本發(fā)明涉及生物化學(xué)制劑技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種時(shí)間分辨熒光微球標(biāo)記肌紅蛋白抗體的保存液。

背景技術(shù)：

在急性心肌損傷時(shí)，肌紅蛋白(MYO)最先被釋放到血液中，在癥狀出現(xiàn)2-3小時(shí)后，血中肌紅蛋白(MYO)可超出正常上限，9-12小時(shí)達(dá)到峰值，24-36小時(shí)后恢復(fù)。MYO陽性雖不能確診AMI，但可用于早期排除AMI診斷的重要指標(biāo)，如MYO陰性，則基本排除心肌梗死。針對(duì)檢測準(zhǔn)確性、穩(wěn)定性而最后進(jìn)行測試用到的標(biāo)抗稀釋液是其中關(guān)鍵的一步。

時(shí)間分辨熒光生化分析技術(shù)是基于稀土熒光配合物特殊的熒光性質(zhì)而建立起來的，時(shí)間分辨熒光測定技術(shù)是利用稀土配合物具有長壽命熒光這一特點(diǎn)，在樣品被脈沖光激發(fā)后、熒光信號(hào)采集前，根據(jù)樣品中所包含的熒光物質(zhì)熒光壽命的不同引入一定的延遲時(shí)間(delay time)，待短壽命的背景熒光完全淬滅后，再對(duì)長壽命的特異性熒光信號(hào)進(jìn)行測定，采用時(shí)間分辨熒光測定技術(shù)可以有效消除來自樣品、試劑、儀器等的短壽命非特異性熒光的干擾，從而極大地提高熒光檢測的靈敏度。但是熒光微球的穩(wěn)定性對(duì)后續(xù)的檢測步驟起著關(guān)鍵的作用，如果熒光微球保存不當(dāng)，就會(huì)導(dǎo)致后續(xù)檢測無法進(jìn)行，影響到最終檢測試劑的效能，給試劑檢測帶來嚴(yán)重的風(fēng)險(xiǎn)。

時(shí)間分辨熒光微球標(biāo)記肌紅蛋白抗體(以下簡稱標(biāo)記抗體)保存液對(duì)維持標(biāo)記抗體在液體中的穩(wěn)定，使其不產(chǎn)生沉淀至關(guān)重要，目前尚沒有見到的標(biāo)記抗體保存液的報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

基于此，本發(fā)明的目的是提供一種用于保存時(shí)間分辨熒光微球標(biāo)記肌紅蛋白抗體的保存液。

具體的技術(shù)方案如下：

一種時(shí)間分辨熒光微球標(biāo)記肌紅蛋白抗體的保存液，包括如下質(zhì)量百分比的組分：

4-羥乙基哌嗪乙磺酸：0.1％-1.5％，氯化鈉：1.0％-3.0％，氯化鉀：0.3％-0.8％、乙二胺四乙酸二鈉：0.08％-0.9％，十二烷基磺酸鈉：0.01％-0.06％，牛血清白蛋白：0.1％-3.0％，葡聚糖:0.05％-0.5％，曲拉通：0.02％-0.2％，吐溫-20:0.01％-0.05％，防腐劑:0.02％-0.1％，水：余量；

調(diào)節(jié)pH至8.0-9.0。

在其中一些實(shí)施例中，該保存液包括如下質(zhì)量百分比的組分：0.6％-1.2％，氯化鈉：1.0％-1.5％，氯化鉀：0.5％-0.7％、乙二胺四乙酸二鈉：0.08％-0.2％，十二烷基磺酸鈉：0.03％-0.05％，牛血清白蛋白：0.1％-0.5％，葡聚糖：0.1％-0.3％，曲拉通：0.02％-0.15％，吐溫-20：0.02％-0.05％，防腐劑：0.02％-0.05％，水：余量；

調(diào)節(jié)pH至8.0-9.0。

在其中一些實(shí)施例中，十二烷基磺酸鈉：曲拉通：吐溫-20的質(zhì)量比為1.5-2.5:2-4:1。

在其中一些實(shí)施例中，十二烷基磺酸鈉：曲拉通：吐溫-20的質(zhì)量比為1.5:2.5:1。

在其中一些實(shí)施例中，所述葡聚糖的分子量為8000-12000。

在其中一些實(shí)施例中，所述葡聚糖的分子量為10000。

在其中一些實(shí)施例中，所述曲拉通為曲拉通x-100。

在其中一些實(shí)施例中，所述防腐劑為procline。

本發(fā)明的原理及優(yōu)點(diǎn)：

由于時(shí)間分辨熒光微球標(biāo)記肌紅蛋白抗體容易沉淀，造成抗體活性不高，且容易失活。微球的表面帶有大量的正電荷，形成一層正電荷層以維持整個(gè)微球在溶液體系中的穩(wěn)定，當(dāng)抗體標(biāo)記到微球表面后會(huì)破壞微球表面的電荷層從而導(dǎo)致微球表面不穩(wěn)定，容易產(chǎn)生集聚并最終形成沉淀，使其失去效果。本發(fā)明中通過添加適量的多種類的表面活性劑(十二烷基磺酸鈉、曲拉通、吐溫-20等)，并按照一定的比例添加，由于表面活性劑在一定的濃度時(shí)能排列成球狀、棒狀、束狀、層狀/板狀等結(jié)構(gòu)，實(shí)現(xiàn)對(duì)微球的包裹，對(duì)微球起到穩(wěn)定的作用。且表面活性劑帶有一定的正電荷，對(duì)微球表面電荷起到一定的補(bǔ)充，使得微球能穩(wěn)定的存在溶液中。

上述保存液，使用原材料成本低，容易獲取，為該類熒光微球的保存提供一個(gè)比較穩(wěn)定的微環(huán)境。

附圖說明

圖1為實(shí)施例1的保存液和對(duì)比例保存液保存當(dāng)天的檢測結(jié)果對(duì)比圖；

圖2為實(shí)施例1的保存液和對(duì)比例保存液保存1個(gè)月后的檢測結(jié)果對(duì)比圖。

具體實(shí)施方式

為了便于理解本發(fā)明，下面將對(duì)本發(fā)明進(jìn)行更全面的描述。但是，本發(fā)明可以以許多不同的形式來實(shí)現(xiàn)，并不限于本文所描述的實(shí)施例。相反地，提供這些實(shí)施例的目的是使對(duì)本發(fā)明的公開內(nèi)容的理解更加透徹全面。

除非另有定義，本文所使用的所有的技術(shù)和科學(xué)術(shù)語與屬于本發(fā)明的技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員通常理解的含義相同。本文中在本發(fā)明的說明書中所使用的術(shù)語只是為了描述具體的實(shí)施例的目的，不是旨在于限制本發(fā)明。本文所使用的術(shù)語“和/或”包括一個(gè)或多個(gè)相關(guān)的所列項(xiàng)目的任意的和所有的組合。

實(shí)施例1

一種時(shí)間分辨熒光微球標(biāo)記肌紅蛋白抗體的保存液，由如下步驟制備而得：

首先稱取葡聚糖1.5g，溶解到500g的水溶液中，在60度下攪拌1h，然后超聲10min，冷卻到室溫后，稱取4-羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)6g，氯化鈉(NaCl)10g，氯化鉀(KCL)5g、乙二胺四乙酸二鈉(EDTA-2Na)0.9g、十二烷基磺酸鈉(SDS)0.3g、牛血清白蛋白(BSA)10g,曲拉通X-100 0.5g,吐溫-200.2g,Procline 0.5g,水補(bǔ)足至1000g，混合均勻，調(diào)節(jié)pH到8.5，即得到時(shí)間分辨熒光微球標(biāo)記肌紅蛋白抗體保存液。

實(shí)施例2

一種時(shí)間分辨熒光微球標(biāo)記肌紅蛋白抗體的保存液，由如下步驟制備而得：

首先稱取葡聚糖1g，溶解到500g的水溶液中，在60度下攪拌1h，然后超聲10min，冷卻到室溫后，稱取4-羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)8g，氯化鈉(NaCl)14g，氯化鉀(KCL)5g、乙二胺四乙酸二鈉(EDTA-2Na)0.8g、十二烷基磺酸鈉(SDS)0.5g、牛血清白蛋白(BSA)15g,曲拉通X-100 0.8g,吐溫-20 0.2g,Procline 0.5g,水補(bǔ)足至1000g，混合均勻，即得到時(shí)間分辨熒光微球標(biāo)記肌紅蛋白抗體保存液。

對(duì)比例1

圖1和2中所示其它保存液1的配方為：氯化鈉(NaCl)：0.8％，氯化鉀(KCl)：0.02％，磷酸二氫鉀(KH₂PO₄)：0.02％，十二水合磷酸氫二鈉(Na₂HPO₄·12H₂O)2.9％。

對(duì)比例2

圖1和2中所示其它保存液2的配方為：葡聚糖:0.1％,4-羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)0.8％，氯化鈉(NaCl)1.4％，氯化鉀(KCL)0.5％、乙二胺四乙酸二鈉(EDTA-2Na)0.08％、聚乙烯吡咯烷酮0.05％、牛血清白蛋白(BSA)15g,曲拉通X-405 0.08％,吐溫-80 0.02％,Procline 0.5g

對(duì)比例3

圖1和2中所示其它保存液3的配方為：首先稱取葡聚糖1g，溶解到500g的水溶液中，在60度下攪拌1h，然后超聲10min，冷卻到室溫后，稱取4-羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)8g，氯化鈉(NaCl)14g，氯化鉀(KCL)5g、乙二胺四乙酸二鈉(EDTA-2Na)0.8g、十二烷基磺酸鈉(SDS)2.0g、牛血清白蛋白(BSA)15g,曲拉通X-100 0.08g,吐溫-20 1.0g,Procline 0.5g,水補(bǔ)足至1000g，混合均勻，即得其它保存液3。

應(yīng)用試驗(yàn)

使用實(shí)施例1得到的保存液與對(duì)比例保存液對(duì)標(biāo)記抗體進(jìn)行保存，檢測結(jié)果如圖1和2所示。

使用相同的標(biāo)記流程對(duì)微球進(jìn)行標(biāo)記，標(biāo)記抗體為采購的商品化的肌紅蛋白(MYO)單克隆抗體，將標(biāo)記好的抗體分別保存在兩種溶液中，檢測時(shí)使用相同的溶液并且稀釋到相同的工作濃度進(jìn)行檢測。圖1表示當(dāng)天保存后的抗體進(jìn)行檢測，圖2表示使用4種保存液分別保存微球30天后再進(jìn)行檢測的效果。從圖2的結(jié)果可知，實(shí)施例1的保存液保存微球30天后抗體依然保持活性。

以上所述實(shí)施例的各技術(shù)特征可以進(jìn)行任意的組合，為使描述簡潔，未對(duì)上述實(shí)施例中的各個(gè)技術(shù)特征所有可能的組合都進(jìn)行描述，然而，只要這些技術(shù)特征的組合不存在矛盾，都應(yīng)當(dāng)認(rèn)為是本說明書記載的范圍。

以上所述實(shí)施例僅表達(dá)了本發(fā)明的幾種實(shí)施方式，其描述較為具體和詳細(xì)，但并不能因此而理解為對(duì)發(fā)明專利范圍的限制。應(yīng)當(dāng)指出的是，對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干變形和改進(jìn)，這些都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。因此，本發(fā)明專利的保護(hù)范圍應(yīng)以所附權(quán)利要求為準(zhǔn)。