一種皮膚創(chuàng)面修復(fù)制劑及其制備方法和應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種皮膚創(chuàng)面修復(fù)制劑，是通過將透明質(zhì)酸、4?二甲氨基吡啶、1?(3?二甲氨基丙基)?3?乙基碳二亞胺鹽酸鹽溶于二甲基亞砜中，室溫下磁力攪拌，得透明質(zhì)酸溶液；將普魯蘭多糖與二甲基亞砜混合，攪拌均勻，得普魯蘭多糖溶液；將普魯蘭多糖溶液緩慢滴加到透明質(zhì)酸溶液中，在40?80℃下反應(yīng)4?48h，將反應(yīng)液進(jìn)行透析，將得到的透析液冷凍干燥，即得皮膚創(chuàng)面修復(fù)制劑。本發(fā)明提供的制劑具有能夠隔離細(xì)菌、吸收創(chuàng)面積液、保持創(chuàng)面濕潤以及促進(jìn)創(chuàng)面愈合等多重功效，而且其制備原料來源廣泛，成本低廉，合成條件溫和、生產(chǎn)路線簡潔、可操作性強(qiáng)、生產(chǎn)質(zhì)量更易于控制，最重要的是該制劑與現(xiàn)有類似產(chǎn)品相比，具有更高的安全性和臨床使用價(jià)值。
【專利說明】
一種皮膚創(chuàng)面修復(fù)制劑及其制備方法和應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)用材料及其制備方法和用途，具體地說是一種皮膚創(chuàng)面修復(fù)制劑及 其制備方法和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 創(chuàng)面是正常皮膚在外界因素作用下導(dǎo)致的組織損傷，常見創(chuàng)傷、創(chuàng)傷感染以及慢 性潰瘍導(dǎo)致皮膚難以愈合。創(chuàng)面的愈合是受損組織再生、修復(fù)和重建的過程，整個(gè)過程經(jīng)歷 炎癥期、增生期和塑性期。針對創(chuàng)面愈合的階段，研究者致力于尋找促進(jìn)創(chuàng)面愈合的有效方 法。創(chuàng)面貼敷活性敷料能影響創(chuàng)面愈合速度及質(zhì)量，其主要的作用在于隔絕創(chuàng)面、防止感 染、止血止痛、為皮膚修復(fù)提供一個(gè)有利環(huán)境。
[0003] 普魯蘭多糖(Pullulan，PL)是出芽短梗霉產(chǎn)生的胞外多糖，易溶于水、安全無毒， 屬于低熱值的天然支鏈淀粉。因其成膜性好，常作為保色、保鮮和抗氧化的包裝材料，在食 品、化妝品和醫(yī)藥行業(yè)具有廣泛的用途。透明質(zhì)酸(hyaluronic acid，HA)又名玻璃酸，它是 一種天然聚陰離子粘多糖，由D-葡萄糖醛酸和D-N-乙酰氨基葡萄糖以0-1，4和0-1，3糖苷鍵 交替連接而成，其廣泛存在于人體皮膚、關(guān)節(jié)液和眼玻璃體中，在肌肉、腎臟、肺和大腦中也 有少量存在。HA具有良好的生物降解與生物相容性、非免疫原性、可被細(xì)胞表面的特定受體 CD44識別、可調(diào)控細(xì)胞的生長和分化、調(diào)控免疫反應(yīng)及促進(jìn)傷口愈合等功能，其良好的生物 活性和生物相容性使其廣泛用于組織工程，如用于防止手術(shù)粘連等。但是，HA材料作為醫(yī)用 材料存在易被機(jī)體透明質(zhì)酸酶分解，致使該材料快速降解而導(dǎo)致體內(nèi)保留時(shí)間短的缺點(diǎn)。 為克服所述缺陷，行業(yè)內(nèi)的研發(fā)人員想到了將其與普魯蘭多糖交聯(lián)成新的物質(zhì)來使用，如 CN104861178A公開了一種普魯蘭多糖-透明質(zhì)酸水凝膠及其制備方法，稱取透明質(zhì)酸溶于 雙蒸水中，然后向透明質(zhì)酸溶液中加入不同分子量的普魯蘭多糖粉末，攪拌反應(yīng);再加入交 聯(lián)劑溶液，攪拌反應(yīng)；將反應(yīng)液水浴加熱制得水凝膠;制得的水凝膠相繼用無熱原水和磷 酸鹽緩沖溶液浸洗，用制粒機(jī)制成不同粒徑的可注射的顆粒。該發(fā)明中通過化學(xué)交聯(lián)方法， 采用第三種化合物1，4_ 丁二醇二縮水甘油醚與透明質(zhì)酸和普魯蘭多糖的分子鏈對接連接 形成聚合物，可通過制粒機(jī)制成不同粒徑的顆粒，可裝入注射器中注射使用，具有穩(wěn)定性良 好、生物學(xué)效價(jià)高、降解時(shí)間較長，從而真正實(shí)現(xiàn)皮膚填充的優(yōu)勢。但是，該制備方法中使用 的交聯(lián)劑1，4_丁二醇二縮水甘油醚(BDDE)對身體存在極大的不安全隱患，甚至即使只有痕 量殘留，都會導(dǎo)致毒性反應(yīng);而且現(xiàn)有技術(shù)的研究報(bào)道中都證實(shí)了該觀點(diǎn)。如張健等在光分 光光度法檢測交聯(lián)透明質(zhì)酸中交聯(lián)劑殘留量報(bào)道了交聯(lián)劑BDDE有著易于突變以及引起臨 床不良反應(yīng)乃至癌癥的潛在因素，所以行業(yè)規(guī)定必須對其殘留量進(jìn)行嚴(yán)格控制在2 ug/g以 下，因此，BDDE含量控制是HA凝膠產(chǎn)品質(zhì)量控制的關(guān)鍵指標(biāo)(張健，奚宏偉，朱彬，蘇金樹，蔣 麗霞，魏長征.光分光光度法檢測交聯(lián)透明質(zhì)酸中交聯(lián)劑殘留量.生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)進(jìn)展， 2011，29(4)，198-200.)。又如，王亞寧等在醫(yī)用透明質(zhì)酸鈉凝膠生物相容性的比較分析一 文中報(bào)道：1，4_ 丁二醇二縮水甘油醚具有眼刺激性，與皮膚接觸時(shí)可能會引起刺激和致敏 反應(yīng)。即使交聯(lián)劑已被有效去除，由于交聯(lián)后的分子結(jié)構(gòu)變化，仍可能會導(dǎo)致一些生物學(xué)指 標(biāo)的異常。盡管生產(chǎn)廠商均強(qiáng)調(diào)對殘留的添加劑和交聯(lián)劑進(jìn)行了有效去除，但仍不能排除 有一定的殘留（王亞寧，袁暾，賈莉芳，等.醫(yī)用透明質(zhì)酸鈉凝膠生物相容性的比較分析.生 物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志，2012，29(4)，716-720.)?？梢姡m然現(xiàn)有技術(shù)中希望將透明質(zhì)酸制 備成臨床可以使用的制劑，但是其制備方法中存在的不安全隱患始終妨礙其正常推廣使 用。因此，尋找臨床更為安全的透明質(zhì)酸交聯(lián)安全制劑的制備方法，是行業(yè)內(nèi)積極研究的課 題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的是提供一種皮膚創(chuàng)面修復(fù)制劑及其制備方法和應(yīng)用，以解決現(xiàn)有技術(shù)中 制備透明質(zhì)酸交聯(lián)制劑存在較大不安全隱患、限制其臨床使用的問題。
[0005] 本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：一種皮膚創(chuàng)面修復(fù)制劑的制備方法， 包括以下步驟： (a) 將透明質(zhì)酸、4-二甲氨基吡啶(DMAP)、l-(3-二甲氨基丙基)-3_乙基碳二亞胺鹽酸 鹽(EDC)溶于二甲基亞砜(DMS0)中，室溫下磁力攪拌，得透明質(zhì)酸溶液，所述透明質(zhì)酸、4-二 甲氨基吡啶、1_(3_二甲氨基丙基）-3_乙基碳二亞胺鹽酸鹽和二甲基亞砜的質(zhì)量比為2: 0.2-1: 1-2: 150； (b) 將普魯蘭多糖與二甲基亞砜按質(zhì)量比為1: 50混合，攪拌均勻，得普魯蘭多糖溶液； (c) 按質(zhì)量比為1: 6將所述普魯蘭多糖溶液緩慢滴加到所述透明質(zhì)酸溶液中，在40-80 °C下反應(yīng)4-48h，將反應(yīng)液進(jìn)行透析，將得到的透析液冷凍干燥，即得皮膚創(chuàng)面修復(fù)制劑，該 制劑為透明質(zhì)酸-普魯蘭糖接枝半合成天然高分子海綿狀材料。
[0006] 本發(fā)明提供的制備方法的化學(xué)反應(yīng)方程式為：
本發(fā)明提供的制備方法中步驟(a )所述的透明質(zhì)酸的分子量為5-1 OOOKDa。
[0007] 本發(fā)明提供的制備方法中步驟(b)的普魯蘭多糖的分子量為lOOKDa。
[0008] 本發(fā)明提供的制備方法中步驟(c)中優(yōu)選反應(yīng)溫度為60°C、反應(yīng)時(shí)間為48h。
[0009] 本發(fā)明提供的制備方法中步驟(C)中緩慢滴加是指20滴/min。
[0010] 本發(fā)明提供的制備方法中步驟(c)中透析的工藝為:將反應(yīng)液裝入透析袋中，采用 去離子水透析48-60h。
[0011] 本發(fā)明提供的制備方法中步驟(c)所述的將透析液冷凍干燥工藝為:將所得到的 透析液于_60°C預(yù)凍24h，所得到的預(yù)凍產(chǎn)物于-60°C、0.1Pa的真空度條件下冷凍干燥24h。
[0012] 本發(fā)明同時(shí)保護(hù)所述的制備方法制備的皮膚創(chuàng)面修復(fù)制劑，該制劑為天然可降解 半合成高分子醫(yī)用材料，通過實(shí)驗(yàn)證明，該制劑能夠吸收創(chuàng)面積液和顯著促進(jìn)傷口愈合的 功效，因此可以在制備促進(jìn)皮膚愈合敷藥中得到應(yīng)用。
[0013] 本發(fā)明利用透明質(zhì)酸游離羧基與普魯蘭多糖鏈游離羥基，經(jīng)4-二甲氨基吡啶 (DMAP)催化，聯(lián)合1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)脫水，加速材料間酯 化反應(yīng)，且在酯化接枝過程中未引入第三種化合物作為連接臂，反應(yīng)完畢，催化劑DMAP、脫 水劑EDC、DMS0溶媒均可經(jīng)透析法去除，透析液凍干后得到海綿狀高分子接枝產(chǎn)物即為皮膚 創(chuàng)面修復(fù)制劑。該制劑經(jīng)核磁與紅外證明了透明質(zhì)酸成功接枝到普魯蘭多糖鏈上，獲得新 型透明質(zhì)酸接枝普魯蘭多糖高分子材料，通過實(shí)驗(yàn)證明，該制劑具有能夠隔離細(xì)菌、吸收創(chuàng) 面積液、保持創(chuàng)面濕潤以及促進(jìn)創(chuàng)面愈合等多重功效，而且發(fā)明提供的制備方法的主要原 料來源廣泛，成本低廉，合成條件溫和、生產(chǎn)路線簡潔、工藝流程簡單、可操作性強(qiáng)、生產(chǎn)質(zhì) 量更易于控制，最重要的是通過本發(fā)明制備的產(chǎn)品較現(xiàn)有類似產(chǎn)品相比，具有更高的安全 性和臨床使用價(jià)值。
【附圖說明】
[0014] 圖1為實(shí)施例1制備的產(chǎn)品以及對照品的紅外圖譜。
[0015] 圖2為實(shí)施例1制備的產(chǎn)品以及對照品的核磁圖譜。
[0016] 圖3為實(shí)施例1制備的產(chǎn)品以及對照品的酶降解曲線圖。
[0017] 圖4為實(shí)施例1制備的產(chǎn)品以及對照品的溶血性實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
[0018] 圖5為敷用實(shí)施例1制備的產(chǎn)品對大鼠創(chuàng)面進(jìn)行修復(fù)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
【具體實(shí)施方式】
[0019] 下面實(shí)施例用于進(jìn)一步詳細(xì)說明本發(fā)明，但實(shí)施例并不對本發(fā)明做任何形式的限 定。除非特別說明，本發(fā)明采用的試劑、方法和設(shè)備為本技術(shù)領(lǐng)域常規(guī)試劑、方法和設(shè)備。但 不以任何形式限制本發(fā)明。
[0020] 實(shí)施例1 (1) 稱量分子量為lOOKDa醫(yī)用級透明質(zhì)酸40g、4-二甲氨基吡啶10g、l-(3-二甲氨基丙 基)-3_乙基碳二亞胺鹽酸鹽30g溶于3000g二甲基亞砜，室溫下磁力攪拌2h，得透明質(zhì)酸溶 液； (2) 將分子量為100 KDa醫(yī)用級普魯蘭多糖10g溶于500g的二甲基亞砜中，攪拌均勻，得 普魯蘭多糖溶液； (3) 將500g步驟(2)制備的普魯蘭多糖溶液按20滴/min緩慢滴加到3000g的步驟（1)制 備的透明質(zhì)酸溶液中，在60°C下反應(yīng)48h，將反應(yīng)后的溶液加入透析袋內(nèi)，用去離子水透析 48h，將所得到的透析液于-60°C預(yù)凍24h，所得到的預(yù)凍產(chǎn)物于-60°C、0.1Pa的真空度條件 下冷凍干燥24h，制成海綿狀皮膚創(chuàng)面修復(fù)制劑。
[0021] 實(shí)施例2 (1) 稱量分子量為5KDa醫(yī)用級透明質(zhì)酸40g、4-二甲氨基吡啶20g、l-(3-二甲氨基丙 基)-3_乙基碳二亞胺鹽酸鹽40g溶于3000g二甲基亞砜，室溫下磁力攪拌2h，得透明質(zhì)酸溶 液； (2) 將分子量為lOOKDa醫(yī)用級普魯蘭多糖10g溶于500g的二甲基亞砜中，攪拌均勻，得 普魯蘭多糖溶液； (3) 將500g步驟(2)制備的普魯蘭多糖溶液按20滴/min緩慢滴加到3000g的步驟（1)制 備的透明質(zhì)酸溶液中，在80°C下反應(yīng)4 h，將反應(yīng)后的溶液加入透析袋內(nèi)，用去離子水透析 48h，將所得到的透析液于-60°C預(yù)凍24h，所得到的預(yù)凍產(chǎn)物于-60°C、0.1Pa的真空度條件 下冷凍干燥24h，制成海綿狀皮膚創(chuàng)面修復(fù)制劑。
[0022] 實(shí)施例3 (1) 稱量分子量為l〇〇〇KDa醫(yī)用級透明質(zhì)酸40g、4-二甲氨基吡啶8g、1-(3_二甲氨基丙 基)-3_乙基碳二亞胺鹽酸鹽20g溶于3000g二甲基亞砜，室溫下磁力攪拌2h，得透明質(zhì)酸溶 液； (2) 將分子量為100 KDa醫(yī)用級普魯蘭多糖10g溶于500g的二甲基亞砜中，攪拌均勻，得 普魯蘭多糖溶液； (3)將500g步驟(2)制備的普魯蘭多糖溶液按20滴/min緩慢滴加到3000g的步驟（1)制 備的透明質(zhì)酸溶液中，在40°C下反應(yīng)48h，將反應(yīng)后的溶液加入透析袋內(nèi)，用去離子水透析 48h，將所得到的透析液于-60°C預(yù)凍24h，所得到的預(yù)凍產(chǎn)物于-60°C、0.1Pa的真空度條件 下冷凍干燥24h，制成海綿狀皮膚創(chuàng)面修復(fù)制劑。
[0023] 實(shí)施例4 (1) 稱量分子量為500KDa醫(yī)用級透明質(zhì)酸40g、4-二甲氨基吡啶15g、l-(3-二甲氨基丙 基)-3_乙基碳二亞胺鹽酸鹽25g溶于3000g二甲基亞砜，室溫下磁力攪拌2h，得透明質(zhì)酸溶 液； (2) 將分子量為100 KDa醫(yī)用級普魯蘭多糖10g溶于500g的二甲基亞砜中，攪拌均勻，得 普魯蘭多糖溶液； (3) 將500g步驟(2)制備的普魯蘭多糖溶液按20滴/min緩慢滴加到3000g的步驟（1)制 備的透明質(zhì)酸溶液中，在60°C下反應(yīng)48 h，將反應(yīng)后的溶液加入透析袋內(nèi)，用去離子水透析 60h，將所得到的透析液于-60°C預(yù)凍24h，所得到的預(yù)凍產(chǎn)物于-60°C、0.1Pa的真空度條件 下冷凍干燥24h，制成海綿狀皮膚創(chuàng)面修復(fù)制劑。
[0024] 實(shí)施例5紅外光譜檢測 以實(shí)施例1制備的樣品為例，取適量樣品進(jìn)行紅外檢測，采用KBr壓片法，40-4000 cnf1 波數(shù)掃描。測定透明質(zhì)酸、普魯蘭多糖、透明質(zhì)酸、普魯蘭多糖物理混合樣以及實(shí)施例1制備 的樣品的紅外圖譜。檢測結(jié)果如圖1所示，圖中a為透明質(zhì)酸;b為普魯蘭多糖;c為透明質(zhì)酸 與普魯蘭多糖物理混合;d為實(shí)施例1制備的產(chǎn)品，圖中d顯示實(shí)施例1制備的樣品在1720 cnf 1出現(xiàn)酯鍵羰基峰，說明透明質(zhì)酸成功接枝到普魯蘭多糖鏈上，獲得新型透明質(zhì)酸接枝普 魯蘭糖高分子材料。
[0025]實(shí)施例6核磁共振波譜檢測 以實(shí)施例1制備的樣品為例，取實(shí)施例1所制備的樣品1 〇mg溶于D20中600 MHz核磁檢 測，并測定透明質(zhì)酸與普魯蘭多糖原料氫核磁圖譜。檢測結(jié)果如圖2所示，圖2中a為透明質(zhì) 酸;b為普魯蘭多糖;c為實(shí)施例1制備的產(chǎn)品；圖中可以看出實(shí)施例1制備的樣品具備透明質(zhì) 酸和普魯蘭多糖特征峰。
[0026]實(shí)施例7體外酶降解性試驗(yàn) 取實(shí)施例1所制備的樣品7mg溶于2 mL 100 U/mL透明質(zhì)酸酶溶液中，37°C恒溫?fù)u床培 養(yǎng)，14天內(nèi)每日按規(guī)定時(shí)間取樣200yL并補(bǔ)充新鮮酶液200 yL，按照硫酸-咔唑顯色法測定 樣品。按照此法，測定純品透明質(zhì)酸酶降解實(shí)驗(yàn)。結(jié)果見圖3,圖中a為透明質(zhì)酸;b為實(shí)施例1 制備的產(chǎn)品；圖中顯示，實(shí)施例1制備的制劑較透明質(zhì)酸相比，具有顯著抵抗透明質(zhì)酸酶降 解的性能。
[0027] 實(shí)施例8體外溶血性實(shí)驗(yàn) 取體重為2.5-3.0 kg的新西蘭大白兔心臟采血20 mL，加肝素鈉抗凝;取抗凝血8 mL， 加無菌生理鹽水10 mL稀釋；以無菌生理鹽水為陰性對照，滅菌注射用水為陽性對照，用無 菌生理鹽水配制濃度為lmg/mL、5 mg/mL和10 mg/mL的實(shí)施例1制備的產(chǎn)品的溶液。取潔凈 試管9支，陰性對照、陽性對照和試驗(yàn)組各3支，每支試管分別加入相應(yīng)溶液10 mL，于37 °C 恒溫水浴中保溫30 min后加入0.2 mL稀釋兔血輕輕搖勻，于37 °C恒溫水浴中繼續(xù)保溫60 min;倒出試管內(nèi)液體，2500 rpm離心5 min，取上清液于545 nm波長處測定吸光度。按如下 公式計(jì)算： 式中As為試驗(yàn)液吸光度，An為陰性對照吸光度，Ap為陽性對照組吸光度。按照相同的方 法平行進(jìn)行純品透明質(zhì)酸、普魯蘭多糖的溶血性試驗(yàn)。得到的結(jié)果如圖4所示，圖中a為1 mg/mL實(shí)施例1制備的產(chǎn)品的溶液;b為5 mg/mL實(shí)施例1制備的產(chǎn)品的溶液;c 10 mg/mL實(shí) 施例1制備的產(chǎn)品的溶液；d無菌注射用水；圖中顯示實(shí)施例1制備的皮膚創(chuàng)面修復(fù)制劑的 溶血率均小于1.2%，沒有出現(xiàn)溶血現(xiàn)象，符合低于5%的醫(yī)用材料標(biāo)準(zhǔn)。
[0028]實(shí)施例9傷口愈合實(shí)驗(yàn) 取體重200 g的SD大鼠10只，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對照組兩組每組5只，大鼠背部剃毛并 處以黃豆粒大小的皮膚傷口，對照組不提供任何敷料及藥物，紗布包扎傷口，實(shí)驗(yàn)組傷口敷 以1.5 cmX 1.0 cm(約20 mg)實(shí)施例1制備的皮膚創(chuàng)面修復(fù)制劑，按照對照組包扎傷口，7天 后觀察傷口愈合情況。結(jié)果見圖5,圖中a為修復(fù)前創(chuàng)面的狀態(tài)圖，b為采用不同處理方式修 復(fù)7天后創(chuàng)面愈合狀態(tài)圖。圖中顯示敷用本發(fā)明制備的皮膚創(chuàng)面修復(fù)制劑可以顯著促進(jìn)傷 口愈合。
[0029]上述實(shí)施例為本發(fā)明較佳的實(shí)施方式，但本發(fā)明的實(shí)施方式并不受所述實(shí)施例的 限制，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡化， 均應(yīng)為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種皮膚創(chuàng)面修復(fù)制劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟： (a) 將透明質(zhì)酸、4-二甲氨基吡啶、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽溶于 二甲基亞砜中，室溫下磁力攪拌，得透明質(zhì)酸溶液，所述透明質(zhì)酸、4-二甲氨基吡啶、1-(3-二甲氨基丙基)-3_乙基碳二亞胺鹽酸鹽和二甲基亞砜的質(zhì)量比為2: 0.2-1: 1-2: 150; (b) 將普魯蘭多糖與二甲基亞砜按質(zhì)量比為1: 50混合，攪拌均勻，得普魯蘭多糖溶液； (c) 按質(zhì)量比為1:6將所述普魯蘭多糖溶液滴加到所述透明質(zhì)酸溶液中，在40-80°C下 反應(yīng)4-48h，將反應(yīng)液進(jìn)行透析，將得到的透析液冷凍干燥，即得皮膚創(chuàng)面修復(fù)制劑。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的皮膚創(chuàng)面修復(fù)制劑的制備方法，其特征在于，步驟(a)所述的 透明質(zhì)酸的分子量為5-1000KDa。3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的皮膚創(chuàng)面修復(fù)制劑的制備方法，其特征在于，步驟(b)的普 魯蘭多糖的分子量為lOOKDa。4. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的皮膚創(chuàng)面修復(fù)制劑的制備方法，其特征在于，步驟(c)所述 的反應(yīng)溫度為60 °C、反應(yīng)時(shí)間為48h。5. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的皮膚創(chuàng)面修復(fù)制劑的制備方法，其特征在于，步驟(c沖透 析的工藝為:采用去離子水透析48-60h。6. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的皮膚創(chuàng)面修復(fù)制劑的制備方法，其特征在于，步驟(c)所述 的冷凍干燥具體工藝為:將所得到的透析液于_60°C預(yù)凍24h，所得到的預(yù)凍產(chǎn)物于-60°C、 0.1 Pa的真空度條件下冷凍干燥24h。7. -種權(quán)利要求1所述制備方法制備的皮膚創(chuàng)面修復(fù)制劑。8. -種權(quán)利要求7所述的皮膚創(chuàng)面修復(fù)制劑在用于制備促進(jìn)皮膚愈合敷藥中的應(yīng)用。
【文檔編號】A61K31/715GK105820267SQ201610269507
【公開日】2016年8月3日
【申請日】2016年4月27日
【發(fā)明人】楊文智, 王樹根, 李海鷹
【申請人】河北大學(xué)