一種基于紫荊澤蘭的榆黃菇培養(yǎng)基菌榆黃菇液體菌種制備方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種基于紫荊澤蘭的榆黃菇培養(yǎng)基，包括以下重量份組分：紫莖澤蘭、木醋液、海藻多糖、可溶性膨脹淀粉、蛋白胨、納米級(jí)電氣石粉、細(xì)菌納米纖維素等。本發(fā)明結(jié)合紫莖澤蘭、可溶性膨脹淀粉等為培養(yǎng)基制備榆黃菇液體菌種，材料來(lái)源廣泛，價(jià)格成本低，同時(shí)通過(guò)對(duì)紫莖澤蘭的超微、海藻多糖以及木醋液結(jié)合文火小煮浸提，豐富了培養(yǎng)基的成分，同時(shí)，借助海藻多糖的性質(zhì)，促進(jìn)了液體培養(yǎng)基的穩(wěn)定，為榆黃菇母種以及擴(kuò)培提供了豐富的營(yíng)養(yǎng)和良好的空間；加入納米纖維素給榆黃菇液體菌種菌絲球提供了良好的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生存環(huán)境，可以提高菌絲球分布的穩(wěn)定性，避免了液體菌種使用前通過(guò)對(duì)菌絲球的機(jī)械粉碎造成的損失。
【專(zhuān)利說(shuō)明】
一種基于紫荊澤蘭的榆黃菇培養(yǎng)基菌榆黃菇液體菌種制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及液體菌種技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種基于紫荊澤蘭的榆黃菇培養(yǎng)基以及榆黃菇液體菌種制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]榆黃菇生產(chǎn)過(guò)程中，液體菌種具有固體菌種所不可比擬的優(yōu)勢(shì)，液體菌種具有生產(chǎn)周期短，菌齡短而一致，純度高、活力強(qiáng)，接種簡(jiǎn)便快捷，易實(shí)行工廠化、規(guī)?；?、標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)?，F(xiàn)在，越來(lái)越多的人都在研究和使用液體菌種，而液體菌種的推廣和使用也是實(shí)現(xiàn)食用菌工廠化、規(guī)?；?、標(biāo)準(zhǔn)化的必然趨勢(shì)。但是液體菌種也存在著自身的缺陷和不足:
1、液體菌種萌發(fā)點(diǎn)多生長(zhǎng)速度快，但是穿透力不強(qiáng)，培養(yǎng)料過(guò)粗菌絲不易吃透培養(yǎng)料，菌絲將沿著培養(yǎng)料表面快速生長(zhǎng)，培養(yǎng)料內(nèi)部菌絲量很少，嚴(yán)重影響了菌種產(chǎn)量和質(zhì)量的問(wèn)題；
2、常規(guī)的液體菌種雖然解決了固體菌種存在的一些問(wèn)題，能明顯縮短栽培周期、增強(qiáng)菌種活力和抗逆性、降低菌種污染率、使得菌種質(zhì)量整齊度提高，但仍存在例如發(fā)酵得到的液體菌種中菌球的密度、大小、均勻度等物理特性不是很理想等不足，如果用攪拌剪切的方法將菌球打碎，得到的菌種均勻度會(huì)更理想，但是，高速攪拌粉碎和打漿的剪切力對(duì)菌種傷害極大，對(duì)菌種整體的質(zhì)量影響較為嚴(yán)重。開(kāi)發(fā)分布均勻且具有更小粒徑菌絲球的高質(zhì)量的液體菌種具有重要意義。公開(kāi)號(hào)CN105309194A《食用菌微粒液體菌種生產(chǎn)新技術(shù)》提供了一種菌絲球粒徑在0.5mm的食用菌微粒液體菌種，采用的增加食用菌液體菌種培養(yǎng)液通氣量，使通氣量在1: 0.6—0.9V/V.min為適宜，同時(shí)在通氣發(fā)酵罐內(nèi)裝置攪拌器使培養(yǎng)液渦流運(yùn)動(dòng)延長(zhǎng)氣泡的運(yùn)動(dòng)路線的技術(shù)操作方法，該生產(chǎn)微粒液體菌種的方法是從生產(chǎn)工藝上進(jìn)行改進(jìn)，并沒(méi)有液體菌種培養(yǎng)基方面進(jìn)行改進(jìn)，實(shí)施起來(lái)技術(shù)難度要求高;公開(kāi)號(hào)CN105130516A《分子級(jí)生物培養(yǎng)基制作方法》提到了分子級(jí)生物培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分可以快速全面的被吸收，促進(jìn)液體菌種的生長(zhǎng)，但是并沒(méi)有提到分子級(jí)生物培養(yǎng)基對(duì)液體菌種菌絲球直徑大小的影響。發(fā)展一種基于液體菌種培養(yǎng)基原材料成分改進(jìn)液體菌種菌絲球直徑改善食用菌菌種產(chǎn)量和質(zhì)量的技術(shù)，具有重要的意義。
[0003]細(xì)菌納米纖維素是自然界的豐富的可再生產(chǎn)物之一，細(xì)菌納米纖維素是纖維素的物理最小結(jié)構(gòu)單元，是指直徑1-1OOnm之間的纖維，細(xì)菌納米纖維素質(zhì)輕，生物相容性好，可降解、可再生，反應(yīng)活性高，且具有楊氏模量高，聚合度高，潔凈度高，強(qiáng)度高，比表面積大等優(yōu)勢(shì)。將細(xì)菌納米纖維素作作為食用菌液體菌種培養(yǎng)基原材料，對(duì)食用菌液體菌種的菌絲球分布以及直徑具有一定的影響，進(jìn)而起到改善食用菌菌種質(zhì)量的作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明目的就是為了彌補(bǔ)已有技術(shù)的缺陷，提供一種基于紫荊澤蘭的榆黃菇培養(yǎng)基以及榆黃菇液體菌種制備方法。
[0005]本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的: 一種基于紫荊澤蘭的榆黃菇培養(yǎng)基，包括以下重量份組分:紫莖澤蘭56-60、木醋液4-
5、海藻多糖14-15、可溶性膨脹淀粉78-80、蛋白胨9-10、葡萄糖12-13、乳糖酸鈣3-4、聚谷氨酸2-3、蕓苔素0.9-1、萘乙酸0.6-0.7、維生素B10.1-0.2、維生素B20.1-0.2、魔芋葡甘聚糖
0.6-0.7、七水硫酸鎂0.5-0.6、石膏0.4-0.5、磷酸二氫鉀0.5-0.6、過(guò)磷酸鈣0.6-0.7、納米級(jí)電氣石粉5.6-6、細(xì)菌納米纖維素6.2-6.5、適量的水。
[0006]—種采用上述的培養(yǎng)基制備榆黃菇液體菌種方法，包括以下步驟:
(1)、將一半納米級(jí)電氣石粉和水按照0.lg/L混合，通電激發(fā)制備無(wú)菌水備用;將魔芋葡甘聚糖、七水硫酸鎂、石膏、磷酸二氫鉀、過(guò)磷酸鈣的總量和無(wú)菌水按lg/L混合在30°C攪拌溶解得溶液一;將蛋白胨、葡萄糖、乳糖酸鈣、聚谷氨酸、蕓苔素、萘乙酸、維生素B1、維生素B2的總量和無(wú)菌水按2g/L混合攪拌溶解得溶液二;將紫莖澤蘭放入超微粉碎機(jī)中粉碎處理30min，和木醋液、海藻多糖一起放入鍋中加入總重量4倍的水小火文煮3h，之后過(guò)濾，得濾液和濾渣，將濾液、可溶性膨脹淀粉的總量和無(wú)菌水按250g/L混合攪拌，并在進(jìn)行98 °C進(jìn)行巴氏滅菌滅酶lOmin，得溶液三;將另一半納米電氣石粉和細(xì)菌納米纖維素以及總重量3-4倍的水混合攪拌均勻并采用高溫蒸汽滅菌，得溶液四備用；
(2 )、將溶液三保持20 0C、溶液二保持25 0C、溶液一保持30 V，先將溶液一加入到溶液二中混合攪拌均勻得復(fù)合液，在將該復(fù)合液加入到溶液三中混合攪拌均勻得營(yíng)養(yǎng)液，并調(diào)整pH，此后對(duì)該營(yíng)養(yǎng)液進(jìn)行通電激發(fā)處理30min得液體培養(yǎng)基備用；
(3)、將榆黃菇母種在無(wú)菌環(huán)境中先接種到一半的液體培養(yǎng)基上進(jìn)行液體發(fā)酵，發(fā)酵條件為PH5.3-5.5、接種量11%、溫度26-28°C、搖床轉(zhuǎn)速190r/min、培養(yǎng)24-25h，得榆黃菇液體菌種一；
(4 )、將剩余一半的液體培養(yǎng)基以及溶液四無(wú)菌混合均勻，并將其總量與無(wú)菌水350g/L混合，高壓均質(zhì)之后，通電激化配合高溫再次滅菌，并放置到無(wú)菌培養(yǎng)瓶中，得復(fù)合培養(yǎng)基，將步驟(3)得到的榆黃菇液體菌種一按25%的接種量在無(wú)菌環(huán)境中接種到該培養(yǎng)瓶中，溫度24-24.5 °C、搖床轉(zhuǎn)速190r/min，培養(yǎng)30_32h即得。
[0007]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是:
本發(fā)明結(jié)合紫莖澤蘭、可溶性膨脹淀粉、蛋白胨、乳糖酸鈣、聚谷氨酸、葡萄糖配合蕓苔素、萘乙酸、維生素為培養(yǎng)基制備榆黃菇液體菌種，材料來(lái)源廣泛，價(jià)格成本低，同時(shí)通過(guò)對(duì)紫莖澤蘭的超微、海藻多糖以及木醋液結(jié)合文火小煮浸提，豐富了培養(yǎng)基的成分，同時(shí)，借助海藻多糖的性質(zhì)，促進(jìn)了液體培養(yǎng)基的穩(wěn)定，為榆黃菇母種以及擴(kuò)培提供了豐富的營(yíng)養(yǎng)和良好的空間;在液體培養(yǎng)基的制備過(guò)程中，借助納米級(jí)電氣石粉電激處理時(shí)的滅菌功效，輔助液體培養(yǎng)基的滅菌，相對(duì)傳統(tǒng)的滅菌，操作簡(jiǎn)單，能耗少；同時(shí);榆黃菇液體菌種的制備采用了液體發(fā)酵以及擴(kuò)培兩階段，第二階段的培養(yǎng)基中加入納米電氣石粉和納米纖維素營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，給榆黃燕液體菌種菌絲球提供了良好的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生存環(huán)境，可以提高菌絲球分布的穩(wěn)定性，避免了液體菌種使用前通過(guò)對(duì)菌絲球的機(jī)械粉碎造成的損失。
【具體實(shí)施方式】
[0008]一種基于紫荊澤蘭的榆黃菇培養(yǎng)基，包括以下重量份組分:紫莖澤蘭56、木醋液4、海藻多糖14、可溶性膨脹淀粉78、蛋白胨9、葡萄糖12、乳糖酸鈣3、聚谷氨酸2、蕓苔素0.9、萘乙酸0.6、維生素B10.1、維生素B20.1、魔芋葡甘聚糖0.6、七水硫酸鎂0.5、石膏0.4、磷酸二氫鉀0.5、過(guò)磷酸鈣0.6、納米級(jí)電氣石粉5.6、細(xì)菌納米纖維素6.2、適量的水。
[0009]—種采用上述的培養(yǎng)基制備榆黃菇液體菌種方法，包括以下步驟:
(1)、將一半納米級(jí)電氣石粉和水按照0.lg/L混合，通電激發(fā)制備無(wú)菌水備用;將魔芋葡甘聚糖、七水硫酸鎂、石膏、磷酸二氫鉀、過(guò)磷酸鈣的總量和無(wú)菌水按lg/L混合在30°C攪拌溶解得溶液一;將蛋白胨、葡萄糖、乳糖酸鈣、聚谷氨酸、蕓苔素、萘乙酸、維生素B1、維生素B2的總量和無(wú)菌水按2g/L混合攪拌溶解得溶液二;將紫莖澤蘭放入超微粉碎機(jī)中粉碎處理30min，和木醋液、海藻多糖一起放入鍋中加入總重量4倍的水小火文煮3h，之后過(guò)濾，得濾液和濾渣，將濾液、可溶性膨脹淀粉的總量和無(wú)菌水按250g/L混合攪拌，并在進(jìn)行98 °C進(jìn)行巴氏滅菌滅酶lOmin，得溶液三;將另一半納米電氣石粉和細(xì)菌納米纖維素以及總重量3倍的水混合攪拌均勻并采用高溫蒸汽滅菌，得溶液四備用；
(2 )、將溶液三保持20 0C、溶液二保持25 0C、溶液一保持30 V，先將溶液一加入到溶液二中混合攪拌均勻得復(fù)合液，在將該復(fù)合液加入到溶液三中混合攪拌均勻得營(yíng)養(yǎng)液，并調(diào)整pH，此后對(duì)該營(yíng)養(yǎng)液進(jìn)行通電激發(fā)處理30min得液體培養(yǎng)基備用；
(3)、將榆黃菇母種在無(wú)菌環(huán)境中先接種到一半的液體培養(yǎng)基上進(jìn)行液體發(fā)酵，發(fā)酵條件為pH5.3、接種量11%、溫度260C、搖床轉(zhuǎn)速190r/min、培養(yǎng)24h，得榆黃菇液體菌種一；
(4 )、將剩余一半的液體培養(yǎng)基以及溶液四無(wú)菌混合均勻，并將其總量與無(wú)菌水350g/L混合，高壓均質(zhì)之后，通電激化配合高溫再次滅菌，并放置到無(wú)菌培養(yǎng)瓶中，得復(fù)合培養(yǎng)基，將步驟(3)得到的榆黃菇液體菌種一按25%的接種量在無(wú)菌環(huán)境中接種到該培養(yǎng)瓶中，溫度24°C、搖床轉(zhuǎn)速190r/min，培養(yǎng)30h即得。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種基于紫荊澤蘭的榆黃菇培養(yǎng)基，其特征在于，包括以下重量份組分:紫莖澤蘭56-60、木醋液4-5、海藻多糖14-15、可溶性膨脹淀粉78-80、蛋白胨9-10、葡萄糖12-13、乳糖酸鈣3-4、聚谷氨酸2-3、蕓苔素0.9-1、萘乙酸0.6-0.7、維生素B10.1-0.2、維生素B20.Ι-Ο.2、魔芋葡甘聚糖0.6-0.7、七水硫酸鎂0.5-0.6、石膏0.4-0.5、磷酸二氫鉀0.5-0.6、過(guò)磷酸鈣0.6-0.7、納米級(jí)電氣石粉5.6-6、細(xì)菌納米纖維素6.2-6.5、適量的水。2.—種采用權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基制備榆黃菇液體菌種方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)、將一半納米級(jí)電氣石粉和水按照0.lg/L混合，通電激發(fā)制備無(wú)菌水備用；將魔芋葡甘聚糖、七水硫酸鎂、石膏、磷酸二氫鉀、過(guò)磷酸鈣的總量和無(wú)菌水按lg/L混合在30°C攪拌溶解得溶液一;將蛋白胨、葡萄糖、乳糖酸鈣、聚谷氨酸、蕓苔素、萘乙酸、維生素B1、維生素B2的總量和無(wú)菌水按2g/L混合攪拌溶解得溶液二;將紫莖澤蘭放入超微粉碎機(jī)中粉碎處理30min，和木醋液、海藻多糖一起放入鍋中加入總重量4倍的水小火文煮3h，之后過(guò)濾，得濾液和濾渣，將濾液、可溶性膨脹淀粉的總量和無(wú)菌水按250g/L混合攪拌，并在進(jìn)行98 °C進(jìn)行巴氏滅菌滅酶lOmin，得溶液三;將另一半納米電氣石粉和細(xì)菌納米纖維素以及總重量3-4倍的水混合攪拌均勻并采用高溫蒸汽滅菌，得溶液四備用； (2)、將溶液三保持20°C、溶液二保持25°C、溶液一保持30°C，先將溶液一加入到溶液二中混合攪拌均勻得復(fù)合液，在將該復(fù)合液加入到溶液三中混合攪拌均勻得營(yíng)養(yǎng)液，并調(diào)整pH，此后對(duì)該營(yíng)養(yǎng)液進(jìn)行通電激發(fā)處理30min得液體培養(yǎng)基備用； (3)、將榆黃菇母種在無(wú)菌環(huán)境中先接種到一半的液體培養(yǎng)基上進(jìn)行液體發(fā)酵，發(fā)酵條件為PH5.3-5.5、接種量11%、溫度26-28°C、搖床轉(zhuǎn)速190r/min、培養(yǎng)24-25h，得榆黃菇液體菌種一； (4)、將剩余一半的液體培養(yǎng)基以及溶液四無(wú)菌混合均勻，并將其總量與無(wú)菌水350g/L混合，高壓均質(zhì)之后，通電激化配合高溫再次滅菌，并放置到無(wú)菌培養(yǎng)瓶中，得復(fù)合培養(yǎng)基，將步驟(3)得到的榆黃菇液體菌種一按25%的接種量在無(wú)菌環(huán)境中接種到該培養(yǎng)瓶中，溫度24-24.5 °C、搖床轉(zhuǎn)速190r/min，培養(yǎng)30_32h即得。
【文檔編號(hào)】C12N1/22GK106011044SQ201610472449
【公開(kāi)日】2016年10月12日
【申請(qǐng)日】2016年6月27日
【發(fā)明人】柯家厚
【申請(qǐng)人】合肥福泉現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技有限公司