專利名稱：一種聚合物膜離子選擇性電極的檢測方法及裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉電位型電化學(xué)檢測技術(shù)，具體的說是一種基于核酸適體的聚合物膜離子選擇性電極的檢測方法及其裝置。
背景技術(shù)：
核酸適體(Aptamer)作為一種新型的分子識別元件，能夠高效、特異地結(jié)合各種配體，具有易合成、易儲存和穩(wěn)定性好等優(yōu)點；然而核酸適體本身不具有顯示信號的功能。 目前基于核酸適體的檢測方法通常需要標(biāo)記熒光、納米材料，從而可產(chǎn)生檢測信號，同時檢測時常需要適體的固定化，不能在均相溶液中實現(xiàn)檢測。這類檢測方法一方面檢測成本高、 操作繁瑣；另一方面標(biāo)記過程也影響了核酸適體的結(jié)合能力。離子選擇性電極具有操作簡便、響應(yīng)快速、設(shè)備價廉等優(yōu)點，特別適合現(xiàn)場檢測以及大批樣品的檢測，已廣泛應(yīng)用于全血、血清、尿、組織、細(xì)胞內(nèi)液及其稀釋液中各種電解質(zhì)離子的直接測定。然而已有核酸適體聚合物膜離子選擇性電極檢測技術(shù)采用納米標(biāo)記，其繁瑣的操作過程，限制了該類方法的應(yīng)用范圍。

發(fā)明內(nèi)容
針對現(xiàn)有技術(shù)中離子選擇性電極存在的操作過程繁瑣等不足之處，本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種操作簡便，響應(yīng)快速的基于核酸適體的聚合物膜離子選擇性電極的檢測方法及其裝置。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是本發(fā)明一種聚合物膜離子選擇性電極的檢測方法包括以下步驟a.檢測池中置入核酸適體10_9-1M，再加入與核酸適體1 10000-10000 1質(zhì)量比例量的聚陽離子實現(xiàn)信號傳導(dǎo)，將聚陽離子選擇性電極插入檢測池，記錄聚陽離子電極的實時電位響應(yīng)，產(chǎn)生對照信號；b.在洗凈的檢測池中加入核酸適體10_9-1M與分別與不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)待測物溶液作用0.01-10小時后，再加入與核酸適體1 10000-10000 1質(zhì)量比例量的聚陽離子實現(xiàn)信號傳導(dǎo)，將聚陽離子選擇性電極插入檢測池9，記錄聚陽離子電極的實時電位響應(yīng)，產(chǎn)生標(biāo)準(zhǔn)待測物溶液不同濃度下的標(biāo)準(zhǔn)信號；c.根據(jù)上述標(biāo)準(zhǔn)信號和對照信號得到標(biāo)準(zhǔn)曲線；d.在洗凈的檢測池中置入待測液，加入核酸適體10_9-im與待測液作用0. 01-10 小時后，加入上述比例量的聚陽離子實現(xiàn)信號傳導(dǎo)，將聚陽離子選擇性電極4插入檢測池， 中，記錄聚陽離子電極的實時電位響應(yīng)，產(chǎn)生樣品信號；根據(jù)樣品信號和對照信號得到待測信號，參照標(biāo)準(zhǔn)曲線，即得待測液的濃度。聚陽離子采用一次性加入，加入量為10-9-1M ；或者采用間歇式加樣，間隔時間不大于10分鐘。采用手動或通過自動進(jìn)樣裝置加樣，速度1.0-100 μ L/s，溶液濃度為l.O-lOOmg/mL，時間間隔0. 1-100分鐘。將聚陽離子選擇性電極在0-1小時響應(yīng)時間內(nèi)任意時間點的電位值作為響應(yīng)信號；或者以電極電位響應(yīng)最大值一半時所對應(yīng)聚陽離子的濃度為信號。所述聚合物敏感膜為聚合物基體材料、增塑劑、陽離子交換劑和離子液體按重量份數(shù)比為20-50 20-50 0.1-10 0. 1_10混合，而后溶入到四氫呋喃溶液中，混均后在室溫下放置12-24h，待四氫呋喃完全揮發(fā)干后即得到有彈性的聚合物敏感膜。所述聚合物基體材料為聚氯乙烯、聚丁基丙烯酸酯、聚丙烯酸丁酯、聚醚酰亞胺、 橡膠或溶膠凝膠膜；增塑劑為鄰-硝基苯辛醚(O-NP0E)、二 -2-乙基己基癸酯、癸二酸二丁酯或癸二酸二辛酯；陽離子交換劑為3-十二烷基甲基氯化氨(TDMA)或離子液體；離子液體為四(十二烷基)_四(4-氯苯基)硼酸銨(ΕΤΗ 500)。所述聚陽離子為魚精蛋白、聚季銨鹽_6、聚烯丙基胺、樹枝狀化合物聚酰胺 Poly(amidoamine)和聚丙撐亞胺Poly (propylenimine)或魚精蛋白類似蛋白。所述核酸適體包括以重金屬離子、有機(jī)染料、氨基酸、有機(jī)小分子、核酸、RNA、多糖、酶、生長因子、抗體、細(xì)菌、細(xì)胞、病毒為配體的各類核酸適體。本發(fā)明一種聚合物膜離子選擇性電極檢測裝置包括檢測池，為用于盛放被測物的容器；聚陽離子選擇性電極，為工作電極，內(nèi)部盛有內(nèi)充液，底部設(shè)有聚合物敏感膜；內(nèi)參比電極，一端插入聚陽離子選擇性電極內(nèi)，另一端連接到外部電位測量裝置；外參比電極，一端設(shè)于檢測池中，另一端連接到外部電位測量裝置。所述聚陽離子選擇性電極還可與旋轉(zhuǎn)圓盤電極的旋轉(zhuǎn)電極頭相連，信號輸出端連接到外部電位測量裝置；所述檢測池還可置于超聲儀的超聲池中；還具有流動注射儀或自動進(jìn)樣裝置，其出口對應(yīng)檢測池；所述外部電位測量裝置為電化學(xué)工作站或離子計。本發(fā)明具有以下有益效果及優(yōu)點1.本發(fā)明檢測裝置中的電極采用聚合物膜離子選擇性電極，制作簡單、靈敏度高、 選擇性好，能夠在復(fù)雜的基質(zhì)中使用，同時便攜性強(qiáng)，便于現(xiàn)場實時檢測。2.本發(fā)明方法應(yīng)用范圍寬，具有通用性。指示信號的聚陽離子種類豐富，同時通過改變適配體種類，能夠?qū)崿F(xiàn)對重金屬離子、有機(jī)染料、氨基酸、有機(jī)小分子、核酸、RNA、多糖、 酶、病毒、生長因子、抗體、細(xì)菌、細(xì)胞等多種物質(zhì)的檢測。3.該方法測定時適配體不需要信號標(biāo)物，適配體無需事先固定在電極基底，是一種免標(biāo)記、免固定化的方法，電極響應(yīng)信號大，電位變化明顯。4.通過電極和旋轉(zhuǎn)圓盤電極相連，或超聲儀加速溶液傳質(zhì)，降低電極檢測限。


圖1為本發(fā)明裝置中聚陽離子選擇性電極和內(nèi)參比電極示意圖；圖2為本發(fā)明裝置應(yīng)用示意圖；圖3為本發(fā)明方法用于三磷酸腺苷測定的實時響應(yīng)和標(biāo)準(zhǔn)曲線；圖4為本發(fā)明方法用于滴定法測定鉀離子曲線。
具體實施方式
實施例1如圖1所示，本發(fā)明聚合物膜離子選擇性電極檢測裝置包括檢測池9、聚陽離子選擇性電極4、內(nèi)參比電極1以及外參比電極5。其中，檢測池9為用于盛放被測物的容器；聚陽離子選擇性電極4為工作電極，內(nèi)部盛有內(nèi)充液2，底部設(shè)有聚合物敏感膜3 ；內(nèi)參比電極 1的一端插入聚陽離子選擇性電極4內(nèi)，另一端連接到外部電位測量裝置；外參比電極5 — 端設(shè)于檢測池9中，另一端連接到外部電位測量裝置。如圖2所示，本實施例中聚陽離子選擇性電極4還可與旋轉(zhuǎn)圓盤電極6的旋轉(zhuǎn)電極頭相連，信號輸出端連接到外部電位測量裝置。檢測池9置于超聲儀7的超聲池中。流動注射儀或自動進(jìn)樣裝置8流出溶液直接導(dǎo)進(jìn)檢測池9實現(xiàn)滴定法測定。檢測池9亦可單獨使用，無需置于超聲儀7的超聲池中。旋轉(zhuǎn)圓盤電極6具有獨立的外部電源，可以設(shè)置轉(zhuǎn)速，旋轉(zhuǎn)圓盤電極6和聚陽離子選擇性電極接4起來以后，可以看成是一個整體，相當(dāng)于一個可以旋轉(zhuǎn)的聚陽離子選擇性電極4，這個工作電極接到電化學(xué)工作站測量信號的輸入端，但此時不是電化學(xué)工作站直接和離子選擇性電極相連，而是通過旋轉(zhuǎn)圓盤電極6的輸出端間接和聚陽離子選擇性電極4 相連。聚陽離子選擇性電極4亦可以直接連接到外部電位測量裝置，實現(xiàn)檢測。所述外部電位測量裝置為電化學(xué)工作站或離子計。本發(fā)明聚合物膜離子選擇性電極的檢測方法包括以下步驟a.檢測池9中置入核酸適體10_9-1M，再加入與核酸適體1 10000-10000 1質(zhì)量比例量的聚陽離子實現(xiàn)信號傳導(dǎo)，將聚陽離子選擇性電極4插入檢測池9，記錄聚陽離子電極的實時電位響應(yīng)，產(chǎn)生對照信號；b.在洗凈的檢測池9中加入核酸適體10_9-1M與分別與不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)待測物溶液作用0.01-10小時后，再加入與核酸適體1 10000-10000 1質(zhì)量比例量的聚陽離子實現(xiàn)信號傳導(dǎo)，將聚陽離子選擇性電極4插入檢測池9，記錄聚陽離子電極的實時電位響應(yīng)， 產(chǎn)生標(biāo)準(zhǔn)待測物溶液不同濃度下的標(biāo)準(zhǔn)信號；c.根據(jù)上述標(biāo)準(zhǔn)信號和對照信號得到標(biāo)準(zhǔn)曲線；d.在洗凈的檢測池9中置入待測液，加入核酸適體10_9-1M與待測液作用0. 01-10 小時后，加入上述比例量的聚陽離子實現(xiàn)信號傳導(dǎo)，將聚陽離子選擇性電極4插入檢測池9 中，記錄聚陽離子電極的實時電位響應(yīng)，產(chǎn)生樣品信號；根據(jù)樣品信號和對照信號得到待測信號，參照標(biāo)準(zhǔn)曲線，即得待測液的濃度。本實施例步驟a中，以聚陽離子選擇性電極4作為工作電極，飽和甘汞電極作為外參比電極5，通過電化學(xué)工作站(本實施例中采用CHI660)測定電位值；3. OmL pH 7. 4含有 0. 12M氯化鈉的三羥甲基氨基甲烷緩沖溶液中，檢測池中置入ΙΟ—Μ三磷酸腺苷(ATP)的適配體，適配體堿基序列為 5，-ACCTG GGGGA GTATT GCGGA GGAAG GT-3，，加入 26. 7 μ g/mL 魚精蛋白，二者相互作用10分鐘后，將聚陽離子選擇性電極4插入上述混合液，記錄聚陽離子電極的實時電位響應(yīng)，以10分鐘時的電極電位值作為對照信號。所述聚陽離子選擇性電極 4(參見圖1)內(nèi)插有Ag-AgCl內(nèi)參比電極1，同時將pH 7. 4含有0. 12M氯化鈉的三羥甲基氨基甲烷緩沖2注入聚陽離子選擇性電極4內(nèi)，并且底部黏附聚合物敏感膜3 ；聚陽離子選擇性電極4初次使用前需在pH 7.4、含有0. 12M含有氯化鈉的三羥甲基氨基甲烷緩沖液中活化12h，即可用于分析測定。
聚陽離子選擇性電極4的制備為取360mg 1% 3_十二烷基氯化氨(TDMA)，1%四 (十二烷基)_四(4-氯苯基)硼酸銨(ΕΤΗ 500),49%聚氯乙烯，49%鄰-硝基苯辛醚，溶入到3mL四氫呋喃溶液中，室溫下在平底小燒杯(直徑3. 6cm)中放置12h，待四氫呋喃完全揮發(fā)干后即得到有彈性的聚合物敏感膜3，厚度為200 μ m。將所述聚合物敏感膜3用打孔器取直徑0. 6-0. 8cm的敏感膜。制備的聚合物敏感膜3通過四氫呋喃黏附于聚陽離子選擇性電極4外壁底部。步驟b中，檢測池中的ΙΟ—Μ三磷酸腺苷(ATP)的適配體與10人5X 10_7、10_6、 5X IO-6UO-5M的三磷酸腺苷作用20分鐘后，加入沈.7μ g/mL魚精蛋白作用10分鐘，將聚陽離子選擇性電極4插入上述溶液，記錄聚陽離子電極的實時電位響應(yīng)，以10分鐘時的電極電位值作為標(biāo)準(zhǔn)信號；步驟c中，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)信號和對照信號的電位差繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(如圖3)；步驟d中，將10_6M三磷酸腺苷(ATP)的適配體加入盛有待測樣品三磷酸腺苷的檢測池9中作用20分鐘，加入沈.7 μ g/mL魚精蛋白作用10分鐘，將聚陽離子選擇性電極4 插入上述溶液，記錄聚陽離子電極的實時電位響應(yīng)，以10分鐘時的電極電位值作為樣品信號；參照標(biāo)準(zhǔn)曲線即得待測物的濃度。檢測裝置聚陽離子選擇性電極4(參見圖1)內(nèi)插有Ag-AgCl內(nèi)參比電極1，同時將pH 7. 4含有0. 12M氯化鈉的三羥甲基氨基甲烷緩沖2注入聚陽離子選擇性電極4內(nèi)，并且底部黏附聚合物敏感膜3 ；聚陽離子選擇性電極4的工作電極為正極，飽和甘汞電極為參比電極為負(fù)極，正極與負(fù)極通過導(dǎo)線與CHI660相連(參見圖2)。電極性能的測試在緩沖溶液中含有0. 12M氯化鈉存在的情況下，測定電極對魚精蛋白依然有很好的響應(yīng)，檢出限可達(dá)0. 05 μ g/mL。本實施例步驟a中，適配體也可以是以重金屬離子如鉀、汞、鉛、銅、鋅、鈾；有機(jī)染料如磺基羅丹明B、活性墨綠KE-4BD ；氨基酸如精氨酸、L-酪氨酸胺；有機(jī)小分子如可卡因、 膽酸、阿斯巴甜(含苯丙氨酸)，(R)-沙利度胺、17 β-雌二醇；核酸如三磷酸腺苷、腺苷酸、 二磷酸腺苷；RNA如TAR-RNA ；多糖如纖維二糖、唾液乳糖；酶如凝血酶、蛋白激酶、中心粒細(xì)胞彈性蛋白酶、HIV-I逆轉(zhuǎn)錄酶；毒素如蓖麻毒素；生長因子如堿性纖維母細(xì)胞生長因子、 血小板源性生長因子B鏈；抗體如人免疫球蛋白IgE ；細(xì)菌和細(xì)胞如孢子、肺癌細(xì)胞為配體的各類核酸適體。實施例2本實施例以滴定法測定鉀離子為例，其測定步驟如下a. 5. OmL pH 7. 4含有0. 12M氯化鈉的三羥甲基氨基甲烷緩沖溶液中，加入 2 X 10_6M鉀的適配體，適配體堿基序列為5，-GGTTGGTGTGGTTGG-3，，將聚陽離子選擇性電極 4插入上述溶液，以每兩分鐘為時間間隔，依次加入5μ L lmg/mL魚精蛋白，記錄電位實時響應(yīng)；b. 5. OmL pH 7. 4含有0. 12M氯化鈉的三羥甲基氨基甲烷緩沖溶液中，加入 2 X KT6M鉀的適配體分別與5 X 1(Γ6Μ、101、5 X 1(Γ5Μ、1(Γ4Μ、5 X KT4M的鉀離子，兩者作用20分鐘后，將聚陽離子選擇性電極4插入上述溶液，以每兩分鐘為時間間隔，依次加入 5 μ Llmg/mL魚精蛋白，記錄電位實時響應(yīng)，如圖4所示；c.以電極電位響應(yīng)最大值一半時所對應(yīng)魚精蛋白的濃度作為信號，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線.
一入 ，d. 2X0—1鉀的適配體加入含有待測樣品的溶液中，兩者作用20分鐘，將聚陽離子選擇性電極4插入上述溶液，以每兩分鐘為時間間隔，依次加入5 μ L lmg/mL魚精蛋白，記錄電位實時響應(yīng)(如圖4)。根據(jù)電極電位響應(yīng)最大值一半時所對應(yīng)魚精蛋白的濃度，參照標(biāo)準(zhǔn)曲線，可以計算待測樣品中鉀離子的濃度。實施例3與實施例1的不同之處在于本實施例以三磷酸腺苷(ATP)適配體為核酸酶的底物，測定核酸酶的活度為例。緩沖溶液為PH 4. 6醋酸-醋酸鈉緩沖，含有0. 15M氯化鈉和 0. OOlM硫酸鋅。其測定步驟如下a. 3. OmL pH 4. 6含有0. 15M氯化鈉和0. OOlM硫酸鋅的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液中含有1(Γ6Μ三磷酸腺苷(ATP)的適配體，堿基序列為5，-ACCTGGGGGA GTATT GCGGA GGAAG GT-3’，加入26. 7 μ g/mL魚精蛋白和二者相互作用10分鐘后，將聚陽離子選擇性電極4插入上述溶液，記錄聚陽離子電極的實時電位響應(yīng)，以10分鐘時的電極電位值作為對照信號；b. 3. OmL 上述緩沖溶液中，lU/mL、5U/mL、10U/mL、30U/mL、50U/mL 的核酸酶分別與 IO-fiM三磷酸腺苷(ATP)的適配體作用十分鐘以后，加入ImM乙二胺四乙酸(EDTA)停止酶反應(yīng)，再將沈.7 μ g/mL魚精蛋白加入上述溶液中，相互作用十分鐘后，將聚陽離子選擇性電極4插入上述溶液，記錄聚陽離子電極的實時電位響應(yīng)，以10分鐘時的電極電位值作為標(biāo)準(zhǔn)信號；c.通過標(biāo)準(zhǔn)信號和對照信號得到電位差，進(jìn)而得到標(biāo)準(zhǔn)工作曲線；d.將待測的樣品酶溶液加入ΙΟ—Μ三磷酸腺苷(ATP)的適配體中作用十分鐘，加入 ImM乙二胺四乙酸(EDTA)停止酶反應(yīng)，再將沈.7 μ g/mL魚精蛋白加入上述溶液進(jìn)一步作用十分鐘后，將聚陽離子選擇性電極4插入上述溶液，記錄聚陽離子電極的實時電位響應(yīng)，記錄10分鐘時的電極電位值作為樣品信號。參照標(biāo)準(zhǔn)工作曲線即可得樣品酶活度。本實施例步驟b中，標(biāo)準(zhǔn)待測物為核酸適體相對應(yīng)的檢測物，或者能夠與核酸適體相互作用的物質(zhì)，包括脫氧核糖核酸酶、限制性內(nèi)切酶、外切核酸酶、核酸酶Si、核酸酶和其抑制劑的混合物，羥基自由基，或者抗氧化劑和羥基自由基混合溶液。
權(quán)利要求
1.一種聚合物膜離子選擇性電極的檢測方法，其特征在于包括以下步驟a.檢測池(9)中置入核酸適體10_9-1M，再加入與核酸適體1 10000-10000 1質(zhì)量比例量的聚陽離子實現(xiàn)信號傳導(dǎo)，將聚陽離子選擇性電極(4)插入檢測池(9)，記錄聚陽離子電極的實時電位響應(yīng)，產(chǎn)生對照信號；b.在洗凈的檢測池(9)中加入核酸適體10-9-1M與分別與不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)待測物溶液作用0.01-10小時后，再加入與核酸適體1 10000-10000 1質(zhì)量比例量的聚陽離子實現(xiàn)信號傳導(dǎo)，將聚陽離子選擇性電極(4)插入檢測池(9)，記錄聚陽離子電極的實時電位響應(yīng)，產(chǎn)生標(biāo)準(zhǔn)待測物溶液不同濃度下的標(biāo)準(zhǔn)信號；c.根據(jù)上述標(biāo)準(zhǔn)信號和對照信號得到標(biāo)準(zhǔn)曲線；d.在洗凈的檢測池(9)中置入待測液，加入核酸適體1(Γ9-1Μ與待測液作用0.01-10小時后，加入上述比例量的聚陽離子實現(xiàn)信號傳導(dǎo)，將聚陽離子選擇性電極(4)插入檢測池 (9)中，記錄聚陽離子電極的實時電位響應(yīng)，產(chǎn)生樣品信號；根據(jù)樣品信號和對照信號得到待測信號，參照標(biāo)準(zhǔn)曲線，即得待測液的濃度。
2.按權(quán)利要求1所述的聚合物膜離子選擇性電極的檢測方法，其特征在于聚陽離子采用一次性加入，加入量為KT9-IM ；或者采用間歇式加樣，間隔時間不大于10分鐘。
3.按權(quán)利要求1所述的聚合物膜離子選擇性電極的檢測方法，其特征在于采用手動或通過自動進(jìn)樣裝置加樣，速度1. 0-100 μ L/s,溶液濃度為1. 0-100mg/mL,時間間隔 0. 1-100 分鐘。
4.按權(quán)利要求1所述的聚合物膜離子選擇性電極的檢測方法，其特征在于將聚陽離子選擇性電極在0-1小時響應(yīng)時間內(nèi)任意時間點的電位值作為響應(yīng)信號；或者以電極電位響應(yīng)最大值一半時所對應(yīng)聚陽離子的濃度為信號。
5.按權(quán)利要求1所述的聚合物膜離子選擇性電極的檢測方法，其特征在于所述聚合物敏感膜C3)為聚合物基體材料、增塑劑、陽離子交換劑和離子液體按重量份數(shù)比為 20-50 20-50 0.1-10 0. 1_10混合，而后溶入到四氫呋喃溶液中，混均后在室溫下放置12-24h，待四氫呋喃完全揮發(fā)干后即得到有彈性的聚合物敏感膜。
6.按權(quán)利要求5所述的聚合物膜離子選擇性電極的檢測方法，其特征在于所述聚合物基體材料為聚氯乙烯、聚丁基丙烯酸酯、聚丙烯酸丁酯、聚醚酰亞胺、橡膠或溶膠凝膠膜；增塑劑為鄰-硝基苯辛醚(o-NPOE)、二-2-乙基己基癸酯、癸二酸二丁酯或癸二酸二辛酯；陽離子交換劑為3-十二烷基甲基氯化氨(TDMA)或離子液體；離子液體為四(十二烷基)-四(4-氯苯基)硼酸銨(ΕΤΗ 500)。
7.按權(quán)利要求1所述的聚合物膜離子選擇性電極的檢測方法，其特征在于所述聚陽離子為魚精蛋白、聚季銨鹽-6、聚烯丙基胺、樹枝狀化合物聚酰胺Poly (amidoamine)和聚丙撐亞胺Poly (propylenimine)或魚精蛋白類似蛋白。
8.按權(quán)利要求1所述的聚合物膜離子選擇性電極的檢測方法，其特征在于所述核酸適體包括以重金屬離子、有機(jī)染料、氨基酸、有機(jī)小分子、核酸、RNA、多糖、酶、生長因子、抗體、細(xì)菌、細(xì)胞、病毒為配體的各類核酸適體。
9.一種聚合物膜離子選擇性電極檢測裝置，其特征在于包括檢測池(9)，為用于盛放被測物的容器；聚陽離子選擇性電極G)，為工作電極，內(nèi)部盛有內(nèi)充液O)，底部設(shè)有聚合物敏感膜⑶；內(nèi)參比電極(1)，一端插入聚陽離子選擇性電極內(nèi)，另一端連接到外部電位測量裝置；外參比電極(5)，一端設(shè)于檢測池(9)中，另一端連接到外部電位測量裝置。
10.按權(quán)利要求9述的聚合物膜離子選擇性電極檢測裝置，其特征在于所述聚陽離子選擇性電極⑷還可與旋轉(zhuǎn)圓盤電極(6)的旋轉(zhuǎn)電極頭相連，信號輸出端連接到外部電位測量裝置。
11.按權(quán)利要求9述的聚合物膜離子選擇性電極檢測裝置，其特征在于所述檢測池 (9)還可置于超聲儀(7)的超聲池中。
12.按權(quán)利要求9述的聚合物膜離子選擇性電極檢測裝置，其特征在于還具有流動注射儀或自動進(jìn)樣裝置(8)，其出口對應(yīng)檢測池(9)。
13.按權(quán)利要求9述的聚合物膜離子選擇性電極檢測裝置，其特征在于所述外部電位測量裝置為電化學(xué)工作站或離子計。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種聚合物膜離子選擇性電極的檢測方法及裝置，方法包括檢測池中置入核酸適體和聚陽離子，將聚陽離子選擇性電極插入檢測池產(chǎn)生對照信號；在檢測池中加入核酸適體與標(biāo)準(zhǔn)待測物溶液作用，再加入與聚陽離子，將聚陽離子選擇性電極插入檢測池產(chǎn)生標(biāo)準(zhǔn)待測物溶液不同濃度下的標(biāo)準(zhǔn)信號；根據(jù)上述標(biāo)準(zhǔn)信號和對照信號得到標(biāo)準(zhǔn)曲線；在檢測池中置入待測液，加入核酸適體與待測液作用后加入上述比例量的聚陽離子實現(xiàn)信號傳導(dǎo)，將聚陽離子選擇性電極插入檢測池中，產(chǎn)生樣品信號；根據(jù)樣品信號和對照信號得到待測信號，參照標(biāo)準(zhǔn)曲線，即得待測液的濃度。本發(fā)明方法應(yīng)用范圍寬，具有通用性，是一種免標(biāo)記、免固定化的方法，電極響應(yīng)信號大，電位變化明顯。
文檔編號G01N27/333GK102262116SQ20101019443
公開日2011年11月30日 申請日期2010年5月28日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月28日
發(fā)明者丁家旺, 王學(xué)偉, 秦偉 申請人:中國科學(xué)院煙臺海岸帶研究所