均勻。室溫靜置10min，于550nm下測吸光值）。每一處理3個重復(fù)，以同樣方法制 作膽固醇標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算上清液中膽固醇含量及降解率，結(jié)果見表1?？芍?，CGMCCN0.11763 對膽固醇有很好的降解作用，在發(fā)酵60h小時后，降解率可達到64.76%。
[0048]表1對膽固醇的降解情況。
[0049]
[0050] 植物乳桿菌CGMCC NO. 11763菌株的耐膽鹽試驗：
[0051 ] 取CGMCCN0.11763菌液lmL接種菌種于含有不同膽鹽（含量梯度為0.0%、0.2 %、 0.4%、0.6%、0.8%、1%)的1011^]\?5液體培養(yǎng)基(？!1=6.4)，置于37°(：下分別培養(yǎng)0、2、411， 每個處理3個重復(fù)。各取lml樣品菌液于9ml生理鹽水中混勻，制備稀釋度溶液，取0.1ml稀釋 液于MRS中涂布，于37°C生化培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)48小時(每個稀釋度做3個平行)記錄計算平 板上的菌數(shù)個數(shù)。結(jié)果見表2?？芍摼谀扄}濃度為1%處理4h后菌的 [0052]生長量依然達到0· 59±0·92 X 107(cfu/ml)，有很好的耐膽鹽能力。
[0053] 表2耐膽鹽能力檢測[(土s) X 107cfu/ml]
[0054]
[0055] 植物乳桿菌CGMCC NO. 11763菌株的耐酸試驗
[0056] 取HLX37母液按lml接種菌種于不同pH值(pH梯度為1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0)的 lOmLMRS液體培養(yǎng)基，置于37°C下分別培養(yǎng)0、2、4h，每一處理3個重復(fù)。各取lml樣品菌液于 9ml生理鹽水中混勻，制備稀釋溶液，取0 . lml稀釋液于MRS中涂布，于37 °C生化培養(yǎng)箱中倒 置培養(yǎng)48小時(每個稀釋度做3個平行)記錄平板上的菌落個數(shù)。結(jié)果見表3。說明該菌具有 很強的耐酸能力。
[0057]表3 耐酸能力檢測[(土s) X 107cfu/ml]
[0058]
[0059] 植物乳桿菌CGMCC NO. 11763的黏附能力測定
[0060] 培養(yǎng)CGMCC NO. 11763(MRS液體培養(yǎng)基）、大腸桿菌DH5a(LB液體培養(yǎng)基)24h得發(fā)酵 液，分別置于3000r/min、4°C下離心10min，收集菌泥，分別用pH = 7.0的無菌磷酸鹽緩沖液 (PBS)洗滌菌泥2次（即在菌落中加入PBS，震蕩混合均勻后，置于3000r/min、4°C下離心 10min，收集菌體）。自凝集率（％ :用無菌的roS將菌泥CGMCC NO. 11763制成在波長600nm處 的吸光值為〇. 4±0.1 (A0)的懸浮菌液及菌懸液，靜置24h后測定吸光值A(chǔ)24，自凝集率（％ ) 公式為(A0-A24)/A0。；他凝集率（％ :將CGMCC N0.11763和大腸桿菌DH5a的懸菌液調(diào)節(jié)成 在波長600nm處的吸光值為0.6 ± 0.1 (AO)的混合懸浮菌液。靜置24H后測定吸光值A(chǔ)24，他凝 集率（％)公式為（40-424)/^0。測定結(jié)果見表5，可知061(^^).11763的自凝集率為 95.71%，有很強的黏附能力。
[0061 ]表4黏附能力表
[0062]
[0063] 植物乳桿菌CGMCC NO. 11763的菌株生理特性
[0064] 所述植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum)XH于2015年11月30日保藏于中國微 生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC)，保藏號為CGMCC N0.11763,保藏地 址為：中國北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，中國科學(xué)院微生物研究所，郵編：100101。 [0065]該菌株特點如下:在顯微鏡下觀察，該菌株為短桿狀，革蘭氏染色呈陽性，無鞭毛， 不產(chǎn)芽孢;在固體培養(yǎng)基上，該菌菌落為白色，表面光滑，致密，形態(tài)為圓形，邊緣較整齊。
[0066] 理化特征為:過氧化氫酶(-)，明膠液化(-)，吲哚實驗( + )，運動性(-)，發(fā)酵產(chǎn)氣 (_)，亞硝酸鹽還原(_)，發(fā)酵產(chǎn)氣(_)，產(chǎn)硫化氫氣體(_)，pH4.0MRS培養(yǎng)基中生長(+ )。經(jīng)過 生理生化鑒定為為植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum)，命名為植物乳桿菌 (Lactobacillus plantarum)XH〇
[0067] 菌株能夠在57°C下生長良好，葡萄糖耐受能力為275g/L。
[0068] 本發(fā)明植物乳桿菌由采集人李建樹，從新疆維吾爾族老鄉(xiāng)家中酸奶中分離得到， 采集時間2015年6月2日。
[0069]本發(fā)明植物乳桿菌CGMCC N0.11763經(jīng)實驗發(fā)現(xiàn)能夠在pH為1.50的條件下存活，在 1 %膽鹽培養(yǎng)4小時后仍處于存活狀態(tài);植物乳桿菌CGMCC N0.11763降解亞硝酸鹽速度快， 分解能力達到10.9mg/h/kg，該菌種在生產(chǎn)泡菜時，整個發(fā)酵過程中亞硝酸鹽濃度在4.8mg/ kg以下；CGMCCN0.11763在發(fā)酵60h小時后，對膽固醇降解率可達到64.76 %。CGMCC NO. 11763黏附能力測定的自凝集率為95.71 %，菌株能夠在57°C下生長良好，葡萄糖耐受能 力為 275g/L。
[0070] 有益效果：
[0071] 本發(fā)明以干白葡萄酒和玫瑰花為原料，首先采用超聲清洗對玫瑰花進行殺蟲滅 卵、殺滅微生物、去除農(nóng)藥殘留和重金屬離子等，大大提高了禾桿黃玫瑰加香干白葡萄酒的 食品安全性;在含有絲膠肽的水溶液中浸泡復(fù)水，可最大限度地減少經(jīng)冷凍而造成的玫瑰 花活性物質(zhì)的損失，提高了玫瑰花有效成分的提取率，同時也為后續(xù)變溫益生菌發(fā)酵奠定 了堅實基礎(chǔ);在一定pH值(2.5-4.0)條件下，科學(xué)復(fù)配漆酶和硅藻土對玫瑰花醬進行脫色， 結(jié)合后續(xù)的高壓脈沖電場、微波、超聲、生物酶解工藝，可將玫瑰花醬中88-92%的酚類和 93-97 %的花色素去除，得到的玫瑰花酶解液色澤為無色至禾桿黃色，與白葡萄酒色澤基本 一致;將高壓脈沖電場、微波、超聲、生物酶解等低溫提取技術(shù)有機結(jié)合，可最大限度地保留 玫瑰花的功能性物質(zhì)和香味成分；以功能性植物乳桿菌等益生菌為發(fā)酵劑，采用變溫發(fā)酵 和分次接種方式可最大限度地獲取益生菌增殖和功能性代謝產(chǎn)物的最大積累、可進一步將 干白葡萄酒中的蘋果酸轉(zhuǎn)化為乳酸，消除干白葡萄酒的酸澀感，提升禾桿黃玫瑰加香干白 葡萄酒的口感和保健功能及酒體穩(wěn)定性，通過超高壓均質(zhì)破碎益生菌體和超高溫瞬時滅 菌，進一步提高了禾桿黃玫瑰加香干白葡萄酒的功能性物質(zhì)的含量和酒體穩(wěn)定性，降低了 色度;將高壓脈沖電場、超聲技術(shù)和過氧乙酸聯(lián)合催陳，得到的禾桿黃玫瑰加香干白葡萄酒 質(zhì)量指標(biāo)相當(dāng)于現(xiàn)有發(fā)酵型普通干白葡萄酒陳釀8-10年的酒質(zhì)，相對于現(xiàn)有技術(shù)陳化效果 好、周期短、效率高、色澤及口感穩(wěn)定性好。具體實驗效果見實施例6和7,具體組份技術(shù)效果 如下：
[0072] 1.本發(fā)明的益生菌粉劑科學(xué)復(fù)配多種乳酸菌劑，種類多，功能全，益生性強，特別 是植物乳桿菌CGMCC N0.11763經(jīng)實驗發(fā)現(xiàn)能夠在pH為1.50的條件下存活，在1%膽鹽培養(yǎng)4 小時后仍處于存活狀態(tài);植物乳桿菌CGMCC NO. 11763降解亞硝酸鹽速度快，分解能力達到 10.9mg/h/kg，該菌種在生產(chǎn)泡菜時，整個發(fā)酵過程中亞硝酸鹽濃度在4.8mg/kg以下;CGMCC NO. 11763在發(fā)酵60h小時后，對膽固醇降解率可達到64.76 %。CGMCC NO. 11763黏附能力測 定的自凝集率為95.71 %。
[0073]需要說明的是本發(fā)明玫瑰葡萄酒中含有大量的功能性益生菌代謝物和功能性胞 內(nèi)物，雖為死菌體，但死菌體、細胞碎片與代謝產(chǎn)物與活菌一樣，可抑制病原菌對腸壁的粘 附和侵襲、有機調(diào)節(jié)人體整體免疫力、增強巨噬細胞吞噬能力、抑制腫瘤生長、提高自然殺 傷細胞(NK細胞）的活性、改善粘膜表面病菌和溶菌酶平衡等，其效果同死菌體數(shù)量成正比 例，滅活的玫瑰干白生物活性濃縮液同樣具備其益生菌的較強的益生性。
[0074] 2.本發(fā)明在制備植物乳桿菌粉劑時采用的冷凍保護劑將含有抗凍蛋白較高的冬 黑麥、沙冬青和鯊魚皮膠原蛋白科學(xué)復(fù)配，經(jīng)高壓脈沖電場提取、超聲波輔助微波提取和生 物酶解而制得，全程低溫提取，抗凍蛋白提取率高，損失少，得到的保護劑抗凍多肽含量高、 種類全、功能性強、抗凍效果好，提高了植物乳桿菌粉劑中的活菌含量。
[0075] 3.本發(fā)明采用生物脫色工藝，在達到脫色目標(biāo)的同時，最大限度地保留了玫瑰花 的其它功能性生物活性物質(zhì)和香味成分，增強了禾桿黃玫瑰加香干白葡萄酒的穩(wěn)定性，減 弱了酸澀味道，提升了整體口感協(xié)調(diào)性，延長了產(chǎn)品的保質(zhì)期，在一定pH值(2.5-4.0)條件 下，科學(xué)復(fù)配漆酶和硅藻土對玫瑰花醬進行脫色，結(jié)合后續(xù)的高壓脈沖電場、微波、超聲、生 物酶解工藝，可將玫瑰花醬中88-92%的酚類和93-97%的花色素去除，得到的玫瑰花酶解 液色澤為無色至禾桿黃色，與白葡萄酒色澤基本一致，實現(xiàn)了利用玫瑰花制備干白葡萄酒 的可能，拓展了原料應(yīng)用范圍，保護了環(huán)境。
[0076] 4.本發(fā)明制備的改性膳食纖維將超聲提取、高壓脈沖電場提取和生物酶解科學(xué)結(jié) 合，所得改性膳食纖維持水性、膨脹性、增稠性更強且不受酸、堿、鹽的影響，可溶性纖維素 含量高，更容易被乳酸菌利用，提高乳酸菌在人體腸道的生長及繁殖能力，增加益生菌菌群 的種類和數(shù)量，降低人體腸道pH值，改善人體腸道微生態(tài)環(huán)境;吸附能力強，經(jīng)改性后，纖維 素的比表面積增大，網(wǎng)格結(jié)構(gòu)豐富，吸附力增強，螯合、吸附膽固醇和膽汁酸類的有機分子 能力更強、抑制人體對他們的吸收;離子交換能力增強，對金屬元素，特別是重金屬元素吸 附效果更強，有效防止了人體重金屬中毒;調(diào)節(jié)和維持腸道菌群的定植時間，增強腸道的消 化和吸收能力，提高機體免疫力;有效促進胃腸蠕動，減緩并消除胃脹、腹脹等不良反應(yīng);強 大的包埋作用可防止環(huán)境(氧氣、溫度、光照、水分活度等）因素對產(chǎn)品品質(zhì)的影響，穩(wěn)定了 禾桿黃玫瑰加香干白葡萄酒的生物活性，延長了禾桿黃玫瑰加香干白葡萄酒的保質(zhì)期。
[0077] 5.本發(fā)明將部分干白葡萄酒、低聚果糖、乳糖和改性膳食纖維科學(xué)復(fù)配，給益生菌 提供了全面、豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，不僅實現(xiàn)了益生菌的最大化增殖和功能性代謝產(chǎn)物的最大 化積累，而且有效改善了成品禾桿黃玫瑰加香干白葡萄酒的口感和穩(wěn)定性。
[0078] 6.本發(fā)明的制備方法工藝簡單、周期短、效率高、陳化效果優(yōu)，玫瑰花有效成分和 香味物質(zhì)損失小、提取率高、色澤穩(wěn)定性好、成品玫瑰葡萄酒口感、色澤和香味穩(wěn)定、協(xié)調(diào)， 玫瑰花香味濃郁，陳華香味物質(zhì)含量高，適合規(guī)?；?、機械化生產(chǎn)。
[0079]需要說明的是本發(fā)明禾桿黃玫瑰加香干白葡萄酒的技術(shù)效果是各組分技術(shù)特征 和方法特征相互協(xié)同、相互作用的結(jié)果，并非簡單的技術(shù)特征(組分功能）的疊加，各組分技 術(shù)特征的有機結(jié)合和協(xié)同產(chǎn)生的效果遠遠超過各單一技術(shù)特征功能和效果的疊加，具有較 好的先進性和實用