一種藍(lán)莓花青素的提取方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種藍(lán)莓花青素的提取方法，屬于天然有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域。本發(fā)明以藍(lán)莓果為原料，破碎打漿，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為40%乙醇溶液作為提取液，并加入纖維素酶，在超聲輔助下提取，再經(jīng)離心分離，沉淀重復(fù)浸提一次，合并提取液濃縮后，通過高壓脈沖電場，促進(jìn)藍(lán)莓花青素的溶出，增加提取液的藍(lán)莓花青素溶出量，再經(jīng)大孔吸附樹脂吸附，醇洗，濃縮，冷凍干燥，從而得到藍(lán)莓花青素提取方法。實(shí)例證明，本發(fā)明操作可控，方法獨(dú)特，減少了生產(chǎn)成本，無污染，使得制得的藍(lán)莓花青素提取率高至80％以上，純度高達(dá)75％以上，具有更高的醫(yī)療保健價值和更寬的實(shí)際應(yīng)用領(lǐng)域。
【專利說明】
一種藍(lán)莓花青素的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明公開了一種藍(lán)莓花青素的提取方法，屬于天然有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]花青素又稱花色素，是一類廣泛存在于植物中的水溶性天然色素，屬黃酮類化合物，其與糖類物質(zhì)以糖苷鍵結(jié)合之后即為花色苷，是一種天然的抗氧化劑。由于花色素不穩(wěn)定，在植物中主要以花色苷存在。
[0003]花青素作為一種天然食用色素，安全、無毒、資源豐富，而且具有一定營養(yǎng)和藥理作用，在食品、化妝、醫(yī)藥等方面有著巨大的應(yīng)用潛力?；ㄇ嗨厥羌兲烊坏目顾ダ系臓I養(yǎng)補(bǔ)充劑，研究證明是當(dāng)今人類發(fā)現(xiàn)最有效的抗氧化劑，是目前自然界最有效的抗氧化物質(zhì)。同時有研究稱可增強(qiáng)視力，消除眼睛疲勞;延緩腦神經(jīng)衰老。藍(lán)莓所含花青素是目前所有植物花青素中功能最優(yōu)良、應(yīng)用范圍最廣，副作用最低，也是價格最昂貴的品種?；ㄇ嗨睾窟_(dá)25%的藍(lán)莓提取物價格是含量達(dá)95%的葡萄籽提取物的5?6倍，可見其超凡的價值。藍(lán)莓根、莖、葉、果皮、果肉中均含有花青素，且存在于藍(lán)莓細(xì)胞的液泡中。
[0004]目前對花青素的提取的研究主要有水提或有機(jī)溶劑提取法、超臨界流體萃取法等。傳統(tǒng)的水提或溶劑提取法存在由于溫度過高會破壞花青素的結(jié)構(gòu)，影響其生物活性及產(chǎn)率降低等問題;現(xiàn)代的超臨界萃取法雖然提取率高，但因設(shè)備昂貴，不適合工業(yè)化生產(chǎn)。
[0005]為了解決藍(lán)莓果采收季節(jié)性強(qiáng)，且不易儲藏，滯銷的藍(lán)莓果因腐爛既造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，又污染環(huán)境的問題，本發(fā)明提供一種高效經(jīng)濟(jì)的從藍(lán)莓果中提取藍(lán)莓花青素的方法，充分利用藍(lán)莓花青素，拓展藍(lán)莓花青素的應(yīng)用領(lǐng)域。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明主要解決的技術(shù)問題:針對目前傳統(tǒng)方法在提取花青素的過程中，水提或溶劑提取法會由于溫度過高破壞花青素結(jié)構(gòu)，影響其生物活性以及產(chǎn)率，而超臨界萃取法雖可以提高提取率，但設(shè)備昂貴，成本高，不易工業(yè)化生產(chǎn)的現(xiàn)狀，提供了一種以藍(lán)莓果為原料，破碎打漿，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為40%乙醇溶液作為提取液，并加入纖維素酶，在超聲輔助下提取，再經(jīng)離心分離，沉淀重復(fù)浸提一次，合并提取液濃縮后，通過高壓脈沖電場，對兩極間的物料施加短脈沖的高電壓處理，使極性物質(zhì)在電場的作用下高速向電極方向運(yùn)動，利用細(xì)胞膜電穿孔原理，造成組織細(xì)胞的不可逆破壞，從而促進(jìn)藍(lán)莓花青素的溶出，增加提取液的藍(lán)莓花青素溶出量，再經(jīng)大孔吸附樹脂吸附，醇洗，濃縮，冷凍干燥，從而得到藍(lán)莓花青素提取方法。該方法操作可控，方法獨(dú)特，減少了生產(chǎn)成本，無污染，使得制得的藍(lán)莓花青素提取率高至80%以上，純度高達(dá)75%以上，具有更高的醫(yī)療保健價值和更寬的實(shí)際應(yīng)用領(lǐng)域。
[0007 ]為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是:
(I)稱取200?300g藍(lán)莓果洗凈去雜，與200?300mL去離子水加入勻漿機(jī)中破碎打漿10?15min，將藍(lán)莓漿液加入2?3L質(zhì)量濃度為40%乙醇溶液中，在50?52°C恒溫水浴下，加入30?45g纖維素酶，并用200W超聲波超聲10?12min，用質(zhì)量濃度為10%鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH至2.0?2.5，浸提2?3h，將浸提液置入4000?6000/min離心機(jī)中離心10?15min，得沉淀和上清液，將沉淀按上述操作再浸提一次并收集上清液，合并上清液，將上清液在50?55 °C下，減壓濃縮至原體積的30?35%，得藍(lán)莓花青素粗提液；
(2)將上述藍(lán)莓花青素粗提液按料液比1:6?1:7加入含質(zhì)量濃度為0.1%鹽酸的質(zhì)量濃度為60%乙醇溶液中，以7?8mL/min通過高壓脈沖電場，控制脈沖數(shù)為8?10個，電場強(qiáng)度為18?19KV/cm，并將混合液置入4000?6000/min離心機(jī)中離心10?15min，取上清液，得藍(lán)莓花青素二提液；
(3)將上述藍(lán)莓花青素二提液以2?4倍柱體積/h流速經(jīng)過填充有大孔樹脂的吸附柱，重復(fù)上述操作至提取液無色，再用質(zhì)量濃度為70%乙醇溶液以0.1?0.5倍柱體積/h流速洗脫被大孔樹脂吸附的藍(lán)莓花青素，收集洗脫液，將洗脫液在50?55 °C真空干燥箱中減壓濃縮，將濃縮液冷凍干燥得藍(lán)莓花青素。
[0008]本發(fā)明的應(yīng)用方法是:按固液比1:50?1:100，將本發(fā)明制得的藍(lán)莓花青素倒入溫開水中，攪拌均勻，口服即可，建議每天早晚飯后服用，服用后禁食海鮮、辛辣食物，堅持連續(xù)服用7?14天，可以明顯感覺皮膚變的細(xì)膩光澤，增強(qiáng)了皮膚的免疫力，對于易過敏患者，可以有效對抗各種過敏性癥狀，效果極其顯著。
[0009]本發(fā)明的有益效果是:
(1)本發(fā)明操作可控，方法獨(dú)特，在制備的過程中無需特殊儀器，減少了生產(chǎn)成本，無污染，屬于綠色環(huán)保工藝；
(2)本發(fā)明通過高壓脈沖電場，對兩極間的物料施加短脈沖的高電壓處理，使得極性物質(zhì)在電場的作用下高速向電極方向運(yùn)動，利用細(xì)胞膜電穿孔原理，造成組織細(xì)胞的不可逆破壞，從而促進(jìn)藍(lán)莓花青素的溶出，增加提取液的藍(lán)莓花青素溶出量，提高了提取率；
(3)本發(fā)明最終使得制得的藍(lán)莓花青素提取率高至80%以上，純度高達(dá)75%以上，具有更高的醫(yī)療保健價值和更寬的實(shí)際應(yīng)用領(lǐng)域。
【具體實(shí)施方式】
[0010]首先稱取200?300g藍(lán)莓果洗凈去雜，與200?300mL去離子水加入勻漿機(jī)中破碎打漿10?15min，將藍(lán)莓漿液加入2?3L質(zhì)量濃度為40%乙醇溶液中，在50?52°C恒溫水浴下，加入30?45g纖維素酶，并用200W超聲波超聲10?12min，用質(zhì)量濃度為10%鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH至2.0?2.5，浸提2?3h，將浸提液置入4000?6000/min離心機(jī)中離心1?15min，得沉淀和上清液，將沉淀按上述操作再浸提一次并收集上清液，合并上清液，將上清液在50?55°(:下，減壓濃縮至原體積的30?35%，得藍(lán)莓花青素粗提液;然后將上述藍(lán)莓花青素粗提液按料液比1:6?1:7加入含質(zhì)量濃度為0.1%鹽酸的質(zhì)量濃度為60%乙醇溶液中，以7?8mL/min通過高壓脈沖電場，控制脈沖數(shù)為8?10個，電場強(qiáng)度為18?19KV/cm，并將混合液置入4000?6000/min離心機(jī)中離心10?15min，取上清液，得藍(lán)莓花青素二提液;最后將上述藍(lán)莓花青素二提液以2?4倍柱體積/h流速經(jīng)過填充有大孔樹脂的吸附柱，重復(fù)上述操作至提取液無色，再用質(zhì)量濃度為70%乙醇溶液以0.1?0.5倍柱體積/h流速洗脫被大孔樹脂吸附的藍(lán)莓花青素，收集洗脫液，將洗脫液在50?55 °(:真空干燥箱中減壓濃縮，將濃縮液冷凍干燥得藍(lán)莓花青素。
[0011]實(shí)例I 首先稱取200g藍(lán)莓果洗凈去雜，與200mL去離子水加入勻漿機(jī)中破碎打漿lOmin，將藍(lán)莓漿液加入2L質(zhì)量濃度為40%乙醇溶液中，在50°C恒溫水浴下，加入30g纖維素酶，并用200W超聲波超聲1min，用質(zhì)量濃度為10%鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH至2.0，浸提2h，將浸提液置入4000/min離心機(jī)中離心lOmin，得沉淀和上清液，將沉淀按上述操作再浸提一次并收集上清液，合并上清液，將上清液在50°C下，減壓濃縮至原體積的30%，得藍(lán)莓花青素粗提液;然后將上述藍(lán)莓花青素粗提液按料液比1:6加入含質(zhì)量濃度為0.1%鹽酸的質(zhì)量濃度為60%乙醇溶液中，以7mL/min通過高壓脈沖電場，控制脈沖數(shù)為8個，電場強(qiáng)度為18KV/cm，并將混合液置入4000/min離心機(jī)中離心1min，取上清液，得藍(lán)莓花青素二提液;最后將上述藍(lán)莓花青素二提液以2倍柱體積/h流速經(jīng)過填充有大孔樹脂的吸附柱，重復(fù)上述操作至提取液無色，再用質(zhì)量濃度為70%乙醇溶液以0.1倍柱體積/h流速洗脫被大孔樹脂吸附的藍(lán)莓花青素，收集洗脫液，將洗脫液在50 °C真空干燥箱中減壓濃縮，將濃縮液冷凍干燥得藍(lán)莓花青素。
[0012]本實(shí)例操作簡便，使用時，按固液比1:50，將本發(fā)明制得的藍(lán)莓花青素倒入溫開水中，攪拌均勻，口服即可，建議每天早晚飯后服用，服用后禁食海鮮、辛辣食物，堅持連續(xù)服用7天，可以明顯感覺皮膚變的細(xì)膩光澤，增強(qiáng)了皮膚的免疫力，對于易過敏患者，可以有效對抗各種過敏性癥狀，效果極其顯著。
[0013]實(shí)例2
首先稱取250g藍(lán)莓果洗凈去雜，與250mL去離子水加入勻漿機(jī)中破碎打漿13min，將藍(lán)莓漿液加入2.5L質(zhì)量濃度為40%乙醇溶液中，在51°C恒溫水浴下，加入40g纖維素酶，并用200W超聲波超聲I Imin，用質(zhì)量濃度為10%鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH至2.3，浸提2.5h，將浸提液置入5000/min離心機(jī)中離心13min，得沉淀和上清液，將沉淀按上述操作再浸提一次并收集上清液，合并上清液，將上清液在53°C下，減壓濃縮至原體積的33%，得藍(lán)莓花青素粗提液;然后將上述藍(lán)莓花青素粗提液按料液比I: 65加入含質(zhì)量濃度為0.1%鹽酸的質(zhì)量濃度為60%乙醇溶液中，以7.5mL/min通過高壓脈沖電場，控制脈沖數(shù)為9個，電場強(qiáng)度18.5KV/cm，并將混合液置入5000/min離心機(jī)中離心13min，取上清液，得藍(lán)莓花青素二提液;最后將上述藍(lán)莓花青素二提液以3倍柱體積/h流速經(jīng)過填充有大孔樹脂的吸附柱，重復(fù)上述操作至提取液無色，再用質(zhì)量濃度為70%乙醇溶液以0.4倍柱體積/h流速洗脫被大孔樹脂吸附的藍(lán)莓花青素，收集洗脫液，將洗脫液在53 °C真空干燥箱中減壓濃縮，將濃縮液冷凍干燥得藍(lán)莓花青素。
[0014]本實(shí)例操作簡便，使用時，按固液比1:80，將本發(fā)明制得的藍(lán)莓花青素倒入溫開水中，攪拌均勻，口服即可，建議每天早晚飯后服用，服用后禁食海鮮、辛辣食物，堅持連續(xù)服用12天，可以明顯感覺皮膚變的細(xì)膩光澤，增強(qiáng)了皮膚的免疫力，對于易過敏患者，可以有效對抗各種過敏性癥狀，效果極其顯著。
[0015]實(shí)例3
首先稱取300g藍(lán)莓果洗凈去雜，與300mL去離子水加入勻漿機(jī)中破碎打漿15min，將藍(lán)莓漿液加入3L質(zhì)量濃度為40%乙醇溶液中，在52°C恒溫水浴下，加入45g纖維素酶，并用200W超聲波超聲12min，用質(zhì)量濃度為10%鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH至2.5，浸提3h，將浸提液置入6000/min離心機(jī)中離心15min，得沉淀和上清液，將沉淀按上述操作再浸提一次并收集上清液，合并上清液，將上清液在55 0C下，減壓濃縮至原體積的35%，得藍(lán)莓花青素粗提液;然后將上述藍(lán)莓花青素粗提液按料液比1:7加入含質(zhì)量濃度為0.1%鹽酸的質(zhì)量濃度為60%乙醇溶液中，以8mL/min通過高壓脈沖電場，控制脈沖數(shù)為1個，電場強(qiáng)度為19KV/cm，并將混合液置入6000/min離心機(jī)中離心15min，取上清液，得藍(lán)莓花青素二提液;最后將上述藍(lán)莓花青素二提液以4倍柱體積/h流速經(jīng)過填充有大孔樹脂的吸附柱，重復(fù)上述操作至提取液無色，再用質(zhì)量濃度為70%乙醇溶液以0.5倍柱體積/h流速洗脫被大孔樹脂吸附的藍(lán)莓花青素，收集洗脫液，將洗脫液在55 °C真空干燥箱中減壓濃縮，將濃縮液冷凍干燥得藍(lán)莓花青素。
[0016]本實(shí)例操作簡便，使用時，按固液比1:100，將本發(fā)明制得的藍(lán)莓花青素倒入溫開水中，攪拌均勻，口服即可，建議每天早晚飯后服用，服用后禁食海鮮、辛辣食物，堅持連續(xù)服用14天，可以明顯感覺皮膚變的細(xì)膩光澤，增強(qiáng)了皮膚的免疫力，對于易過敏患者，可以有效對抗各種過敏性癥狀，效果極其顯著。
【主權(quán)項】
1.一種藍(lán)莓花青素的提取方法，其特征在于具體制備步驟為: (1)稱取200?300g藍(lán)莓果洗凈去雜，與200?300mL去離子水加入勻漿機(jī)中破碎打漿10?15min，將藍(lán)莓漿液加入2?3L質(zhì)量濃度為40%乙醇溶液中，在50?52°C恒溫水浴下，加入.30?45g纖維素酶，并用200W超聲波超聲10?12min，用質(zhì)量濃度為10%鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH至.2.0?2.5，浸提2?3h，將浸提液置入4000?6000/min離心機(jī)中離心10?15min，得沉淀和上清液，將沉淀按上述操作再浸提一次并收集上清液，合并上清液，將上清液在50?55 °C下，減壓濃縮至原體積的30?35%，得藍(lán)莓花青素粗提液； (2)將上述藍(lán)莓花青素粗提液按料液比1:6?1:7加入含質(zhì)量濃度為0.1%鹽酸的質(zhì)量濃度為60%乙醇溶液中，以7?8mL/min通過高壓脈沖電場，控制脈沖數(shù)為8?10個，電場強(qiáng)度為.18?19KV/cm，并將混合液置入4000?6000/min離心機(jī)中離心10?15min，取上清液，得藍(lán)莓花青素二提液； (3)將上述藍(lán)莓花青素二提液以2?4倍柱體積/h流速經(jīng)過填充有大孔樹脂的吸附柱，重復(fù)上述操作至提取液無色，再用質(zhì)量濃度為70%乙醇溶液以0.1?0.5倍柱體積/h流速洗脫被大孔樹脂吸附的藍(lán)莓花青素，收集洗脫液，將洗脫液在50?55 °C真空干燥箱中減壓濃縮，將濃縮液冷凍干燥得藍(lán)莓花青素。
【文檔編號】C09B61/00GK106083796SQ201610441777
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年6月20日
【發(fā)明人】仇穎瑩, 張明, 王龍
【申請人】仇穎瑩