專利名稱：：核酸探針及探針聚合物的形成方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及新核酸探針，形成該核酸探針的自我聚合體(聚合物)，能夠提高標的分析物檢測靈敏度的探針聚合物形成方法，通過該方法生成探針聚合物以及利用該方法檢測標的分析物的檢測方法。
背景技術：
：本發(fā)明人提出過一種去酶恒溫核酸擴增法，即使用多種含有與其他核酸探針互補的堿基序列的核酸探針，通過探針的自我聚合反應(Probealternationlinkselfassembly^reaction)形成核酸探針聚合體(聚合物)的方法(以下，將通過探針的自我聚合反應形成聚合物的方法稱為PALSAR法)(專利文獻14)。此外，本發(fā)明人也提出利用Palsar法提高目標基因的檢測靈敏度的方法(專利文獻5)。通過上述方法，雖然能高靈敏度地檢測出目標基因，但需要使用多種核酸探針來形成信號探針聚合物。專利文獻1日本專利第3267576號公報專利文獻1日本專利第3310662號公報專利文獻3國際公開第02/31192號公報專利文獻4日本專利特開2002-355081號公報專利文獻5國際公開第03/029441號公報
發(fā)明內容發(fā)明要解決的課題本發(fā)明目的在于提供能夠簡便且有效地形成核酸探針聚合物的方法，由該方法形成的探針聚合物，使用該方法的新核酸探針以及高靈敏度且簡便地檢測標的分析物的標的分析物檢測方法。解決課題的手段本發(fā)明人為了解決上述課題，經過反復研究，終于發(fā)現(xiàn)在核酸探針的一個區(qū)域，以此區(qū)域的中心位置為界，通過構成對稱相對的堿基間具有互補的鏡像關系(對稱)的堿基序列，并且僅以一種核酸探針形成該核酸探針的聚合物。即本發(fā)明中的核酸探針的特征是，含有3個以上的核酸區(qū)域，同時該核酸探針的各個核酸區(qū)域含有第1區(qū)域以及與該第1區(qū)域互補且鄰接的第2區(qū)域。本發(fā)明的形成探針聚合物的方法，其特征是使本發(fā)明中的核酸探針發(fā)生反應生成該核酸探針的聚合物。本發(fā)明的探針聚合物的特征是通過上述的本發(fā)明中的探針聚合物形成方法形成。本發(fā)明的標的分析物的檢測方法，其特征是根據(jù)上述本發(fā)明中探針聚合物的形成方法形成探針聚合物，通過檢測出該探針聚合物來檢測標的分析物。本發(fā)明的標的分析物的檢測方法中，優(yōu)選使用能與上述標的分析物特異結合可能且含有與上述核酸探針相同的一部分或者全部堿基序列的輔助探針，形成含有上述標的分析物、上述輔助探針和上述探針聚合物的復合體，通過分析該復合體檢測上述標的分析物。同時，本說明書中的輔助探針是指含有能與被檢測標的分析物進行特異結合的部分，并且具有與用于形成聚合物的上述核酸探針相同的一部分或者全部堿基序列，起連接標的分析物與探針聚合物的作用。上述標的分析物可以列舉，例如，核酸、抗原、抗體、受體、半抗原、酶、蛋白質、肽、聚合物以及糖類構成的群類中至少一種。上述標的分析物是核酸的情況時，上述核酸探針通過構成含有與上述標的核酸(目標基因)的一部分互補的序列，能使標的核酸與探針聚合物相結合。發(fā)明效果根據(jù)本發(fā)明，能僅通過一種核酸探針形成該核酸探針的聚合物。此外，通過本發(fā)明，能簡便地檢測出標的分析物并且能顯著的提高其檢測靈敏度。圖1表示一例本發(fā)明的核酸探針的簡要說明圖圖2表示圖1記載的核酸探針的結合方式的簡要說明圖圖3表示由圖1記載的核酸探針形成的探針聚合物的簡要說明圖圖4顯示實施例1的結果的照片圖5顯示實施例2的結果的照片圖6顯示實施例3的結果的照片符號說明10本發(fā)明的核酸探針，10a、10b、IOc核酸區(qū)域，20氫鍵，30探針聚合物。具體實施例方式以下根據(jù)附圖對本發(fā)明的實施方式進行說明，圖示例僅例示，當然可以在不脫離本發(fā)明的技術思想的范圍內進行各種變形。圖1是表示一例本發(fā)明的核酸探針簡要說明圖。圖2是表示圖1中的核酸探針的結合方式的簡要說明圖。圖3是表示由圖1中的核酸探針形成的自我聚合體(探針聚合物)的簡要說明圖。本發(fā)明的核酸探針，其特征是含有3個以上的核酸區(qū)域，該核酸探針的各個核酸區(qū)域含有相互鄰接的第1區(qū)域以及與該第1區(qū)域互補的第2區(qū)域，通過使該核酸探針發(fā)生反應可以形成該核酸探針的聚合物。本說明書中，核酸探針的核酸區(qū)域是指上述第1區(qū)域與第2區(qū)域構成的區(qū)域。此外，也稱各核酸區(qū)域中的第1區(qū)域以及第2區(qū)域的各自的互補區(qū)域。本發(fā)明中核酸探針包含的核酸區(qū)域是3個以上，優(yōu)選3個以上10以下，更優(yōu)選3個以上5以下。圖1表示一例本發(fā)明的核酸探針簡要說明圖，其中包含3個核酸區(qū)域。如圖1所示，本發(fā)明的核酸探針10從5’端部開始按順序含有核酸區(qū)域10a，核酸區(qū)域IOb以及核酸區(qū)域10c，各個核酸區(qū)域10a，IOb以及IOc包括與之互補且鄰接的2區(qū)域。也即，上述核酸區(qū)域IOa包含互補區(qū)域X以及與其鄰接并含有與該互補區(qū)域X互補的堿基序列的互補區(qū)域X’，上述核酸區(qū)域IOb包含互補區(qū)域Y以及與其鄰接并含有與該互補區(qū)域Y互補的堿基序列的互補區(qū)域Y’，上述核酸區(qū)域IOc包含互補區(qū)域Z以及與其鄰接并含有與該互補區(qū)域Z互補的堿基序列的互補區(qū)域V。本發(fā)明的核酸探針10中，互補區(qū)域X與互補區(qū)域X’，互補區(qū)域Y與互補區(qū)域Y’，互補區(qū)域ζ與互補區(qū)域V是分別能夠與之雜化的互補核酸區(qū)域，如圖2所示，互補區(qū)域X與互補區(qū)域V相結合圖2(a)，互補區(qū)域Y與互補區(qū)域Y’相結合圖2(b)，互補區(qū)域Z與互補區(qū)域Z’相結合圖2(c)。圖2中，符號20表示氫鍵。其中，作為適宜的例子，圖1所舉是含有3個核酸區(qū)域(10a，IOb以及IOc)的核酸探針，但是并沒有特別將核酸區(qū)域的數(shù)目限定為3個以上。本發(fā)明中核酸探針10通過雜化反應，如圖3所示，核酸探針10進行自我聚合，形成核酸探針10自我聚合體即探針聚合物30。本發(fā)明的核酸探針，其各個互補區(qū)域的長度以堿基數(shù)量來說，優(yōu)選2個堿基以上，更優(yōu)選350個堿基，進一步優(yōu)選415個堿基。此外，核酸探針中各個互補區(qū)域的長度以相同為宜。本發(fā)明的核酸探針的堿基序列最優(yōu)是由各個核酸區(qū)域中的第1區(qū)域以及第2區(qū)域的互補的堿基序列構成即可，無特別限定，各個互補區(qū)域兩末端的堿基優(yōu)選鳥瞟呤或者胞嘧啶。各個互補區(qū)域兩端的堿基是鳥瞟呤或者胞嘧啶時，能縮短反應時間，以更低的反應溫度形成穩(wěn)定的探針聚合物，同時還可以提高操作性和檢測靈敏度。本發(fā)明的核酸探針通常由DNA或者RNA構成，核酸類似體也可以。核酸類似體可以列舉，例如，肽核酸(PNA，參閱國際公開第92/20702號公報等)和LockedNucleicAcid(LNA,參KoshkinAAetal.Tetrahedronl998.54,3607-3630.,KoshkinAAetal.J.Am.Chem.Soc.1998.120,13252-13253.,WahlestedtCetal.PNAS.2000.97,5633-5638.等)。此外，本發(fā)明中，核酸探針內的核酸組成無必要僅為一種，比如，僅由DNA構成，根據(jù)具體要求，也可能使用例如由DNA和RNA構成的低聚核苷酸·探針(嵌合體探針)。這些探針均可由已知的方法合成。例如，使用AppliedBiosystem公司(AppliedBiosystemInc.)生產的DNA合成器394型，通過亞磷酰胺法可以合成DNA探針。此外還有，磷酸三酯法，H-膦酸鹽(phosphonate)法，硫代膦酸鹽法等，使用以上任意一種方法合成均可。本發(fā)明形成探針聚合物的方法是使上述本發(fā)明的核酸探針發(fā)生反應形成探針聚合物的方法。如圖3所示，通過使多種本發(fā)明的核酸探針10發(fā)生雜化反應，根據(jù)探針的濃度有效地形成核酸探針10的自我聚合體即探針聚合物30。所使用的核酸探針的數(shù)量無特別限定，但是一般在IO2IO15根的范圍內使用。對于反應緩沖溶液的組成，其濃度無特別限定，核酸擴增常用的通常緩沖溶液適當使用即可。PH值在常用的范圍即可，優(yōu)選7.09.0的范圍內。雜化反應的溫度條件也無特別限定，通常的溫度即可，但優(yōu)選在反應溶液中形成部分的反應溫度區(qū)，在此反應溫度區(qū)內發(fā)生自我聚合反應(國際公開第2005/106031號公報)。適用的部分反應溫度區(qū)優(yōu)選4080°C，更優(yōu)選5565"C。通過使用本發(fā)明的探針聚合物的形成方法檢測標的分析物，能簡便且高靈敏度地檢測標的分析物。標的分析物的檢測方法無特別限定，采用已知的方法即可。本發(fā)明的標的分析物的檢測方法是利用上述本發(fā)明的探針聚合物形成方法生成聚合物，通過檢測該聚合物測定樣本中標的分析物是否存在的方法。上述標的分析物的檢測方法，具體的可以列舉，使標的分析物與探針聚合物形成復合體，通過檢測探針聚合物測定標的分析物的方法以及僅在標的分析物存在的情況下，利用形成聚合物的方法生成聚合物，通過檢測聚合物測定標的分析物的方法(例如，使用切斷的核酸探針，僅在標的分析物存在的情況下，通過雜化反應連接核酸探針形成聚合物的方法)本發(fā)明中的標的分析物測定用樣本，可以適宜使用有可能含有該標的分析物的所有樣本，例如，血液、血清、尿、大便、腦脊液、組織液、痰、細胞培養(yǎng)物等生物由來樣本，含有或者可能已感染病毒、細菌、霉等的樣本。上述標的分析物可以列舉，例如，核酸、抗原、抗體、受體、半抗原、酶、蛋白質、肽、聚合物、糖類以及它們的組合所構成的。該標的分析物可以由樣本配制也可離析出來。此夕卜，樣本中的標的核酸也可使用以已知的方法擴增過的DNA或者RNA等核酸。上述標的核酸(目標基因)可以使用單鏈的DNA以及/或者RNA，與雙鏈的DNA以及/或者RNA。此外，上述標的核酸可以使用SNPs(單核苷酸多態(tài))本發(fā)明的檢測方法中，優(yōu)選含有一個或者多個具有與本發(fā)明的核酸探針相同的一部分或者全部堿基序列的區(qū)域(稱為探針結合區(qū)域)，并且含有能與標的分析物進行特異結合的部分(稱為目標區(qū)域T)的輔助探針。比起使用上述輔助探針，形成含有標的分析物、輔助探針和聚合物的復合體，通過分析復合體測定上述標的分析物的方法，本發(fā)明的檢測方法更能簡便地檢測標的分析物。目標區(qū)域優(yōu)選位于輔助探針末端。上述目標區(qū)域可根據(jù)標的分析物進行選擇。例如，標的分析物是核酸的情況時，目標區(qū)域優(yōu)選構成含有與標的核酸互補的堿基序列，使用含有與標的核酸的1區(qū)域互補的序列的輔助探針，通過雜化反應結合的區(qū)域。標的分析物是抗原等蛋白質的情況時，優(yōu)選其直接或者間接結合于能與抗體等標的分析物進行特異結合的物質。并且，輔助探針與標的分析物之間，兩者直接結合亦可，通過其他物質介入間接結合亦可。具體的，優(yōu)選通過化學結合與抗體結合的輔助探針，例如，使用預先將氨基和羧基與抗體相結合的輔助探針。另外，選用使用抗生蛋白鏈霉素與生物素化抗體相結合的輔助探針也可以。上述輔助探針的探針結合區(qū)域優(yōu)選含有1個以上與本發(fā)明的核酸探針的互補區(qū)域具有相同堿基序列的區(qū)域結構，更優(yōu)選含有2種以上與本發(fā)明的核酸探針相同的互補區(qū)域，輔助探針與本發(fā)明的核酸探針通過2個以上互補區(qū)域連結的結構。此外，使用含有多個相同的探針結合區(qū)域的輔助探針，一個輔助探針連結有兩個以上的核酸探針亦可。此外，標的分析物是核酸的情況時，本發(fā)明的核酸探針構成含有與上述標的核酸的一部分互補的序列，使用該核酸探針形成標的核酸和探針聚合物的復合體，通過檢測探針聚合物測定標的核酸。此外，本發(fā)明的檢測方法中，優(yōu)選含有通過標的分析物檢測用反應器材捕捉標的分析物的步驟。本發(fā)明適用于標的分析物檢測用的各種反應器材，特別的，DNA芯片或者DNA微陣列(參閱Marshall,A.,Hodgson,J.DNAchips:anarrayofpossibilities.NatBiotechnol.16，27-31，1998.等)，微孔板以及磁性體粒子等同樣適用。使用反應器材捕捉標的分析物的方法無特別限定，但是優(yōu)選使用連接有能與標的分析物進行特異結合的捕捉用物質的反應器材，通過該捕捉用物質與標的分析物結合，使反應器材與標的分析物結合。該捕捉用物質根據(jù)標的分析物進行適宜選擇即可，無特別限定。標的分析物是核酸的情況時，捕捉用物質優(yōu)選含有與該標的核酸的1區(qū)域(與輔助探針互補的區(qū)域除外)相配對的堿基序列的低聚核苷酸(捕捉探針)。標的分析物是抗原或者抗體的情況時，捕捉用物質優(yōu)選使用與標的分析物進行特異結合的抗體或者抗原。此外，標的分析物是糖類的情況時，捕捉用物質優(yōu)選使用與標的分析物進行特異結合的外源凝集素。本發(fā)明中，探針聚合物的檢測方法無特別限定，優(yōu)選預先用標識物質標記上述核酸探針，利用該標識物質進行檢測。上述標識物質優(yōu)選吖啶鐺酯，放射性同位素，生物素，異羥洋地黃毒苷配基，熒光物質，發(fā)光物質或者色素，考慮到操作性，定量性及靈敏度特別優(yōu)選吖啶鐺酯。具體的，預先用熒光物質標記本發(fā)明的核酸探針，可以通過熒光物質的光化學變化檢測探針聚合物是否存在。再者，預先用發(fā)色系酶或者發(fā)光系酶標記本發(fā)明的核酸探針，可以通過光化學變化檢測探針聚合物是否存在。進一步，預先用放射性同位素標記本發(fā)明的核酸探針，可以通過放射性同位素測定探針聚合物是否存在。此外，對于上述形成的探針聚合物，可以通過標識探針與探針聚合物進行雜化檢測探針聚合物是否存在。標識探針可以使用發(fā)色系酶，發(fā)光系酶或者放射性同位素等進行標記。此外，對于上述形成的探針聚合物，加入具有與核酸相結合性質的熒光物質，可以通過這個熒光物質的光化學變化檢測上述探針聚合物是否存在。熒光物質優(yōu)選具有能插入到雙鏈的堿基對間的性質的熒光物質。此外，本發(fā)明的探針聚合物在260nm下極大地顯現(xiàn)出紫外吸收帶的強度降低(減色特征)這個淡色效果，因此可以通過測定波長260nm下的紫外吸收確認聚合物的狀態(tài)。實施例以下列舉實施例對本發(fā)明進行具體的說明，實施例僅供參考，本發(fā)明不限于此。(實施例1)通過電泳確認本發(fā)明的核酸探針有無生成探針聚合物。將含有下述堿基序列的核酸探針-1(序列號1)溶解于反應溶液4XSSC，配制成2000pmol/mL的探針溶液。核酸探針-1的堿基序列(5'-XJ堿基數(shù)7)X/(堿基數(shù)7)_Yi(堿基數(shù)7)Y1'(堿基數(shù)7)-Z1(堿基數(shù)7)Z1'(堿基數(shù)7)_3')5，-CCTGTCTAGACAGGCTTCGGATCCGAAGGGTAGCATGCTACC-3，(序列號1)將上述配制的探針溶液在94°C下加熱1分鐘，立即用冰冷卻。接著，預熱軟管使其達到各個反應溫度35，38，40，43，46，48，50，53，55，57，59，61，64，66，68或者70°C，反應1小時。將反應后的標本置于0.25%的瓊脂糖凝膠進行電泳。結果如圖4所示。圖4圖6中，M表示分子尺寸標記，各個數(shù)字表示相應的反應溫度條件。如圖4所示，55°C61°C的反應溫度中，確認探針聚合物是否形成。(實施例2)使用含有下述堿基序列的核酸探針_2(序列號2)來替代核酸探針-1，除此之外，按照與實施例1同樣的方法進行實驗。結果如圖5所示。核酸探針-2的堿基序列(5'_X2(堿基數(shù)6)X2'(堿基數(shù)6)-Υ2(堿基數(shù)6)Y2'(堿基數(shù)6)-Z2(堿基數(shù)6)Z2'(堿基數(shù)6)-3')5，-CCTGTCGACAGGCTCGGATCCGAGGGAGCATGCTCC-3，(序列號2)如圖5所示，53°C61°C的反應溫度中，確認探針聚合物是否形成。(實施例3)使用含有下述堿基序列的核酸探針_3(序列號3)，來替代核酸探針-1，除此之外，按照與實施例1同樣的方法進行實驗。結果如圖6所示。核酸探針-3的堿基序列(5'_X3(堿基數(shù)5)X3'(堿基數(shù)5)-Υ3(堿基數(shù)5)Y3'(堿基數(shù)5)-Z3(堿基數(shù)5)Z3'(堿基數(shù)5)-3')5，-CCTGCGCAGGCTCGGCCGAGGGACGCGTCC-3，(序列號3)如圖6所示，50°C59°C的反應溫度中，確認探針聚合物是否形成。(實施例4)使用通過本發(fā)明的核酸探針形成的探針聚合物檢測目標基因。使用與金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)的rRNA含有相同的堿基序列的合成DNA(目標低聚DNA)(序列號4)作為標的分析物。目標低聚DNA的堿基序列5’-TTCGGGAAACCGGAGCTAATACCGGATAATATTTTGAACCGCATGGTTCAAAAGTGAAAGACGGTCTTGCTGTCACTTATAGATGGATCCGCGCTGCATTAGCTA-3，(序列號4)使用含有與上述目標低聚DNA(序列號4)互補的序列的核酸探針(序列號5)作為捕捉探針。捕捉探針的堿基序列5，-CGTCTTTCACTTTTGAACCATGCGGTTCAAAATATTATCCGG-3，-氨基鍵(序列號5)將上述捕捉探針固定在各個條井型96井微量滴度酶標板上進行實驗。使用吖啶鐺酯(AE)對實施例1中的核酸探針-1(序列號1)的5’末端進行標記，將其用作形成探針聚合物的核酸探針。將該AE標記過的核酸探針-1溶解于溶液IOOmM-丁二酸鋰、600mM-氯化鋰、2mM-EDTA、5%-LDS、穩(wěn)定劑中，配制成濃度為50pmol/mL的第2雜化溶液。使用同時含有與上述核酸探針-1的一部分相同的堿基序列以及上述目標低聚DNA互補的區(qū)域的核酸探針(輔助探針-1)(序列號6)作為輔助探針。輔助探針-1的堿基序列(5‘-Y1'-X1-PolyT-Y1'-X1-T'-3')5，-TCCGAAGCCTGTCTTTTTTTCCGAAGCCTGTCTATCTATAAGTGACAGCAAGAC-3，(序列號6)將上述輔助探針溶解于溶液IOOmM-丁二酸鋰、600mM-氯化鈉、2mM_EDTA、1%-LDS]中，配制成濃度為25pmol/mL的第1雜化溶液。將50μL的0或者lOfmol/mL的目標低聚DNA(序列號4)和50μL第1雜化溶液分別注入上述調制好的條井型96井微量滴度酶標板中，用密封板密封封緊，設定標板溫度上部為20°C，下部為55°C，在此條件下反應45分鐘。反應后，用洗凈液50mM-Tris、0.3M-NaCl、0.01%-TritonX-100、ρΗ7·0洗凈。洗凈后，將100μL第2雜化溶液注入充分洗凈的96井微量滴度酶標板中，用密封板密封封緊。設定標板溫度上部為20°C，下部為55°C，在此條件下反應30分鐘后，用洗凈液洗凈。將標板的井洗凈后，加入發(fā)光化學試劑-I，II(GenProbe公司制造)測定液_1各50μL，使用照度計(CentroLB960，Berthold制造)測定發(fā)光強度(RLU)。發(fā)光強度(RLU)測定結果如表1所示。(實施例5)將條件作如下更改，方法參照實施例4進行實驗。結果如表1所示。使用吖啶鐺酯(AE)對實施例3中的核酸探針_3(序列號3)的5’末端進行標記，將其用作形成探針聚合物的核酸探針。使用同時含有與上述核酸探針_3的一部分相同的堿基序列以及上述目標低聚DNA互補的區(qū)域的核酸探針(輔助探針_2)(序列號7)作為輔助探針。輔助探針-2的堿基序列(5‘-Y3'-X3-X3'-Y3'-X3-X3'-T'-3')5，-CCGAGCCTGCGCAGGCCGAGCCTGCGCAGGATCTATAAGTGACAGCAAGAC-3，(序列號7)(比較例1)通過使用2種核酸探針形成的探針聚合物檢測目標基因。將條件作如下更改，方法參照實施例4進行實驗。結果如表1所示。使用吖啶鐺酯(AE)對下述2種核酸探針(第1以及第2探針；序列號8和9)的5’末端進行標記，將其用作形成探針聚合物的核酸探針。分別將該AE標記過的2種核酸探針溶解于溶液IOOmM-丁二酸鋰、600mM-氯化鋰、2mM_EDTA、5%-LDS、穩(wěn)定劑中，配制成濃度為25pmol/mL的第2雜化溶液。第1探針的堿基序列(5‘-X4-Y4-Z4-3')5，-GATGTCTCGGGATGGCTTCGGAGTTACGCTGGCGGTATCAAC-3，(序列號8)第2探針的堿基序列(5'-X4'-Y4'-Z4'-3')5，-CATCCCGAGACATCCGTAACTCCGAAGCGTTGATACCGCCAG-3，(序列號9)使用同時含有與上述第1探針的一部分相同的堿基序列以及上述目標低聚DNA互補的區(qū)域的核酸探針(輔助探針_3)(序列號10)作為輔助探針。輔助探針-3的堿基序列(5‘-X4-Y4-X4-T'-3')5’-GATGTCTCGGGATGGCTTCGGAGTTACGGATGTCTCGGGATGATCTATAAGTGACAGCAAGAC-3，(序列號10)[表1]<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>目標低聚DNA濃度(fmol/mL)實施例4實施例5比較例110846323843082496如表1所示，使用1種核酸探針與使用2種核酸探針一樣，同樣能夠檢測出目標。權利要求一種核酸探針，其特征是含有3個以上的核酸區(qū)域，同時該核酸探針的各個核酸區(qū)域含有第1區(qū)域以及與該第1區(qū)域鄰接且互補的第2區(qū)域。2.一種探針聚合物的形成方法，其特征是使權利要求1中所述的核酸探針發(fā)生反應，形成該核酸探針的聚合物。3.一種探針聚合物，其特征是由權利要求2中所述的方法形成。4.一種標的分析物的檢測方法，其特征是根據(jù)權利要求2中所述的方法形成探針聚合物，通過檢測該探針聚合物來檢測標的分析物。5.如權利要求4所述的檢測方法，其特征是使用能與所述標的分析物進行特異結合并且具有與所述核酸探針的一部分或者全部相同的堿基序列的輔助探針，形成含有所述標的分析物、所述輔助探針和所述探針聚合物的復合體，通過分析該復合體檢測所述標的分析物。6.如權利要求4所述的檢測方法，其特征是所述標的分析物為核酸，所述核酸探針含有與所述標的核酸的一部分互補的序列。7.如權利要求4或者5所述的檢測方法，其特征是所述標的分析物是選自核酸、抗原、抗體、受體、半抗原、酶、蛋白質、肽、聚合物以及糖類所構成的群中的至少一種。全文摘要本發(fā)明提供能夠簡便且有效地形成核酸探針聚合物的核酸探針聚合物形成方法，由該方法形成的探針聚合物，使用該方法的新核酸探針以及高靈敏度且簡便地檢測標的分析物的標的分析物檢測方法。所述核酸探針含有3個以上的核酸區(qū)域，同時該核酸探針的各個核酸區(qū)域含有第1區(qū)域以及與該第1區(qū)域互補且鄰接的第2區(qū)域。通過使該核酸探針反應，形成該核酸探針的聚合物。文檔編號G01N33/53GK101835906SQ20088011334公開日2010年9月15日申請日期2008年10月17日優(yōu)先權日2007年10月24日發(fā)明者波木井千雅子,薄井貢申請人:衛(wèi)材R&D管理有限公司