qū)5，板蓋11上標注有字母"T"，右側(cè)為包被有抗鼠抗體 的線形對照區(qū)6，板蓋11上標注有字母"C"，反應膜3的下部設(shè)置有吸水墊4。本實用新型試劑盒的使用方法包括以下步驟(1)樣本收集采取靜脈血于干凈未加抗凝劑的容器內(nèi)，靜置使血凝固，分離血清準備檢測；a、 取出檢測板l，室溫平衡20 30分鐘；b、 滴加洗滌液l滴于方形檢測孔2中，待液體將硝酸纖維素膜完全濕潤；c、 加待測血清150ul于方形檢測孔2中，待液體充分吸入；d、 滴加金標液3滴于方形檢測孔2中，待液體充分吸入；e、 滴加洗滌液3滴于方形檢測孔2中，待液體充分吸入后于3分鐘內(nèi)觀祭 結(jié)果。(3)結(jié)果判斷檢測板的檢測孔2內(nèi)滴入液體后，吸水材料使液體緩慢下滲濾過，在滲濾的同時完成特異性的抗原抗體反應。a、 陰性反應后，在標注有字母"C"的對照區(qū)6處形成一個紅色沉積反應線，在標 注有字母"T"的檢測區(qū)5處無反應線出現(xiàn)，表明被測樣品中無肺炎支原體抗體， 為陰性結(jié)果；b、 陽性-反應后，在標注有字母"C"的對照區(qū)6處形成一個紅色沉積反應線，同時 在標注有字母"T"的檢測區(qū)5處形成一個紅色沉積反應線，表明被測樣品中有肺炎支原體抗體，為陽性結(jié)果； C、無效反應后，在標注有字母"C"的對照區(qū)6處不顯色，表明本次檢測無效。 實施例2，如圖3、圖4所示的一種卡式肺炎支原體抗體檢測試劑盒，檢測孔為圓形檢測孔，檢測區(qū)為圓形檢測區(qū)，對照區(qū)為圓形對照區(qū)，形成的紅色反應標記為圓點，其余與實施例1相同。
權(quán)利要求1、一種卡式肺炎支原體抗體檢測試劑盒，其特征是所述試劑盒包括檢測板(1)，所述檢測板(1)為包括板體(12)、板蓋(11)的盒狀體，所述板蓋(11)與板體(12)固定連接，所述板蓋(11)上設(shè)有檢測孔(2)，所述板體(12)內(nèi)與檢測孔(2)位置對應處設(shè)有反應膜(3)，所述反應膜(3)的一端設(shè)有包被MP抗原的檢測區(qū)(5)，另一端設(shè)有包被抗鼠抗體的對照區(qū)(6)，所述反應膜(3)的下部設(shè)有吸水墊(4)；一金標液瓶，所述金標液瓶內(nèi)盛有膠體金納米粒子與單克隆抗體的標記結(jié)合物；和一洗滌液瓶，盛有洗滌液，用以浸潤膜片、洗滌本底和去非特異性反應。
2、 如權(quán)利要求1所述的一種卡式肺炎支原體抗體檢測試劑盒，其特征是 所述反應膜(3)為硝酸纖維素膜。
3、 如權(quán)利要求2所述的一種卡式肺炎支原體抗體檢測試劑盒，其特征是 所述板蓋(11)的底面上設(shè)有若干個用來固定板蓋(11)和板體(12)的定位 銷(7)，所述板體(12)上設(shè)有與定位銷(7)配合的定位槽(8)。
4、 如權(quán)利要求3所述的一種卡式肺炎支原體抗體檢測試劑盒，其特征是 所述板蓋(11)上對應檢測區(qū)(5)的位置標注有字母"T"，對應對照區(qū)(6) 的位置標注有字母"C"。
5、 如權(quán)利要求1、 2、 3、 4其中之一所述的一種卡式肺炎支原體抗體檢測試劑盒，其特征是所述試劑盒包括一外包裝盒，所述外包裝盒內(nèi)盛有40片用鋁箔袋包裝的檢測板(1)、 一個 金標液瓶、 一個洗滌液瓶。
專利摘要本實用新型公開了一種卡式肺炎支原體抗體檢測試劑盒，試劑盒包括檢測板，檢測板為包括板體、板蓋的盒狀體，板蓋與板體固定連接，板蓋上設(shè)有檢測孔，所述板體內(nèi)與檢測孔位置對應處設(shè)有反應膜，反應膜的一端包被有MP抗原，另一端包被有抗鼠抗體，反應膜的下部設(shè)有吸水墊，一金標液瓶，金標液瓶內(nèi)盛有膠體金納米粒子與單克隆抗體的標記結(jié)合物，洗滌液瓶，盛有洗滌液，用以浸潤膜片、洗滌本底和去非特異性反應，具有特異性強、靈敏度高、快捷、簡便、直觀，不需要特殊的儀器設(shè)備，適應臨床需要的優(yōu)點，因此，本實用新型具有較高的社會價值和經(jīng)濟價值。
文檔編號G01N33/577GK201045616SQ20072002168
公開日2008年4月9日 申請日期2007年5月11日 優(yōu)先權(quán)日2007年5月11日
發(fā)明者劉玉華, 楊致亭, 力 王, 王好玉, 王愛香 申請人:楊致亭