一種克拉霉素的雜質檢測方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明提供一種克拉霉素原料藥中雜質的檢測方法，屬于分析方法一類。
【背景技術】
[0002] 克拉霉素是紅霉素的衍生物，20世紀90年代初由日本大正公司開發(fā)成功，并以商 品名Clarith注冊。爾后，大正公司首先將其技術轉讓給美國雅培公司生產(chǎn)；1990年在愛 爾蘭、意大利上市，1991年10月獲FDA批準定為IB類新藥上市，商品名Biaxin，1993年以 Klacid在中國香港上市，在歐洲和亞洲的商品名為克拉仙，已在全球50多個國家上市，市 場用量穩(wěn)步增長，并在臨床中發(fā)揮了重要作用?？死顾丶捌淦瑒?、目前生產(chǎn)的劑型還有顆 粒劑、分散片、緩釋片、注射劑和干混懸劑。
[0003] 臨床主要用于敏感細菌所致的上、克拉霉素下呼吸道，包括扁桃體炎、咽喉炎、glj 竇炎、支氣管炎、肺炎等、皮膚、軟組織感染、膿癤、丹毒、毛囊炎、傷口感染等，療效與其他大 環(huán)內(nèi)酯類相仿。該品也可用于沙眼衣原體或溶脲脲原體所致生殖泌尿系感染、艾滋病患者 的非典型分支桿菌感染等。成人用量：口服，常用量一次〇.25g(l片），每12小時1次。不 良反應主要有口腔異味，腹痛、腹瀉、惡心、嘔吐等胃腸道反應，頭痛，血清氨基轉移酶短 暫升高。可能發(fā)生過敏反應，輕者為藥疹、蕁麻疹，重者為過敏及Stevens-Johnson癥。
[0004] 上述信息足以可見克拉霉素在臨床中治療的適用范圍廣、市場空間大、臨床療效 高且臨床用藥劑量大，同時不良反應也頗多。本公司現(xiàn)生產(chǎn)有克拉霉素原料藥（批準文號 國藥準字H20057986)制劑有克拉霉素片（國藥準字H20046345)，克拉霉素分素片（國藥準 字H20066047)，規(guī)格250mg?，F(xiàn)產(chǎn)品的質量控制標準采用的是中國藥典標準。
[0005] 根據(jù)國家食品藥品監(jiān)督管理總局辦公廳關于2013年度仿制藥質量一致性評價方 法研究任務的通知（食藥監(jiān)辦藥化管[2013] 38號），通過仿制藥質量一致性評價，要淘汰內(nèi) 在質量達不到要求的品種，促進我國仿制藥整體水平提升，達到或接近國際先進水平的目 標。本公司積極響應，對本公司生產(chǎn)的克拉霉素原料藥、片于分散片的仿制藥均進行了質量 統(tǒng)計分析，并購買原研制劑進行了溶出曲線相似研究，有關物質控制水平收集了國內(nèi)外標 準進行對比分析。發(fā)現(xiàn)公司產(chǎn)品質量均高于中國藥典的標準規(guī)定，還有很多批次產(chǎn)品的質 量能達到國際標準，本公司即以國際最高標準為目標制定了該產(chǎn)品的再研究方案。
[0006] 現(xiàn)有技術缺陷
[0007] 現(xiàn)有有關物質測定法在日常運行中，未出現(xiàn)不適應，但與國際標準對比雜質控制 標準太低，與仿制藥質量一致性評價的目標相距太遠，想打入國際市場只能是一種愿望而 已。與國際標準對比見表1
[0008]表1
[0009]
[0010] 上述列表中的代號分別表示：USP(API)代表美國藥典標準中收載的克拉霉素原 料藥的雜質控制標準；EP(API)代表歐洲藥典標準中收載的克拉霉素原料藥的雜質控制標 準；JP(API)代表日本藥典標準中收載的克拉霉素原料藥的雜質控制標準；BP(片）代表英 國藥典標準中收載的克拉霉素片的雜質控制標準；Ch.P. (API.片）代表中國藥典標準中收 載的克拉霉素原料藥和片劑的雜質控制標準
[0011] 終上述比較，本公司決議以USP(API)的標準為目標，對本公司的產(chǎn)品進行標準提 升，提高產(chǎn)品質量，并購買國際標準雜質定位的系統(tǒng)適用性對照品，標準品報告的標準圖譜 (見圖1)，取國際標準雜質定位的系統(tǒng)適用性對照品在《中國藥典》收載標準中的有關物質 測定法的系統(tǒng)下進行了測試，結果顯示現(xiàn)中國藥典收載的測定系統(tǒng)根本無法區(qū)分國外標準 的雜質定位要求，見圖2。
[0012] 圖譜1、2明顯顯示，國際標準雜質定位的系統(tǒng)適用性對照品在中國藥典標準收載 的系統(tǒng)下運行所得的圖譜差別極大，各雜質無法歸屬且雜質間也無法分離，說明用該測定 法的色譜條件來檢測與國際標準相當?shù)目死顾禺a(chǎn)品不合適。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0013] 本發(fā)明根據(jù)上述問題提供了一種克拉霉素的液相檢測方法，具體步驟如下：
[0014] 步驟一：溶液配制
[0015]稱取含克拉霉素原料藥150mg(含克拉霉素原料藥細粉相當于克拉霉素150mg)， 置100ml量瓶中，加入溶劑（乙腈與水的體積比為1:1) 80ml，振搖并超聲5分鐘使溶解，放 冷，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，片劑離心，取上清液作為供試品溶液。（命名溶液1)
[0016] 量取供試品溶液5ml于100ml量瓶中，加溶劑稀釋至刻度，作為溶液系統(tǒng)拖尾因子 的評價溶液。（命名溶液2)
[0017] 量取系統(tǒng)拖尾因子的評價溶液10ml于100ml量瓶中，加溶劑稀釋至刻度，作為自 身對照溶液。（命名溶液3)
[0018] 量取自身對照溶液2ml于100ml量瓶中，加溶劑稀釋至刻度，作為系統(tǒng)靈敏度評價 溶液。（命名溶液4)
[0019] 稱取國際標準雜質系統(tǒng)適應性對照品配制成1ml中含克拉霉素1.5mg的溶作為系 統(tǒng)適用性溶液。（命名溶液5)
[0020] 步驟二：高效液相測定法的色譜條件
[0021] 高效液相色譜儀Agilentl200/1260 ;檢測器VWD;色譜柱 UItimate-XB_Cls (4. 6X150mm、3um)流動相A為0. 035mol/L磷酸二氫鉀緩沖液（氫氧化鉀 溶液調(diào)節(jié)pH值至5. 1 ±0. 1)，流動相B為乙腈；乙腈與水的體積比為1:1為溶劑；進樣量為 20ul;流速為每分鐘1.lml;檢測波長為205nm;柱溫40°C。
[0022]
[0023] 步驟三：測定操作
[0024] 取空白溶劑進樣一針檢測記錄色譜圖，要求對雜質的測定無干擾。
[0025] 取靈敏度溶液進樣一針檢測記錄色譜圖，要求信噪比不低于10:1。
[0026] 取系統(tǒng)拖尾因子的評價溶液進樣一針檢測記錄色譜圖，要求克拉霉素峰的拖尾因 子不得過1.7。
[0027] 取自身對照溶液進樣一針檢測記錄色譜圖，取克拉霉素峰的峰面積用于雜質計算 的自身對照。
[0028] 取系統(tǒng)適用性溶液進樣一針檢測記錄色譜圖，要求圖譜中雜質D/主成分峰峰高 峰谷比值Hp/Hv不得低于3. 0(或是分離度不低于1. 0)。
[0029] 取供試品溶液進樣一針檢測記錄色譜圖，并參照系統(tǒng)適用性圖譜找出供試品圖譜 中的雜質位置（保留時間）及峰面積，按自身對照法計算各雜質的含量即可完成檢測。
[0030] 步驟四：雜質計算
[0031] 供試品溶液的色譜圖中如有雜質峰，出去雜質I之前的溶劑與輔料峰外，任一雜 質峰面積不得過溶液（3)主峰面積的2倍（1. 0% )(雜質G、Η的校正因子分別為0. 27、 〇. 15);大于溶液（3)主峰面積的0. 8倍（0. 4% )的雜質不得過4個；雜質總和不得過溶 液（3)主峰面積的7倍（3. 5% )。（雜質峰面積低于靈敏度溶液中蘭索拉唑峰面積的忽略 不計）。
[0032] 步驟五：相關制劑的雜質控制
[0033] 本公司生產(chǎn)的制劑品種：含克拉霉素原料藥的包括克拉霉素片；克拉霉素分散 片，根據(jù)處方的再研究及穩(wěn)定性考察，雜質控制限度與原料藥一致。
[0034] 所述含克拉霉素原料藥包括克拉霉素片、克拉霉素分散片。
[0035] 本發(fā)明中所述系統(tǒng)適用性對照品屬國際標準雜質系統(tǒng)適用性對照品，對照品中含 12中組分，按在圖譜中保留順序為：雜質13、1^、(：、0、主成分4、？、？、6、!1(見國際標準 雜質系統(tǒng)適用性對照品圖3);且各雜質在該系統(tǒng)下的保留時間見列表2 ;各雜質的名稱見 列表3。
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