專利名稱：銀丹心腦通軟膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于制藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種軟膠囊劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，特別涉及一種治療心腦 血管疾病的軟膠囊劑(通用名稱或藥品名稱銀丹心腦通軟膠囊)的質(zhì)量檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
銀丹心腦通軟膠囊具有活血化瘀、行氣止痛、消食化滯的功能。用于氣滯血瘀引起的胸 痹，癥見(jiàn)胸痛，胸悶，氣短，心悸等，冠心病心絞痛，高脂血癥、腦動(dòng)脈硬化，中風(fēng)、中風(fēng) 后遺癥。銀杏葉、丹參、三七、燈盞細(xì)辛分別是銀丹心腦通軟膠囊的特征性指標(biāo)成份。在現(xiàn) 有的銀丹心腦通軟膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，三七鑒別的TLC重現(xiàn)性不好，未對(duì)丹參中酯滲性成分( 丹參酮IIA)和燈盞細(xì)辛進(jìn)行定性控制。另外丹參的含量測(cè)定方法不佳，未對(duì)銀杏葉中銀杏 總黃酮含量進(jìn)行有效控制。以上問(wèn)題不利于生產(chǎn)廠家和監(jiān)督部門對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量的控制。為了更 進(jìn)一步保證該產(chǎn)品的質(zhì)量及更有利于對(duì)該產(chǎn)品質(zhì)量的監(jiān)督、管理，所以有必要對(duì)該藥品的質(zhì) 量檢測(cè)方法進(jìn)行改進(jìn)，從而更進(jìn)一步保證該產(chǎn)品的質(zhì)量和療效。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種銀丹心腦通軟膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法。本發(fā)明在原有的質(zhì)量控 制基礎(chǔ)上，增加了可以對(duì)銀丹心腦通軟膠囊的主要藥物成份進(jìn)行有效檢測(cè)的方法，彌補(bǔ)了原 質(zhì)量控制過(guò)程的不足，提高了產(chǎn)品的質(zhì)量監(jiān)控水平，也有利于管理部門對(duì)產(chǎn)品的監(jiān)測(cè)。
本發(fā)明的目的可通過(guò)下列技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)銀丹心腦通軟膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法，按照 重量計(jì)算，銀丹心腦通軟膠囊是用銀杏葉500g、丹參500g、燈盞細(xì)辛300g、絞股藍(lán)300g、 山楂400g、大蒜400g、三七200g、艾片10g制成1000粒膠囊劑；其特征在于，該質(zhì)量檢測(cè)方 法包括以下步驟
性狀本品(銀丹心腦通軟膠囊)為軟膠囊，內(nèi)容物為棕色至棕褐色的膏狀物；氣辛 ，味微苦。
鑒別(1)取本品內(nèi)容物lg，加水20ml攪拌使溶散，用石油醚(30 60°C)萃取兩次 ，每次20ml，棄去石油醚層，水層用乙醚萃取3次，每次20ml，合并乙醚液，水浴揮干，殘 渣加乙酸乙酯2ml，攪拌，靜置，取上清液作為供試品溶液。另取丹參酮IIA對(duì)照品，加乙 酸乙酯制成每lml含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部 附錄VI B)試驗(yàn)。吸取上述兩種溶液各5 10yl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯-乙酸乙酯-石油醚(30 60°C) (18:1:1)為展開劑，展開，取出，晾干。供試品色譜中，在與 對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的暗紅色斑點(diǎn)。
(2) 取本品內(nèi)容物2g，加石油醚(30 60°C) 20ml，振搖，靜置，棄去上清液，殘?jiān)?加甲醇20ml，加熱回流15分鐘，放冷，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml，微熱使溶解，力口 水飽和的正丁醇25ml，振搖提取，取正丁醇提取液，用氨試液25ml洗滌，棄去氨溶液，再 用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次25ml，正丁醇液濃縮至干，殘?jiān)蛹状糽ml使溶解，作為 供試品溶液。另取三七對(duì)照藥材O. 5g，加水約5滴，攪勻，加甲醇20ml，加熱回流15分鐘， 放冷，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml，微熱使溶解，加水飽和的正丁醇25ml，振搖提取
，取正丁醇提取液，用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次25ml，正丁醇液濃縮至干，殘?jiān)蛹?醇lml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。再取三七皂苷Ri，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作為 對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液 各2 3ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(13:7:2) l(TC以下放置分層 的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，于105'C加熱至斑點(diǎn)顯 色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑 點(diǎn)。
(3) 取本品內(nèi)容物1.5g，加石油醚(30 60°C) 20ml，振搖，靜置，棄去上清液，殘 渣加50。/。乙醇30ml，回流提取30分鐘，濾過(guò)，濾液揮至無(wú)醇味，殘?jiān)铀?0ml微熱溶解，趁 熱濾過(guò)，冷卻，濾液用鹽酸調(diào)PH值至1 2，再用乙酸乙酯提取2次，每次15ml，合并乙酸乙 酯液，揮干，殘?jiān)蛹状糽ml溶解，作為供試品溶液。另取燈盞細(xì)辛對(duì)照藥材lg，自加50% 乙醇30ml起，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取野黃芩苷對(duì)照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶 液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述三 種溶液各2ul，分別條帶狀點(diǎn)于同一聚酰氨膜上，以冰醋酸-乙醇(4:1)為展開劑，展開
，取出，晾干，噴以2%三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜及對(duì)照品色 譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
上述銀丹心腦通軟膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法中，還包括
檢査，應(yīng)符合膠囊劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定(中國(guó)藥典2005年版一部附錄I L)。 丹參素鈉的含量測(cè)定，照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI D)測(cè)定。 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水-乙酸( 5:160:1)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm。理論板數(shù)按丹參素鈉峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。
對(duì)照品溶液的制備精密稱取丹參素鈉對(duì)照品適量，加甲醇制成每lml含32yg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本品裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，研勻，取0.8g，精密稱定，加石 油醚(eO 9(TC)，提取兩次，每次10ml，離心，棄去石油醚，殘?jiān)脽崴礈?，洗液?50ml容量瓶中，放冷，加水至刻度，超聲處理(功率250W;頻率40KHz) 30分鐘，放至 室溫，濾過(guò)，取續(xù)濾液用0.45ym濾膜濾過(guò)，即得。
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
本品每粒含丹參以丹參素鈉(C9H1()05Na)計(jì)，不得少于0.50mg。
銀杏總黃酮的含量測(cè)定，照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI D)測(cè)定
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.4%磷酸溶 液(50:50)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為360nm。理論板數(shù)按槲皮素峰計(jì)算應(yīng)不低于2500。
對(duì)照品溶液的制備分別精密稱取經(jīng)五氧化二磷干燥過(guò)夜的槲皮素、山萘素、異鼠李 素對(duì)照品適量，分別加甲醇制成每lml各含0.03mg、 0. 03mg和0. 02mg的混合液，作為對(duì)照品 溶液(或分別配制槲皮素和山萘素每lml含O. lmg，異鼠李素每lml含0.06mg的儲(chǔ)備液，臨用 前，精密量取各lml，混勻，即得)。
供試品溶液的制備;取本品裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物約0.8g，精密稱定，加甲醇-25%鹽 酸(4:1)混合液25ml，置水浴中回流30分鐘，放冷，用脫脂棉過(guò)濾至50ml容量瓶中，加甲 醇至刻度，搖勻，用0.45ym的微孔濾膜濾過(guò)，即得。
測(cè)定法:分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，分 別計(jì)算三種黃酮醇苷的含量，按公式"總黃酮醇苷含量=(槲皮素含量+山萘素含量+異鼠 李素含量)X2.51"計(jì)算，即得。
本品每粒含銀杏總黃酮以總黃酮醇苷計(jì)，不得少于2. Omg。
前述銀丹心腦通軟膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法中，所述的銀丹心腦通軟膠囊是按照下述方法制
成的取三七30g粉碎成極細(xì)粉，其余粉碎成粗粉備用；艾片研成極細(xì)粉；大蒜用水蒸氣蒸 餾法提取大蒜油；銀杏葉加乙醇回流提取二次，每次1.5小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，加 水靜置12小時(shí)，濾過(guò)，濾液上聚酰胺樹脂柱，依次用水、乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液濃縮至 相對(duì)密度為1.20 (50 60°C)的清膏，減壓干燥，粉碎成極細(xì)粉。丹參加乙醇回流提取二次 ，每次1.5小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.20 (50 60°C)的清膏 ，減壓干燥，粉碎成極細(xì)粉，藥渣備用。燈盞細(xì)辛、絞股藍(lán)、丹參藥渣與山楂及三七粗粉的
7混合物，分別加水煎煮二次，每次2小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.20 ( 50 60°C)的清膏后，分別加入乙醇使含醇量達(dá)50%、 60%、 70%，攪勻，靜置24小時(shí)，取上 清液，回收乙醇，濃縮，干燥，粉碎成極細(xì)粉；將上述藥材及浸膏的極細(xì)粉混合均勻，與大 蒜油及蜂蠟、山梨酸加入植物油中，充分混合攪拌，制成混懸液，壓制成軟膠囊，即得。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明在現(xiàn)有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)基礎(chǔ)上改進(jìn)了對(duì)三七的TCL鑒別方法，補(bǔ)充了 丹參中丹參酮IIA和燈盞細(xì)辛的TCL鑒別，改進(jìn)了丹參的含量測(cè)定方法，增加了對(duì)銀杏總黃酮 的含量測(cè)定?？梢詫?duì)銀丹心腦通軟膠囊的主要藥物成分進(jìn)行更有效控制，使得銀丹心腦通軟 膠囊的質(zhì)量監(jiān)控水平有了很大的提高。本發(fā)明的應(yīng)用，既更有利于生產(chǎn)廠家和監(jiān)督管理部門 對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量的監(jiān)測(cè)，也可以為醫(yī)療部門和患者的治療提供更好的保障。
具體實(shí)施例方式
銀丹心腦通軟膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法，按照重量計(jì)算，銀丹心腦通軟膠囊是用銀杏葉 500g、丹參500g、燈盞細(xì)辛300g、絞股藍(lán)300g、山楂400g、大蒜400g、三七200g、艾片10g 制成1000粒膠囊劑；其特征在于，該質(zhì)量檢測(cè)方法包括以下步驟
性狀本品(銀丹心腦通軟膠囊)為軟膠囊，內(nèi)容物為棕色至棕褐色的膏狀物；氣辛 ，味微苦。
鑒別(1)取本品內(nèi)容物lg，加水20ml攪拌使溶散，用石油醚(30 60°C)萃取兩次 ，每次20ml，棄去石油醚層，水層用乙醚萃取3次，每次20ml，合并乙醚液，水浴揮干，殘 渣加乙酸乙酯2ml，攪拌，靜置，取上清液作為供試品溶液。另取丹參酮IIA對(duì)照品，加乙 酸乙酯制成每lml含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部 附錄VI B)試驗(yàn)。吸取上述兩種溶液各5 10yl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯-乙酸 乙酯-石油醚(30 60°C) (18:1:1)為展開劑，展開，取出，晾干。供試品色譜中，在與 對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的暗紅色斑點(diǎn)。
(2)取本品內(nèi)容物2g，加石油醚(30 60°C) 20ml，振搖，靜置，棄去上清液，殘?jiān)?加甲醇20ml，加熱回流15分鐘，放冷，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml，微熱使溶解，力口 水飽和的正丁醇25ml，振搖提取，取正丁醇提取液，用氨試液25ml洗滌，棄去氨溶液，再 用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次25ml，正丁醇液濃縮至干，殘?jiān)蛹状糽ml使溶解，作為 供試品溶液。另取三七對(duì)照藥材O. 5g，加水約5滴，攪勻，加甲醇20ml，加熱回流15分鐘， 放冷，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml，微熱使溶解，加水飽和的正丁醇25ml，振搖提取 ，取正丁醇提取液，用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次25ml，正丁醇液濃縮至干，殘?jiān)蛹?醇lml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。再取三七皂苷Ri，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液 各2 3ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(13:7:2) l(TC以下放置分層 的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，于105'C加熱至斑點(diǎn)顯 色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑 點(diǎn)。
(3)取本品內(nèi)容物1.5g，加石油醚(30 60°C) 20ml，振搖，靜置，棄去上清液，殘 渣加50。/。乙醇30ml，回流提取30分鐘，濾過(guò)，濾液揮至無(wú)醇味，殘?jiān)铀?0ml微熱溶解，趁 熱濾過(guò)，冷卻，濾液用鹽酸調(diào)PH值至1 2，再用乙酸乙酯提取2次，每次15ml，合并乙酸乙 酯液，揮干，殘?jiān)蛹状糽ml溶解，作為供試品溶液。另取燈盞細(xì)辛對(duì)照藥材lg，自加50% 乙醇30ml起，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取野黃芩苷對(duì)照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶 液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述三 種溶液各2ul，分別條帶狀點(diǎn)于同一聚酰氨膜上，以冰醋酸-乙醇(4:1)為展開劑，展開 ，取出，晾干，噴以2%三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜及對(duì)照品色 譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
檢査，應(yīng)符合膠囊劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定(中國(guó)藥典2005年版一部附錄I L)。 丹參素鈉的含量測(cè)定，照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI D)測(cè)定。 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水-乙酸( 5:160:1)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm。理論板數(shù)按丹參素鈉峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。
對(duì)照品溶液的制備:精密稱取丹參素鈉對(duì)照品適量，加甲醇制成每lml含32y g的溶液， 即得。
供試品溶液的制備:取本品裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，研勻，取0.8g，精密稱定，加石油 醚(eO 9(TC)，提取兩次，每次10ml，離心，棄去石油醚，殘?jiān)脽崴礈?，洗液?50ml容量瓶中，放冷，加水至刻度，超聲處理(功率250W;頻率40KHz) 30分鐘放至室 溫，濾過(guò)，取續(xù)濾液用0.45ym濾膜濾過(guò)，即得。
測(cè)定法:分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各IO y 1 ，注
入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
本品每粒含丹參以丹參素鈉(C9H1()05Na)計(jì)，不得少于0.50mg。
銀杏總黃酮的含量測(cè)定，照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI D)測(cè)定 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)；用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.4%磷酸溶液(50:50)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為360nm。理論板數(shù)按槲皮素峰計(jì)算應(yīng)不低于2500。
對(duì)照品溶液的制備分別精密稱取經(jīng)五氧化二磷干燥過(guò)夜的槲皮素、山萘素、異鼠李 素對(duì)照品適量，分別加甲醇制成每lml各含0.03mg、 0. 03mg和0. 02mg的混合液，作為對(duì)照品 溶液(或分別配制槲皮素和山萘素每lml含O. lmg，異鼠李素每lml含0.06mg的儲(chǔ)備液，臨用 前，精密量取各lml，混勻，即得)。
供試品溶液的制備，取本品裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物約0.8g，精密稱定，加甲醇-25%鹽 酸(4:1)混合液25ml，置水浴中回流30分鐘，放冷，用脫脂棉過(guò)濾至50ml容量瓶中，加甲 醇至刻度，搖勻，用0.45ym的微孔濾膜濾過(guò)，即得。
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，分 別計(jì)算三種黃酮醇苷的含量，按公式"總黃酮醇苷含量=(槲皮素含量+山萘素含量+異鼠 李素含量)X2.51"計(jì)算，即得。
本品每粒含銀杏總黃酮以總黃酮醇苷計(jì)，不得少于2. Omg。
所述的銀丹心腦通軟膠囊是按照下述方法制成的取三七30g粉碎成極細(xì)粉，其余粉碎 成粗粉備用；艾片研成極細(xì)粉；大蒜用水蒸氣蒸餾法提取大蒜油；銀杏葉加乙醇回流提取 二次，每次1.5小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，加水靜置12小時(shí)，濾過(guò)，濾液上聚酰胺樹脂 柱，依次用水、乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液濃縮至相對(duì)密度為1.20 (50 60°C)的清膏， 減壓干燥，粉碎成極細(xì)粉。丹參加乙醇回流提取二次，每次1.5小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，回 收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.20 (50 60°C)的清膏，減壓干燥，粉碎成極細(xì)粉，藥渣備 用。燈盞細(xì)辛、絞股藍(lán)、丹參藥渣與山楂及三七粗粉的混合物，分別加水煎煮二次，每次2 小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.20 (50 60°C)的清膏后，分別加入乙 醇使含醇量達(dá)50%、 60%、 70%，攪勻，靜置24小時(shí)，取上清液，回收乙醇，濃縮，干燥，粉 碎成極細(xì)粉；將上述藥材及浸膏的極細(xì)粉混合均勻，與大蒜油及蜂蠟、山梨酸加入植物油 中，充分混合攪拌，制成混懸液，壓制成軟膠囊，即得。
權(quán)利要求
1.銀丹心腦通軟膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法，按照重量計(jì)算，銀丹心腦通軟膠囊是用銀杏葉500g、丹參500g、燈盞細(xì)辛300g、絞股藍(lán)300g、山楂400g、大蒜400g、三七200g、艾片10g制成1000粒膠囊劑；其特征在于，該質(zhì)量檢測(cè)方法包括以下步驟性狀本品為軟膠囊，內(nèi)容物為棕色至棕褐色的膏狀物；氣辛，味微苦；鑒別(1)取本品內(nèi)容物1g，加水20ml攪拌使溶散，用30～60℃的石油醚萃取兩次，每次20ml，棄去石油醚層，水層用乙醚萃取3次，每次20ml，合并乙醚液，水浴揮干，殘?jiān)右宜嵋阴?ml，攪拌，靜置，取上清液作為供試品溶液；另取丹參酮IIA對(duì)照品，加乙酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)；吸取上述兩種溶液各5～10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以18∶1∶1的苯-乙酸乙酯-30～60℃石油醚為展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的暗紅色斑點(diǎn)；(2)取本品內(nèi)容物2g，加30～60℃石油醚20ml，振搖，靜置，棄去上清液，殘?jiān)蛹状?0ml，加熱回流15分鐘，放冷，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml，微熱使溶解，加水飽和的正丁醇25ml，振搖提取，取正丁醇提取液，用氨試液25ml洗滌，棄去氨溶液，再用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次25ml，正丁醇液濃縮至干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取三七對(duì)照藥材0.5g，加水約5滴，攪勻，加甲醇20ml，加熱回流15分鐘，放冷，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml，微熱使溶解，加水飽和的正丁醇25ml，振搖提取，取正丁醇提取液，用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次25ml，正丁醇液濃縮至干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；再取三七皂苷R1，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各2～3μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以13∶7∶2的氯仿-甲醇-水10℃以下放置分層的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(3)取本品內(nèi)容物1.5g，加30～60℃石油醚20ml，振搖，靜置，棄去上清液，殘?jiān)?0％乙醇30ml，回流提取30分鐘，濾過(guò)，濾液揮至無(wú)醇味，殘?jiān)铀?0ml微熱溶解，趁熱濾過(guò)，冷卻，濾液用鹽酸調(diào)PH值至1～2，再用乙酸乙酯提取2次，每次15ml，合并乙酸乙酯液，揮干，殘?jiān)蛹状?ml溶解，作為供試品溶液；另取燈盞細(xì)辛對(duì)照藥材1g，自加50％乙醇30ml起，同法制成對(duì)照藥材溶液；再取野黃芩苷對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各2μl，分別條帶狀點(diǎn)于同一聚酰氨膜上，以4∶1的冰醋酸-乙醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2％三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
2 根據(jù)權(quán)利要求l所述的銀丹心腦通軟膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征 在于，該質(zhì)量檢測(cè)方法還包括檢査，應(yīng)符合膠囊劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；丹參素鈉的含量測(cè)定，照高效液相色譜法測(cè)定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；5:160:l的乙腈-水 -乙酸為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm;理論板數(shù)按丹參素鈉峰計(jì)算應(yīng)不低于3000;對(duì)照品溶液的制備精密稱取丹參素鈉對(duì)照品適量，加甲醇制成每lml含32yg的溶液 ，即得；供試品溶液的制備取本品裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，研勻，取0.8g，精密稱定，加 60 9(TC石油醚，提取兩次，每次10ml，離心，棄去石油醚，殘?jiān)脽崴礈?，洗液?50ml容量瓶中，放冷，加水至刻度，功率為250W，頻率為40KHz的超聲處理30分鐘，放至室 溫，濾過(guò)，取續(xù)濾液用0.45ym濾膜濾過(guò)，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測(cè)定， 即得；本品每粒含丹參以丹參素鈉(C9H1005Na)計(jì)，不得少于O. 50mg; 銀杏總黃酮的含量測(cè)定，照高效液相色譜法測(cè)定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；50:50的甲醇-0.4 %磷酸溶液為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為360nm;理論板數(shù)按槲皮素峰計(jì)算應(yīng)不低于2500;對(duì)照品溶液的制備分別精密稱取經(jīng)五氧化二磷干燥過(guò)夜的槲皮素、山萘素、異鼠李 素對(duì)照品適量，分別加甲醇制成每lml各含0.03mg、 0. 03mg和0. 02mg的混合液，作為對(duì)照品 溶液；或分別配制槲皮素和山萘素每lml含O. lmg，異鼠李素每lml含O. 06mg的儲(chǔ)備液，臨用 前，精密量取各lml，混勻，作為對(duì)照品溶液；供試品溶液的制備取本品裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物約0.8g，精密稱定，力口4:1的甲醇-25%鹽酸混合液251111，置水浴中回流30分鐘，放冷，用脫脂棉過(guò)濾至50ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45ym的微孔濾膜濾過(guò)，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，分別計(jì)算三種黃酮醇苷的含量，按公式"總黃酮醇苷含量=(槲皮素含量+山萘素含量+異鼠李素含量)X2.51"計(jì)算，即得；本品每粒含銀杏總黃酮以總黃酮醇苷計(jì)，不得少于2. Omg。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的銀丹心腦通軟膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于，所述的銀丹心腦通軟膠囊是按照下述方法制成的取三七30g粉碎成極細(xì)粉，其余粉碎成粗粉備用；艾片研成極細(xì)粉；大蒜用水蒸氣蒸餾法提取大蒜油；銀杏葉加乙醇回流提取二次，每次1.5小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，加水靜置12小時(shí)，濾過(guò)，濾液上聚酰胺樹脂柱，依次用水、乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液濃縮至在50 6(TC時(shí)相對(duì)密度為1.20的清膏，減壓干燥，粉碎成極細(xì)粉；丹參加乙醇回流提取二次，每次1.5小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，回收乙醇，濃縮至在50 6(TC時(shí)相對(duì)密度為1.20的清膏，減壓干燥，粉碎成極細(xì)粉，藥渣備用；燈盞細(xì)辛、絞股藍(lán)、丹參藥渣與山楂及三七粗粉的混合物，分別加水煎煮二次，每次2小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，減壓濃縮至在50 6(TC時(shí)相對(duì)密度為1.20的清膏后，分別加入乙醇使含醇量達(dá)50%、 60%、 70%，攪勻，靜置24小時(shí)，取上清液，回收乙醇，濃縮，干燥，粉碎成極細(xì)粉；將上述藥材及浸膏的極細(xì)粉混合均勻，與大蒜油及蜂蠟和山梨酸加入植物油中，充分混合攪拌，制成混懸液，壓制成軟膠囊，即得。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種銀丹心腦通軟膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法，它是在現(xiàn)有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)基礎(chǔ)上改進(jìn)了三七的TCL鑒別，補(bǔ)充了丹參中丹參酮IIA和燈盞細(xì)辛的鑒別，改進(jìn)了丹參的含量測(cè)定，增加了銀杏總黃酮的含量測(cè)定?？梢詫?duì)銀丹心腦通軟膠囊的主要藥物成分進(jìn)行更有效控制，使得銀丹心腦通軟膠囊的質(zhì)量監(jiān)控水平有了很大的提高。本發(fā)明的應(yīng)用，既更有利于生產(chǎn)廠家和監(jiān)督管理部門對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量的監(jiān)測(cè)，也可以為醫(yī)療部門和患者的治療提供更好的保障。
文檔編號(hào)A61K36/8962GK101647942SQ20091030597
公開日2010年2月17日 申請(qǐng)日期2009年8月24日 優(yōu)先權(quán)日2009年8月24日
發(fā)明者吳春玲, 孫曉軍, 王曉冬, 鄭周琴 申請(qǐng)人:貴州百靈企業(yè)集團(tuán)制藥股份有限公司