含有色酮結構的吡唑類n-苯基馬來酰亞胺衍生物及其制備方法與應用
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種3?（6?溴?4?氧?4H?色酮）?1,5? 二苯基?1,6a?二氫吡咯啉[3,4?c]吡唑?4,6（3aH,5H）?二酮及其制備方法與應用，該制備方法用1,3?偶極環(huán)加成方法在N?取代苯基馬來酰亞胺結構中引入吡唑環(huán)，與色酮衍生物反應導入色酮結構，從而合成一個新型的3?（6?溴?4?氧?4H?色酮）?1,5? 二苯基?1,6a?二氫吡咯啉[3,4?c]吡唑?4,6（3aH,5H）?二酮，上述化合物對于腫瘤細胞株具有良好的抑制作用，其中對于口腔癌細胞具有更好的抑制率和選擇性，在制備抗腫瘤藥物等方面，具有非常好的工業(yè)應用前景。
【專利說明】
含有色酮結構的吡唑類N-苯基馬來酰亞胺衍生物及其制備方 法與應用
技術領域：
[0001] 本發(fā)明涉及含有色酮結構的吡唑類N-苯基馬來酰亞胺衍生物，具體是指3-(6-溴- 4-氧-4H-色酮)-1，5-二苯基-1，6a-二氫吡咯啉[3，4-c ]吡唑-4，6 (3aH，5H)-二酮及其制備 方法與應用。
【背景技術】：
[0002] N-苯基馬來酰亞胺，化學名：1_苯基吡咯烷-2,5-二酮，化學結構式如下：
[0003]
]-苯基吡咯焼-2, 5-二顧
[0004] 1，3_偶極環(huán)加成反應以其良好的區(qū)域和主體選擇性而成為合成五元雜環(huán)化合物 最主要的方法，也是雜環(huán)藥物化學研究中較為活躍的一類反應。近幾年來，由于色酮廣泛的 生物活性，諸如抗癌、抗菌、抑制血小板凝聚等而倍受關注。所以，無論是從藥理學還是從合 成角度考慮，這類雜環(huán)化合物都有很高的合成價值。
[0005] 吡唑衍生物作為一類有用的中間體以及它們本身所顯示出來的多種藥物活性而 受到人們的廣泛關注。本發(fā)明通過研究不同雜環(huán)在同一分子中聚集而對藥理活性所產生的 影響，從而提供一種全新的含有色酮結構的吡唑類N-苯基馬來酰亞胺衍生物。

【發(fā)明內容】
：
[0006] 本發(fā)明的第一方面目的是提供一種新的含有色酮結構的吡唑類N-苯基馬來酰亞 胺衍生物。
[0007] 本發(fā)明采取的技術方案如下：
[0008] -種含有色酮結構的吡唑類N-苯基馬來酰亞胺衍生物，其化學名稱為：3-(6-溴_ 4-氧-4H-色酮)-1,5-二苯基-l，6a-二氫吡咯啉[3,4-c]吡唑-4,6(3aH，5H)_二酮，其結構式 如下：
[0009]
[0010]該化合物相關實驗數據如下：
[0011]
[0012]
【申請人】通過研究發(fā)現:在N-苯基馬來酰亞胺引入五元吡唑環(huán)的基礎上再導入了色 酮的結構，獲得了一種全新的含有色酮結構的吡唑類N-苯基馬來酰亞胺衍生物，該化合物 可以改變藥理活性。
[0013] 本發(fā)明的第二方面目的是提供一種上述含有色酮結構的吡唑類N-苯基馬來酰亞 胺衍生物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟:將順丁烯二酸酐和苯胺反應合成N-苯基 馬來酰亞胺（3)，然后采用6-溴代色酮與苯肼脫水反應合成6-溴代色酮苯腙(4)，最后將N-苯基馬來酰亞胺和6-溴代色酮苯腙進行偶極環(huán)加成反應，合成含有色酮結構的吡唑類N-苯 基馬來酰亞胺衍生物(5)，即3-(6-溴-4-氧-4H-色酮)-1，5_二苯基-l，6a-二氫吡咯啉[3,4_ c]吡唑-4,6(3aH，5H)_ 二酮。
[0014] 本發(fā)明涉及的反應方程式如下：
[0015]
[0016]進一步的，所述的一種含有色酮結構的吡唑類N-苯基馬來酰亞胺衍生物的制備方 法，其特征在于，包括以下步驟：
[0017] (1)、N-苯基馬來酰亞胺的合成：
[0018] 將順丁烯二酸酐和苯胺溶解于丙酮溶劑中，攪拌下反應，并逐步產生淡黃色沉淀， 室溫反應2小時后，依次加入醋酸錳、三乙胺和醋酐，升溫后，沉淀逐步溶解，在50~60°C下 反應2小時，溶液由橙黃變成紅黑，逐漸出現新的沉淀即N-苯基馬來酰亞胺（3)，冷卻至室 溫，沉淀經水洗、干燥，用丙酮重結晶得到產物N-苯基馬來酰亞胺(3);
[0019] (2)、6_溴代色酮苯腙的合成：
[0020] 所述的6-溴代色酮苯腙(4)為已知化合物，CAS號為68287-82-1，本發(fā)明采用6-溴 代色酮與苯肼脫水反應生成席夫堿的方法進行合成:取2mmol的苯肼加入盛有10mL四氫呋 喃的燒瓶中，加熱回流攪拌至溶解，然后緩慢滴加入20mL溶有2mmo 1 6-溴代色酮的無水乙 醇溶液，繼續(xù)回流攪拌lh，滴加10滴鹽酸，有淡黃色沉淀出現，連續(xù)加熱回流攪拌5h，停止加 熱，冷卻至室溫后加人20mL蒸餾水攪拌，淡黃色沉淀顏色變深，抽濾得6-溴代色酮苯腙(4)， 黃紅色針狀產物;用無水乙醚沖洗多次，真空干燥得產物6-溴代色酮苯腙(4);
[0021] (3)、導入色酮結構：
[0022] 將N-苯基馬來酰亞胺和6-溴代色酮苯腙溶于無水乙醇中，加入氯胺T，回流12小 時，進行1，3-偶極環(huán)加成加成反應，導入色酮和吡唑結構，用甲醇再結晶，真空干燥得到化 合物(5)。
[0023]更進一步的設置在于：
[0024]所述的步驟(1)中，反應得到的淡黃色沉淀需進行減壓過濾。
[0025]本發(fā)明的第三方面目的是提供一種前述含有色酮結構的吡唑類N-苯基馬來酰亞 胺衍生物在制備抗腫瘤藥物方面的應用。通過實驗驗證:上述化合物，對于不同瘤株如人肝 癌細胞、口腔癌細胞、胃癌細胞、卵巢癌細胞、白血病細胞、腸癌細胞等，均具有抑制作用，其 中對于KB(口腔癌細胞)具有更佳的抑制率和選擇性，可單獨制備抗腫瘤藥物、也可以作為 活性成分與其他抗腫瘤藥物制備抗腫瘤組合物，具有非常好的工業(yè)應用前景。
[0026]本發(fā)明的有益效果如下：
[0027]本
【申請人】經研究發(fā)現，在N-苯基馬來酰亞胺引入五元吡唑環(huán)的基礎上再導入色酮 的結構，可以改變藥理活性，經進一步實驗及分析，研究不同雜環(huán)在同一分子中聚集而對藥 理活性所產生的影響，
【申請人】通過偶極環(huán)加成反應合成了含有色酮結構的吡唑類N-苯基馬 來酰亞胺衍生物，該方法制備的新型含色酮結構吡唑類N-苯基馬來酰亞胺衍生物，在制備 抗腫瘤藥物方面，具有非常好的工業(yè)應用前景。
【具體實施方式】：
[0028]以下結合實施例對本發(fā)明做進一步描述，但實施例不應解釋為限定本發(fā)明的范 圍。
[0029]實施例1:N-苯基馬來酰亞胺的合成：
[0030] 將順丁烯二酸酐和苯胺溶解于一定量的丙酮溶劑中，在攪拌下將苯胺溶液滴加至 含有順丁烯二酸酐溶液的反應瓶，反應放熱并逐步產生淡黃色沉淀，室溫反應2小時后，依 次加入醋酸錳、三乙胺和醋酐，升溫后，沉淀逐步溶解，在50~60°C下反應2小時，溶液由橙 黃變成紅黑，逐漸出現新的沉淀即化合物（3)，冷卻至室溫，水中沉淀經大量水洗、干燥，用 丙酮重結晶得到產物N-苯基馬來酰亞胺(3);
[0031] 實施例2:6_溴代色酮苯腙的合成：
[0032]采用6-溴代色酮與苯肼脫水反應生成席夫堿的方法：取2mmol的苯肼加入盛有 1 OmL四氫呋喃的燒瓶中，加熱回流攪拌至溶解，然后緩慢滴加入20mL溶有2mmo 1 6-溴代色 酮的無水乙醇溶液，繼續(xù)回流攪拌lh，滴加10滴鹽酸，有淡黃色沉淀出現。連續(xù)加熱回流攪 拌5h，停止加熱，冷卻至室溫后加人20mL蒸餾水攪拌，淡黃色沉淀顏色變深，抽濾得6-溴代 色酮苯腙，黃紅色針狀產物。用無水乙醚沖洗多次，真空干燥得產物6-溴代色酮苯腙(4); [0033] 實施例3:3-(6-溴-4-氧-4H-色酮）-l，5-二苯基-l，6a-二氫吡咯啉[3,4-c]吡唑-4,6(3aH，5H)-二酮的合成：將lmmolN-苯基馬來酰亞胺和l.lmmol6-溴代色酮苯腙于20mL 乙醇中，再加入1.2mL氯胺T，回流12小時。將沉淀過濾，95%乙醇清洗，用甲醇再結晶，真空 干燥后得到產物。產物為黃色結晶，產率44.3 %，產物經檢測：分子式為C26H16BrN3〇4，名稱 為 ：3-(6-溴-4-氧-紐-色酮）-1，5-二苯基-1，6&-二氫吡咯啉[3,4-(3]吡唑-4,6(33!1，5!〇-二 酮（化合物 5)，m.p.l39.5-141°C。
[0034] 結構確認：
[0035] 咕匪1?(0150)3:7.288-7.492(111，13!1，八『-!1)，6.47(8，1!1，〇 = (：-!1)，5.82((1，了 = 1010Hz, 1H), 5.34(d,J = 1014Hz, 1H)
[0036] IR 3457(N-C = 0) ,3085(ArH), 1720(C = 0), 1575(C = N), 1293(C-〇-C)cm_1
[0037] m/e :513.03( 100.0% ), 515.03(97.6% )〇
[0038] Anal.calcd.for C26Hi6BrN3〇4:C，60.72;H，3.16;N，8.15 〇
[0039] 應用實施例4:采用MTT法檢測受試化合物對不同瘤株的的抗腫瘤活性。
[0040] 將上述實施例制備的化合物（5)，分別以不同瘤株（腫瘤細胞Bel-7402、KB、 SGC7901、H08901、HL-60、ECA109)為實驗對象，測試化合物（5)對于不同瘤株的體外抑制作 用:實驗采用四甲基偶氮唑鹽微量酶反應比色法(MTT法），活性用半數抑制濃度表示（IC 50)。 [0041 ]具體實驗步驟如下：
[0042]將化合物5用DMS0溶解，稀釋，腫瘤細胞Bel-7402(人肝癌細胞）、KB(口腔癌細胞）、 SGC7901(胃癌細胞）、H08901 (卵巢癌細胞）、HL-60(白血病細胞）、ECA109(腸癌細胞)在96孔 板上種入4000個/200yL/孔，每孔加入化合物2yL，終濃度為12. ΟμΜ，6. ΟμΜ，3. ΟμΜ，1.5μΜ，共 同于37°C、5 %C02細胞培養(yǎng)箱中孵育72小時，以DMS0(1 % )為空白對照。72小時后，加入終濃 度為0.25mg/mL的MTT，置于37 °C、5 % C02細胞培養(yǎng)箱中4小時，之后吸干溶劑，每孔加入100μ 1 DMS0,用酶聯免疫儀于570nm處測定吸光度(0D值），所得數據用于計算IC5〇值。
[0043]不同濃度的受試化合物用96孔板進行粗篩，根據所得的抑制率，計算IC5Q值，結果 見下表。
[0044]表1、含色酮結構吡唑類N-苯基馬來酰亞胺衍生物對六種腫瘤細胞株的IC5〇值。
[0045]
[0046] 通過上表數據可以看出：本發(fā)明制備的化合物，對于六種腫瘤細胞株均具有抑制 作用，其中對于KB(口腔癌細胞)具有更好的抑制率和選擇性，可以單獨制備抗腫瘤藥物、也 可以作為活性成分與其他抗腫瘤藥物制備抗腫瘤組合物，具有非常好的工業(yè)應用前景。
【主權項】
1.3-(6-漠-4-氧-4H-色酬）-l，5-二苯基-l，6a-二氨化咯嘟[3,4-c]化挫-4,6(3aH， 甜)-二酬，其結構式如下，2. - 種 3-(6-漠-4-氧-4H-色酬）-1,5-二苯基-1，6a-二氨化咯嘟[3,4-C]化挫-4,6 (3aH，5H)-二酬的制備方法，其特征在于，包括W下步驟:將順下締二酸酢和苯胺反應合成 N-苯基馬來酷亞胺，然后采用6-漠代色酬與苯阱脫水反應合成6-漠代色酬苯腺，最后將N- 苯基馬來酷亞胺和6-漠代色酬苯腺進行偶極環(huán)加成反應，合成3-(6-漠-4-氧-4H-色酬)-1， 5-二苯基-1，6a-二氨化咯嘟[3，4-C ]化挫-4，6 (3aH，甜)-二酬。3. 根據權利要求2所述的一種3-(6-漠-4-氧-4H-色酬)-1,5-二苯基-l，6a-二氨化咯嘟 [3,4-c]化挫-4,6(3aH，甜)-二酬的制備方法，其特征在于，包括W下步驟： (1) 、N-苯基馬來酷亞胺的合成： 將順下締二酸酢和苯胺溶解于丙酬溶劑中，攬拌下反應，并逐步產生淡黃色沉淀，室溫 反應2小時后，依次加入醋酸儘、=乙胺和醋酢，升溫后，沉淀逐步溶解，在50~60°C下反應2 小時，溶液由澄黃變成紅黑，逐漸出現新的沉淀即N-苯基馬來酷亞胺，冷卻至室溫，沉淀經 水洗、干燥，用丙酬重結晶得到產物N-苯基馬來酷亞胺； (2) 、6-漠代色酬苯腺的合成： 取2mmol的苯阱加入盛有IOmL四氨巧喃的燒瓶中，加熱回流攬拌至溶解，然后緩慢滴加 入20mL溶有2mmo 1 6-漠代色酬的無水乙醇溶液，繼續(xù)回流攬拌比，滴加10滴鹽酸，有淡黃色 沉淀出現，連續(xù)加熱回流攬拌化，停止加熱，冷卻至室溫后加人20mL蒸饋水攬拌，淡黃色沉 淀顏色變深，抽濾得6-漠代色酬苯腺，黃紅色針狀產物；用無水乙酸沖洗多次，真空干燥得 產物6-漠代色酬苯腺； (3) 、導入色酬結構： 將N-苯基馬來酷亞胺和6-漠代色酬苯腺溶于無水乙醇中，加入氯胺T，回流12小時，進 行1，3-偶極環(huán)加成加成反應，導入色酬和化挫結構，用甲醇再結晶，真空干燥得到3-(6-漠- 4-氧-4H-色酬)-1，5-二苯基-1，6a-二氨化咯嘟[3，4-C ]化挫-4，6 (3aH，甜)-二酬。4. 根據權利要求3所述的一種3-(6-漠-4-氧-4H-色酬)-1,5-二苯基-l，6a-二氨化咯嘟 [3,4-c]化挫-4,6(3aH，5H)-二酬的制備方法，其特征在于:所述的步驟（1)中，反應得到的 淡黃色沉淀需進行減壓過濾。5. -種權利要求1所述化合物在制備抗腫瘤藥物方面的應用。
【文檔編號】C07D487/04GK105906633SQ201610279071
【公開日】2016年8月31日
【申請日】2016年4月29日
【發(fā)明人】鄧莉平, 王瑋, 陳國慶, 胡純琦, 吳春雷, 莫憶偉, 李琰
【申請人】紹興文理學院