專利名稱：一種炎寧膠囊質(zhì)量標準檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥品檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體地說是涉及一種炎寧膠囊質(zhì)量標準的檢測方法。
背景技術(shù)：
炎寧膠囊是國家食品藥品監(jiān)督管理局批準的藥品，由鹿茸草、白花蛇舌草、鴨跖草配伍組成，采用現(xiàn)代提取方法提取其有效成份制備而成的膠囊劑，具有清熱解毒，消炎止痢的功效，用于上呼吸道感染，扁桃體炎，尿路感染，急性菌痢，腸炎。
炎寧膠囊現(xiàn)行的質(zhì)量標準標準號為YBZ10042008，該方法僅對產(chǎn)品的性狀、鑒別及其它膠囊劑的常規(guī)項進行檢測，鑒別中僅進行化學(xué)顯色鑒別，同時產(chǎn)品組方中主要有效成分的含量測定限度較粗，該標準方法無專屬性，難以準確反應(yīng)產(chǎn)品質(zhì)量，已不能適應(yīng)中藥現(xiàn)代化發(fā)展的技術(shù)要求及產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定可控的要求。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種炎寧膠囊藥品質(zhì)量標準檢測方法，該方法具有分離效果好，測定準確、靈敏、快速及專屬性強等特點。本發(fā)明所檢測的炎寧膠囊，其標準處方為鹿茸草3906. 25g，白花蛇舌草1953. 12g，鴨跖草1953. 12g。其制備工藝為以上三味，分別加10倍、8倍量水煎煮二次，第一次I. 5小時，第二次I小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為I. 10(85 90°C )，加乙醇使含醇量為60%，攪勻，靜置12小時，濾過，濾液回收乙醇，濃縮至相對密度為I. 32 (85 90°C)的清膏，80°C干燥，粉碎成細粉，加入硬脂酸鎂0. 5g，混合均勻，裝入膠囊，制成1000粒，SP得。性狀本品為硬膠囊，內(nèi)容物為紅棕色至棕褐色的粉末；氣香，味微苦。本發(fā)明是對該藥品原有的質(zhì)量標準進行新的內(nèi)容補充，即提高了白花蛇舌草的鑒別及鹿茸草的含量測定方法，具體技術(shù)方案為
I、白花蛇舌草鑒別方法如下
I)取炎寧膠囊內(nèi)容物I. 0g，加乙醚30ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加無水乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液。2)取齊墩果酸對照品，加無水乙醇制成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液。3)取鹿茸草3906. 25g，鴨跖草1953. 12g，按樣品制備方法制備出陰性樣品，按供試品溶液制備方法制備出陰性樣品溶液，作為缺少白花蛇舌草的陰性樣品溶液。4)照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各廣5W，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷一甲醇按體積配比40:1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以磷鑰酸試液，在105°C加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，應(yīng)顯相同顏色的斑點。2、木犀草素含量測定方法如下I)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-0. 1%磷酸溶液(55 45)為流動相，檢測波長為350nm。理論板數(shù)按木犀草素峰計算應(yīng)不低于3000。2)對照品溶液的制備取在五氧化二磷中減壓干燥至恒重的木犀草素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含20ug的溶液，即得。3)供試品溶液的制備取裝量差異項下的炎寧膠囊內(nèi)容物，研細，取約0. 5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入60%乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率40kHz) 10分鐘，放冷，再稱定重量，用60%乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。4)測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液10ul，注入液相色譜儀，測定，記錄色譜圖，取峰面積按外標法計算，即得木犀草素含量。3、方法學(xué)研究· I)最大吸收波長的測定
①精密稱取在五氧化二磷減壓干燥下至恒重的木犀草素對照品10. 67mg,置50mL量瓶，加甲醇使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，即得。作為對照品溶液。②甲醇為空白溶液。③設(shè)置掃描波長的范圍選擇ABS (吸光度)。采樣間距，選擇0.5nm?？瞻兹芤盒蕭呙杌€。放上待測對照品溶液進行掃描，即得到全波長的樣品光譜圖。在350nm處有最大吸收。2)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-0. 1%磷酸溶液(55 45)為流動相，檢測波長為350nm。理論板數(shù)按木犀草素峰計算應(yīng)不低于3000。3)對照品溶液的制備取在五氧化二磷中減壓干燥至恒重的木犀草素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含20ug的溶液，即得。4)供試品溶液的制備取裝量差異項下的炎寧膠囊內(nèi)容物，研細，取約0. 5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入60%乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率40kHz) 10分鐘，放冷，再稱定重量，用60%乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。5)測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液10ul，注入液相色譜儀，測定，記錄色譜圖，取峰面積按外標法計算，即得木犀草素含量。根據(jù)本發(fā)明新增的鑒別和含量測定方法可制定出新的炎寧膠囊質(zhì)量標準如下 鑒別取本品內(nèi)容物I. Og，加乙醚30ml，回流提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加無
水乙醇2ml使溶解,作為供試品溶液。另取齊墩果酸對照品,加無水乙醇制成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2010年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述兩種溶液各1飛^1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷一甲醇(40:1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以磷鑰酸試液，在105°C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。檢查應(yīng)符合膠囊劑項下有關(guān)的各項規(guī)定(中國藥典2010年版一部附錄IL)。含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2010年版一部附錄VID)測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-0. 1%磷酸溶液(55 45)為流動相；檢測波長為350nm。理論板數(shù)按木犀草素峰計算應(yīng)不低于3000。對照品溶液的制備取五氧化二磷減壓干燥至恒重的木犀草素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含20ii g的溶液，即得。供試品溶液的制備取裝量差異項下的本品內(nèi)容物，研細，取約0. 5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入60%乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率40kHz)10分鐘，放冷，再稱定重量，用60%乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液10 yl，注入液相色譜儀，測定，即得。本品每粒含鹿茸草以木犀草素(C15HltlO6)計，不得少于0. 50mg。功能與主治清熱解毒，消炎止痢。用于上呼吸道感染，扁桃體炎，尿路感染，急性菌痢，腸炎。用法與用量口服。一次4粒,一日3 4次。規(guī)格每粒裝0.5g
貯藏密封，避光。本發(fā)明的有益效果為對炎寧膠囊中的白花蛇舌草所含齊墩果酸進行薄層色譜法鑒別檢查，該方法具有操作簡單、分離效果好、專屬性強等技術(shù)特點；對方中主藥鹿茸草所含木犀草素采用高效液相色譜法(HPLC)測定含量，該方具有分離效果好，測定準確、靈敏度高、專屬性強等特點。


圖I為本發(fā)明中白花蛇舌草的薄層鑒別圖。圖2為本發(fā)明中含量測定木犀草素對照品圖。圖3為本發(fā)明的含量測定炎寧膠囊的樣品圖。圖4為本發(fā)明的含量測定陰性對照圖。
圖5為本發(fā)明木犀草素標準曲線。
以木犀草素進樣量為橫坐標，峰面積為縱坐標做回歸曲線，得線性回歸方程y=4230. 5x-3202. 4 7 = 0. 9999，由結(jié)果可見，木犀草素進樣量在50. 68 506. 80ng范圍之內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。圖I中，左數(shù)I為齊墩果酸對照品，2為陰性對照，3為批號為20100501炎寧膠囊樣品，4，為批號為20100502炎寧膠囊樣品，5為批號為20100503炎寧膠囊樣品。
具體實施例方式一、對炎寧膠囊中白花蛇舌草的鑒別方法如下
取本品內(nèi)容物I. Og,加乙醚30ml，回流提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加無水乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取齊墩果酸對照品，加無水乙醇制成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2010年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述兩種溶液各分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷一甲醇(40:1)為展開劑，展開，取 出，晾干，噴以磷鑰酸試液，在105°C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。
二、對炎寧膠囊中木犀草素含量測定方法如下
I、儀器與試藥
儀器LC-20AT島津液相色譜儀、AG245電子天平
試藥甲醇，色譜純，水為重蒸水，其他試劑均為分析純
對照品木犀草素對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號111520-200504)
試藥炎寧膠囊(哈藥集團三精千鶴制藥有限公司，批號20100501)。2、方法與結(jié)果
(I)色譜條件
以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-0. 1%磷酸溶液(55 45)為流動相，檢測波長為350nm。理論板數(shù)按木犀草素峰計算應(yīng)不低于3000。( 2)對照品貯備液制備
取在五氧化二磷中減壓干燥至恒重的木犀草素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含20ug的溶液，即得。( 3 )供試品溶液的制備
取裝量差異項下的本品內(nèi)容物，研細，取約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入60%乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率40kHz) 10分鐘，放冷，再稱定重量，用60%乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。(4)測定法
分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液10ul，注入液相色譜儀，測定，即得。(5)系統(tǒng)適用性試驗
在上述色譜條件下，選用不同型號的色譜柱進行系統(tǒng)適用性考察，試驗結(jié)果見表I。表I含量系統(tǒng)適用性試驗結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種炎寧膠囊藥品中白花蛇舌草的鑒別方法，其特征在于按以下方法進行取炎寧膠囊內(nèi)容物I. Og，加乙醚30ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加無水乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；取齊墩果酸對照品，加無水乙醇制成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各1飛沿，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷一甲醇按40:1體積配比為展開劑，展開，取出，晾干，噴以磷鑰酸試液，在105°C加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，應(yīng)顯相同顏色的斑點。
2.一種炎寧膠囊藥品中木犀草素的含量測定方法，其特征在于按以下進行 (1)色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-0.1%磷酸溶液按體積配比55 :45為流動相，檢測波長為350nm ;理論板數(shù)按木犀草素峰計算應(yīng)不低于 3000 ； (2)對照品溶液的制備取在五氧化二磷中減壓干燥至恒重的木犀草素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含20ug的溶液，即得； (3)供試品溶液的制備取炎寧膠囊內(nèi)容物約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入60%乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理10分鐘，放冷，再稱定重量，用60%乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得； (4)測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液10ul，注入液相色譜儀，測定，即得木犀草素含量。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種炎寧膠囊質(zhì)量標準的檢測方法，用于炎寧膠囊的質(zhì)量控制，增加了炎寧膠囊中白花蛇舌草的薄層定性鑒別，該方法具有操作簡單、分離效果好、專屬性強等到技術(shù)特點；對方中主藥鹿茸草所含木犀草素采用高效液相色譜法(HPLC)測定含量，該方法具有分離效果好、測定準確、靈敏、快速及專屬性強等特點。利用本發(fā)明的檢測方法，可提高炎寧膠囊的質(zhì)量可控性，有利于產(chǎn)品的質(zhì)量穩(wěn)定。
文檔編號G01N30/02GK102967684SQ201210378989
公開日2013年3月13日 申請日期2012年10月9日 優(yōu)先權(quán)日2012年10月9日
發(fā)明者方洪壯, 孫開敬, 孫長海, 武鳳梅, 張舒婷, 鄭玉梅, 任恒鑫, 費建軍, 張淼, 王浩, 朱文軍, 李尚晏 申請人:哈藥集團三精千鶴制藥有限公司