專(zhuān)利名稱(chēng)：：一種夏枯草制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬中藥質(zhì)量檢測(cè)領(lǐng)域，具體來(lái)說(shuō)涉及一種夏枯草制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
：夏枯草制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法之一是采用分光光度法測(cè)定總黃酮含量，但黃酮類(lèi)化合物種類(lèi)很多，因此該方法專(zhuān)屬性差，不能有效控制產(chǎn)品質(zhì)量。因此夏枯草制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法又增加了高效液相色譜法測(cè)定金絲桃苷含量，但夏枯草中金絲桃苷含量較低，在制劑中含量限度低于萬(wàn)分之一，還需要結(jié)合測(cè)定總黃酮含量來(lái)控制產(chǎn)品質(zhì)量，方法繁瑣，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，因此，還需要進(jìn)一步改進(jìn)。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于克服上述缺點(diǎn)而提供一種能有效控制夏枯草制劑質(zhì)量，準(zhǔn)確度高、技術(shù)先進(jìn)的使用高效液相色譜法測(cè)定夏枯草中槲皮素的含量的夏枯草制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法。發(fā)明人根據(jù)“中藥新藥研究的技術(shù)要求”，試驗(yàn)采用了專(zhuān)屬性強(qiáng)、靈敏度高的高效液相色譜法測(cè)定夏枯草制劑中所含熊果酸、金絲桃苷和槲皮素的含量，但熊果酸、金絲桃苷的含量均低于萬(wàn)分之一，而槲皮素的含量高于萬(wàn)分之一，且槲皮素與其他組份分離度、重現(xiàn)性、精密度、回收率都較好，故確定本發(fā)明的夏枯草制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法采用高效液相色譜法測(cè)定夏枯草制劑中槲皮素的含量。本發(fā)明的一種夏枯草制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，取夏枯草2667份，分別加水12、10、8倍煎煮三次，每次2小時(shí)，濾過(guò)，合并煎液，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.08～1.15(60～70℃)的浸膏，取70％浸膏噴霧干燥，得噴霧粉，備用，剩余浸膏加甜菊素6份混勻后作為粘合劑與噴霧粉、糊精515份沸騰制粒，干燥，混合，整粒，制得本品1000份，其特征在于包括以下步驟(1)供試品溶液的制備取本品研細(xì)，精密稱(chēng)取0.5～1.0g，置錐形瓶中，加體積比為70∶10∶20的甲醇/鹽酸/水的提取-水解溶液25ml，于80℃水浴中回流提取2小時(shí)，取下，放冷，用20％氫氧化鈉溶液/70％甲醇溶液中和PH至3～5，轉(zhuǎn)至50ml容量瓶，用70％甲醇定容，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；(2)對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取槲皮素對(duì)照品適量，加甲醇，制成每1ml含槲皮素15.00～20.00ug的溶液；(3)含量測(cè)定方法分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，照高效液相色譜法(《中國(guó)藥典》2000年版一部附錄□D)測(cè)定；(4)色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，體積比為50∶50的甲醇-0.4％磷酸溶液為流動(dòng)相，流速為1.0ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為360～372nm，理論塔板數(shù)按槲皮素峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。本發(fā)明的夏枯草制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，其中(2)對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取槲皮素對(duì)照品20.00mg置于200ml量瓶中，加甲醇至刻度，混勻，精密吸取20ml置于100ml容量瓶中，加甲醇至刻度，混勻，即制成每1ml含槲皮素20.00ug的溶液。本發(fā)明的夏枯草制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，其中檢測(cè)波長(zhǎng)為372nm。本發(fā)明的夏枯草制劑可以是常規(guī)的各種劑型。本發(fā)明的方法與現(xiàn)有夏枯草制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法相比主要優(yōu)越性如下經(jīng)過(guò)反復(fù)實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)夏枯草中槲皮素含量較高，故確定采用高效液相色譜法測(cè)定夏枯草顆粒中槲皮素的含量。經(jīng)試驗(yàn)表明，槲皮素與其他組份分離度好，線(xiàn)性關(guān)系、重現(xiàn)性、精密度、穩(wěn)定性、回收率都較好。供試品溶液的制備采用回流2小時(shí)處理能夠得到較好的檢測(cè)結(jié)果，又可以節(jié)省時(shí)間，提高效率，因此，本發(fā)明的方法準(zhǔn)確度高、技術(shù)先進(jìn)、操作快速簡(jiǎn)便，能使產(chǎn)品質(zhì)量得到更有效的控制。具體實(shí)施例方式以下通過(guò)夏枯草顆粒的實(shí)施例和試驗(yàn)例來(lái)進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的有益效果。夏枯草顆粒(1)制備取夏枯草2667g，分別加水12、10、8倍煎煮三次，每次2小時(shí)，濾過(guò)，合并煎液，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.08～1.15(60～70℃)的浸膏，取70％浸膏噴霧干燥，得噴霧粉，備用。剩余浸膏加甜菊素6g混勻后作為粘合劑與噴霧粉、糊精515g沸騰制粒，干燥，混合，整粒，制得1000g本品，分裝成每袋裝3g。(2)用法用量口服，一次1袋，一日2次。(3)性狀本品為棕褐色的顆粒；氣香，味微甜、微苦。(4)鑒別①取本品1.5g，加水20ml溶解，用水飽和的正丁醇提取4次，每次20ml，合并提取液，置水浴上蒸干，殘?jiān)铀?0ml，加熱使溶解，水溶液加于已處理好的聚酰胺柱(內(nèi)徑1.8cm、高6cm)上，用水60ml洗脫，棄去水洗液，再用乙醇60ml洗脫，收集洗脫液，置水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取夏枯草對(duì)照藥材4g加水50ml，回流提取30分鐘，過(guò)濾，濾液照供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液；再取金絲桃苷對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G高效薄層板上使成條狀，以醋酸乙酯-甲酸-水(8∶1∶1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，熱風(fēng)吹干后，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。②取本品6g，加乙醇50ml，加熱回流3小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液；另取熊果酸對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液10μl及對(duì)照品溶液1μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-氯仿-醋酸乙酯-冰醋酸(20∶5∶8∶0.5)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，100℃加熱至斑點(diǎn)清晰，分別置日光及紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。(5)檢查應(yīng)符合顆粒劑項(xiàng)下有關(guān)各項(xiàng)規(guī)定(《中國(guó)藥典》2000年版一部附錄IC)。實(shí)施例1夏枯草顆粒的質(zhì)量檢測(cè)方法，包括以下步驟(1)供試品溶液的制備取本品研細(xì)，精密稱(chēng)取0.5g，置錐形瓶中，加體積比為70∶10∶20的甲醇/鹽酸/水的提取-水解溶液25ml，于80℃水浴中回流提取2小時(shí)，取下，放冷，用20％氫氧化鈉溶液/70％甲醇溶液中和PH至3～5，轉(zhuǎn)至50ml容量瓶，用70％甲醇定容，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；分別稱(chēng)取兩個(gè)平行樣S1、S2S1S2空瓶51.780252.7992空瓶+樣51.317252.3322樣0.46300.4670(2)對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取槲皮素對(duì)照品20.00mg置于200ml量瓶中，加甲醇至刻度，混勻，精密吸取20ml置于100ml容量瓶中，加甲醇至刻度，混勻，即制成每1ml含槲皮素20.00ug的溶液；同樣制備方法分別制成對(duì)照品溶液1、對(duì)照品溶液2對(duì)照品溶液1對(duì)照品溶液2空瓶71.0018270.09875空瓶+樣71.0218270.11875樣0.020000.02000(3)色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，體積比為50∶50的甲醇-0.4％磷酸溶液為流動(dòng)相，流速為1.0ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為360～372nm，理論塔板數(shù)按槲皮素峰計(jì)算不低于3000。含量測(cè)定方法分別精密吸取二種對(duì)照品溶液和二份供試品溶液各10μl注入液相色譜儀，連續(xù)進(jìn)樣各2次，照高效液相色譜法(《中國(guó)藥典》2000年版一部附錄□D)測(cè)定，記錄色譜圖，測(cè)定峰面積，以下式計(jì)算樣品中槲皮素的含量As供試品溶液的峰面積；照品溶液的峰面積；Cs對(duì)照品濃度(mg/ml)；Ms供試品取樣量(g)；V定容體積(ml)□測(cè)定結(jié)果□計(jì)算(平均含量3.0270g/袋)S＝1.4mg/袋RSD＝1.0％實(shí)施例2夏枯草顆粒的質(zhì)量檢測(cè)方法，包括以下步驟(1)供試品溶液的制備取本品研細(xì)，精密稱(chēng)取0.5g，置錐形瓶中，加體積比為70∶10∶20的甲醇/鹽酸/水的提取-水解溶液25ml，于80℃水浴中回流提取2小時(shí)，取下，放冷，用20％氫氧化鈉溶液/70％甲醇溶液中和PH至3～5，轉(zhuǎn)至50ml容量瓶，用70％甲醇定容，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；分別稱(chēng)取兩個(gè)平行樣S1、S2S1S2空瓶52.533251.2136空瓶+樣52.032250.7233樣0.50100.4903(2)對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取槲皮素對(duì)照品20.00mg置于200ml量瓶中，加甲醇至刻度，混勻，精密吸取20ml置于100ml容量瓶中，加甲醇至刻度，混勻，即制成每1ml含槲皮素20.00ug的溶液；同樣制備方法分別制成對(duì)照品溶液1、對(duì)照品溶液2對(duì)照品溶液1對(duì)照品溶液2空瓶71.0018270.09875空瓶+樣71.0218270.11875樣0.020000.02000(3)色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，體積比為50∶50的甲醇-0.4％磷酸溶液為流動(dòng)相，流速為1.0ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為360～372nm，理論塔板數(shù)按槲皮素峰計(jì)算不低于3000。含量測(cè)定方法分別精密吸取二種對(duì)照品溶液和二份供試品溶液各10μl注入液相色譜儀，連續(xù)進(jìn)樣各2次，照高效液相色譜法(《中國(guó)藥典》2000年版一部附錄□D)測(cè)定，記錄色譜圖，測(cè)定峰面積，以實(shí)施例同樣的方式計(jì)算樣品中槲皮素的含量□測(cè)定結(jié)果<tablesid="table4"num="004"><tablewidth="792">對(duì)照品溶液2112.188701.60.856931-701.6211.842703.80.876829-703.8平均峰面積700.4RSD0.4％</table></tables><tablesid="table5"num="005"><tablewidth="660">進(jìn)樣序號(hào)保留時(shí)間峰面積對(duì)稱(chēng)性理論板數(shù)分離度供試品溶液1115.210306.80.867189-215.239311.80.817217-供試品溶液2115.215291.10.867362-215.220293.50.847541-</table></tables>□計(jì)算(平均含量3.0023g/袋)S＝1.3mg/袋RSD＝2.1％實(shí)施例3～12夏枯草顆粒的質(zhì)量檢測(cè)方法，包括以下步驟(1)供試品溶液的制備取本品研細(xì)，精密稱(chēng)取1.0g，置錐形瓶中，加體積比為70∶10∶20的甲醇/鹽酸/水的提取-水解溶液25ml，于80℃水浴中回流提取2小時(shí)，取下，放冷，用20％氫氧化鈉溶液/70％甲醇溶液中和PH至3～5，轉(zhuǎn)至50ml容量瓶，用70％甲醇定容，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；其余步驟同實(shí)施例1實(shí)施倒3～12十批供試品測(cè)定結(jié)果見(jiàn)下表<tablesid="table6"num="006"><tablewidth="752">實(shí)施例批號(hào)槲皮素的含量(mg·袋-1)第一次第二次平均值</table></tables>根據(jù)以上實(shí)施例1～12共12批樣品的含量測(cè)定結(jié)果，并考慮藥材含量的波動(dòng)，確定本品每袋含夏枯草以槲皮素(C15H10O7·2H2O)計(jì)，不得少于1.0mg。試驗(yàn)例1、樣品前處理(1)性狀見(jiàn)上述夏枯草顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，十批樣品均與此描述一致。(2)鑒別夏枯草制劑所含金絲桃苷及夏枯草對(duì)照藥材的薄層定性鑒別。因現(xiàn)有技術(shù)夏枯草口服液中僅有金絲桃苷的薄層定性鑒別，為了更準(zhǔn)確地體現(xiàn)該產(chǎn)品的質(zhì)量可靠性，增加夏枯草對(duì)照藥材的薄層定性鑒別。經(jīng)試驗(yàn)供試品色譜中在與對(duì)照品及對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)，故選擇本發(fā)明的方法。(3)含量測(cè)定為夏枯草顆粒所含槲皮素成分的含量測(cè)定，現(xiàn)有技術(shù)夏枯草口服液采用分光光度法測(cè)總黃酮，該方法專(zhuān)屬性差，根據(jù)“中藥新藥研究的技術(shù)要求”，試驗(yàn)采用了專(zhuān)屬性強(qiáng)、靈敏度高的高效液相色譜法測(cè)定夏枯草顆粒中所含熊果酸、金絲桃苷和槲皮素的含量，但熊果酸、金絲桃苷的含量均低于萬(wàn)分之一，而槲皮素的含量高于萬(wàn)分之一，故確定采用高效液相色譜法測(cè)定本品中槲皮素的含量。色譜條件如下所述，槲皮素與其他組份分離度、重現(xiàn)性、精密度、回收率都較好。(4)藥品與藥劑甲醇為色譜純，水為重蒸餾水，樣品由貴陽(yáng)新天藥業(yè)股份有限公司提供。(5)儀器分析條件儀器為Agilent1100高效液相色譜儀，VWD檢測(cè)器，Agilent1100化學(xué)工作站。(6)色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，色譜柱EliteHypersilC18，5μm，4.6×250mm，流動(dòng)相采用甲醇-0.4％磷酸溶液(50∶50)，檢測(cè)波長(zhǎng)372nm，柱溫為25℃，流速為1.0ml/min，理論塔板數(shù)以槲皮素峰計(jì)應(yīng)不低于3000。(7)檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇取槲皮素對(duì)照品溶液進(jìn)行UV光譜掃描，在372nm處有最大吸收，故選372nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。(8)供試品溶液處理的選擇按實(shí)施例含量測(cè)定方法中供試品溶液制備方法，通過(guò)超聲1小時(shí)、超聲2小時(shí)、超聲3小時(shí)、回流1小時(shí)、2小時(shí)、3小時(shí)的比較證明，回流2小時(shí)能夠得到滿(mǎn)意的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，又可以節(jié)省時(shí)間，提高效率，具體數(shù)據(jù)見(jiàn)表一。表一供試品溶液處理試驗(yàn)2、方法學(xué)考察(1)線(xiàn)性關(guān)系的考察精密稱(chēng)取槲皮素對(duì)照品10.5mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密吸取20ml至50ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即制成每1ml含42.0μg的對(duì)照品溶液，分別精密吸取上述對(duì)照品溶液2ml、5ml、10ml、15ml和20ml置于20ml量瓶中，加甲醇至刻度。分別吸取上述對(duì)照品溶液10μl注入液相色譜儀，按上述色譜條件測(cè)定。以槲皮素進(jìn)樣量(μg)為橫坐標(biāo)，相應(yīng)的峰面積(A)為縱坐標(biāo)，計(jì)算回歸方程為A＝3851.4C-45.446r＝0.9999具體數(shù)據(jù)見(jiàn)表二表二線(xiàn)性關(guān)系考察試驗(yàn)表明槲皮素進(jìn)樣量在0.042～0.42μg范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好。(2)精密度試驗(yàn)精密稱(chēng)取槲皮素對(duì)照品10.5mg置于100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密吸取20ml至100ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即制成每1ml含21.0μg的對(duì)照品溶液。取此對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣五次，每次10μl，測(cè)定槲皮素峰面積，結(jié)果RSD為0.9％，表明儀器的精密度良好。見(jiàn)表三。表三精密度試驗(yàn)(3)重復(fù)性試驗(yàn)取同批(批號(hào)20021001)供試品，按正文含量測(cè)定方法制備供試品溶液5份并測(cè)定含量，有良好的重重復(fù)性，結(jié)果見(jiàn)表四。表四重復(fù)性試驗(yàn)(4)穩(wěn)定性試驗(yàn)樣品穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一份供試品溶液(批號(hào)20021001)按正文含量測(cè)定方法在不同時(shí)間分別測(cè)定峰面積，共測(cè)定6次。結(jié)果RSD為1.6％，表明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定，見(jiàn)表五。表五樣品穩(wěn)定性試驗(yàn)對(duì)照品穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一份對(duì)照品溶液(21.0μg/ml)按正文含量測(cè)定方法在不同時(shí)間分別測(cè)定峰面積，共測(cè)定7次。結(jié)果RSD為1.4％，表明對(duì)照品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定，見(jiàn)表六。表六對(duì)照品穩(wěn)定性試驗(yàn)(5)加樣回收率試驗(yàn)精密稱(chēng)取已知含量(0.43mg·g-1)的同一供試品(批號(hào)20021001)5份，精密加入槲皮素對(duì)照溶液(0.02mg·ml-1)5ml，按正文所述方法提取并按色譜條件進(jìn)行測(cè)定，以下式計(jì)算回收率，結(jié)果見(jiàn)表七，說(shuō)明本方法有良好的回收率。表七回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果以上所述，僅是本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并非對(duì)本發(fā)明作任何形式上的限制，任何未脫離本發(fā)明技術(shù)方案內(nèi)容，依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實(shí)質(zhì)對(duì)以上實(shí)施例所作的任何簡(jiǎn)單修改、等同變化與修飾，均仍屬于本發(fā)明技術(shù)方案的范圍內(nèi)。權(quán)利要求1.一種夏枯草制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，取夏枯草2667份，分別加水12、10、8倍煎煮三次，每次2小時(shí)，濾過(guò)，合并煎液，濾液濃縮至溫度為60～70℃、相對(duì)密度為1.0g～1.15的浸膏，取70％浸膏噴霧干燥，得噴霧粉，備用，剩余浸膏加甜菊素6份混勻后作為粘合劑與噴霧粉、糊精515份沸騰制粒，干燥，混合，整粒，制得本品1000份，其特征在于包括以下步驟(1)供試品溶液的制備取本品研細(xì)，精密稱(chēng)取0.5～1.0g，置錐形瓶中，加體積比為70∶10∶20的甲醇/鹽酸/水的提取-水解溶液25ml，于80℃水浴中回流提取2小時(shí)，取下，放冷，用20％氫氧化鈉溶液/70％甲醇溶液中和PH至3～5，轉(zhuǎn)至50ml容量瓶，用70％甲醇定容，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；(2)對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取槲皮素對(duì)照品適量，加甲醇，制成每1ml含槲皮素15.00～20.00ug的溶液；(3)含量測(cè)定方法分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，照高效液相色譜法測(cè)定；(4)色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，體積比為50∶50的甲醇-0.4％磷酸溶液為流動(dòng)相，流速為1.0ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為360～372nm，理論塔板數(shù)按槲皮素峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。2.如權(quán)利要求1所述的夏枯草制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，其中(2)對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取槲皮素對(duì)照品20.00mg置于200ml量瓶中，加甲醇至刻度，混勻，精密吸取20ml置于100ml容量瓶中，加甲醇至刻度，混勻，即制成每1ml含槲皮素20.00ug的溶液。3.如權(quán)利要求1或2所述的夏枯草制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，其中，檢測(cè)波長(zhǎng)為372nm。4.如權(quán)利要求3所述的夏枯草制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，其中每袋3g含夏枯草以槲皮素(C15H10O7·2H2O)計(jì)，不得少于1.0mg。5.如權(quán)利要求4所述的夏枯草制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，其中夏枯草制劑是常規(guī)的各種劑型。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了一種夏枯草制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，包括下述步驟供試品溶液的制備，精密稱(chēng)取樣品，置錐形瓶中，加體積比為70∶10∶20的甲醇/鹽酸/水的提?。馊芤?，于80℃水浴中回流提取2小時(shí)，取下，放冷，用20％氫氧化鈉溶液/70％甲醇溶液中和pH至3～5，用70％甲醇定容，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；對(duì)照品溶液的制備，精密稱(chēng)取槲皮素對(duì)照品適量，加甲醇，制成每1ml含槲皮素15.00～20.00ug的溶液；含量測(cè)定，分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，照高效液相色譜法測(cè)定。本發(fā)明的方法準(zhǔn)確度高、技術(shù)先進(jìn)、操作快速簡(jiǎn)便，能使產(chǎn)品質(zhì)量得到更有效的控制。文檔編號(hào)G01N1/28GK1601273SQ20041004091公開(kāi)日2005年3月30日申請(qǐng)日期2004年10月21日優(yōu)先權(quán)日2004年10月21日發(fā)明者董大倫申請(qǐng)人:貴陽(yáng)新天藥業(yè)股份有限公司