一類(lèi)基于1,8-萘酰亞胺為骨架的磺酰胺化合物、制備方法及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】：
[0001] 本發(fā)明涉及基于1，8-萘酰亞胺為骨架的磺酰胺化合物、制備方法及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】：
[0002] 谷胱甘肽（GSH)在人體內(nèi)的生化防御體系起重要作用，具有多方面的生理功能。 GSH的結(jié)構(gòu)中含有一個(gè)活潑的巰基-SH，易被氧化脫氫，這一特異結(jié)構(gòu)使其成為體內(nèi)主要的 自由基清除劑，作為體內(nèi)一種重要的抗氧化劑，保護(hù)許多蛋白質(zhì)和酶等分子中的巰基。例如 當(dāng)細(xì)胞內(nèi)生成少量H2O2時(shí)，GSH在谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的作用下，把H202還原成H20,其自 身被氧化為GSSG，GSSG由存在于肝臟和紅細(xì)胞中的谷胱甘肽還原酶作用下，接受H還原成 GSH，使體內(nèi)自由基的清除反應(yīng)能夠持續(xù)進(jìn)行。
[0003] 谷胱甘肽不僅能消除人體自由基，還可以提高人體免疫力。谷胱甘肽維護(hù)健康，抗 衰老，在老人遲緩化的細(xì)胞上所發(fā)揮的功效比年輕人大。
[0004] 除此，谷胱甘肽還可以保護(hù)血紅蛋白不受過(guò)氧化氫氧化、自由基等氧化從而使它 持續(xù)正常發(fā)揮運(yùn)輸氧的能力。這是因?yàn)榧t細(xì)胞中部分血紅蛋白在過(guò)氧化氫等氧化劑的作用 下，其中的二價(jià)鐵會(huì)被氧化為三價(jià)鐵，使血紅蛋白轉(zhuǎn)變?yōu)楦哞F血紅蛋白，從而失去了帶氧能 力。還原型谷胱甘肽既能直接與過(guò)氧化氫等氧化劑結(jié)合，生成水和氧化型谷胱甘肽，也能夠 將高鐵血紅蛋白還原為血紅蛋白。人體紅細(xì)胞中谷胱甘肽的含量很多，這對(duì)保護(hù)紅細(xì)胞膜 上蛋白質(zhì)的巰基處于還原狀態(tài)，防止溶血具有重要意義。
[0005] 谷胱甘肽保護(hù)酶分子中-SH基，有利于酶活性的發(fā)揮，并且能恢復(fù)已被破壞的酶 分子中-SH基的活性功能，使酶重新恢復(fù)活性。谷胱甘肽還可以抑制乙醇侵害肝臟所產(chǎn)生 的脂肪肝。
[0006] 谷胱甘肽對(duì)于放射線、放射性藥物所引起的白細(xì)胞減少等癥狀，有強(qiáng)有力的保護(hù) 作用。谷胱甘肽能與進(jìn)入人體的有毒化合物、重金屬離子或致癌物質(zhì)等相結(jié)合，并促進(jìn)其排 出體外，起到中和解毒作用。
[0007] GSH能夠糾正乙酰膽堿、膽堿酯酶的不平衡，起到抗過(guò)敏作用，還可防止皮膚老化 及色素沉著，減少黑色素的形成，改善皮膚抗氧化能力并使皮膚產(chǎn)生光澤，另外，GSH在治療 眼角膜病及改善性功能方面也有很好作用。
[0008] 因此，維持體內(nèi)GSH含量的穩(wěn)定是非常重要的，GSH過(guò)高或過(guò)低都會(huì)影響正常的生 理機(jī)能，導(dǎo)致一些疾病的產(chǎn)生如肝損傷，癌癥，艾滋病，骨質(zhì)疏松癥，阿耳茨海默氏病，和心 臟，炎性腸和心血管疾病。

【發(fā)明內(nèi)容】
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[0009] 本發(fā)明的內(nèi)容是提供一類(lèi)基于1，8-萘酰亞胺為骨架的磺酰胺化合物、制備方法 及其應(yīng)用，其可用于檢測(cè)GSH的熒光檢測(cè)。
[0010] -類(lèi)基于1，8-萘酰亞胺為骨架的磺酰胺化合物，具有化合物1或2或3所述的結(jié) 構(gòu)：
[0011]
[0012] 提供一種1，8-萘酰亞胺為骨架的磺酰胺化合物的制備方法，其中：
[0013] 化合物1的制備方法為：
[0014] 在惰性無(wú)氧條件下，將N- 丁基-4-磺酰氯-1，8-萘酰亞胺與芐胺反應(yīng)得到目標(biāo)化 合物1 ;
[0015] 化合物2的制備方法為：
[0016] 1)在惰性無(wú)氧條件下，將N-丁基-4-磺酰氯-1，8-萘酰亞胺與哌嗪反應(yīng)得到含萘 酰亞胺結(jié)構(gòu)的磺酰胺化合物；
[0017] 2)在惰性無(wú)氧條件下，將步驟1)得到的含萘酰亞胺結(jié)構(gòu)的磺酰胺化合物與丹磺 酰氯反應(yīng)得到目標(biāo)化合物2;
[0018] 化合物3的制備方法為：
[0019] 1)在惰性無(wú)氧條件下，將IR-780碘化物（菁染料中間體）與哌嗪反應(yīng)，得到哌嗪 取代的菁染料中間體；
[0020] 2)在惰性無(wú)氧條件下，將步驟1)得到的哌嗪取代的菁染料中間體化合物與N- 丁 基-1，8-萘酰亞胺-5-磺酰氯進(jìn)行反應(yīng)，得到化合物3。
[0021] 按上述方案，化合物1的制備中N- 丁基-4-磺酰氯-1，8-萘酰亞胺和芐胺的摩爾 比為1:1~1:1. 5,所述的反應(yīng)為：在惰性無(wú)氧條件下，將N- 丁基-4-磺酰氯-1，8-萘酰亞 胺滴加到芐胺，四氫呋喃和束縛堿吡啶的混合體系中，回流反應(yīng)16~20h。
[0022] 按上述方案，化合物2的制備中步驟1)中N- 丁基-4-磺酰氯-1，8-萘酰亞胺 和哌嗪的摩爾比為1:4~1:5 ;所述的反應(yīng)為：在惰性無(wú)氧條件下，將N-丁基-4-磺酰 氯-1，8-萘酰亞胺在冰浴條件下滴加到哌嗪，四氫呋喃和束縛堿吡啶的混合體系中，回流 反應(yīng)16~20h。
[0023] 按上述方案，化合物2的制備中步驟2)中含萘酰亞胺結(jié)構(gòu)的磺酰胺化合物和丹磺 酰氯的摩爾比為1:1~1. 5:1，步驟2)的反應(yīng)為：在含有丹磺酰氯和步驟1)得到的含萘酰 亞胺結(jié)構(gòu)的磺酰胺化合物的反應(yīng)容器中，在惰性無(wú)氧條件下，加入二氯甲烷和束縛堿三乙 胺，室溫反應(yīng)12-16h。
[0024] 按上述方案，化合物3的制備中步驟1)中IR-780碘化物和哌嗪的摩爾比為1:3~ 1:4,所述的反應(yīng)為：在惰性無(wú)氧條件下，將IR-780,哌嗪和DMF于80~85°C下反應(yīng)4~5h。
[0025] 按上述方案，化合物3的制備中；步驟2)中哌嗪取代的菁染料中間體化合物和 N- 丁基-1，8-萘酰亞胺-5-磺酰氯的摩爾比為1:1~1:3 ;步驟2)的反應(yīng)為：在冰浴條件 下將N- 丁基-4-磺酰氯-1，8-萘酰亞胺與哌嗪取代的菁染料中間體，四氫呋喃和束縛堿吡 啶混合后，回流反應(yīng)16~20h。
[0026] 本發(fā)明的1，8-萘酰亞胺為骨架的磺酰胺化合物在熒光識(shí)別GSH中的應(yīng)用。
[0027] 本發(fā)明的化合物是一類(lèi)新型的可用于選擇性識(shí)別GSH的熒光探針。如熒光譜圖1， 2,3所示，這些化合物在10%的二甲亞砜的HEPES溶液中展現(xiàn)了對(duì)GSH高的選擇性。這些 探針高的選擇性對(duì)于早期診斷密切相關(guān)疾病具有十分重要的意義。
【附圖說(shuō)明】：
[0028] 圖1為化合物1在10%二甲亞砜的HEPES溶液中對(duì)不同氨基酸的選擇性熒光光譜 圖，化合物1表現(xiàn)出對(duì)GSH高的選擇性（由上到下所加氨基酸分別為GSH，Glu，Ala，Arg，Gl y,Tyr,His,Cys,Lys,Probe,Ser,Hey,Met) 〇
[0029] 圖2為化合物2在10%二甲亞砜的HEPES溶液中對(duì)不同氨基酸的選擇性熒光光譜 圖，化合物2表現(xiàn)出對(duì)GSH高的選擇性（由上到下所加氨基酸分別為GSH，Hcy，Ala，Cys，Hi s,Lys,Met,Arg,Lys,Ref,Glu,Tyr,Ser) 〇
[0030] 圖3為化合物3在10%二甲亞砜的HEPES溶液中對(duì)不同氨基酸的選擇性熒光光譜 圖，化合物3表現(xiàn)出對(duì)GSH高的選擇性（由上到下所加氨基酸分別為GSH,Hcy,Cys,Contro I,Gly,Tyr,His,Cys,Lys,Arg,Ser,Hey,Met) 〇
【具體實(shí)施方式】：
[0031] 實(shí)施例1:化合物1的合成
[0032] 合成路線如下：
[0033]
[0034] 反應(yīng)式中THF-四氫咲喃，pyridine-吡啶
[0035] 具體合成步驟如下：
[0036]將節(jié)胺（11Img, 0. 85mmol)置于IOOmL三頸燒瓶，N- 丁基-4-磺酰氯-1，8-萘酰 亞胺（300mg, 0. 85mmol)置于恒壓滴液漏斗中，抽充氮?dú)馊魏?，加入重蒸的THF和2~ 3mL的吡啶，并保持惰性氣氛，在冰浴條件下滴加N- 丁基-4-磺酰氯-1，8-萘酰亞胺，回 流反應(yīng)16h。反應(yīng)結(jié)束后，將過(guò)多的溶劑除去，并用色譜柱分離，得淺黃色目標(biāo)化合物，產(chǎn) 率 60 %。1HNMR(400MHZ，CDCl3) :S(ppm) = 9. 02 (d，J= 8Hz，1H，Ph-H)，8. 70 (d，J= 8Hz, 1H,Ph-H), 8. 60 (d,J= 8Hz, 1H,Ph-H) 8. 41 (d,J= 8Hz, 1H,Ph-H), 7. 92 (t,J= 8Hz, 1H, Ph-H), 7. 16-7. 14 (m, 3H,Ph-H), 7. 05-7. 03 (m, 2H,Ph-H), 5. 06 (d,J= 4Hz, 1H,NH), 4. 21-4. 17 (m, 4H,CH2)，I. 74-1. 69 (m, 2H,CH2)，I. 48-1. 43 (m, 2H,CH2)，I. 01 (t,J= 8Hz, 3H,CH3)。13C NMR(100MHZ，CDCl3) : S(ppm) = 163. 43, 162. 84, 140. 46, 135. 37, 131. 65, 130. 57, 129. 38， 129. 13, 128. 74, 128. 43, 127. 85, 127. 68, 126. 70, 126. 54, 123. 11, 47. 33, 40. 46, 30. 01, 20. 2 6,13.67〇EI-MS:m/z= 422. 47[M]+；calculatedexactmass= 422. 13〇
[0037] 分別配制不同氨基酸和化合物I的10%DMSO的HEPES溶液，Aex= 356nm進(jìn)行熒 光檢測(cè)，熒光光譜圖如圖1所示。圖1表明：本發(fā)明的化合物可用于GSH的熒光檢測(cè)。
[0038] 實(shí)施例2:化合物2的合成
[0039] 合成路線如下：
[0040]
[0041] 反應(yīng)式中THF-四氫呋喃，Et3N-三乙胺
[0042] 具體合成步驟如下：
[0043]1、將哌嗪（245mg, 2. 84mmol)置于IOOm