專利名稱：磺酰異氰酸酯柱前衍生化法測定水分含量的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬分析化學(xué)領(lǐng)域，涉及水的柱前衍生化方法，具體涉及一種采用磺酰異氰酸酯柱前衍生化法測定水分含量的方法(簡稱DZY法)。
背景技術(shù)：
現(xiàn)有技術(shù)公開的測定樣品中水分的方法主要有烘干法、甲苯法、減壓干燥法、氣相色譜法、費(fèi)休氏容量滴定法、卡爾費(fèi)休水分滴定儀法等。上述烘干法、甲苯法、減壓干燥法、費(fèi)休氏容量滴定法等方法存在操作煩瑣、準(zhǔn)確性低、易受干擾的缺點(diǎn)；而氣相色譜法和卡爾費(fèi)休水分滴定儀法等方法所需儀器價(jià)格昂貴不易普及。
在分析化學(xué)領(lǐng)域的研究中，研究者一直在尋找一種易普及、廉價(jià)的，能快速高效的、高靈敏度測定微量水分的方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種水的柱前衍生化方法，尤其是提供一種反應(yīng)條件溫和、快速高效的水的柱前衍生化方法，具體涉及采用磺酰異氰酸酯柱前衍生化法測定水分含量的方法。
本發(fā)明方法以磺酰異氰酸酯類為衍生化試劑進(jìn)行柱前衍生化，與高效液相色譜、高效液相色譜-質(zhì)譜、毛細(xì)管電泳、毛細(xì)管電泳-質(zhì)譜或者薄層色譜法等方法聯(lián)合使用，可以實(shí)現(xiàn)對樣品中微量水分的高靈敏度測定。
本發(fā)明方法通過下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)取含有待測水分的樣品，經(jīng)過樣品預(yù)處理后，加入不含活潑氫的反應(yīng)溶劑，以及磺酰異氰酸酯類衍生化試劑，混勻，室溫下放置1-20分鐘，加羥基或巰基化合物終止反應(yīng)，聯(lián)和使用高效液相色譜、高效液相色譜-質(zhì)譜、毛細(xì)管電泳、毛細(xì)管電泳-質(zhì)譜或者薄層色譜法等方法，測定水分的濃度。按下述步驟進(jìn)行1)按常規(guī)方法預(yù)處理待測含水樣品，2)加入不含活潑氫的反應(yīng)溶劑和磺酰異氰酸酯類衍生化試劑，混勻，3)室溫放置1-20分鐘，加羥基或巰基化合物終止反應(yīng)，
4)用高效液相色譜、高效液相色譜-質(zhì)譜、毛細(xì)管電泳、毛細(xì)管電泳-質(zhì)譜法或者薄層色譜法測定水分的含量。
本發(fā)明方法所述的衍生化試劑是磺酰異氰酸酯類化合物，其結(jié)構(gòu)通式可表示為RSO2NCO，其中R可以為烷基或芳基基團(tuán)。
本發(fā)明使用磺酰異氰酸酯類化合物作為衍生化試劑，衍生化反應(yīng)在室溫下即可以發(fā)生。將所述的衍生化試劑與待測溶液混勻僅需1-20分鐘后，衍生化反應(yīng)即已經(jīng)完成。
本發(fā)明方法所述的不含活潑氫的溶劑是乙腈、四氫吠喃、乙醚、苯、甲苯、或四氯化碳等溶劑。
本發(fā)明方法可以通過高效液相色譜、高效液相色譜-質(zhì)譜、毛細(xì)管電泳、毛細(xì)管電泳-質(zhì)譜或者薄層色譜等多種儀器實(shí)現(xiàn)，特別是高效液相色譜-紫外檢測器具有普及、廉價(jià)等優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明方法與現(xiàn)有技術(shù)比較，具有測定快速、準(zhǔn)確、簡便、易于推廣、成本低、反應(yīng)條件溫和、副反應(yīng)產(chǎn)物少和過量衍生化試劑不會(huì)干擾待測物的測定等優(yōu)點(diǎn)。


圖1是空白乙腈衍生化高效液相色譜(HPLC)圖，其中，內(nèi)標(biāo)色譜峰、水衍生化產(chǎn)物色譜峰、甲醇衍生化產(chǎn)物色譜峰基線分離；乙腈含有微量水分因此仍有水衍生化產(chǎn)物色譜峰。
圖2是含水乙腈衍生化高效液相色譜(HPLC)圖，圖中內(nèi)標(biāo)色譜峰、水衍生化產(chǎn)物色譜峰、甲醇衍生化產(chǎn)物色譜峰基線分離。
圖3是腸內(nèi)營養(yǎng)粉劑樣品乙腈溶液衍生化高效液相色譜(HPLC)圖，圖中內(nèi)標(biāo)色譜峰、水衍生化產(chǎn)物色譜峰、甲醇衍生化產(chǎn)物色譜峰基線分離，未見雜質(zhì)色譜峰干擾檢驗(yàn)，其中，1是內(nèi)標(biāo)(對氨基苯甲酸)；2是水衍生化產(chǎn)物；3是甲醇衍生化產(chǎn)物。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1
儀器與條件日本島津10A型高效液相色譜系統(tǒng)，包括二元梯度系統(tǒng)、柱溫控制箱、紫外可見可變波長檢測器、杭州英譜HS2000工作站以及20μL手動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)；色譜柱150×4.6mm ID，5μm DiamonsilTMC18(DIKMA)；水相稱取0.69gKH2PO4溶于500ml純水中，再用磷酸調(diào)節(jié)pH值為2.5。有機(jī)相乙腈。等比洗脫，水相∶有機(jī)相＝55∶45；流速1.0mL/min；柱溫25℃；檢測波長227nm；進(jìn)樣量20μL。
實(shí)驗(yàn)步驟精密稱取水200mg，置于10mL容量瓶中，乙腈溶解并稀釋至刻度，配制成濃度20mg/mL的對照品儲(chǔ)備液，再用乙腈稀釋至20mg/mL，10mg/mL，5mg/mL，3mg/mL，2mg/mL的濃度，供制備標(biāo)準(zhǔn)曲線。
取50μL標(biāo)準(zhǔn)液，加入20％對甲苯磺酰異氰酸酯(v/v)乙腈溶液100μL，漩渦混勻，室溫放置20分鐘，待其充分反應(yīng)后，加入50μL甲醇去除未反應(yīng)的衍生化試劑。取50μL反應(yīng)液加入23mg/ml對氨基苯甲酸乙腈內(nèi)標(biāo)溶液100μL，再加2mL乙腈溶液，漩渦混勻。用乙腈稀釋1000倍，進(jìn)樣20μL，同做隨行空白。記錄內(nèi)標(biāo)和水衍生化產(chǎn)物峰面積，以兩者比值計(jì)算線性方程。
精密稱取腸內(nèi)營養(yǎng)粉劑6.28g，置于50mL容量瓶中，乙腈溶解并稀釋至刻度，同樣取50μL與標(biāo)準(zhǔn)液以相同條件制備，相同色譜條件進(jìn)樣20μL，記錄內(nèi)標(biāo)和水衍生化產(chǎn)物峰面積，兩者比值代入線性方程中，計(jì)算其測定值，將計(jì)算值除以實(shí)際取樣量計(jì)算水分含量。
權(quán)利要求
1.磺酰異氰酸酯柱前衍生化法測定水分含量的方法，其特征是待測樣品預(yù)處理后，加入不含活潑氫的反應(yīng)溶劑，以磺酰異氰酸酯類為衍生化試劑進(jìn)行柱前衍生化，與高效液相色譜、高效液相色譜-質(zhì)譜、毛細(xì)管電泳、毛細(xì)管電泳-質(zhì)譜或者薄層色譜法聯(lián)和使用，測定水分含量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的磺酰異氰酸酯柱前衍生化法測定水分含量的方法，其特征是所述的衍生化試劑是磺酰異氰酸酯類化合物，其結(jié)構(gòu)通式為RSO2NCO，其中R為烷基或芳基基團(tuán)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水的磺酰異氰酸酯柱前衍生化法測定水分含量的方法，其特征是按下述步驟進(jìn)行1)待測含水樣品預(yù)處理，2)加入不含活潑氫的反應(yīng)溶劑和磺酰異氰酸酯類衍生化試劑，混勻，3)室溫放置1-20分鐘，加羥基或巰基化合物終止反應(yīng)，4)用高效液相色譜、高效液相色譜-質(zhì)譜、毛細(xì)管電泳、毛細(xì)管電泳-質(zhì)譜法或者薄層色譜法測定樣品中水分含量。
4，根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征是所述的不含活潑氫的反應(yīng)溶劑選自乙腈、四氫呋喃、乙醚、苯、甲苯或四氯化碳。
5，根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征是所述的衍生化反應(yīng)為室溫放置1-20分鐘，反應(yīng)完畢，加羥基或巰基化合物終止反應(yīng)。
全文摘要
本發(fā)明屬分析化學(xué)領(lǐng)域，涉及磺酰異氰酸酯柱前衍生化法測定水分含量。本發(fā)明以磺酰異氰酸酯類化合物為衍生化試劑，對水進(jìn)行柱前衍生化之后，加羥基或巰基化合物終止反應(yīng)。本發(fā)明提供的衍生化方法測定快速、準(zhǔn)確、簡便、易于推廣、成本低，還具有反應(yīng)條件溫和、副反應(yīng)少、過量衍生化試劑不干擾水分的測定等優(yōu)點(diǎn)，本發(fā)明衍生化方法與高效液相色譜、高效液相色譜－質(zhì)譜、毛細(xì)管電泳、毛細(xì)管電泳－質(zhì)譜或者薄層色譜法等方法聯(lián)合使用可以實(shí)現(xiàn)對水分的靈敏測定。
文檔編號(hào)G01N1/28GK1963492SQ20061011893
公開日2007年5月16日 申請日期2006年11月29日 優(yōu)先權(quán)日2006年11月29日
發(fā)明者段更利, 周濤, 郁穎佳 申請人:復(fù)旦大學(xué)