類球紅細(xì)菌k73菌株及其在地表水體生態(tài)凈化中的應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明涉及微生物應(yīng)用領(lǐng)域，具體而言，涉及一株可用于地表水生態(tài)凈化的細(xì)菌菌株及含有該菌株細(xì)菌的菌劑和應(yīng)用。本發(fā)明提供了一株細(xì)菌菌株，所述菌株為類球紅細(xì)菌K73，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為：CGMCC NO.12310；保藏時間為：2016年3月28日。該菌株可以有效地降低水體中的氮和磷等物質(zhì)含量、明顯提高水體透明度，達(dá)到提高水體水質(zhì)的技術(shù)效果。與傳統(tǒng)的基于動植物的水體生態(tài)凈化技術(shù)相比，該菌株的使用以及管理方式更為簡單；與傳統(tǒng)的基于微生物菌劑的水質(zhì)凈化技術(shù)相比，該菌株的生態(tài)凈化效果更加明顯；與傳統(tǒng)的物理或化學(xué)方面的處理手段相比，其沒有生態(tài)副作用，而且凈化成本低。CGMCC No.1231020160328
【專利說明】
類球紅細(xì)菌K73菌株及其在地表水體生態(tài)凈化中的應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001 ]本發(fā)明涉及微生物應(yīng)用領(lǐng)域，具體而言，涉及一株類球紅細(xì)菌K73菌株及其在地表 水體生態(tài)凈化中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 在完成截污納管和雨污分流的地區(qū)，因為大氣降塵和面源污染等原因，地表水體 也經(jīng)常處于一個發(fā)黃發(fā)綠甚至發(fā)黑發(fā)臭的狀態(tài)。
[0003] 為了保持一個好的水環(huán)境，各種水處理技術(shù)都在發(fā)展和使用，其中人為構(gòu)建以水 生動植物為主體的水體生態(tài)系統(tǒng)來凈化水質(zhì)是比較流行的一種形式，得到了比較普遍的應(yīng) 用。然而，以水體動植物為主的生態(tài)凈化手段有費用低、綠色環(huán)保等優(yōu)點，但維護(hù)管理比較 麻煩、受氣候影響比較大、凈化能力較弱、抗水質(zhì)波動能力較低。
[0004] 另外，針對地表水的凈化技術(shù)，也有一些物理或化學(xué)方面的處理手段，比如過濾、 吸附、絮凝等。但是該幾種方法(過濾、吸附以及絮凝)都難以在一個稍微長的時間內(nèi)保持比 較好的凈化效果，而且該幾種技術(shù)費用往往比較高，并存在一些副作用。此外，對于一些富 含氮、磷的水體，其非常容易由于水體富營養(yǎng)化而導(dǎo)致藻類爆發(fā)性生長，采用常規(guī)的物化法 雖然可以對水體中懸浮有機(jī)物等具有較好的去除效果，但是，對溶解性有機(jī)物的去除率卻 很低，難以有效地降低水中有機(jī)物污染。
[0005] 有鑒于此，特提出本發(fā)明。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 基于現(xiàn)有技術(shù)中，水體凈化所存在的凈化成本高、水體污染物難去除等問題，本發(fā) 明的第一目的在于提供一株能夠有效凈化地表水的新菌株，該菌株可以有效地利用水體中 的動物排泄物、動植物殘骸的分解產(chǎn)物以及其他懸浮或溶解于水的污染物，進(jìn)而有效地分 解或去除水體中的污染物，達(dá)到降低水體中的氮和磷濃度、明顯改善水體的透明度的技術(shù) 效果。
[0007] 本發(fā)明的第二目的在于提供一種含有該菌株的微生物菌劑，從而使得該菌株在水 體凈化的應(yīng)用更加方便和有效。
[0008] 本發(fā)明的第三目的在于提供上述微生物菌劑的制備方法，該制備方法中，通過將 菌株菌種逐步放大操作從而實現(xiàn)微生物菌株的制備，制備方法簡單易行，而且由于培養(yǎng)液 選擇合理，所獲的菌劑活菌數(shù)高，并且所獲的微生物菌劑還可短時間保存，并方便運輸。
[0009] 本發(fā)明的第四目的在于提供上述微生物菌株以及菌劑的用途，用于克服水體富營 養(yǎng)化和提高水質(zhì)，尤其可用于透明度較差的水體凈化中，效果非常顯著。
[0010] 為了實現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，特采用以下技術(shù)方案：
[0011] -株可用于水體凈化的新菌株，所述菌株為類球紅細(xì)菌K73,保藏于中國微生物菌 種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為= CGMCC NO. 12310;保藏時間為:2016年3月 28日。
[0012] 該菌種拉丁學(xué)名為Rhodobacter sphaeroides，中文學(xué)名為類球紅細(xì)菌，菌株名為 K73,來源于北京小清河河底淤泥中。
[0013] 經(jīng)過鑒定，該類球紅細(xì)菌屬于變形菌門α變形菌綱紅細(xì)菌目紅細(xì)菌科紅細(xì)菌屬細(xì) 菌，其具有廣泛的能量代謝機(jī)制，在光照條件下能光合作用，在黑暗條件下好氧生長;可充 分利用水體中的動物排泄物、動植物殘骸的分解產(chǎn)物以及其他懸浮或溶解于水的污染物， 從而達(dá)到去除水中污染物、提高水質(zhì)的效果。通過該菌株，可實現(xiàn)對水體進(jìn)行微生物凈化的 處理效果，其來源知悉后，后續(xù)擴(kuò)大培養(yǎng)的方式簡單，并在應(yīng)用的過程中，將制備的菌劑施 加到待處理的水體中即可，其去磷效果比較明顯，更為關(guān)鍵的是，其提高水體透明度的效果 非常明顯。
[0014]與傳統(tǒng)的基于動植物的水體生態(tài)凈化技術(shù)相比，該菌株的使用以及管理方式更為 簡單;與傳統(tǒng)的基于微生物菌劑的水質(zhì)凈化技術(shù)相比，該菌株的生態(tài)凈化效果更加明顯;與 傳統(tǒng)的物理或化學(xué)方面的處理手段相比，其沒有生態(tài)副作用，而且凈化成本低。
[0015] 上述的經(jīng)過分離純化的類球紅細(xì)菌，其單個細(xì)胞為放線狀，在光照厭氧、黑暗好氧 及微好氧條件均能生長，液體培養(yǎng)物由最初的淺黃色變?yōu)樽丶t色，瓶底和瓶壁出現(xiàn)少量的 棕紅色沉淀物，在固體培養(yǎng)基上形成2-3_的點狀菌落、邊緣整齊。
[0016] 另外，對于該菌株，經(jīng)過純化后測序，其16S rRNA基因序列如SEQ ID NO: 1所示。含 有該序列的經(jīng)過純化的培養(yǎng)物，其與相同的種間微生物細(xì)菌相比，其可以實現(xiàn)水體的凈化 效果，尤其是對提高水體透明度有非常高的應(yīng)用效果。
[0017] 含有所述的水體凈化菌株的微生物菌劑也屬于本申請要求保護(hù)的范圍。對于該菌 株而言，是只要能夠加入到需要凈化的水體即可發(fā)揮凈化的效果。然而在實際應(yīng)用的過程 中，考慮到其可能需要運輸?shù)仍颍斜匾獙⑵鋽U(kuò)大培養(yǎng)制成微生物菌劑的形式以擴(kuò)大其 應(yīng)用范圍。
[0018] 上述的微生物菌菌劑，優(yōu)選為液體菌劑，該液體菌劑中，培養(yǎng)液可優(yōu)選為LB液體培 養(yǎng)基、或者進(jìn)一步添加葡萄糖、硫胺素、生物素和煙酸等營養(yǎng)物。
[0019] 對于該微生物菌劑而言，通過適宜的培養(yǎng)液擴(kuò)大培養(yǎng)后即可得到微生物菌劑。更 為優(yōu)選的，在微生物菌劑(一般為液態(tài)）中，為了保證水體凈化的效果，以實現(xiàn)良好的降低氮 磷等元素以及提高水體透明度的效果，活菌的數(shù)量優(yōu)選為IX IOltwiCFUAilt3
[0020] 本發(fā)明基于上述的液態(tài)微生物菌劑提供了一種制備方法，包括如下步驟：
[0021 ] 1 )、將含有所述類球紅細(xì)菌的菌種接種于LB液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，得到培養(yǎng)液；
[0022] 2)、將所述培養(yǎng)液中的細(xì)菌培養(yǎng)物過濾濃縮，得到液體菌劑。
[0023] 該方法中，將類球紅細(xì)菌的菌種接入LB培養(yǎng)基培養(yǎng)獲得菌液，再將菌液進(jìn)行擴(kuò)大 培養(yǎng)，再經(jīng)過濃縮即可獲得。整個微生物菌劑的制備方法簡單，可以短時間保存和方便運 輸，使用的時候直接以一定的比例添加到待凈化的水體中，使用非常方便。
[0024] 需要注意的是，在保存和運輸?shù)倪^程中，為了保證菌液中細(xì)菌的存活，應(yīng)盡量減少 保存和運輸?shù)臅r間，且避免高溫和日曬。
[0025]此外，具體的，對于上述的LB液體培養(yǎng)基，其組成如下：蛋白胨10g/L、酵母粉5g/L、 氯化鈉5-10g/L，pH 7.0左右，使用前進(jìn)行滅菌操作，以防止雜菌污染。
[0026] 優(yōu)選的，對于上述的制備方法，優(yōu)選的，在步驟1)和步驟2)中，其制備方法可包括：
[0027] 將該菌株菌種接種至LB液體培養(yǎng)基獲得菌液，然后將獲得的菌液再次接入LB液體 培養(yǎng)基中進(jìn)行放大培養(yǎng)即得;且，以體積百分比計，所述菌液接種量為5-10%。
[0028] 在擴(kuò)大培養(yǎng)的過程中（即步驟1的操作），為了快速有效地實現(xiàn)菌體的大量增殖，優(yōu) 選的，在步驟1)中，所述培養(yǎng)具體包括:將接種有菌液的LB液體培養(yǎng)基攪拌并曝氣，并于28-32 °C培養(yǎng)48-72小時。
[0029] 通過不斷的攪拌以及曝氣的操作，從而增大菌體與空氣的接觸面積，以保證菌體 能夠快速高效繁殖。另外，再通過28-32°C培養(yǎng)48-72小時，即可達(dá)到菌體增殖的峰值，此時 的培養(yǎng)液中含有大量的活菌體，在進(jìn)行后續(xù)培養(yǎng)，活菌數(shù)基本不再增加，因此綜合考量時間 成本、培養(yǎng)效率之后，確定28-32 °C培養(yǎng)48-72小時的培養(yǎng)條件。
[0030] 通過步驟1)的操作后，需要對細(xì)菌培養(yǎng)物進(jìn)行過濾濃縮處理；優(yōu)選的，在步驟2) 中，過濾濃縮的過程中采用400目的濾網(wǎng)進(jìn)行。因所濾出的細(xì)菌因容易脫水死亡、不方便保 存，所以應(yīng)將濾出的細(xì)菌洗入適量LB培養(yǎng)基中保存。
[0031] 通過上述的操作之后，細(xì)菌培養(yǎng)物被濃縮以減小體積來方便保存和運輸，同時也 減少了使用時投放至水體中的培養(yǎng)基營養(yǎng)物。制成的菌劑中活菌含量相應(yīng)較高，其可以直 接應(yīng)用，也可以在使用時應(yīng)采用待處理水體中的地表水進(jìn)行稀釋再應(yīng)用。
[0032] 可選的，所述微生物菌劑為固體菌劑，所述固體菌劑由所述類球紅細(xì)菌附加固態(tài) 載體制備而成。
[0033] 可選的，所述固態(tài)載體包括滑石粉、細(xì)沙以及粘土中的一種或多種;其中以滑石粉 作為優(yōu)選載體。
[0034] -種所述的微生物菌劑的制備方法，包括以下步驟：
[0035] 將經(jīng)過純化后得到的所述類球紅細(xì)菌混于固態(tài)載體中既得。
[0036] 所述的細(xì)菌菌株在作為地表水體凈化菌株中的應(yīng)用；優(yōu)選的，所述地表水體為透 明度較低的水體。
[0037] 所述的微生物菌劑在凈化地表水體中的應(yīng)用;優(yōu)選的，所述地表水體為透明度較 低的水體。
[0038] 在應(yīng)用的過程中，需要將該液體菌劑經(jīng)過稀釋或者直接潑灑到需要生態(tài)凈化的地 表水中，以實現(xiàn)水體凈化的效果。
[0039] 鑒于上述的菌劑其在降低水體中磷含量以及提高水體透明度（即降低水體濁度） 等方面具有非常好的應(yīng)用效果，優(yōu)選的，所凈化的水體為磷含量較高的水體或者透明度較 低的水體。
[0040] 另外，在具體使用的過程中，可選的，將液體菌劑按一定比例稀釋到一定體積的地 表水中，然后投放或潑灑到需要生態(tài)凈化的地表水中，以方便投放或潑灑均勻。
[0041] 在使用過程中，該菌劑的使用量的選擇可根據(jù)水體的污染程度適應(yīng)選擇，如可以 選擇原培養(yǎng)液體積:待處理水體體積為千分之一的比例加入到待凈化的水體中。
[0042]另外，在應(yīng)用的過程中，優(yōu)選在待凈化水體中的水生植物已經(jīng)種植完畢但水生動 物尚未投放的時機(jī)進(jìn)行噴灑菌液。也可以在氣溫驟然升高、日照驟然加強(qiáng)的時間進(jìn)行投放 菌液以避免藻華發(fā)生;且出于強(qiáng)化效果的目的，可以多次潑灑，也可以在待凈化的水體中增 加曝氣裝置以促進(jìn)細(xì)菌的水質(zhì)凈化效果。所潑灑的細(xì)菌在水體生態(tài)系統(tǒng)中匯入正常的水體 物質(zhì)和能量流動和循環(huán)，不需要回收和控制手段。
[0043]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果為：
[0044] 1)、提供了一株可應(yīng)用于地表水體凈化的菌株，該菌株具有較為寬泛的生長條件， 可有效地實現(xiàn)水體凈化的目的，為地表水體的凈化提供了一種新的途徑。
[0045] 2)、該菌株具有廣泛的能量代謝機(jī)制，在光照條件下能光合作用，在黑暗條件下好 氧生長;可充分利用水體中的污染物質(zhì)來生長，具有良好的水體凈化效果，尤其適合降低水 體的磷含量，可有效地提高水體的透明度。
[0046] 3)、本發(fā)明提供的以類球紅細(xì)菌或者其菌液凈化水體的方式，其與傳統(tǒng)的基于動 植物的水體生態(tài)凈化技術(shù)相比，該菌株的使用以及管理方式更為簡單;與傳統(tǒng)的基于微生 物菌劑的水質(zhì)凈化技術(shù)相比，該菌株的生態(tài)凈化效果更加明顯；與傳統(tǒng)的物理或化學(xué)方面 的處理手段相比，其沒有生態(tài)副作用，而且凈化成本低。
[0047] 4)、該類球紅細(xì)菌在擴(kuò)大培養(yǎng)的過程中，所用的培養(yǎng)基成分簡單，而且生長條件易 于控制，因此非常易于實現(xiàn)菌劑的制備，為其大規(guī)模地應(yīng)用到水體凈化領(lǐng)域中提供了基礎(chǔ)。 [0048] 本申請?zhí)峁┑念惽蚣t細(xì)菌(Rhodobacter sphaeroides)，菌株名為K73,保藏于中 國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏地址為:北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院 3號，中國科學(xué)院微生物研究所;保藏時間為:2016年3月28日，保藏編號CGMCC NO. 12310。經(jīng) 保藏中心于2016年3月28日檢測為存活菌株。
【具體實施方式】
[0049]下面將結(jié)合實施例對本發(fā)明的實施方案進(jìn)行詳細(xì)描述，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員將會 理解，下列實施例僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)視為限制本發(fā)明的范圍。實施例中未注明具體 條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為 可以通過市售購買獲得的常規(guī)產(chǎn)品。
[0050] 實施例1
[0051] 本實施例提供了一種含有水體凈化菌株的微生物菌劑及其制備方法，該方法包括 如下步驟：
[0052] Sll:將類球紅細(xì)菌菌種加入少量LB液體培養(yǎng)基中于28°C培養(yǎng)60小時獲得菌液。將 獲得的菌液以5%的體積比接種于LB液體培養(yǎng)基中于28°C培養(yǎng)60小時，得到放大培養(yǎng)液； [0053] S12:將放大培養(yǎng)液采用400目的濾網(wǎng)過濾，并將濾得的菌洗入適量LB液體培養(yǎng)基 中，得到液體菌劑。
[0054]其中，所述及到的LB液體培養(yǎng)基含有蛋白胨10g/L、酵母粉5g/L、氯化鈉 5-10g/L， pH 7.0,使用前均進(jìn)行滅菌處理。
[0055] 實施例2
[0056] 本實施例提供了含有水體凈化菌株的微生物菌劑及其制備方法，該方法包括如下 步驟：
[0057] S21:類球紅細(xì)菌的分離純化；
[0058] 具體的，在該步驟中，以北京小清河的河底淤泥為樣本，將所取的樣本進(jìn)行梯度稀 釋后涂平板培養(yǎng)，其中所用培養(yǎng)基為固態(tài)的LB培養(yǎng)基;最后收集經(jīng)過培養(yǎng)后得到的單菌落， 得到類球紅細(xì)菌。
[0059] 對于所收集得到的類球紅細(xì)菌，采用常規(guī)方法擴(kuò)增其16srRNA，并進(jìn)行測序，其序 列如SEQ ID NO: 1所示。
[0060] S22:分離純化后的類球紅細(xì)菌制成菌液；
[0061] 在S22步驟中，將S21步驟中分離純化后的單菌落接入少量到LB液體培養(yǎng)基中于 25-30°C下培養(yǎng)，即得菌液。
[0062] S23:將含有類球紅細(xì)菌的菌液以8 %的體積比接種于LB液體培養(yǎng)基中，攪拌并曝 氣，且于30 °C培養(yǎng)60小時，得到培養(yǎng)液。
[0063] S24:將所述培養(yǎng)液采用400目的濾網(wǎng)過濾，并將濾得的菌洗入LB液體培養(yǎng)基中，得 微生物菌劑。
[0064] 該步驟中，所用的LB液體培養(yǎng)基的體積為步驟中S22中所用LB液體培養(yǎng)基體積的 10%〇
[0065]其中，所述及到的LB液體培養(yǎng)基含有蛋白胨10g/L、酵母粉5g/L、氯化鈉 5-10g/L， pH 7.0,使用前于121°C高壓蒸汽滅菌。
[0066] 實施例3
[0067] 本實施例提供了一種含有水體凈化菌株的微生物菌劑及其制備方法，該方法包括 如下步驟：
[0068] S31:將分離純化后的類球紅細(xì)菌制成菌液；
[0069] 在S31步驟中，所用到的單菌落為實施例2中步驟S21提供；
[0070] 將S21步驟中分離純化后的單菌落接入到少量LB液體培養(yǎng)基中于28-30°C下?lián)u瓶 培養(yǎng)60小時，即得菌液。
[0071 ] S32:將含有類球紅細(xì)菌的菌液以6 %的體積比接種于LB液體培養(yǎng)基中于32 °C培養(yǎng) 65小時，得到培養(yǎng)液；
[0072] S33:將所述培養(yǎng)液采用400目的濾網(wǎng)過濾，并將濾得的菌洗入LB液體培養(yǎng)基中，得 微生物菌劑。
[0073]其中，所述及到的LB液體培養(yǎng)基含有蛋白胨10g/L、酵母粉5g/L、氯化鈉 5-10g/L， pH 7.0,使用前均進(jìn)行滅菌處理。
[0074] 實施例4
[0075] 本實施例提供了一種含有水體凈化菌株的微生物菌劑及其制備方法，該方法包括 如下步驟：
[0076] S41:將分離純化后的類球紅細(xì)菌制成菌液；
[0077]在S41步驟中，所用到的單菌落為實施例2中步驟S21提供；
[0078]將S21步驟中分離純化后的單菌落接入到少量LB液體培養(yǎng)基中于25-28Γ下培養(yǎng) 60小時，即得菌液。
[0079] S42:將含有類球紅細(xì)菌的菌液以7 %的體積比接種于LB液體培養(yǎng)基中于30 °C培養(yǎng) 65小時，得到培養(yǎng)液；
[0080] S43:將所述培養(yǎng)液采用400目的濾網(wǎng)過濾，并將篩得的菌洗入LB液體培養(yǎng)基中，得 微生物菌劑。
[0081 ]該步驟中，所用的LB液體培養(yǎng)基的體積為步驟中S42中所用LB液體培養(yǎng)基體積的 10%〇
[0082]其中，所述及到的LB液體培養(yǎng)基含有蛋白胨10g/L、酵母粉5g/L、氯化鈉 5-10g/L， pH 7.0,使用前均進(jìn)行滅菌處理。
[0083] 實施例5
[0084] 本實施例提供了一種含有水體凈化菌株的微生物菌劑及其制備方法，該方法包括 如下步驟：
[0085] S51:將分離純化后的類球紅細(xì)菌制成菌液；
[0086]在S51步驟中，所用到的單菌落為實施例2中步驟S21提供；
[0087]將S21步驟中分離純化后的單菌落接入到少量LB液體培養(yǎng)基中于26-28Γ下?lián)u瓶 培養(yǎng)，即得菌液。
[0088] S52:將含有類球紅細(xì)菌的菌液以9 %的體積比接種于LB液體培養(yǎng)基中于32 °C培養(yǎng) 70小時，得到培養(yǎng)液。
[0089] S53:將所述培養(yǎng)液采用450目的濾網(wǎng)過濾，并將篩得的菌洗入LB液體培養(yǎng)基中，得 微生物菌劑。
[0090] 該步驟中，所用的LB液體培養(yǎng)基的體積為步驟中S52中所用LB液體培養(yǎng)基體積的 8%〇
[0091] 其中，所述及到的LB液體培養(yǎng)基含有蛋白胨10g/L、酵母粉5g/L、氯化鈉5-10g/L， pH 7.0,使用前均進(jìn)行滅菌處理。
[0092] 實施例6
[0093] 本實施例提供了一種含有水體凈化菌株的微生物菌劑及其制備方法，該方法包括 如下步驟：
[0094] S61:將分離純化后的類球紅細(xì)菌制成菌液；
[0095] 在S61步驟中，所用到的單菌落為實施例2中步驟S21提供；
[0096]將S21步驟中分離純化后的單菌落接入到少量LB液體培養(yǎng)基中于28 °C下?lián)u瓶培 養(yǎng)，即得菌液。
[0097] S62:將含有類球紅細(xì)菌的菌液以10 %的體積比接種于LB液體培養(yǎng)基中于30 °C培 養(yǎng)72小時，得到培養(yǎng)液。
[0098] S63:將所述培養(yǎng)液采用400目的篩網(wǎng)過濾，并將篩得的菌洗入LB液體培養(yǎng)基中，得 微生物菌劑。
[0099] 該步驟中，所用的LB液體培養(yǎng)基的體積為步驟中S62中所用LB液體培養(yǎng)基體積的 6% 〇
[0100]其中，所述及到的LB液體培養(yǎng)基含有蛋白胨10g/L、酵母粉5g/L、氯化鈉5-10g/L， pH 7.0,使用前均進(jìn)行滅菌處理。
[0101] 需要強(qiáng)調(diào)的是，在上述實施例中，過濾后再加入少量的LB液體培養(yǎng)基培養(yǎng)的目的 是為了方便保存。
[0102] 實施例7
[0103] 本實施例提供了一種固體菌劑及其制備方法，具體包括以下步驟：
[0104] 將上述實施例2制成的液體菌劑按照每1千克液體菌劑配20克滑石粉(作為固體載 體)的比例加入至滑石粉中充分?jǐn)嚢杌靹?，過濾、干燥、粉碎，即得固體菌劑。
[0105] 實施例8
[0106] 本實施例中，制備操作同實施例7，與實施例7不同的是，在本實施例中，所用的固 體載體為滑石粉、細(xì)沙以及粘土等比例的混合物。
[0107] 實驗例I
[0108] 將實施例2中所制成的微生物菌劑作為實驗菌劑進(jìn)行應(yīng)用(具體的，所制成的液體 菌液以千分之一的體積比加入），單獨使用于某河道河水，在投放后第8天，統(tǒng)計高錳酸鹽指 數(shù)、總氨、氨氮、硝酸鹽、亞硝酸鹽等指標(biāo)，從而監(jiān)測其凈化水體的效果。
[0109] 表1實施例2水體凈化檢測數(shù)據(jù)
[0111] 在表1中，處理1和處理3為加入了實驗菌劑后的檢測結(jié)果，而處理2和處理4則作為 對照，未加入任何處理菌劑。其中，處理1和處理2為第1天(大概加菌6個小時后取水樣），處 理3和處理4為第8天取水樣。每個處理由三個水樣同比例混合而成。監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)為《水和廢水 監(jiān)測分析方法(第四版)》。
[0112] 通過表1的數(shù)據(jù)可知，經(jīng)過凈化處理后，相對對照組，實驗組的高錳酸鹽指數(shù)、總 氨、氨氮、硝酸鹽、亞硝酸鹽下降3-6%，總磷下降17%，濁度下降33%。
[0113] 實驗例2
[0114] 將實施例5中所制成的微生物菌劑作為實驗菌劑進(jìn)行應(yīng)用(具體的，所制成的液體 菌液以千分之一的體積比加入），單獨使用于某地表水生態(tài)修復(fù)水體(已經(jīng)進(jìn)行了以動植物 為主的生態(tài)凈化），在投放后第8天，統(tǒng)計高錳酸鹽指數(shù)、總磷、氨氮以及濁度等指標(biāo)，從而監(jiān) 測其凈化水體的效果。
[0115] 表2實施例5水體凈化檢測數(shù)據(jù)
[0117]其中，在表2中，處理1為加菌當(dāng)天原水水質(zhì)，處理2為投放后第8天對照組水質(zhì)（未 加入任何處理菌劑），處理3為實驗組第8天水質(zhì)。每個處理的水樣由三個水樣同比例混合。 監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)為《水和廢水監(jiān)測分析方法(第四版)》。
[0118]通過表2可知，在投放后第8天，相對對照組，實驗組的高錳酸鹽指數(shù)、總氨、氨氮下 降10%，總憐下降18%，池度下降57%。
[0119]以上實驗例表明，通過投放本發(fā)明提供的細(xì)菌，對總磷的去除作用比較明顯，而磷 往往是水體富營養(yǎng)化和藻類爆發(fā)性生長的限制性因素，所以該細(xì)菌對水體生態(tài)凈化效果良 好。同時，該細(xì)菌的投放對減小水體濁度、提高透明度效果非常明顯。
[0120]還需說明的是，本發(fā)明分離純化的這種類球紅細(xì)菌，在自然環(huán)境的生存能力較強(qiáng)， 此外其還具有多種生理功能，如硫化物氧化、固碳、固氮和脫氮，將該菌或者菌劑應(yīng)用到水 體凈化后，適應(yīng)性非常廣，可以滿足處理各種生境的污染水體，進(jìn)一步的使得該菌株在水體 凈化領(lǐng)域得到推廣。
[0121]盡管已用具體實施例來說明和描述了本發(fā)明，然而應(yīng)意識到，在不背離本發(fā)明的 精神和范圍的情況下可以作出許多其它的更改和修改。因此，這意味著在所附權(quán)利要求中 包括屬于本發(fā)明范圍內(nèi)的所有這些變化和修改。
【主權(quán)項】
1. 一株細(xì)菌菌株，其特征在于，所述菌株為類球紅細(xì)菌K73，保藏于中國微生物菌種保 藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為：CGMCC NO. 12310;保藏時間為：2016年3月28 曰。2. 如權(quán)利要求1所述的細(xì)菌菌株，其特征在于，所述菌株的16S rRNA基因序列如SEQ ID NO: 1所示。3. 含有要求1或2所述的細(xì)菌菌株的微生物菌劑。4. 如權(quán)利要求3所述的微生物菌劑，其特征在于，所述微生物菌劑為液體菌劑，且在該 液體菌劑中，活菌的數(shù)量是1 X l〇1(W1CFU/ml。5. -種如權(quán)利要求4所述的微生物菌劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟： 將類球紅細(xì)菌K73的菌種接種于LB液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，得到培養(yǎng)液； 將所述培養(yǎng)液中的細(xì)菌培養(yǎng)物過濾濃縮后，得到液體菌劑。6. 如權(quán)利要求3所述的微生物菌劑，其特征在于，所述微生物菌劑為固體菌劑，所述固 體菌劑由所述類球紅細(xì)菌附加固態(tài)載體制備而成。7. 如權(quán)利要求6所述的微生物菌劑，其特征在于，所述固態(tài)載體包括滑石粉、細(xì)沙以及 粘土中的一種或多種。8. -種如權(quán)利要求6或7所述的微生物菌劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟： 將經(jīng)過純化后得到的所述類球紅細(xì)菌混于固態(tài)載體中既得。9. 權(quán)利要求1或2所述的細(xì)菌菌株在凈化地表水體中的應(yīng)用。 1 〇.權(quán)利要求3、4、6或7所述的微生物菌劑在凈化地表水體中的應(yīng)用。
【文檔編號】C12N1/20GK105861393SQ201610417745
【公開日】2016年8月17日
【申請日】2016年6月15日
【發(fā)明人】李可俊
【申請人】李可俊