一種自身抗體檢測(cè)試劑盒的制作方法
【專利摘要】本實(shí)用新型公開了一種自身抗體檢測(cè)試劑盒，該試劑盒包括檢測(cè)膜條、顯色劑A、顯色劑B、反應(yīng)終止液、濃縮洗滌液、自身抗體譜標(biāo)準(zhǔn)條帶。本實(shí)用新型預(yù)先在檢測(cè)膜條上設(shè)置了酶標(biāo)自身抗原檢測(cè)線和酶標(biāo)抗人IgG抗體質(zhì)控線，使用該試劑盒進(jìn)行檢測(cè)的過程中無需再加入酶標(biāo)試劑，省略了加入酶標(biāo)試劑再洗滌膜條以及再次孵育的步驟，簡(jiǎn)化了操作程序，節(jié)省了操作時(shí)間，操作過程更加簡(jiǎn)單可行。
【專利說明】一種自身抗體檢測(cè)試劑盒
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型涉及一種自身抗體檢測(cè)試劑盒，屬于醫(yī)療檢測(cè)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]自身抗體指針對(duì)自身組織、器官、細(xì)胞及細(xì)胞成分的抗體。人體的生長(zhǎng)、發(fā)育和生存有完整的自身免疫耐受機(jī)制的維持，正常的免疫反應(yīng)有保護(hù)性防御作用，即對(duì)自身組織、成分不發(fā)生反應(yīng)。一旦自身耐受的完整性遭到破壞，則機(jī)體視自身組織、成分為“異物”，而發(fā)生自身免疫反應(yīng)，產(chǎn)生自身抗體。在特定情況下，免疫系統(tǒng)對(duì)機(jī)體自身物質(zhì)識(shí)別失效，把它們認(rèn)為是外來入侵物，從而產(chǎn)生針對(duì)這些物質(zhì)的抗體(即自身抗體)，引發(fā)自身免疫。這些自身抗體會(huì)攻擊機(jī)體自身細(xì)胞、組織、器官，引起炎癥反應(yīng)，對(duì)機(jī)體造成傷害。常見的自身免疫疾病包括有結(jié)締組織疾病、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、皮肌炎、硬皮病、神經(jīng)肌肉疾病、多發(fā)性硬化癥、重癥肌無力、脫髓鞘疾病、內(nèi)分泌性疾病、原發(fā)性腎上腺皮質(zhì)萎縮、慢性甲狀炎、青少年型糖尿病、消化系統(tǒng)疾病慢性非特異性潰瘍性結(jié)腸炎、慢性活動(dòng)性肝炎、惡習(xí)性貧血與萎縮性胃炎、泌尿系統(tǒng)疾病自身免疫性腎小球腎炎、肺腎出血性綜合癥、血液系統(tǒng)疾病自身免疫性溶血性貧血、特發(fā)性血小板減少性紫癜、特發(fā)性白細(xì)胞減少癥等。
[0003]現(xiàn)有的自身抗體檢測(cè)試劑盒包括檢測(cè)膜條、顯色劑A、顯色劑B、酶標(biāo)試劑、反應(yīng)終止液、濃縮洗滌液以及自身抗體譜標(biāo)準(zhǔn)條帶。其中，檢測(cè)膜條上包括檢測(cè)區(qū)和質(zhì)控區(qū)，檢測(cè)區(qū)上設(shè)有多條自身抗原檢測(cè)線，使用該膜條進(jìn)行檢測(cè)時(shí)有以下8個(gè)步驟:
[0004](I)將所有試劑恢復(fù)至室溫。在室溫下進(jìn)行測(cè)試。
[0005](2)按所需量將濃縮洗滌液用蒸餾水作1: 10稀釋，即I份濃縮洗滌液加9份蒸餾水稀釋。
[0006](3)取出反應(yīng)槽，每槽加入0.5ml洗滌液，然后加入待檢血清IOul，充分混勻，緩慢搖動(dòng)于37°C孵育30min。
[0007](4)棄去槽內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，用洗滌液洗滌4次，每次每槽1ml，洗滌lmin。
[0008](5)每槽加入洗滌液0.5ml，酶結(jié)合物20ul，混勻，緩慢搖動(dòng)于37°C孵育30min。
[0009](6)洗滌方法與⑷相同。
[0010](7)加入顯色液A0.5ml,顯色液B0.5ml,室溫反應(yīng)lOmin。
[0011](8)每槽加入0.5ml終止液，終止反應(yīng)，Imin后棄去液體，用自來水洗滌數(shù)次，取出膜條，用吸水紙吸干后即可進(jìn)行結(jié)果判斷。
[0012]以上操作方法步驟繁多，所需檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)，檢測(cè)效率低。
實(shí)用新型內(nèi)容
[0013]為了解決上述問題，本實(shí)用新型提供了一種自身抗體檢測(cè)試劑盒，通過對(duì)試劑盒中的檢測(cè)膜條進(jìn)行結(jié)構(gòu)上的改進(jìn)，簡(jiǎn)化操作步驟，節(jié)省操作時(shí)間，使操作更為方便快捷。
[0014]本實(shí)用新型的主要技術(shù)方案是:一種自身抗體檢測(cè)試劑盒，該試劑盒包括檢測(cè)膜條、顯色劑A、顯色劑B、反應(yīng)終止液、濃縮洗滌液、自身抗體譜標(biāo)準(zhǔn)條帶。[0015]所述檢測(cè)膜條包括檢測(cè)區(qū)和質(zhì)控區(qū)。
[0016]所述檢測(cè)區(qū)設(shè)有2條或2條以上包被有酶標(biāo)自身抗體檢測(cè)線；質(zhì)控區(qū)包被有酶標(biāo)抗人IgG抗體。
[0017]使用該試劑盒在室溫下進(jìn)行檢測(cè)，操作步驟如下:
[0018](I)在反應(yīng)槽中加入洗滌液1ml，封閉液50ul，孵育5分鐘；
[0019](2)往反應(yīng)槽中的相應(yīng)位置加入待檢血清10ul，在37°C的環(huán)境下孵育30分鐘；
[0020](3)棄去槽內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，用洗滌液洗滌檢測(cè)膜條3次；
[0021 ] (4)加入顯色劑Iml，反應(yīng)5-15分鐘；
[0022](5)觀察結(jié)果。
[0023]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本實(shí)用新型具有以下有益效果:
[0024]本實(shí)用新型的一種自身抗體檢測(cè)試劑盒由于預(yù)先在檢測(cè)膜條上設(shè)置了酶標(biāo)自身抗原檢測(cè)線和酶標(biāo)抗人IgG抗體質(zhì)控線，因此，在使用該試劑盒中的膜條進(jìn)行檢測(cè)的過程中無需再加入酶標(biāo)試劑，省略了加入酶標(biāo)試劑，再洗滌膜條以及再次孵育的步驟，簡(jiǎn)化了操作程序，節(jié)省了操作時(shí)間，操作過程更加簡(jiǎn)單可行。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0025]圖1是本實(shí)用新型實(shí)施例一的檢測(cè)膜條結(jié)構(gòu)示意圖；
[0026]圖2是本實(shí)用新型實(shí)施例一的自身抗體譜標(biāo)準(zhǔn)條帶。
[0027]附圖標(biāo)記:1、檢測(cè)膜條；2、自身抗原線；3、質(zhì)控線。
【具體實(shí)施方式】
[0028]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本實(shí)用新型進(jìn)行詳細(xì)說明。
[0029]實(shí)施例1
[0030]如圖1所示，本實(shí)施例的檢測(cè)膜條I上的檢測(cè)區(qū)設(shè)置有多條酶標(biāo)自身抗原線2，用于與待檢樣本中的自身抗體結(jié)合顯色，如待檢樣本中不存在自身抗體，則檢測(cè)線不顯色，如待檢樣本中存在自身抗體，則相應(yīng)的檢測(cè)線將發(fā)生抗原抗體結(jié)合反應(yīng)并顯色。這時(shí)，將檢測(cè)膜條與試劑盒中的自身抗體譜標(biāo)準(zhǔn)條帶對(duì)照比較，即可判斷存在何種相應(yīng)自身抗體疾病。如待檢樣本中不存在自身抗體，則無抗原抗體結(jié)合反應(yīng)，檢測(cè)線不顯色。質(zhì)控區(qū)上噴印有酶標(biāo)抗人IgG抗體，該質(zhì)控線用以檢測(cè)膜條是否失效，如有效則正常顯色，如不顯色則說明檢測(cè)膜條失效。
[0031]本實(shí)用新型試劑盒由檢測(cè)膜條、顯色劑A、顯色劑B、反應(yīng)終止液、濃縮洗滌液、自身抗體譜標(biāo)準(zhǔn)條帶組成。
[0032]檢測(cè)過程中，樣本取血后應(yīng)盡快分離血清，以免溶血。分離后的標(biāo)本應(yīng)盡快進(jìn)行測(cè)試，如不能及時(shí)測(cè)試可將標(biāo)本置4°C冰箱貯存，超過3天應(yīng)加入0.1 %硫柳汞防腐，置_20°C冷凍保存，測(cè)試前注意恢復(fù)至室溫。
[0033]利用本實(shí)用新型中的試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，測(cè)定步驟如下:
[0034](I)將所有試劑恢復(fù)至室溫。在室溫下進(jìn)行測(cè)試。
[0035](2)按所需量將濃縮洗滌液用蒸餾水作1:10稀釋，即I份濃縮洗滌液加9份蒸餾水稀釋。[0036](3)取出反應(yīng)槽，每槽加入0.5ml洗滌液，然后加入待檢血清IOul，充分混勻，緩慢搖動(dòng)于37°C孵育30min。
[0037](4)加入顯色液A0.5ml，顯色液B0.5ml，室溫反應(yīng)IOmin。
[0038](5)每槽加入0.5ml終止液，終止反應(yīng)，Imin后棄去液體，用自來水洗滌數(shù)次，取出膜條，用吸水紙吸干后即可進(jìn)行結(jié)果判斷。
[0039]結(jié)果判定:將印跡膜上起始線與標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照?qǐng)D譜的起始線對(duì)齊，觀察膜條上的陽性顯色區(qū)帶與標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照區(qū)帶對(duì)應(yīng)的位置，即可判斷顯色區(qū)帶含有的是何種自身抗體。
【權(quán)利要求】
1.一種自身抗體檢測(cè)試劑盒，其特征在于，該試劑盒包括檢測(cè)膜條、顯色劑A、顯色劑B、反應(yīng)終止液、濃縮洗滌液、自身抗體譜標(biāo)準(zhǔn)條帶；所述檢測(cè)膜條包括檢測(cè)區(qū)和質(zhì)控區(qū)，所述檢測(cè)區(qū)和質(zhì)控區(qū)上設(shè)有酶標(biāo)檢測(cè)線和酶標(biāo)質(zhì)控線。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的自身抗體檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述檢測(cè)區(qū)設(shè)有2條或2條以上包被有酶標(biāo)自身抗原檢測(cè)線。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的自身抗體檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述質(zhì)控區(qū)包被有酶標(biāo)抗人IgG抗體。
【文檔編號(hào)】G01N33/558GK203551566SQ201320046235
【公開日】2014年4月16日 申請(qǐng)日期:2013年1月28日 優(yōu)先權(quán)日:2013年1月28日
【發(fā)明者】王繼華, 唐時(shí)幸, 孫敏 申請(qǐng)人:廣州萬孚生物技術(shù)股份有限公司