一種豆粉瓊脂培養(yǎng)基及其應(yīng)用
【專利說明】
[0001]
技術(shù)領(lǐng)域 本發(fā)明為微生物領(lǐng)域,特別涉及一種豆粉瓊脂培養(yǎng)基及其應(yīng)用。
[0002]
【背景技術(shù)】 金黃色葡萄球菌,也稱"金葡菌",細(xì)胞壁含90%的肽聚糖和10%的磷壁酸。其肽聚糖的 網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)比革蘭氏陰性菌致密,染色時(shí)結(jié)晶紫附著后不被酒精脫色故而呈現(xiàn)紫色,相反,陰 性菌的細(xì)胞壁肽聚糖層薄、交聯(lián)度差,脂類含量高,所以紫色復(fù)合物被酒精沖掉然后附著了 沙黃的紅色。金黃色葡萄球菌與青霉素的發(fā)現(xiàn)有很大的淵源。當(dāng)年弗萊明就是在他的金黃 色葡萄球菌的培養(yǎng)皿中發(fā)現(xiàn)有些球菌被殺死了,于是發(fā)現(xiàn)了青霉素。而研究也表明青霉素 只對(duì)以金黃色葡萄球菌為代表的革蘭氏陽性菌作用明顯。這也是由肽聚糖層的厚度和結(jié)構(gòu) 造成的。新出現(xiàn)的耐甲氧西林金黃色葡萄球菌,被稱作超級(jí)細(xì)菌,幾乎能抵抗人類所有的藥 物,但是萬古霉素可以對(duì)付它。典型的金黃色葡萄球菌為球型,直徑0. 8 y m左右,顯微鏡下 排列成葡萄串狀。
[0003] 金黃色葡萄球菌無芽胞、鞭毛,大多數(shù)無莢膜,革蘭氏染色陽性。金黃色葡萄球菌 營(yíng)養(yǎng)要求不高,在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好,需氧或兼性厭氧,最適生長(zhǎng)溫度37° C,最適生 長(zhǎng)pH7. 4,干燥環(huán)境下可存活數(shù)周。平板上菌落厚、有光澤、圓形凸起,直徑0.5~1. 0mm。血 平板菌落周圍形成透明的溶血環(huán)。金黃色葡萄球菌有高度的耐鹽性,可在l(Tl5%NaCl肉湯 中生長(zhǎng)??煞纸馄咸烟恰Ⅺ溠刻?、乳糖、蔗糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。甲基紅反應(yīng)陽性,VP反應(yīng)弱陽性。 許多菌株可分解精氨酸,水解尿素,還原硝酸鹽,液化明膠。金黃色葡萄球菌具有較強(qiáng)的抵 抗力,對(duì)磺胺類藥物、青霉素、紅霉素、土霉素、新霉素等抗生素敏感,但易產(chǎn)生耐藥性,原因 是由于這些菌株產(chǎn)生青霉素酶等。對(duì)堿性染料敏感,十萬分之一的龍膽紫液即可抑制生長(zhǎng)。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004] 本發(fā)明克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足,提供一種豆粉瓊脂培養(yǎng)基及其應(yīng)用。
[0005] 本發(fā)明運(yùn)用生物化學(xué),微生物學(xué)及無機(jī)、有機(jī)、分析化學(xué)和熒光技術(shù)的原理,對(duì)不 同的碳源、氮源、無機(jī)鹽類、維生素、生長(zhǎng)促進(jìn)劑等諸類營(yíng)養(yǎng)組分的組合進(jìn)行篩選,對(duì)培養(yǎng)基 的pH值、離子強(qiáng)度、氧化-還原電勢(shì)、表面張力、氣體環(huán)境等物化因子進(jìn)行了比較,研究出了 本發(fā)明的培養(yǎng)基。
[0006] 本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為: 一種豆粉瓊脂培養(yǎng)基,所述培養(yǎng)基的組分包括22. 7g/L 7. 5%氯化鈉肉湯、3g/L牛心浸 粉、2. 2g/L豌豆浸粉、15. Og/L瓊脂,pH值為7. 2-7. 4 ; 在以上方案的基礎(chǔ)上,所述7. 5%氯化鈉肉湯為每升7. 5%氯化鈉肉湯中含有胰蛋白胨 10. 0g、牛肉粉5. 0g、氯化鈉75. 0g、磷酸氫二鉀2. 0g。
[0007] 本發(fā)明還公開了所述的豆粉瓊脂培養(yǎng)基的應(yīng)用,用于配制血瓊脂、巧克力瓊脂及 亞碲酸鹽瓊脂。
[0008] 牛肉浸粉、豌豆浸粉提供碳氮源、維生素和生長(zhǎng)因子;氯化鈉維持均衡的滲透壓; 瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。 稱取本品3.8g,加熱溶解于100ml蒸餾水中,121°C高壓滅菌15分鐘,冷至50-55°C 時(shí)無菌操作加入5%-10% (V/V)預(yù)溫至37°C的無菌脫纖維羊血,,混勻,傾入無菌平皿。 本發(fā)明的有益效果: 1、 培養(yǎng)基組方簡(jiǎn)單,制備操作方便,成本低,利于推廣應(yīng)用; 2、 菌生長(zhǎng)迅速,變異率低; 3、 便于觀察,分析。
[0009]
【具體實(shí)施方式】 實(shí)施例1: 一種豆粉瓊脂培養(yǎng)基,所述培養(yǎng)基的組分包括22. 7g/L 7. 5%氯化鈉肉湯、3g/L牛心浸 粉、2. 2g/L豌豆浸粉、15. Og/L瓊脂,pH值為7. 2-7. 4 ; 所述7. 5%氯化鈉肉湯為每升7. 5%氯化鈉肉湯中含有胰蛋白胨10. 0g、牛肉粉5. 0g、 氯化鈉75. 0g、磷酸氫二鉀2. 0g。
[0010] 牛肉浸粉、豌豆浸粉提供碳氮源、維生素和生長(zhǎng)因子;氯化鈉維持均衡的滲透壓; 瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。 稱取本品3.8g,加熱溶解于100ml蒸餾水中,121°C高壓滅菌15分鐘,冷至50-55°C 時(shí)無菌操作加入5%-10% (V/V)預(yù)溫至37°C的無菌脫纖維羊血,,混勻,傾入無菌平皿。 在36 ±1°C培養(yǎng)18-24小時(shí)
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種豆粉瓊脂培養(yǎng)基,其特征在于所述培養(yǎng)基的組分包括22. 7g/L 7. 5%氯化鈉肉 湯、3g/L牛心浸粉、2. 2g/L豌豆浸粉、15. Og/L瓊脂,pH值為7. 2-7. 4 ; 根據(jù)權(quán)利要求1所述的豆粉瓊脂培養(yǎng)基,其特征在于所述7. 5%氯化鈉肉湯為每升7. 5% 氯化鈉肉湯中含有胰蛋白胨10.0 g、牛肉粉5. Og、氯化鈉75. Og、磷酸氫二鉀2. Og。
2. -種根據(jù)權(quán)利要求1所述的豆粉瓊脂培養(yǎng)基的應(yīng)用,其特征在于用于配制血瓊脂、 巧克力瓊脂及亞碲酸鹽瓊脂。
【專利摘要】本發(fā)明為微生物領(lǐng)域,特別涉及一種豆粉瓊脂培養(yǎng)基,所述培養(yǎng)基的組分包括22.7g/L7.5%氯化鈉肉湯、3g/L牛心浸粉、2.2g/L豌豆浸粉、15.0g/L瓊脂,pH值為7.2-7.4;所述7.5%氯化鈉肉湯為每升7.5%氯化鈉肉湯中含有胰蛋白胨10.0g、牛肉粉5.0g、氯化鈉75.0g、磷酸氫二鉀2.0g。本發(fā)明培養(yǎng)基組方簡(jiǎn)單,制備操作方便,成本低,利于推廣應(yīng)用;菌生長(zhǎng)迅速,變異率低;便于觀察,分析。
【IPC分類】C12R1-445, C12N1-20, C12R1-19
【公開號(hào)】CN104651255
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201310599779
【發(fā)明人】劉漢斌
【申請(qǐng)人】劉漢斌
【公開日】2015年5月27日
【申請(qǐng)日】2013年11月25日