一種間接測(cè)定1,3-二油酸-2-棕櫚酸甘油三酯含量的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及化學(xué)分析【技術(shù)領(lǐng)域】,特別是涉及一種1,3-二油酸-2-棕櫚酸甘油三酯含量的間接測(cè)量方法。該方法直接測(cè)定1,3-二油酸-2-棕櫚酸甘油三酯(OPO)的活性部分,從而進(jìn)一步計(jì)算得出活性O(shè)PO的含量。該方法直接反映了OPO的有效性能,所以其含量直接對(duì)應(yīng)了OPO作為食品添加劑的有效性。所述方法間接測(cè)定消化后OPO形式,非常容易區(qū)分sn-2位P,對(duì)于非sn-2位P的同分異構(gòu)體,可容易識(shí)別,避免造假。
【專利說(shuō)明】-種間接測(cè)定I,3-二油酸-2-驚桐酸甘油H醒含量的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及化學(xué)分析【技術(shù)領(lǐng)域】,特別是涉及一種乳品中1,3-二油酸-2-蹤擱酸甘 油H醋含量的間接測(cè)定方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展,生活水平的提高,對(duì)于嬰幼兒食品的消費(fèi)量已經(jīng)越來(lái)越高。嬰幼 兒身體小,生理機(jī)能尚未成熟,但為了達(dá)到正常的生長(zhǎng)發(fā)育,每公斤體重的熱量需求卻是成 人的二倍W上,若主要W糖類(lèi)及蛋白質(zhì)供應(yīng)所需能量的話,每克只能供給16KJ的熱量,所 W食用量必須相當(dāng)大,對(duì)消化功能還不是很完善的嬰兒來(lái)說(shuō)是一項(xiàng)不小的負(fù)擔(dān);而油脂可 W供應(yīng)蛋白質(zhì)或糖類(lèi)二倍W上的熱量即每克38KJ的熱量,因此脂肪在嬰幼兒食品中必不 可缺的物質(zhì)。
[0003] 1,3-二油酸-2-蹤擱酸甘油H醋(OPO)是2008年衛(wèi)生部新增加的一種新資源食 品,它是類(lèi)似于母乳脂肪的一種甘油H醋。母乳脂肪中約70%的蹤擱酸連結(jié)在甘油H醋的 sn-2位上,而sn-1,3位主要是不飽和脂肪酸。蹤擱酸是人體重要的產(chǎn)能脂肪酸,它在甘油 H醋上的位置對(duì)其消化和吸收有很大的影響,sn-2位上的蹤擱酸能W sn-2位單甘脂的形 式被吸收,而sn-1,3位上的蹤擱酸則易與礦物質(zhì)(巧、鎮(zhèn)等)形成不溶性的鹽流失掉,同時(shí) 也造成礦物質(zhì)和能量的流失。
[0004] OPO甘油H醋在嬰兒腸道中的消化過(guò)程可W簡(jiǎn)單描述為W下步驟:
[0005] a)脂肪內(nèi)切酶將位于甘油H醋1,3位的脂肪酸切除,形成2位-單甘脂。
[0006] b)不飽和的游離油酸可溶,并被有效吸收。
[0007] C) 2-位蹤擱酸單甘脂被有效吸收。
[0008] 而在牛乳中及市場(chǎng)上銷(xiāo)售的大多數(shù)嬰幼兒配方奶粉(添加普通植物油)的脂肪結(jié) 構(gòu)恰恰缺少OPO結(jié)構(gòu)脂肪結(jié)構(gòu),其脂肪結(jié)構(gòu)多W POP、PP0、PPP、OOP結(jié)構(gòu)形式存在,該意味 著高達(dá)80%的蹤擱酸連在1、3位上,不飽和脂肪酸油酸連接在2位上。該些結(jié)構(gòu)在消化過(guò) 程中,優(yōu)先釋放出來(lái)1、3位上的蹤擱酸,會(huì)與腸道內(nèi)的礦物質(zhì),如巧相結(jié)合,形成巧皂,被排 除體外,從而使嬰兒失去大量的功能蹤擱酸和珍貴的巧。
[0009] 因此,1,3-二油酸-2-蹤擱酸甘油H醋作為一種新型的食品添加劑,具有促進(jìn)機(jī) 體對(duì)能量吸收,促進(jìn)巧、鎮(zhèn)等骨骼礦物質(zhì)吸收,緩解嬰幼兒便秘等功能。目前,1,3-二油 酸-2-蹤擱酸甘油H醋的研究在國(guó)外已逐步從實(shí)驗(yàn)室階段轉(zhuǎn)向工業(yè)化生產(chǎn)和應(yīng)用,它主要 應(yīng)用于嬰幼兒配方食品中。
[0010] 目前許多國(guó)內(nèi)外研究者都開(kāi)展了對(duì)嬰幼兒食品中脂肪的研究工作。1,3-二油 酸-2-蹤擱酸甘油H醋(OPO)是一種母乳化結(jié)構(gòu)脂肪,即將大量用于嬰幼兒配方食品中。按 照中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部公告(2010年第1號(hào))規(guī)定要求,1,3-二油酸2-蹤擱酸甘油H醋 適用范圍為嬰幼兒配方食品,較大嬰兒和幼兒配方食品,學(xué)齡前兒童配方食品,其強(qiáng)化量為 24?96g/kg,其量W 1,3-二油酸-2-蹤擱酸甘油H醋純品計(jì)。
[0011] 蹤擱酸是嬰兒生長(zhǎng)最重要的脂肪酸,為機(jī)體的生長(zhǎng)發(fā)育、大腦活動(dòng)、新陳代謝提供 能量,蹤擱酸結(jié)合在甘油H醋的Sn-2位時(shí)最容易被嬰幼兒消化,能夠促進(jìn)機(jī)體對(duì)能量物質(zhì) (脂肪)的吸收,而在Sn-I, 3位則大部分不能被吸收,該是因?yàn)镾n-I, 3位的蹤擱酸在膜脂 肪酶作用下形成游離的蹤擱酸,而蹤擱酸烙點(diǎn)(6:rc)高于人體體溫,在小腸的酸性環(huán)境下 容易與礦物質(zhì)發(fā)生皂化反應(yīng),形成不溶性的鹽,最終被排出體外,但在Sn-2位上的蹤擱酸 則能W Sn-2蹤擱酸甘油單醋的形式被人體吸收。Sn-2位蹤擱酸還能夠促進(jìn)巧、鎮(zhèn)等骨骼礦 物質(zhì)的吸收,促進(jìn)嬰幼兒身體骨骼的生長(zhǎng),巧缺乏時(shí)容易引發(fā)倆傻病,人體維持神經(jīng)肌肉的 興奮、神經(jīng)沖動(dòng)的傳導(dǎo)、也臟的正常搏動(dòng)也需要的巧的參與。目前研究表明Sn-2位蹤擱酸 還對(duì)嬰幼兒的生長(zhǎng)發(fā)育有促進(jìn)作用,尚未發(fā)現(xiàn)有關(guān)Sn-2位蹤擱酸對(duì)嬰兒成長(zhǎng)發(fā)育的不利 影響和副作用方面的研究。
[0012] 對(duì)1,3-二油酸-2-蹤擱酸甘油H醋(OPO)的定量檢測(cè)已有研究,但存在問(wèn)題較 多?,F(xiàn)有檢測(cè)方法主要反映在檢測(cè)過(guò)程中,檢測(cè)對(duì)象是1,3-二油酸-2-蹤擱酸甘油H醋 (OPO)本身,由于OPO同分異構(gòu)體的存在,使得檢測(cè)過(guò)程中不可避免地混入OOP和/或P00。 該些OOP、POO會(huì)影響OPO的檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,干擾對(duì)產(chǎn)品有效性能的判斷。
[0013] 衛(wèi)生部規(guī)定了兩個(gè)重要參數(shù):
[0014] OPO 含量>40 %
[0015] sn-2位蹤擱酸比例> 52 %
[0016] 均強(qiáng)調(diào)了蹤擱酸Sn-2位比例。母乳組成、臨床數(shù)據(jù)和國(guó)際法規(guī)均只規(guī)定Sn-2位 蹤擱酸比例作為有效衡量參數(shù)。所W,產(chǎn)品中OPO的分析方法應(yīng)回答兩個(gè)問(wèn)題:即嬰兒的營(yíng) 養(yǎng)需要和新的法規(guī)要求。
[0017] 因此,研究更為準(zhǔn)確的1,3-二油酸-2-蹤擱酸甘油H醋(OPO)檢測(cè)方法,有顯著 意義。
【發(fā)明內(nèi)容】
:
[0018] 本發(fā)明描述了一種通過(guò)直接測(cè)定1,3-二油酸-2-蹤擱酸甘油H醋(OPO)的活性 部分(active化rm),從而進(jìn)一步計(jì)算得出OPO的含量的方法。
[0019] 所謂的OPO活性部分指消化后的0P0,即失去sn-l,3位油酸的0P0。
[0020] 同時(shí),除了 sn-2位P,sn-l,3位0之外,測(cè)定脂肪中,還存在其它sn-l,3位P和 sn-2 位 0。
[0021] OPO甘油H醋在嬰兒腸道中的消化過(guò)程包括W下H個(gè)部分:
[0022] 1.脂肪內(nèi)切酶將位于甘油H醋1,3位的脂肪酸切除,形成2位-單甘脂。
[0023] 2.不飽和的游離油酸可溶,并被有效吸收。
[0024] 3. 2位-蹤擱酸單甘脂被有效吸收。
[0025] 因此,檢測(cè)嬰兒消化形式的0P0,即失去了 sn-1,3位油酸的0P0,也就是OPO活性 部分,直接反映了 OPO的有效性能,所W其含量直接對(duì)應(yīng)了 OPO作為食品添加劑的有效性。
[0026] 現(xiàn)有的直接檢測(cè)方法,必須分開(kāi)同分異構(gòu)體0P0、OOP和P00,操作復(fù)雜,結(jié)果誤差 大,難W有效反映OPO的真實(shí)效能。
[0027] 如使用上述間接檢測(cè)方法,測(cè)定消化后OPO形式,則非常容易區(qū)分sn-2位P和 sn-2位0。OPO該種形式才是嬰兒真正需要的,對(duì)于非sn-2位P的同分異構(gòu)體,可容易識(shí) 另Ij,避免造假。
[0028] 本發(fā)明所述方法,可將嬰兒食品中的甘油H醋分離,通過(guò)酶解消化處理,然后進(jìn)行 檢測(cè)sn-2位P和sn-1,3位的0,再通過(guò)計(jì)算可得。
[0029] 所述方法用于測(cè)定乳品中的0P0,該乳品包括但不限于液態(tài)奶、奶粉、嬰兒配方奶、 酸奶、酸奶油、冰洪淋。
[0030] 舉例:
[0031] 在消化后的混合物中有多少OPO ?
[0032] 1個(gè)OPO分子可分離出;1個(gè)sn-2位的P和2個(gè)sn-1,3位的0。也就是說(shuō),對(duì)于 OPO形式的甘油H醋,消化后的sn-2位P與sn-1,3位的0應(yīng)保持1 : 2的物質(zhì)的量的關(guān) 系。
[0033] 如果(sn-2位巧/(sn-1,3位0)小于或等于1 : 2,說(shuō)明消化后的結(jié)果中,存在OPO 之外的sn-1,3位的0,則應(yīng)W sn-2位P的含量為基準(zhǔn),計(jì)算OPO的含量,即sn-2位P的物 質(zhì)含量就是OPO的物質(zhì)含量。
[0034] 如果(sn-2位巧/(sn-l,3位的0)大于1 : 2,說(shuō)明消化后的結(jié)果中,存在OPO之 外的sn-2位P,則應(yīng)W sn-1,3位的0的含量為基準(zhǔn),計(jì)算OPO的含量,即1/2 (sn-1,3位0) 的物質(zhì)含量就是OPO的物質(zhì)含量。
[00巧]簡(jiǎn)單舉例,如果我們檢測(cè)得到一個(gè)sn-2位的P,和四個(gè)sn-1,3位的0,則根據(jù)上述 關(guān)系,我們可判斷只有一個(gè)OPO分子。如果我們檢測(cè)得到H個(gè)sn-2位的P,和四個(gè)sn-1,3 位的0,則根據(jù)上述關(guān)系,我們可計(jì)算得到有兩個(gè)OPO分子。
[0036] 在本發(fā)明所述方法中,sn-2位的P(蹤擱酸)、sn-2位的0(油酸)的含量,采用 GB/T24894-2010《動(dòng)植物油脂甘H醋分子2-位脂肪酸組成的測(cè)定》進(jìn)行檢測(cè)。
[0037] sn-l,3位的0(油酸)的測(cè)定,通過(guò)計(jì)算得到。通過(guò)脂肪酶水解得到單脂肪酸,采用 GB/T22223-2008《食品中總脂肪、飽和脂肪(酸)、不飽和脂肪(酸)的測(cè)定水解提取-氣 相色譜法》檢測(cè)總油酸含量,結(jié)合GB/T24894-2010測(cè)得的sn-2位油酸含量,其差值為sn-1, 3位的0(油酸)含量。
[0038] 通過(guò)上述方法得到的OPO含量,真實(shí)反映了乳品中1,3-二油酸-2-蹤擱酸甘油H 醋含量,從而反映了嬰兒配方奶對(duì)于有效提高寶寶對(duì)于能量和巧等礦物質(zhì)的吸收和利用的 指標(biāo)。通過(guò)應(yīng)用本發(fā)明方法,關(guān)注OPO含量,測(cè)定OPO的活性部分,更好地順應(yīng)了嬰兒天然 的營(yíng)養(yǎng)需求,支持了嬰兒的健康成長(zhǎng)。
[0039] 本發(fā)明使用間接測(cè)定法,既實(shí)現(xiàn)分析目的,同時(shí)滿足了營(yíng)養(yǎng)要求,直接計(jì)算得到 OPO含量,避免了任何有效成分慘假的可能性。
【具體實(shí)施方式】:
[0040] 實(shí)施例1
[0041] 間接檢測(cè)OPO第一步:
[0042] 分析乳品混合物得到:
[0043] 1.總脂肪酸組成
[0044] 2. sn-2位脂肪酸組成
[0045] 使用GB/T24894-2010作為檢測(cè)方法,結(jié)果為:
[0046] 總的% P = 3/9 = 33. 3% ;
[0047] sn-2 位的% P = 1/3 = 33. 3%
[0048] 總的 % 0 = 6/9 = 66. 7 %
[0049] sn-2 位的 % 0 = 2/3 = 66. 7 %。
[0050] 實(shí)施例2
[0051] 間接檢測(cè)OPO第二步:
[005引根據(jù)結(jié)果計(jì)算:
[0053] 1.總脂肪中sn-2位P的含量
[0054] 2.總脂肪中sn-1+3的含量
[0055] (1) sn-2位P占總脂肪的比例:
[0056] 因?yàn)閟n-2位的P占1/3的總脂肪酸,所W sn-2位P占總脂肪的比例;33. 3% /3 =11. 1%。
[0057] (2) sn-1+3位0占總脂肪的比例:
[0058] sn-2 位 0 占總脂肪的比例;66. 7% /3 = 22. 25%。
[0059] (總的% 0)-(sn-2位的% 0) = sn-1+3位的% 0,所W sn-1+3位0占總脂肪的比 例;66. 7% -22. 25%= 44. 4%
[0060] 實(shí)施例3
[0061] 間接檢測(cè)OPO第H步:
[0062] 基于:
[006引 sn-2位P占總脂肪含量;11 %
[0064] sn-1+3位0占總脂肪含量;44. 4%
[0065] 計(jì)算 OPO ;
[006引 根據(jù)sn-2位P
[0067]根據(jù) sn-1+3 位 0
[006引我們選取相對(duì)低值作為限制性因子 [006引根據(jù)P計(jì)算的OPO ;
[0070] 每1 %的sn-2位的P含量,必然對(duì)應(yīng)3%的OPO含量,
[0071] 目P ;sn-2 位的 P 含量 X3 = 11. 1% X3 = 33. 3%。
[007引根據(jù)0計(jì)算OPO ;
[0073] 每1 %的sn-1+3位的0,必然對(duì)應(yīng)1. 5 %的OPO含量,
[0074] 目P ;sn-l+3 位的 0 含量 XI. 5 = 44. 4% *1. 5 = 66. 7%。
[0075] 根據(jù)P計(jì)算的OPO含量為33. 3%
[0076] 根據(jù)0計(jì)算的OPO含量為66. 7%
[0077] 因?yàn)?3. 3 % < 66. 6 %,所W OPO含量為33. 3 %,即使用間接法測(cè)定了 W OPO形式 消化的物質(zhì),結(jié)果正確。
[0078] 實(shí)施例4
[0079] 本實(shí)施例通過(guò)OPO含量的對(duì)比測(cè)定,W說(shuō)明本發(fā)明方法對(duì)嬰兒配方奶中有效OPO 含量的測(cè)定的特點(diǎn)。樣品1、2、3來(lái)自InFat?,是AAK和化zymotec的合資公司領(lǐng)先油脂公 司(Advanced Lipids)的產(chǎn)品,是一種富含beta-蹤擱酸醋的脂質(zhì)配料。
[0080] 蹤擱油(palm oU)和母乳具有相似的脂肪酸組成,為市售產(chǎn)品,用W對(duì)比。
[0081] 測(cè)定:
[0082] 上述檢測(cè)采用GB/T22223-2008《食品中總脂肪、飽和脂肪(酸)、不飽和脂肪(酸) 的測(cè)定水解提取-氣相色譜法》、GB/T24894-2010《動(dòng)植物油脂甘H醋分子2-位脂肪酸組 成的測(cè)定》進(jìn)行檢測(cè)檢測(cè)。
[0083] 測(cè)定結(jié)果見(jiàn)下表:
【權(quán)利要求】
1. 一種間接測(cè)定1,3-二油酸-2-棕櫚酸甘油三酯含量的方法,所述方法直接測(cè)定1, 3_二油酸-2-棕櫚酸甘油三酯(ΟΡΟ)的活性部分(active form),從而進(jìn)一步計(jì)算得出ΟΡΟ 的含量的方法;所謂的ΟΡΟ活性部分指消化后的0Ρ0,即失去sn-1,3位油酸的0Ρ0,所述的 進(jìn)一步計(jì)算得出0P0的含量的方法為: a) 如果(sn-2位PV(sn-l,3位0)小于或等于1 : 2,則應(yīng)以sn-2位Ρ的含量為基準(zhǔn), 計(jì)算0P0的含量,即sn-2位P的物質(zhì)含量就是0P0的物質(zhì)含量; b) 如果(sn-2位PV(sn-l,3位0)大于1 : 2,則應(yīng)以sn-l,3位的0的含量為基準(zhǔn), 計(jì)算0P0的含量,即1/2 (sn-1,3位0)的物質(zhì)含量就是0P0的物質(zhì)含量。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述的方法用于測(cè)定乳品中的0Ρ0,該乳 品包括但不限于液態(tài)奶、奶粉、嬰兒配方奶、酸奶、酸奶油、冰淇淋。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法,其特征在于,0Ρ0的消化過(guò)程包括以下三個(gè)部分: 1) 脂肪內(nèi)切酶將位于甘油三酯1,3位的脂肪酸切除,形成2位-單甘脂; 2) 不飽和的游離油酸可溶,并被有效吸收; 3) 2位-棕櫚酸單甘脂被有效吸收。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的方法,其特征在于,分析乳品混合物中sn-2位脂肪酸 組成的方法為GB/T24894-2010。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的方法,其特征在于,分析乳品混合物中總脂肪酸組成的 方法為 GB/T22223-2008。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的方法,其特征在于,所述sn-l,3位油酸含量的測(cè)定由 sn-2位油酸和總油酸含量的測(cè)定值計(jì)算得到。
【文檔編號(hào)】G01N33/04GK104237475SQ201410276891
【公開(kāi)日】2014年12月24日 申請(qǐng)日期:2014年6月18日 優(yōu)先權(quán)日:2013年6月19日
【發(fā)明者】劉漢霞, 張鳳霞, 馬小寧, 吳博隆, 仲維科, G·本迪羅 申請(qǐng)人:中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院綜合檢測(cè)中心, 安賽科有限公司