一種基于氫核磁共振快速測定牛磺熊去氧膽酸純度的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種基于氫核磁共振快速測定?；切苋パ跄懰嵩纤幖兌鹊姆椒?，包括以下步驟：(1)測定?；切苋パ跄懰岷蛢?nèi)標(biāo)物各定量目標(biāo)峰的縱向弛豫時間T1；(2)根據(jù)所測定的T1值設(shè)置核磁共振波普儀的傾倒角和弛豫延遲時間(d1)，所述傾倒角為30～90°，弛豫延遲時間(d1)≥(7/3×T1max～5×T1max)；(3)設(shè)定核磁共振波譜儀的其他相關(guān)檢測參數(shù)，根據(jù)如下公式(1)計(jì)算牛磺熊去氧膽酸純度：W％＝(mIS×HIS×AS×MS×100％)/(MIS×AIS×HS×mS)。本發(fā)明具有操作簡便，內(nèi)標(biāo)物廉價(jià)易得，結(jié)果準(zhǔn)確且重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。
【專利說明】
一種基于氫核磁共振快速測定牛磺熊去氧膽酸純度的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥分析技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種基于氫核磁共振快速測定牛磺熊去 氧膽酸純度的檢測方法。
【背景技術(shù)】
[0002] ?；切苋パ跄懰釣樾苣懼械闹饕行С煞?，具有解痙、抗驚厥、抗炎及溶膽石作 用，臨床上主要用于治療原發(fā)硬化性膽管炎、膽囊膽固醇結(jié)石、原發(fā)膽汁性肝硬化等肝膽疾 病。?；切苋パ跄懰嶙钤缬梢獯罄鸅ruschettini S. R. L.大藥廠研發(fā)，并于2007年獲準(zhǔn)在中 國銷售。近年來，國內(nèi)關(guān)于牛磺熊去氧膽酸的研究一直非?；钴S。目前，主要以動物膽酸類 物質(zhì)為起始原料進(jìn)行化學(xué)合成，其中，市場上的主流產(chǎn)品為以鵝去氧膽酸為原料合成高純 度熊去氧膽酸，進(jìn)而制備高純度?；切苋パ跄懰?。除少量參與化學(xué)反應(yīng)的原料及膽酸類副 產(chǎn)物影響?；切苋パ跄懰岙a(chǎn)品的純度外，產(chǎn)品中往往含有一定量的溶劑殘留，現(xiàn)有色譜方 法很難一次性準(zhǔn)確測定牛磺熊去氧膽酸的真正純度。因此開展?；切苋パ跄懰峒兌葴y定方 法研究對確保醫(yī)藥企業(yè)研發(fā)生產(chǎn)過程中的產(chǎn)品質(zhì)量具有重要意義。
[0003] 目前，對?；切苋パ跄懰?結(jié)構(gòu)式如下式所示)純度的檢測通常使用高效液相色譜 儀、C18反相色譜柱，以紫外檢測器波長為210nm，以甲醇-磷酸二氫鈉溶液(0.3mol/L)(68: 32)(以磷酸調(diào)節(jié)PH值為4.4)為流動相進(jìn)行測定。以上色譜法的主要不足是：（1)由于在 210nm的區(qū)域檢測，儀器噪音高，選擇性較差；（2)對于樣品中的溶劑殘留，如水、乙醇、乙腈 等，仍需結(jié)合氣相色譜等方法扣除溶劑殘留量；（3)峰形及出峰時間受水相中緩沖鹽的比例 影響較大，進(jìn)而影響純度測定結(jié)果；（4)定量時需要高純度的?；切苋パ跄懰針?biāo)準(zhǔn)品，但標(biāo) 準(zhǔn)品價(jià)格昂貴，長期使用成本高，而且在存放過程中標(biāo)準(zhǔn)品發(fā)生吸潮、污染或降解等均會嚴(yán) 重影響測定結(jié)果。而藥品原料藥純度檢測方法的研究是醫(yī)藥研發(fā)中一項(xiàng)重要內(nèi)容，藥品制 劑原料的純度最終影響成藥的用藥安全和療效。因此，有必要開發(fā)一種能對?；切苋パ跄?酸純度進(jìn)行廉價(jià)、簡便、快速、準(zhǔn)確測定的分析方法。
[0004] 氫核磁共振法因其具有的高靈敏度、高精確度、分析快速等優(yōu)點(diǎn)已被廣泛應(yīng)用于 有機(jī)化合物的結(jié)構(gòu)解析和定性分析中，然而使用氫核磁共振法對某種特定化合物進(jìn)行純度 測定定量分析時，由于影響其測量準(zhǔn)確性的參數(shù)眾多，而各化合物之間結(jié)構(gòu)、性質(zhì)上差異巨 大，且參數(shù)設(shè)置無明確規(guī)律可以依循，因此構(gòu)建一套基于氫核磁共振法準(zhǔn)確測定化合物純 度的體系十分困難。目前，尚未有基于氫核磁共振法測定?；切苋パ跄懰峒兌鹊膱?bào)道。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 針對上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供基于氫核磁共振快速測定牛磺熊去氧膽酸 純度的方法，該方法具有操作簡便，內(nèi)標(biāo)物廉價(jià)易得，結(jié)果準(zhǔn)確且重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。
[0007] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：
[0008] -種基于氫核磁共振快速測定?；切苋パ跄懰峒兌鹊姆椒ǎㄒ韵虏襟E：
[0009] (1)測定?；切苋パ跄懰岷蛢?nèi)標(biāo)物各定量目標(biāo)峰的縱向弛豫時間T1;
[0010] (2)根據(jù)所測定的Ti值設(shè)置核磁共振波普儀的傾倒角和弛豫延遲時間(cU)，所述傾 倒角為30~90°，弛豫延遲時間（di)彡（7/3 XTimax~5 XTimax);
[0011] (3)設(shè)定核磁共振波譜儀的其他相關(guān)檢測參數(shù)，測定?；切苋パ跄懰峒皟?nèi)標(biāo)物中 各定量目標(biāo)峰的積分面積，根據(jù)如下公式(1)計(jì)算?；切苋パ跄懰峒兌龋?br>[0012] ff% = (misXHisXAsXMsX100%)/(MisXAisXHsXms) (1)
[0013] 其中，W%為牛磺熊去氧膽酸的純度;mIS為內(nèi)標(biāo)物的實(shí)際質(zhì)量（內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量X純 度），單位為mg;H IS為內(nèi)標(biāo)物定量目標(biāo)峰的質(zhì)子數(shù);As為?；切苋パ跄懰岫磕繕?biāo)峰的積分 值;Ms為牛磺熊去氧膽酸的摩爾質(zhì)量，單位為g/mol ;Mis為內(nèi)標(biāo)物的摩爾質(zhì)量，單位為g/mol; AIS為內(nèi)標(biāo)物定量目標(biāo)峰的積分值;Hs為牛磺熊去氧膽酸定量目標(biāo)峰的質(zhì)子數(shù);ms為?；切?去氧膽酸樣品的質(zhì)量，單位為mg。
[0014] 優(yōu)選的，所述傾倒角為30°、70°或90°，所述弛豫延遲時間（cb)為6~100s;
[0015] 優(yōu)選的，所述核磁共振波譜儀的檢測參數(shù)為:共振頻率為400MHz，譜寬20ppm，測試 溫度28°C，采樣時間(AQ)為2.0~4. Is;采樣累加次數(shù)為32~64次；
[0016] 優(yōu)選的，氘代試劑為重水、氘代甲醇或氘代二甲基亞砜(DMS〇-d6);
[0017]進(jìn)一步優(yōu)選的，所述氘代試劑為氘代二甲基亞砜；
[0018]優(yōu)選的，所述?；切苋パ跄懰岬臋z測濃度為23.5-26.5mg/mL;
[0019] 優(yōu)選的，所述?；切苋パ跄懰岬亩磕繕?biāo)峰化學(xué)位移為δΗ 0.61 (18位角甲基信 號)；
[0020] 優(yōu)選的，所述內(nèi)標(biāo)物為其質(zhì)子化學(xué)位移在δΗ 16.00~6.28或δΗ 6.28~3.30或δΗ 3.28~2.58或δΗ 〇. 60~0.00范圍，且室溫條件下不與?；切苋パ跄懰岚l(fā)生化學(xué)反應(yīng)的任 意物質(zhì)；
[0021] 進(jìn)一步優(yōu)選的，所述內(nèi)標(biāo)物為順丁烯二酸；
[0022]優(yōu)選的，所述測定?；切苋パ跄懰峒皟?nèi)標(biāo)物中各定量目標(biāo)峰的積分面積的計(jì)算方 法為對每一信號6次積分取平均值。
[0023]氫核磁共振定量的基礎(chǔ)是在合適的儀器參數(shù)下，定量目標(biāo)信號的積分值與引起該 信號的質(zhì)子數(shù)成正比關(guān)系，通過選擇適當(dāng)?shù)膬?nèi)標(biāo)物，根據(jù)定量目標(biāo)峰的積分值推算該信號 所屬化合物的摩爾濃度，進(jìn)而計(jì)算各定量化合物的質(zhì)量及純度。在實(shí)際研究過程中，
【申請人】 發(fā)現(xiàn)脈沖傾倒角和弛豫延遲時間（di)直接影響最終定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。當(dāng)采用90°脈沖時， cU多5XT lmax是確保含量測定數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性的必須條件，分析時間較長，氫核磁定量快速性的 優(yōu)點(diǎn)得不到發(fā)揮；當(dāng)采用較小脈沖傾倒角時，如30°脈沖，此時就能夠獲得 準(zhǔn)確的分析結(jié)果，且分析時間大大縮短。因此，本申請首先通過測定定量目標(biāo)信號的縱向弛 豫時間(T:)，進(jìn)而確定脈沖傾倒角和弛豫延遲時間(cb )，并最終建立了基于氫核磁共振快速 測定?；切苋パ跄懰嵩纤幖兌鹊姆椒āＳ捎谠跍y定過程中不需要特定研發(fā)藥品的對照 品，因此，特別適合新藥研發(fā)原料藥的純度測定。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明有如下有益效果：
[0024] (1)本發(fā)明利用氫核磁共振技術(shù)檢測?；切苋パ跄懰峒兌?，首先測定了可用于氫 核磁定量目標(biāo)信號的^值，并在此基礎(chǔ)上深入討論了儀器脈沖傾倒角和弛豫延遲時間等參 數(shù)對含量測定結(jié)果的影響，同時選擇廉價(jià)穩(wěn)定效果好的內(nèi)標(biāo)物對?；切苋パ跄懰嵩纤庍M(jìn) 行純度測定，操作簡便，結(jié)果準(zhǔn)確且重復(fù)性好；
[0025] (2)本發(fā)明樣品前處理簡單，分析時間短，特別適合無紫外吸收的醫(yī)藥品種原料藥 的純度分析及質(zhì)量控制，能夠有效解決牛磺熊去氧膽酸以及類?；切苋パ跄懰岬男滤幖兌?測定的技術(shù)問題，為此類藥物純度測定提供了新方法。
[0026]需要說明的是，核磁共振定量的原理是含氫有機(jī)化合物NMR波譜信號直接與原子 數(shù)目成正比，因此在實(shí)驗(yàn)參數(shù)設(shè)定時，需要被測物和內(nèi)標(biāo)物上的共振峰與其對應(yīng)的原子數(shù) 盡可能保持一致，若選擇不合適位置的氫進(jìn)行純度的測定，則受溶劑中雜質(zhì)以及溶劑本身 等干擾峰的影響較大，被測組分和雜質(zhì)信號之間存在干擾，被測組分和內(nèi)標(biāo)也會出現(xiàn)信號 重疊，導(dǎo)致積分不準(zhǔn)確，檢測結(jié)果重現(xiàn)性差。本發(fā)明中的待檢測物質(zhì)?；切苋パ跄懰岱肿恿?高達(dá)500,結(jié)構(gòu)式如【背景技術(shù)】中所示，實(shí)際上除了羰基、羥基、氨基等位置上比較活潑的氫不 易被測出外，?；切苋パ跄懰徇€有約二十個不同位置的氫，每一位移峰都會對應(yīng)不同的傾 倒角和弛豫延遲時間等參數(shù)，所以選擇哪個位置的氫進(jìn)行純度測定是目前限制利用氫核磁 共振測定?；切苋パ跄懰峒兌鹊募夹g(shù)難題之一。
[0027] 而內(nèi)標(biāo)物的選擇最基本的原則是室溫條件下不與?；切苋パ跄懰岚l(fā)生化學(xué)反應(yīng) 的物質(zhì)，但是在內(nèi)標(biāo)物的物的選擇時還要考慮被測物質(zhì)的氫共振峰與內(nèi)標(biāo)的氫共振峰之間 要避免重疊以及內(nèi)標(biāo)物是否廉價(jià)易得等，目前可用于作為內(nèi)標(biāo)物的物質(zhì)有苯、苯甲酸芐酯、 馬來酸、過氧化苯甲酰、非那西汀、2,4_二硝基甲苯、三氟乙酸鈉，DMS〇-d 6,鄰苯二甲酸氫鉀 等多種，每種內(nèi)標(biāo)物都有至少一種氫共振峰，待測物質(zhì)?；切苋パ跄懰岬倪x擇哪個位置的 氫作為檢測對象并不確定，所以選擇何種內(nèi)標(biāo)物，何種氫共振峰都是沒有任何依據(jù)的，這也 是目前限制利用氫核磁共振測定?；切苋パ跄懰峒兌鹊募夹g(shù)難題之一。
[0028] 此外，需要說明的是，研究者通常對核磁共振檢測過程中的測定溫度和待測物檢 測濃度并不關(guān)注，對于測定溫度研究者基本都選定室溫作為測定溫度，但
【申請人】在基于氫 核磁共振快速測定?；切苋パ跄懰峒兌鹊难芯恐邪l(fā)現(xiàn)，適度提高溫度能夠有效促使H0D峰 向高場移動，而且有效提高譜圖分辨率，
【申請人】發(fā)現(xiàn)在28°C時效果最佳，過高溫度反而使譜 圖分辨率下降，不利于檢測結(jié)果的準(zhǔn)確測定。同時，對待測物濃度選取學(xué)術(shù)界也是莫衷一 是，目前對核磁共振檢測樣品的濃度一般為20mg/mL左右，
【申請人】在實(shí)際檢測中發(fā)現(xiàn)，針對 ?；切苋パ跄懰岫?，適當(dāng)提高待測樣品濃度，可以增大樣品信號在采集到信號中所占百 分比，從而達(dá)到提高信噪比目的，經(jīng)過分析?；切苋パ跄懰釞z測濃度為23.5-26.5mg/mL時 檢測精度最尚。
[0029]
【申請人】有必要指出，脈沖傾倒角和弛豫延遲時間（cU)是建立氫核磁共振定量方法 過程中兩個重要儀器參數(shù)，直接影響最終定量結(jié)果的準(zhǔn)確性，目前雖然也有研究這些參數(shù) 與檢測結(jié)果關(guān)系的文獻(xiàn)報(bào)道，然而在實(shí)際測定純度時研究人員往往直接將內(nèi)標(biāo)物與待測物 質(zhì)溶解于溶劑中，進(jìn)行儀器參數(shù)設(shè)定的測量，在進(jìn)行參數(shù)的設(shè)定時則將脈沖傾倒角和弛豫 延遲時間等同于共振頻率等常規(guī)參數(shù)一起進(jìn)行設(shè)定，這使得使用測量時對參數(shù)設(shè)置存在盲 目性，往往需要進(jìn)行多次試驗(yàn)才能確定較佳參數(shù)，費(fèi)時費(fèi)力。本申請發(fā)明人在研究過程中則 突破傳統(tǒng)思維，首先測定?；切苋パ跄懰峒皟?nèi)標(biāo)物定量目標(biāo)峰在氘代試劑中的縱向弛豫時 間(Tl)，再根據(jù)所測定的!^值設(shè)置核磁共振波譜儀的傾倒角和弛豫延遲時間( dl)，提高分析 樣品的準(zhǔn)確性和效率。
【附圖說明】
[0030] 圖1為實(shí)例1中核磁共振氫譜圖；
[0031] 圖2為實(shí)例2中核磁共振氫譜圖；
[0032]圖3為實(shí)例3中核磁共振氫譜圖；
[0033]圖4為實(shí)例4中核磁共振氫譜圖；
[0034]圖5為實(shí)例5中核磁共振氫譜圖；
[0035]圖6為實(shí)例6中核磁共振氫譜圖；
[0036]圖7為實(shí)例7中核磁共振氫譜圖；
[0037]圖8為實(shí)例8中核磁共振氫譜圖；
[0038]圖9為實(shí)例9中核磁共振氫譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0039]稱取牛磺熊去氧膽酸13.2111^、順丁烯二酸0.65411^，分別置于核磁管中，加入 0.5mL DMS〇-d6溶解，用于咕NMR測試。采用質(zhì)子反轉(zhuǎn)-恢復(fù)1^實(shí)驗(yàn)方法測定各定量目標(biāo)峰的 縱向弛豫時間Τι，并用Bruker的Τι計(jì)算程序計(jì)算。設(shè)定脈沖弛豫延遲時間范圍為1秒至30秒。 經(jīng)測定以DMS〇-d 6為溶劑時，順丁烯二酸δΗ 6.28信號峰1^為2.5s，?；切苋パ跄懰幡摩?〇. 61 處信號Τι為398ms。
[0040] 下面結(jié)合附圖與實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明，應(yīng)該說明的是，下述說明僅是為 了解釋本發(fā)明，并不對其內(nèi)容進(jìn)行限定。
[0041] 實(shí)施例1-9所用?；切苋パ跄懰針悠穼?shí)際純度為96.0%。
[0042] 實(shí)施例1
[0043] 精密稱取?；切苋パ跄懰針悠?4.112mg、順丁烯二酸2.037mg，分別以600μL、250μ L DMS〇-d6溶解，后精密取440yL?；切苋パ跄懰崛芤?、60yL順丁烯二酸溶液轉(zhuǎn)移到核磁管 中，進(jìn)行咕NMR測試。核磁共振波譜儀共振頻率為400MHz，90°脈沖，cU為100s，采樣累加次數(shù) 為64次，譜寬20ppm，測試溫度為28°C，AQ為4. Is。
[0044] 在1Η匪R譜中，內(nèi)標(biāo)物順丁烯二酸δΗ 6.28信號峰積分值為1，?；切苋パ跄懰幡摩? 0.61處信號積分值為7.08,根據(jù)公式-1可計(jì)算得到?；切苋パ跄懰岬募兌葹?5.0%，重復(fù)5 次，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差0.2%。
[0045] ff% = (misXHisXAsXMsX100%)/(MisXAisXHsXms)(公式 _1)
[0046] W%-?；切苋パ跄懰岬募兌?br>[0047] mis-內(nèi)標(biāo)物的實(shí)際質(zhì)量（內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量X純度），0.484mg
[0048] HIS -內(nèi)標(biāo)物定量目標(biāo)峰的質(zhì)子數(shù)，為2 [0049] As-?；切苋パ跄懰岫磕繕?biāo)峰的積分值，為7.08 [0050] Ms-?；切苋パ跄懰岬哪栙|(zhì)量，499.70g/mol
[0051 ] Mis一內(nèi)標(biāo)物的摩爾質(zhì)量，116.07g/mol
[0052] AIS -內(nèi)標(biāo)物定量目標(biāo)峰的積分值，為1 [0053] Hs-牛磺熊去氧膽酸定量目標(biāo)峰的質(zhì)子數(shù)，為3 [0054] ms-牛磺熊去氧膽酸樣品的質(zhì)量，10.349mg
[0055] 實(shí)施例2
[0056]咕匪R測試樣品同實(shí)施例1。核磁共振波譜儀共振頻率為400MHz，90°脈沖，ch為 8〇8，采樣累加次數(shù)為32次，譜寬20??111，測試溫度為28°(：4〇為4.18。
[0057]在1Η匪R譜中，內(nèi)標(biāo)物順丁烯二酸δΗ 6.28信號峰積分值為1，牛磺熊去氧膽酸δΗ 0.61處信號積分值為7.14,根據(jù)公式-1可計(jì)算得到?；切苋パ跄懰岬募兌葹?5.8%，重復(fù)5 次，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差0.1%。
[0058] 實(shí)施例3
[0059]咕匪R測試樣品同實(shí)施例1。核磁共振波譜儀共振頻率為400MHz，70°脈沖，ch為 5〇8，采樣累加次數(shù)為64次，譜寬20??111，測試溫度為28°(：4〇為4.18。
[0060]在1Η匪R譜中，內(nèi)標(biāo)物順丁烯二酸δΗ 6.28信號峰積分值為1，?；切苋パ跄懰幡摩?0.61處信號積分值為7.14,根據(jù)公式-1可計(jì)算得到?；切苋パ跄懰岬募兌葹?5.8%，重復(fù)5 次，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差0.3%。
[0061 ] 實(shí)施例4
[0062] 4 NMR測試樣品同實(shí)施例1。核磁共振波譜儀共振頻率為400MHz，90°脈沖，cb為6s， 采樣累加次數(shù)為64次，譜寬20ppm，測試溫度為28°C，AQ為4. Is。
[0063]在1Η匪R譜中，內(nèi)標(biāo)物順丁烯二酸δΗ 6.28信號峰積分值為1，?；切苋パ跄懰幡摩?0.61處信號積分值為7.13,根據(jù)公式-1可計(jì)算得到?；切苋パ跄懰岬募兌葹?5.7%，重復(fù)5 次，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差0.1%。
[0064] 實(shí)施例5
[0065]咕匪R測試樣品同實(shí)施例1。核磁共振波譜儀共振頻率為400MHz，90°脈沖，ch為 258，采樣累加次數(shù)為32次，譜寬20??111，測試溫度為28°(：40為4.18。
[0066]在1Η匪R譜中，內(nèi)標(biāo)物順丁烯二酸δΗ 6.28信號峰積分值為1，牛磺熊去氧膽酸δΗ 0.61處信號積分值為7.12,根據(jù)公式-1可計(jì)算得到?；切苋パ跄懰岬募兌葹?5.6%，重復(fù)5 次，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差0.2%。
[0067] 實(shí)施例6
[0068]咕匪R測試樣品同實(shí)施例1。核磁共振波譜儀共振頻率為400MHz，90°脈沖，ch為 158，采樣累加次數(shù)為32次，譜寬20??111，測試溫度為28°(：4〇為3.〇8。
[0069]在1Η匪R譜中，內(nèi)標(biāo)物順丁烯二酸δΗ 6.28信號峰積分值為1，牛磺熊去氧膽酸δΗ 0.61處信號積分值為7.26,根據(jù)公式-1可計(jì)算得到?；切苋パ跄懰岬募兌葹?7.5%，重復(fù)5 次，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差0.1%。
[0070] 實(shí)施例7
[0071]咕匪R測試樣品同實(shí)施例1。核磁共振波譜儀共振頻率為400MHz，90°脈沖，ch為 138，采樣累加次數(shù)為32次，譜寬20??111，測試溫度為28°(：40為4.18。。
[0072]在1Η匪R譜中，內(nèi)標(biāo)物順丁烯二酸δΗ 6.28信號峰積分值為1，?；切苋パ跄懰幡摩?0.61處信號積分值為7.15,根據(jù)公式-1可計(jì)算得到?；切苋パ跄懰岬募兌葹?6.0%，重復(fù)5 次，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差o.l%。
[0073] 實(shí)施例8
[0074]咕匪R測試樣品同實(shí)施例1。核磁共振波譜儀共振頻率為400MHz，90°脈沖，ch為 158，采樣累加次數(shù)為64次，譜寬20??111，測試溫度為28°(：4〇為2.〇8。
[0075]在1Η匪R譜中，內(nèi)標(biāo)物順丁烯二酸δΗ 6.28信號峰積分值為1，?；切苋パ跄懰幡摩?〇.61處信號積分值為7.24，根據(jù)公式-1可計(jì)算得到?；切苋パ跄懰岬募兌葹?7.2%，重復(fù)5 次，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差0.2%。
[0076] 實(shí)施例9
[0077]咕匪R測試樣品同實(shí)施例1。核磁共振波譜儀共振頻率為400MHz，30°脈沖，ch為 138，采樣累加次數(shù)為32次，譜寬20??111，測試溫度為28°(：40為4.18。
[0078]在1Η匪R譜中，內(nèi)標(biāo)物順丁烯二酸δΗ 6.28信號峰積分值為1，?；切苋パ跄懰幡摩?2.06處信號積分值為6.95，根據(jù)公式-1可計(jì)算得到?；切苋パ跄懰岬募兌葹?3.3%，重復(fù)5 次，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差0.1%。
[0079]上述雖然結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】進(jìn)行了描述，但并非對本發(fā)明保護(hù) 范圍的限制，所屬領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該明白，在本發(fā)明的技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，本領(lǐng)域技術(shù)人員 不需要付出創(chuàng)造性勞動即可做出的各種修改或變形仍在本發(fā)明的保護(hù)范圍以內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種基于氫核磁共振快速測定?；切苋パ跄懰嵩纤幖兌鹊姆椒?，其特征在于，包 括以下步驟： (1) 測定?；切苋パ跄懰岷蛢?nèi)標(biāo)物各定量目標(biāo)峰的縱向弛豫時間Ti; (2) 根據(jù)所測定的Ti值設(shè)置核磁共振波普儀的傾倒角和弛豫延遲時間(cU)，所述傾倒角 為30~90°，所述弛豫延遲時間（di)多（7/3 X Timax~5 X Timax)。2. 如權(quán)利要求1所述的一種基于氫核磁共振快速測定?；切苋パ跄懰嵩纤幖兌鹊姆?法，其特征在于，所述傾倒角為30°、70°或90°，所述弛豫延遲時間（cU)為6~100s。3. 如權(quán)利要求1所述的一種基于氫核磁共振快速測定牛磺熊去氧膽酸原料藥純度的方 法，其特征在于，核磁共振波譜儀的檢測參數(shù)為:共振頻率為400MHz，譜寬20ppm，測試溫度 28°C，采樣時間(AQ)為2.0~4. Is;采樣累加次數(shù)為32~64次。4. 如權(quán)利要求1所述的一種基于氫核磁共振快速測定?；切苋パ跄懰嵩纤幖兌鹊姆?法，其特征在于，氘代試劑為重水、氘代甲醇或氘代二甲基亞砜。5. 如權(quán)利要求4所述的一種基于氫核磁共振快速測定牛磺熊去氧膽酸原料藥純度的方 法，其特征在于，所述氘代試劑為氘代二甲基亞砜。6. 如權(quán)利要求1所述的一種基于氫核磁共振快速測定?；切苋パ跄懰嵩纤幖兌鹊姆?法，其特征在于，所述?；切苋パ跄懰岬臋z測濃度為23.5-26.5mg/mL。7. 如權(quán)利要求1所述的一種基于氫核磁共振快速測定牛磺熊去氧膽酸原料藥純度的方 法，其特征在于，所述?；切苋パ跄懰岬亩磕繕?biāo)峰化學(xué)位移為知0.61。8. 如權(quán)利要求1所述的一種基于氫核磁共振快速測定?；切苋パ跄懰嵩纤幖兌鹊姆?法，其特征在于，所述內(nèi)標(biāo)物為其質(zhì)子化學(xué)位移在5 1116.00~6.28七6.28~3.30^3.28 ~2.58或δΗ 〇. 60~0.00范圍內(nèi)，且室溫條件下不與?；切苋パ跄懰岚l(fā)生化學(xué)反應(yīng)的任意 物質(zhì)。9. 如權(quán)利要求1或8所述的一種基于氫核磁共振快速測定?；切苋パ跄懰嵩纤幖兌?的方法，其特征在于，所述內(nèi)標(biāo)物為順丁烯二酸。10. 如權(quán)利要求1所述的一種基于氫核磁共振快速測定?；切苋パ跄懰嵩纤幖兌鹊?方法，其特征在于，測定?；切苋パ跄懰峒皟?nèi)標(biāo)物中各定量目標(biāo)峰的積分面積的計(jì)算方法 為對每一信號6次積分取平均值。
【文檔編號】G01N24/08GK106018455SQ201610322785
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年5月16日
【發(fā)明人】王志偉, 魏祥玉, 李鋒, 林云良, 趙汝松, 閆慧嬌, 陳躍, 高紅梅
【申請人】山東省分析測試中心