凝膠干膠裝置及凝膠干膠方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種凝膠干膠裝置及凝膠干膠方法。
【背景技術(shù)】
[0002]在分子克隆、蛋白表達(dá)與鑒定的操作過程中，常常需要借助瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠對(duì)DNA或蛋白進(jìn)行電泳，以便對(duì)其分子量進(jìn)行準(zhǔn)確判定，進(jìn)而進(jìn)行后期的DNA切膠回收或蛋白印跡等實(shí)驗(yàn)操作。電泳后的凝膠是一種十分重要和珍貴的實(shí)驗(yàn)資料，有必要進(jìn)行長(zhǎng)期保存，以備后期使用。
[0003]但是，若使凝膠暴露在普通室溫條件下，會(huì)有細(xì)菌或真菌滋生。也有將重要的蛋白凝膠保存在普通的純水、蛋白電泳緩沖液或蛋白凝膠脫色液中的情況，這樣僅能對(duì)蛋白膠進(jìn)行短時(shí)間保存。保存在緩沖液中的凝膠在后期參考或比較時(shí)，一般觀膠操作繁瑣且容易使蛋白膠碎裂。市面上也有來自國(guó)外的凝膠干膠處理裝置，此干膠裝置價(jià)格昂貴、操作繁瑣，需要購(gòu)買配套的干膠緩沖液，而且不能保證最終的干膠質(zhì)量，容易出現(xiàn)裂膠現(xiàn)象。因此，通常會(huì)在DNA或蛋白進(jìn)行瓊脂糖凝膠或聚丙烯胺凝膠電泳后拍照，作為廢物丟棄凝膠。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的之一在于提供一種凝膠干膠裝置，另一目的在于提供一種凝膠干膠方法，本發(fā)明的凝膠干膠方法借助凝膠干膠裝置可有效防止干制的凝膠干裂。
[0005]本發(fā)明為了實(shí)現(xiàn)上述目的采用如下技術(shù)方案:
[0006]本發(fā)明提供一種凝膠干膠裝置，此凝膠干膠裝置包括一塊蓋板與一塊底板，所述蓋板借助兩個(gè)直角凹形卡槽固定在所述底板上；其中所述蓋板中央有開口。
[0007]進(jìn)一步的，所述蓋板的所述開口尺寸為9cmX7cm或14cmX9cm。
[0008]進(jìn)一步的，所述蓋板、所述底板以及所述凹形卡槽均為塑料制品或有機(jī)玻璃制品，并且制作所述凹形卡槽的塑料材質(zhì)為PE、HDPE, PA或PP。
[0009]本發(fā)明還提供借助所述凝膠干膠裝置的干膠方法，此干膠方法包括如下步驟:(I)配制瓊脂糖凝膠干膠緩沖液:取I體積的甘油與9體積的TAE，將兩者混合，然后在上述混合液中加入10%疊氮鈉使混合液終濃度為0.1% ;(2)兩張多孔聚乙烯膜以及電泳后待保存的瓊脂糖凝膠均由所述步驟(I)制得的凝膠緩沖液完全浸濕，其中，所述多孔聚乙烯膜的尺寸均大于所述蓋板開口的尺寸；(3)經(jīng)所述步驟(2)操作的所述兩張多孔聚乙烯膜分別完全覆蓋經(jīng)所述步驟(2)操作的所述凝膠的上表面與下表面；(4)將經(jīng)所述步驟(3)操作的凝膠由上述凝膠干膠裝置固定，并自然陰干。
[0010]進(jìn)一步的，上述述步驟(2)中，使所述兩張多孔聚乙烯膜以及所述瓊脂糖凝膠完全浸濕的操作方法為:將所述兩張多孔聚乙烯膜以及所述瓊脂糖凝膠放入所述步驟(I)制得的瓊脂糖凝膠干膠緩沖液中靜置I?30min。
[0011]進(jìn)一步的，上述步驟(3)的操作包括如下步驟:將經(jīng)所述步驟(2)操作的一張所述多孔聚乙烯膜放置在所述底板上，鋪平并攆出氣泡；在所述一張多孔聚乙烯膜中央放置經(jīng)所述步驟(2)操作的所述瓊脂糖凝膠，再在所述凝膠上放置另外一張經(jīng)所述步驟(2)操作的所述多孔聚乙烯膜；然后將所述瓊脂糖凝膠周圍的氣泡攆出；接著將所述蓋板蓋在被所述兩張所述多孔聚乙烯膜覆蓋的所述瓊脂糖凝膠上，其中，所述瓊脂糖凝膠位于所述蓋板的所述開口內(nèi)，并且所述瓊脂糖凝膠的長(zhǎng)邊與所述蓋板的所述開口的長(zhǎng)邊保持平行；然后借助所述兩個(gè)直角凹形卡槽將夾固所述瓊脂糖凝膠的所述底板和所述蓋板固定。
[0012]進(jìn)一步的，上述步驟(4)中所述自然陰干的實(shí)施方法為將經(jīng)所述凝膠干膠裝置固定的所述瓊脂糖凝膠放在空氣濕度為20?50%，溫度為O?37°C的條件下。
[0013]本發(fā)明還提供另一種干膠方法，此方法包括如下步驟:(I)配制聚丙烯酰胺凝膠干膠緩沖液:取5體積甲醇、4體積超純水以及I體積乙酸，然后將其混合，即得預(yù)制的聚丙烯酰胺凝膠緩沖液；取I體積甘油與9體積上述預(yù)制聚丙烯酰胺凝膠緩沖液，然后混合；在上述混合液中加入10%疊氮鈉使混合液終濃度為0.1% ；(2)兩張多孔聚乙烯膜以及電泳后待保存的聚丙烯酰胺凝膠均由所述步驟(I)制得的聚丙烯酰胺凝膠緩沖液完全浸濕，其中，所述多孔聚乙烯膜的尺寸均大于所述蓋板開口的尺寸；(3)經(jīng)所述步驟(2)操作的所述兩張多孔聚乙烯膜分別完全覆蓋經(jīng)所述步驟(2)操作的所述聚丙烯酰胺凝膠的上表面與下表面；(4)將經(jīng)所述步驟(3)操作的凝膠由上述凝膠干膠裝置固定，并自然陰干。
[0014]進(jìn)一步的，另一種干膠方法中所述步驟(3)的操作包括如下步驟:將經(jīng)所述步驟
(2)操作的一張所述多孔聚乙烯膜放置在所述底板上，鋪平并攆出氣泡；在所述一張多孔聚乙烯膜中央放置經(jīng)所述步驟(2)操作的所述聚丙烯酰胺凝膠，再在所述凝膠上放置另外一張經(jīng)所述步驟(2)操作的所述多孔聚乙烯膜；然后將所述聚丙烯酰胺凝膠周圍的氣泡攆出；接著將所述蓋板蓋在被所述兩張所述多孔聚乙烯膜覆蓋的所述聚丙烯酰胺凝膠上，其中，所述聚丙烯酰胺凝膠位于所述蓋板的所述開口內(nèi)，并且所述聚丙烯酰胺凝膠的長(zhǎng)邊與所述蓋板的所述開口的長(zhǎng)邊保持平行；然后借助所述兩個(gè)直角凹形卡槽將夾固所述聚丙烯酰胺凝膠的所述底板和所述蓋板固定。
[0015]進(jìn)一步的，另一種干膠方法中所述步驟⑷中所述自然陰干的實(shí)施方法為將經(jīng)所述凝膠干膠裝置固定的所述聚丙烯酰胺凝膠放在空氣濕度為20?50%，溫度為O?37°C的條件下。
[0016]本發(fā)明的有益效果在于:本發(fā)明的凝膠干膠裝置制作簡(jiǎn)單、成本低廉，配合干膠凝膠緩沖液使用，可用于瓊脂糖凝膠或聚丙烯胺凝膠的干膠處理；借助本發(fā)明的凝膠干膠裝置的干膠方法操作簡(jiǎn)便，有效地解決了目前凝膠干膠制備困難的問題。
【附圖說明】
[0017]圖1所示為本發(fā)明凝膠干膠裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0018]圖2所示為本發(fā)明另一凝膠干膠裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。
【具體實(shí)施方式】
[0019]下文將結(jié)合具體實(shí)施例詳細(xì)描述本發(fā)明。應(yīng)當(dāng)注意的是，下述實(shí)施例中描述的技術(shù)特征或者技術(shù)特征的組合不應(yīng)當(dāng)被認(rèn)為是孤立的，它們可以被相互組合從而達(dá)到更好的技術(shù)效果。
[0020]首先描述本發(fā)明提供的凝膠干膠裝置的具體實(shí)施例。
[0021]實(shí)施例1
[0022]如圖1所示，本發(fā)明提供的凝膠干膠裝置包括第一蓋板10與底板30，這兩塊板的尺寸可相同，并且可以是20cmX20cmX3mm，并且這兩塊板可由兩個(gè)直角凹形卡槽40固定。具體而言，第一蓋板10具有位于其中央的開口 11，此開口的尺寸為9cmX7cm。該凝膠干膠裝置可用于一塊尺寸為5cmX8cm的蛋白凝膠或DNA凝膠的干膠。
[0023]進(jìn)一步地說，第一蓋板10與底板30可由有機(jī)玻璃板、塑料材料制成，并且所述直角凹形卡槽40由諸如PE、HDPE、PA或PP之類的塑料材質(zhì)制成。
[0024]實(shí)施例2
[0025]如圖2所示，本發(fā)明提供的凝膠干膠裝置包括第二蓋板20與底板30，這兩塊板均為20cmX20cmX3mm的透明有機(jī)玻璃板，并且這兩塊板可由兩個(gè)直角凹形卡槽40固定。具體而言，第二蓋板20具有位于其中央的開口 21，此開口的尺寸為14cmX9cm。該凝膠干膠裝置可用于兩塊尺寸均為5cmX8cm的蛋白凝膠或DNA凝膠的干膠。
[0026]進(jìn)一步地說，第二蓋板20與底板30可由機(jī)玻璃板、塑料材料制成。
[0027]下面將詳細(xì)描述借助上述凝膠干膠裝置的干膠方法的具體實(shí)施例。
[0028]實(shí)施例1
[0029]一、首先配制丙烯酰胺凝膠干膠緩沖液:
[0030]1.試劑:
[0031]甲醇(分析純)、乙酸(分析純)、甘油(分析純)，超純水；
[0032]10%的疊氮鈉配制:稱取1g NaN3(分析純)放入燒杯中，加超純水溶解后，轉(zhuǎn)移至10mL容量瓶中，超純水定容至100mL，轉(zhuǎn)移至10mL藍(lán)蓋瓶中，室溫保存。使用時(shí)用相應(yīng)溶液稀釋至0.1 %即可。
[0033]2.操作方法
[0034](I)按甲醇:超純水:乙酸=5:4:1的體積比進(jìn)行混合，即得預(yù)制的聚丙烯酰胺凝膠緩沖液；
[0035](2)按甘油(分析純):預(yù)制聚丙烯酰胺凝膠緩沖液=I:9的體積比進(jìn)行混合；
[0036](3)加入10%疊氮鈉至上述混合溶液中，使混合液終濃度為0.1%，即得聚丙烯酰胺凝膠干膠緩沖液。
[0037]二、干膠操作
[0038](I)將兩張多孔聚乙烯膜(親水玻璃紙)以及電泳后待保存的聚丙烯酰胺凝膠(目的凝膠)放入步驟一中配制的聚丙烯酰胺凝膠干膠緩沖液中靜置，使其充分浸泡；
[0039](2)將經(jīng)步驟(I)操作的一張親水玻璃紙放置在底板30上，鋪平，避免氣泡產(chǎn)生；
[0040](3)將經(jīng)步驟(2)操作的親水玻璃紙中央放置經(jīng)步驟(I)操作的目的凝膠，再在所述目的凝膠上防止另外一張經(jīng)步驟(I)操作的親水玻璃紙；
[0041](4)用玻璃棒將經(jīng)步驟(3)操作后的目的凝膠周圍的氣泡攆出；
[0042](5)根據(jù)目的凝膠尺寸選擇對(duì)應(yīng)的蓋板(一塊凝膠選擇第一蓋板10，兩塊凝膠選擇第二蓋板20)，并將選好的蓋板蓋在經(jīng)步驟(4)操作后的兩張親水玻璃紙上，保證目的凝膠在蓋板的開口區(qū)域內(nèi)，并且凝