專(zhuān)利名稱(chēng)：面粉中過(guò)氧化鈣的檢測(cè)試劑盒及過(guò)氧化鈣檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及檢測(cè)用試劑盒及其應(yīng)用，尤其是涉及一種快速測(cè)定面粉中過(guò)氧化鈣的試劑盒及對(duì)面粉中人為摻加過(guò)氧化鈣定性和半定量的測(cè)定方法。
背景技術(shù)：
過(guò)氧化鈣是淡黃色結(jié)晶粉末，分子量72. 08，廣泛用于食品、化工、紡織等行業(yè)。常用于改善小麥粉的后熟、面粉增白、麥粉增筋劑、面粉脫色劑、面包改良劑食用油漂白等領(lǐng)域。為了增加小麥粉的筋道和口感，面粉行業(yè)普遍加入過(guò)氧化苯甲酰、過(guò)氧化鈣作為小麥粉增筋劑、增白劑。我國(guó)自2011年5月I日起，禁止在面粉生產(chǎn)中添加過(guò)氧化苯甲酰、過(guò)氧化鈣[衛(wèi)生部等七部(局)發(fā)布《關(guān)于撤銷(xiāo)食品添加劑過(guò)氧化苯甲酰、過(guò)氧化鈣的公告》(2011年第4號(hào))]。
將過(guò)氧化鈣添加到面粉中，長(zhǎng)期食用可能會(huì)致癌，對(duì)人體健康會(huì)產(chǎn)生很大的危害。而有些面粉生產(chǎn)廠家為了面粉脫色、加快面粉的熟化，可能違規(guī)濫加過(guò)氧化苯甲酰或過(guò)氧化鈣?，F(xiàn)有的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)和公開(kāi)文獻(xiàn)中，還沒(méi)有檢測(cè)面粉中過(guò)氧化鈣的方法以及快速測(cè)定試劑盒。因此，建立一個(gè)快速、準(zhǔn)確的面粉中過(guò)氧化鈣定性及半定量測(cè)定方法有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是提供一種對(duì)面粉中過(guò)氧化鈣快速檢測(cè)的試劑盒，以及應(yīng)用該試劑盒對(duì)面粉中過(guò)氧化鈣進(jìn)行定性和半定量的測(cè)定方法。為此，本發(fā)明采用如下的技術(shù)方案面粉中過(guò)氧化鈣快速測(cè)定試劑盒，其特征在于(I)塑料樣品勺，裝滿一平勺面粉質(zhì)量約2g ；(2)帶有刻度的一次性塑料滴管3mL ；(3) 50mL具塞玻璃比色管；(4) 5OmL玻璃或塑料量筒；(5)試管架，孔的直徑適合50mL具塞玻璃比色管；(6)標(biāo)準(zhǔn)比色卡，標(biāo)準(zhǔn)比色卡為淡紅色至深紅色呈梯度變化的系列色卡，每條下面均對(duì)應(yīng)其代表的過(guò)氧化鈣的含量；(7)過(guò)氧化物酶顯色試劑；(8)廣泛 pH 試紙(1-14)和精密 pH 試紙(6. 4-8. O)；(9)反應(yīng)試劑三個(gè)塑料瓶裝的試劑，每瓶體積500_1000mL，分別為I %稀硫酸、20%稀氫氧化鈉、O. I %氫氧化鈉；(10)500mL 塑料洗瓶。面粉中過(guò)氧化鈣快速檢測(cè)試劑盒的應(yīng)用，其具體步驟是(I)取一勺試樣，加入1%稀硫酸20mL，渦旋混合均勻，充分反應(yīng)IOmin ；(2)加入20%氫氧化鈉溶液用廣泛pH試紙調(diào)節(jié)pH到5-6之間,然后用O. 1%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)溶液PH值到7. O。(3)加入過(guò)氧化物酶顯色試劑溶液2mL,定容到50mL,室溫下顯色5-10min后,觀察顏色。(4)將所得顏色與標(biāo)準(zhǔn)比色卡對(duì)照。步驟(3)過(guò)氧化物酶試劑混合溶液由組合試劑構(gòu)成，現(xiàn)用現(xiàn)配。A號(hào)瓶含辣根過(guò)氧化物酶2000U (活力單位)；B號(hào)瓶含4-氨基安替比林O. 00154mol/L的O. 2mol/L的磷酸鹽緩沖液(pH = 7.6)200mL;C號(hào)瓶含0.022mol/L苯酚溶液200mL。使用時(shí)，先將B和C溶液充分混合，然后將A中的酶溶解在混合液中，輕輕搖動(dòng)，使酶完全溶解，即為過(guò)氧化物酶試劑溶液，酶活力IOU(活力單位)/mL。結(jié)果判定，樣品溶液若不變色，則沒(méi)有摻加過(guò)氧化鈣，屬于合格的面粉；溶液若有 顏色變化，則為摻有過(guò)氧化鈣。過(guò)氧化苯甲酰雖然也是面粉加工常用的增白劑，屬于強(qiáng)氧化齊U，但在該方法的條件下，在含過(guò)氧化苯甲酰1000mg/kg及以下含量條件下不影響檢測(cè)結(jié)
果O面粉中過(guò)氧過(guò)鈣檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)比色卡的制作方法(I)精確稱(chēng)取IOg不含過(guò)氧化鈣的面粉作為空白基質(zhì)，加入準(zhǔn)確稱(chēng)量的過(guò)氧化鈣標(biāo)準(zhǔn)品，配制成過(guò)氧化鈣的系列加標(biāo)含量，分別加入50mL質(zhì)量濃度為I %稀硫酸，渦旋混勻，充分反應(yīng)lOmin。(2)用20%和O. I %的氫氧化鈉溶液調(diào)整pH值到7. O。(3)加入過(guò)氧化物酶組合試劑溶液，在37°C水浴鍋中恒溫顯色20min，冷卻至室溫，定容至50mL。(4)將顯色的標(biāo)準(zhǔn)溶液采集照片，將梯度變化的一組彩色照片而制成標(biāo)準(zhǔn)比色卡。根據(jù)顏色的深淺來(lái)定性和半定量。制作方法(I)中所配制的空白基質(zhì)加標(biāo)含量梯度范圍優(yōu)選在20mg/kg-1000mg/kg之間，如 20mg/kg、50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg、500mg/kg、1000mg/kg。有益效果I)試劑盒法快速定性和半定量檢測(cè)面粉中過(guò)氧化鈣的方法，方法簡(jiǎn)單、快速、靈敏度高、結(jié)果鮮明。2)利用本發(fā)明的面粉中過(guò)氧化鈣的檢測(cè)試劑盒，便于目測(cè)定性和現(xiàn)場(chǎng)快速篩選測(cè)定。3)本發(fā)明面粉中過(guò)氧化鈣的檢測(cè)試劑盒及其檢測(cè)方法，不需要其他附件儀器，易于操作，實(shí)用性強(qiáng)。


圖I面粉中過(guò)氧化鈣標(biāo)準(zhǔn)比色卡
具體實(shí)施例方式下面對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。實(shí)施例I :標(biāo)準(zhǔn)比色卡的制備
分析步驟精確稱(chēng)量不含過(guò)氧化鈣增白劑的小麥面粉試樣10g(精確至O. Olg于IOOmL比色管中，然后再分別稱(chēng)取高純?cè)噭┻^(guò)氧化I丐0mg、0. 20mg、0. 50mg、l. 00mg、2. OOmg>
5.OOmgUO. OOmg加入到比色管中，并依次加入I %稀硫酸50mL，渦旋混勻，在室溫下反應(yīng)IOmin0用20%和O. I %的氫氧化鈉溶液調(diào)整pH值到7. 0，加入3mL酶試劑溶液，用二次水定容到IOOmL,在帶水平搖床的37°C水浴鍋中恒溫lOmin，冷卻至室溫，即得系列空白基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別對(duì)應(yīng)每公斤面粉含過(guò)氧化I丐0mg、20mg、50mg、100mg、200mg、500mg、lOOOmg。給顯色的溶液照相，采集顏色制作成標(biāo)準(zhǔn)比色卡(見(jiàn)圖I)。實(shí)施例2 過(guò)氧化鈣快速測(cè)定試劑盒試劑盒裝有塑料樣品勺，2個(gè)，裝滿一平勺面粉質(zhì)量約2g ；3mL帶有刻度的一次 性塑料滴管，100個(gè)；50mL具塞玻璃比色管，30個(gè)；50mL塑料量筒，I個(gè)；試管架，I個(gè)，20個(gè)孔，孔的直徑適合50mL具塞玻璃比色管；標(biāo)準(zhǔn)比色卡，I個(gè)，為含有空白和淡紅色至深紅色6個(gè)呈梯度變化的系列色條，每條下面標(biāo)注其代表的過(guò)氧化鈣的含量；廣泛PH試紙(1-14)，2盒；精密pH試紙(6. 4-8. 0)，2盒；反應(yīng)試劑三種塑料瓶裝的試劑，分別標(biāo)為I %稀硫酸、20%稀氫氧化鈉、0. I %氫氧化鈉，每瓶裝500mL。500mL塑料洗瓶，內(nèi)裝蒸餾水，I個(gè)。實(shí)施例3:分析步驟取某品牌餃子粉一勺于50mL比色管中，加入I %稀硫酸20mL，在室溫下反應(yīng)lOmin，冷卻至室溫后，用20%和0. I %氫氧化鈉溶液調(diào)整pH值到7.0，加入21^酶試劑溶液，用二次水定容至刻度，搖勻。室溫下顯色5min后，觀察顏色。試樣為粉紅色的渾濁溶液，說(shuō)明該試樣中含有過(guò)氧化鈣。經(jīng)與標(biāo)準(zhǔn)比色卡對(duì)照，試液顏色與100mg/kg的標(biāo)準(zhǔn)色條顏色接近，說(shuō)明該樣品中過(guò)氧化鈣有檢出，含量約為100mg/kg。上述實(shí)施例僅供說(shuō)明本發(fā)明之用，而并非是對(duì)本發(fā)明專(zhuān)利的限制；應(yīng)當(dāng)指出的是，對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思范圍的情況下，還可以作出各種變化和變型，這些都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍；因此，凡跟本發(fā)明權(quán)利要求范圍所做的均等變化與修飾，均應(yīng)屬于本發(fā)明權(quán)利要求的覆蓋范圍。
權(quán)利要求
1.面粉中過(guò)氧化鈣快速測(cè)定試劑盒，其特征在于，裝有由塑料樣品勺、塑料滴管、試管、量筒、試管架、標(biāo)準(zhǔn)比色卡、過(guò)氧化物酶顯色試劑、PH試紙、反應(yīng)試劑組成的盒；其中反應(yīng)試劑為I %稀硫酸、20%稀氫氧化鈉、O. I %氫氧化鈉,標(biāo)準(zhǔn)比色卡為淡紅色至深紅色呈梯度變化的系列色卡。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于，標(biāo)準(zhǔn)比色卡的粉紅色為由淺至深分為6-8個(gè)檔次，并對(duì)不同顏色對(duì)應(yīng)標(biāo)注所代表的過(guò)氧化I丐濃度為20mg/kg至1000mg/kg,如20mg/kg、50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg、500mg/kg、1000mg/kg。
3.面粉中過(guò)氧化鈣快速測(cè)定試劑盒的應(yīng)用，其特征在于，取一平勺試樣，加入1%稀硫酸20mL，渦旋混合均勻，充分反應(yīng)IOmin ;用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值到7. O ;加入過(guò)氧化物酶顯色試劑2mL，定容，室溫下顯色5-10min，將所得顏色與標(biāo)準(zhǔn)比色卡對(duì)照，確定面粉中過(guò)氧化鈣的含量范圍。
全文摘要
本發(fā)明的面粉中過(guò)氧化鈣檢測(cè)試劑盒是由塑料樣品勺、塑料滴管、試管、量筒、試管架、標(biāo)準(zhǔn)比色卡、顯色試劑、pH試紙、反應(yīng)試劑、洗瓶組成。對(duì)試樣開(kāi)展測(cè)試，觀察顯示的顏色深淺和標(biāo)準(zhǔn)比色卡對(duì)照進(jìn)行定性和半定量檢測(cè)。面粉中過(guò)氧化鈣檢測(cè)方法將面粉中加入稀酸反應(yīng)，然后用堿性溶液調(diào)節(jié)混合液pH值到中性，加入含過(guò)氧化物酶試劑的混合溶液，顯色，與標(biāo)準(zhǔn)比色卡對(duì)照，得到定性和半定量結(jié)果。本發(fā)明的試劑盒和檢測(cè)方法具有使用方便、顯色速度快、測(cè)定條件相對(duì)寬松、靈敏度高、成本低等優(yōu)點(diǎn)，適于現(xiàn)場(chǎng)快速篩選測(cè)定。
文檔編號(hào)G01N21/78GK102944550SQ20121038883
公開(kāi)日2013年2月27日 申請(qǐng)日期2012年10月15日 優(yōu)先權(quán)日2012年10月15日
發(fā)明者宋薇 申請(qǐng)人:上海譜尼測(cè)試技術(shù)有限公司