氣相色譜法檢測(cè)土壤中毒死蜱農(nóng)藥殘留量的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明建立一種檢測(cè)不同質(zhì)地土壤(壤土、粘土、砂土)中毒死蜱農(nóng)藥殘留量的氣相色譜方法，其特征在于以乙酸乙酯為提取劑，提取液經(jīng)氮吹儀濃縮，用丙酮定容后，直接在氣相色譜儀上痕量分析。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于：一是毒死蜱含量與峰面積具有良好的線性關(guān)系(0.05-5.0mg／kg范圍內(nèi))，準(zhǔn)確度、精密度高；二是前處理簡(jiǎn)便快速，檢測(cè)成本低；三是乙酸乙酯毒性小(基本沒(méi)有毒性)，在檢測(cè)過(guò)程中，實(shí)驗(yàn)人員避免了有毒氣體的吸入。
【專利說(shuō)明】氣相色譜法檢測(cè)土壤中毒死蜱農(nóng)藥殘留量
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明建立一種檢測(cè)不同質(zhì)地土壤(壤土、粘土、砂土)中毒死蜱農(nóng)藥殘留量的氣相色譜方法，屬于農(nóng)藥殘留檢測(cè)【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002]毒死蜱是一種廣譜性有機(jī)磷殺蟲(chóng)劑，其化學(xué)名稱為0，O-二乙基-O-(3，5，6-三氯-2-吡啶基)硫代磷酸酯，主要用于防治多種作物上的螟蟲(chóng)、黏蟲(chóng)、介殼蟲(chóng)、蚜蟲(chóng)、棉鈴蟲(chóng)、薊馬、葉蟬和螨類等害蟲(chóng)。隨著甲胺磷等五種高毒有機(jī)磷農(nóng)藥退出市場(chǎng)，作為這些高毒農(nóng)藥的替代農(nóng)藥，毒死蜱是一種高效、低毒、低殘留的殺蟲(chóng)劑，目前，它已成為有機(jī)磷類殺蟲(chóng)劑的主導(dǎo)品種。
[0003]以往的研究表明，田間噴灑的農(nóng)藥只有10% -20%粘附在作物上，其余80% -90%通過(guò)各種途徑進(jìn)入了土壤。由于土壤中的有機(jī)質(zhì)對(duì)毒死蜱有較強(qiáng)的吸附能力，造成土壤中的毒死蜱含量常常居高不下，降解緩慢，半衰期常長(zhǎng)達(dá)60d-120d。
[0004]在實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)，土壤中殘留的毒死蜱能夠被菠菜、芹菜等作物吸收，其吸收量與土壤中的殘留量呈正相關(guān)。而且芹菜噴施毒死蜱后，那些殘留量還能造成下一季芹菜中的毒死蝶含量超標(biāo)。
[0005]現(xiàn)在，許多國(guó)家對(duì)毒死蜱在農(nóng)產(chǎn)品中的殘留限量規(guī)定越來(lái)越嚴(yán)格:①2002年9月7日，日本公布的農(nóng)殘限量標(biāo)準(zhǔn)表中，菠菜的殘留限量是0.0lmg / kg;②在歐盟，菠菜的殘留限量為0.05mg / kg ;③在CAC和美國(guó)，蔬菜中毒死蝶的殘留限量為0.05mg / kg ;④在我國(guó)，從2005年10月I日開(kāi)始，規(guī)定葉菜類蔬菜中毒死蜱殘留限量從原先的1.0mg / kg調(diào)整到0.1mg / kg，莖類蔬菜的限量標(biāo)準(zhǔn)更是調(diào)整到了 0.05mg / kg。
[0006]目前，對(duì)土壤中毒死蜱殘留量的檢測(cè)，尚無(wú)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的方法。本發(fā)明旨在建立一種廉價(jià)、快速、準(zhǔn)確、靈敏的方法來(lái)測(cè)定土壤中毒死蜱農(nóng)藥的殘留量。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明有如下二方面內(nèi)容:
[0008]1、土壤樣品前處理
[0009]2、氣相色譜儀檢測(cè)
[0010]本發(fā)明所采用的技術(shù)，包括以下內(nèi)容:
[0011](I) 土壤樣品的制備
[0012]將新鮮土樣自然風(fēng)干，去除樣品中的石沙、植物殘?bào)w等雜物，將風(fēng)干樣品研磨過(guò)60目篩。
[0013](2)儀器與試劑
[0014]①儀器Agilent6890氣相色譜儀、配有火焰光度檢測(cè)器(FPD)，DB-608(30mX0.32mmX0.5ym)、HP_5(30mX0.32mmX0.25 μ m)毛細(xì)管色譜柱，電子天平，水浴恒溫振蕩機(jī)，美國(guó)N-EVAP24水浴氮吹儀，高速離心機(jī)。[0015]②試劑乙酸乙酯:分析純；丙酮:色譜純；無(wú)水硫酸鈉:分析純，650°C馬福爐中烘6h。
[0016]③農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)樣品毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)溶液購(gòu)自農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所，質(zhì)量濃度為100 yg/ ml ο
[0017](3) 土壤樣品前處理
[0018]①提取用電子天平準(zhǔn)確稱取25.0g 土壤樣品于250ml具塞三角燒瓶中，加無(wú)水硫酸鈉5g、乙酸乙酯50.0ml，在水浴(25±1)1:振蕩器上以20(^ / min振蕩30min，然后倒入IOOml的離心管中，以4000r / min離心5min ；
[0019]②濃縮從離心管中吸取10.0ml上清液于IOml刻度試管中，將試管放入水浴鍋中加熱，水浴溫度控制在65°C-70°C，試管內(nèi)緩緩?fù)ㄈ氲獨(dú)饣蚩諝饬?，待樣品溶劑揮發(fā)、濃縮至近干(余留4-5滴)時(shí)，用丙酮定容，定容至5.0ml，充分搖勻，靜置5min，取上清液，供氣相色譜儀檢測(cè)。
[0020](4)氣相色譜儀檢測(cè)
[0021]①色譜參數(shù)設(shè)定色譜柱:DB_608毛細(xì)管柱作為分離柱；載氣:高純氮?dú)?純度99.999% );檢測(cè)器的燃?xì)馀c助燃?xì)獗?501111 / min、空氣IlOml / min ;進(jìn)樣模式:恒流，流量為1.8ml / min ;進(jìn)樣口溫度:235°C ;檢測(cè)器溫度:270°C ;柱升溫程序:初始溫度90°C，保持lmin，以35°C / min上升至210°C，以20°C / min上升至250°C，以25°C / min上升至270°C，保持6min ;進(jìn)樣方式:不分流；進(jìn)樣量I μ I。
[0022]②定性和定 量方法以毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)溶液的保留時(shí)間來(lái)定性，對(duì)于陽(yáng)性樣品采用ΗΡ-5毛細(xì)管色譜柱確認(rèn)；以樣品峰面積與標(biāo)準(zhǔn)溶液峰面積比較來(lái)定量。
[0023](5)方法驗(yàn)證
[0024]①線性和范圍分別配制濃度為0.05、0.l、0.2、0.5、L0、2.0、5.0mg / kg的毒死蜱
系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，按上述色譜條件下依次進(jìn)樣，以標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，色譜峰面積為縱坐標(biāo)，線性回歸方程為:y=418236x+32922，其相關(guān)系數(shù)為0.9991。
[0025]②準(zhǔn)確度、精密度以添加回收率來(lái)衡量方法的準(zhǔn)確度，以變異系數(shù)(CV)來(lái)表示方法的精密度。在本底不含毒死蜱的土壤樣品中添加毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)溶液，添加濃度為0.05,0.1、1.0,5.0mg / kg，同時(shí)設(shè)置6個(gè)重復(fù)，再按前述的樣品處理方法及色譜條件進(jìn)行添加回收率試驗(yàn),在4個(gè)添加水平上，毒死蜱的平均回收率為85.9% -101.8%,變異系數(shù)在6%以下。
[0026]③檢出限體現(xiàn)了方法的靈敏度。用毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)溶液逐級(jí)稀釋添加，按上述方法檢測(cè)，以3倍噪聲計(jì)算,測(cè)得最低檢出濃度為0.0lmg / kg ο
[0027]本發(fā)明利用相似相溶原理，以乙酸乙酯為提取劑，提取液經(jīng)氮吹儀濃縮，用丙酮定容后，直接在氣相色譜儀上痕量分析。該方法的優(yōu)點(diǎn)在于:一是毒死蜱含量與峰面積具有良好的線性關(guān)系(0.05-5.0mg / kg范圍內(nèi))，準(zhǔn)確度、精密度高；二是前處理簡(jiǎn)便快速，檢測(cè)成本低；三是乙酸乙酯毒性小(基本沒(méi)有毒性)，在檢測(cè)過(guò)程中，實(shí)驗(yàn)人員避免了有毒氣體的吸入。
【具體實(shí)施方式】
[0028]方式1:粘土中毒死蜱殘留量的檢測(cè)
[0029](I) 土壤樣品前處理[0030]①提取用電子天平準(zhǔn)確稱取25.0g 土壤樣品于250ml具塞三角燒瓶中，加無(wú)水硫酸鈉5g、乙酸乙酯50.0ml，在水浴(25±1)1:振蕩器上以20(^ / min振蕩30min，然后倒入100ml的離心管中，以4000r / min離心5min。
[0031]②濃縮從離心管中吸取10.0ml上清液于IOml刻度試管中，將試管放入水浴鍋中加熱，水浴溫度控制在65°C，試管內(nèi)緩緩?fù)ㄈ氲獨(dú)饣蚩諝饬鳎龢悠啡軇]發(fā)、濃縮至近干(余留4-5滴)時(shí)，用丙酮定容，定容至5.0ml，充分搖勻，靜置5min，取上清液，供氣相色譜儀檢測(cè)。
[0032](2)氣相色譜儀檢測(cè)
[0033]①色譜參數(shù)設(shè)定色譜柱:DB_608彈性石英毛細(xì)管柱作為分離柱；載氣:高純氮?dú)?純度99.999% );檢測(cè)器的燃?xì)馀c助燃?xì)釮2150ml / min、空氣IlOml / min ;進(jìn)樣模式:恒流，流量為1.8ml / min ;進(jìn)樣口溫度:235°C ;檢測(cè)器溫度:270°C ;柱升溫程序:初始溫度90°C，保持 lmin，以 35°C / min 上升至 210°C，以 20°C / min 上升至 250°C，以 25°C / min上升至270°C，保持6min ;進(jìn)樣方式:不分流；進(jìn)樣量Iy I。
[0034]②定性和定量方法以毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)溶液的保留時(shí)間來(lái)定性，對(duì)于陽(yáng)性樣品采用HP-5毛細(xì)管色譜柱確認(rèn)；以樣品峰面積與標(biāo)準(zhǔn)溶液峰面積比較來(lái)定量。
[0035](3)方法的準(zhǔn)確度和精密度
[0036]在本底不含毒死蜱的粘土樣品中進(jìn)行毒死蜱添加回收率實(shí)驗(yàn)，添加濃度為
0.05mg / kg、0.1mg / kg> 1.0mg / kg>5.0mg / kg4 個(gè)水平,各處理重復(fù) 6 次。結(jié)果:毒死蜱的平均回收率為85.9% -98.9% (見(jiàn)表1)，變異系數(shù)為3.4% -5.6%，完全符合農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留檢測(cè)的要求。
[0037]表1粘土中毒死蜱不同濃度的添加回收率
【權(quán)利要求】
1.一種檢測(cè)不同質(zhì)地土壤(壤土、粘土、砂土)中毒死蜱農(nóng)藥殘留量的氣相色譜方法，其特征在于包括下述步驟: ①提取用電子天平準(zhǔn)確稱取25.0g 土壤樣品于250ml具塞三角燒瓶中，加無(wú)水硫酸鈉5g、乙酸乙酯50.0ml，在水浴(25±1)°〇振蕩器上以20(^ / min振蕩30min，然后倒入IOOml的離心管中，以4000r / min離心5min ； ②濃縮從離心管中吸取10.0ml上清液于IOml刻度試管中，將試管放入水浴鍋中加熱，水浴溫度控制在65°C _70°C，試管內(nèi)緩緩?fù)ㄈ氲獨(dú)饣蚩諝饬鳎龢悠啡軇]發(fā)、濃縮至近干(余留4-5滴)時(shí)，用丙酮定容，定容至5.0ml，充分搖勻，靜置5min，取上清液，供氣相色譜儀檢測(cè)； ③色譜參數(shù)設(shè)定色譜柱:DB-608毛細(xì)管柱作為分離柱；載氣:高純氮?dú)?純度99.999%);檢測(cè)器的燃?xì)馀c助燃?xì)釮2150ml / min、空氣IlOml / min ;進(jìn)樣模式:恒流，流量為1.8ml / min ;進(jìn)樣口溫度:235°C ;檢測(cè)器溫度:270°C ;柱升溫程序:初始溫度90°C，保持lmin，以35°C / min上升至210°C，以20°C / min上升至250°C，以25°C / min上升至270°C，保持6min ;進(jìn)樣方式:不分流；進(jìn)樣量I μ I ; ④定性和定量方法以毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)溶液的保留時(shí)間來(lái)定性，對(duì)于陽(yáng)性樣品采用ΗΡ-5毛細(xì)管色譜柱確認(rèn)；以樣品峰面積與標(biāo)準(zhǔn)溶液峰面積比較來(lái)定量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測(cè)土壤中毒死蜱農(nóng)藥殘留量的氣相色譜方法，其特征在于土壤中的毒死蜱用乙酸乙酯提取，提取液經(jīng)氮吹儀濃縮，用丙酮定容后，直接在氣相色譜儀上痕量分析。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測(cè)土壤中毒死蜱農(nóng)藥殘留量的氣相色譜方法，其特征在于檢測(cè)設(shè)備為Agilent6890氣相色譜儀，配有火焰光度檢測(cè)器(FPD)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測(cè)土壤中毒死蜱農(nóng)藥殘留量的氣相色譜方法，其特征在于用雙柱確認(rèn)定性，用外標(biāo)法定量。
【文檔編號(hào)】G01N30/88GK103472173SQ201310420069
【公開(kāi)日】2013年12月25日 申請(qǐng)日期:2013年9月1日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月1日
【發(fā)明者】鄔金飛, 馬麗萍 申請(qǐng)人:鄔金飛