專利名稱:一種從長春花中提取長春堿的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及天然藥物領域，特別涉及一種采用超聲波提取技術從長春花中提取長 春堿的方法。
背景技術長春堿主要從長春花植物中提取得到，是夾竹桃科植物長春花所含有的一種抗癌 生物堿，是目前臨床使用的抗腫瘤藥物，也可作為合成另一種抗癌生物堿長春瑞賓的化學 中間體。
目前從長春花中提取長春堿的方法有
1.從長春花鮮草中提取生物堿的工藝，中國專利局公開號CN101007033A ；公開 日2007. 8. 1 ；申請?zhí)?200610023692. 7。該發(fā)明涉及一種從長春花鮮草中提取生物堿的工 藝，通過打漿一調(diào)酸一離心、榨汁一過濾一濾液調(diào)PH —四氯化碳萃取一濃縮抽松得到生物 堿混合物。
2. —種長春堿的高效生產(chǎn)方法，中國專利局公開號CN1534038A ；
公開日2004. 10.6 ；申請?zhí)?00410013558.X。該發(fā)明涉及一種長春堿的高效生產(chǎn)方法，通過將長 春花經(jīng)與醇或酸醇提取溶劑混合一勻漿固液萃取一空化混懸萃取一過濾一提取液濃縮一 濃縮液調(diào)PH值一過濾一空化混懸液液萃取一濃縮一純化后得到長春堿成品。
3.從長春花中提取抗癌活性成分的新工藝，中國專利局公開號CN1365978A ；公 開日2002. 08. 28 ；申請?zhí)?011319879. 9。該發(fā)明涉及一種長春花全草干粉中提取長春堿、 長春新堿及熊果酸的工藝方法，采用長春花干料磨粉一苯滲漉一3 10%的酒石酸液逆流 萃取一酸溶物經(jīng)柱層析分離一長春堿和長春新堿。
4.Process for the isolation of alkaloid components from the plantVinca Rosea L.(一種從長春花中分離生物堿成分的工藝)美國專利局公開號4172077 ；
公開日1979. 10. 23 ；申請?zhí)朳HU]RI 638。該發(fā)明涉及一種以長春花干草粉碎后，通過不同的pH萃 取來提取長春花生物堿的工藝方法。原料經(jīng)粉碎一甲醇、2%硫酸水溶液及甲苯滲漉一濃縮 滲漉液一PH梯度萃取一純化得到生物堿。
其中方法2、3、4存在工藝復雜不易推廣、提取時間較長、生產(chǎn)成本高等缺點；方法 1、3、4存在使用苯、甲苯、四氯化碳等有毒溶劑，容易對環(huán)境造成污染。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術的不足而提供一種工藝流程簡單、提取率高、對環(huán) 境無污染的從長春花中提取長春堿的方法。
為了達到上述目的，本發(fā)明采用的技術方案為將長春花鮮草加入提取溶液中制 成勻漿，勻漿經(jīng)超聲波處理后進行固液分離，提取液經(jīng)調(diào)PH值、有機溶劑萃取，萃取液再經(jīng) 濃縮、純化后得到長春堿成品。
本發(fā)明的優(yōu)點[0012]1.工藝流程簡單，易于推廣，對環(huán)境無污染。
2.采用超聲波提取法，具有生產(chǎn)周期短、提取率高的優(yōu)點。
3.本發(fā)明提供的工藝方法也可用于提取長春花所含有的其它生物堿如文多靈、長 春質(zhì)堿、脫水長春堿、長春新堿等。
具體實施方式
下面結合非限定性實施例對本發(fā)明作進一步詳細說明。
本發(fā)明所提供的從長春花中提取長春堿的方法，具體步驟如下
(1)、將長春花地上部分刈割后得到的鮮品、提取溶液同時加入勻漿機中進行勻 漿，然后用0. 5 5%的硫酸水溶液將勻漿的PH值調(diào)至1 3. 5。所述提取溶液為硫酸 水溶液與無機鹽水溶液的混合溶液，其中混合溶液的pH為1 3. 5，無機鹽的摩爾濃度為 0. 5M 3. 5M。所述無機鹽為氯化鈉、氯化鉀、硫酸鈉或硫酸鉀其中的一種或二種以上混合。
(2)、用超聲波提取機以頻率為20KHz IMHz的超聲波處理勻漿，以增加長春堿的 溶出量，時間為10 90分鐘。
(3)、采用沉降離心機離心除去固體物質(zhì)得到提取液，分離因數(shù)為1000 6000，時 間3 20分鐘。
(4)、用濃氨水將提取液的PH值調(diào)至7. 5 12，然后用有機溶劑進行萃取。所述有 機溶劑是乙酸乙酯。
(5)、將萃取液在溫度35 50°C、負壓0.06 0. IMPa或常壓下濃縮至干得到長春 堿混合物。
(6)、用正相硅膠柱對長春堿混合物進行純化，所用洗脫液為含1 10%甲醇的三 氯甲烷溶液。用洗脫液進行洗脫，然后合并含有長春堿的洗脫液，在溫度35 50°C、負壓 0. 06 0. IMPa條件下回收溶劑得到長春堿粗品。
(7)、將所得長春堿粗品進行重結晶即得長春堿產(chǎn)品；所用的重結晶溶劑為 85% 95%的甲醇或乙醇溶液。
實施例一、
將含水率83 %的鮮長春花50kg與提取液(pH值為2. 5的硫酸水溶液，含IM氯化 鈉)100L混合同時投入勻漿機進行勻漿，勻漿液以2%的硫酸水溶液調(diào)至pH 2. 5，勻漿液經(jīng) 轉子泵打入超聲波提取機，25KHz超聲波處理30分鐘，勻漿液再經(jīng)轉子泵打入沉降離心機 內(nèi)離心，分離因數(shù)3000，時間10分鐘，收集上清液。將沉淀物加入新的提取液重復上述操作 3次，合并上清液，用濃氨水調(diào)pH值至8 9，與1/4體積的乙酸乙酯置于萃取罐中，攪拌萃 取10分鐘，靜置10分鐘，將乙酸乙酯萃取液經(jīng)溫度為30°C、負壓為0. IMPa的溶劑濃縮器 回收乙酸乙酯，將萃取液濃縮至干，經(jīng)結晶及正相硅膠柱層析分離后，再經(jīng)重結晶得到純度 98. 9的長春堿1. 05g。
實施例二、
將含水率45%的長春花50kg與提取液(pH值為1. 5的硫酸水溶液，含2M硫酸 鈉)100L混合同時投入勻漿機進行勻漿，勻漿液以2%的硫酸水溶液調(diào)至pH 1. 5，勻漿液經(jīng) 轉子泵打入超聲波提取機，IMHz超聲波處理30分鐘，勻漿液再經(jīng)轉子泵打入沉降離心機內(nèi) 離心，分離因數(shù)3000，時間5分鐘，收集上清液。將沉淀物加入新的提取液重復上述操作3次，合并上清液，用濃氨水調(diào)pH8 9，與1/4體積的乙酸乙酯置于萃取罐中，攪拌萃取15分 鐘，靜置10分鐘，將乙酸乙酯萃取液經(jīng)溫度為30°C、負壓為0. IMPa的溶劑濃縮器回收乙酸 乙酯，將萃取液濃縮至干，經(jīng)結晶及正相硅膠柱層析分離后，再經(jīng)重結晶得到純度98. 1的 長春堿1.33g。
權利要求
一種從長春花中提取長春堿的方法，其特征在于具體步驟如下(1)、將長春花地上部分刈割后得到的鮮品、提取溶液同時加入勻漿機中進行勻漿，然后用0.5～5％的硫酸水溶液將勻漿的pH值調(diào)至1～3.5；所述提取溶液為硫酸水溶液與無機鹽水溶液的混合溶液，其中混合溶液的pH為1～3.5，無機鹽的摩爾濃度為0.5M～3.5M；所述無機鹽為氯化鈉、氯化鉀、硫酸鈉或硫酸鉀其中的一種或二種以上混合；(2)、用超聲波提取機以頻率為20KHz～1MHz的超聲波處理勻漿；(3)、采用沉降離心機離心除去固體物質(zhì)得到提取液，分離因數(shù)為1000～6000，時間3～20分鐘；(4)、用濃氨水將提取液的pH值調(diào)至7.5～12，然后用有機溶劑進行萃?。凰鲇袡C溶劑是乙酸乙酯；(5)、將萃取液在溫度35～50℃、負壓0.06～0.1MPa或常壓下濃縮至干得到長春堿混合物；(6)、用正相硅膠柱對長春堿混合物進行純化，所用洗脫液為含1～10％甲醇的三氯甲烷溶液；用洗脫液進行洗脫，然后合并含有長春堿的洗脫液，在溫度35～50℃、負壓0.06～0.1MPa條件下回收溶劑得到長春堿粗品；(7)、將所得長春堿粗品進行重結晶即得長春堿產(chǎn)品。
2.根據(jù)權利要求
1所述的從長春花中提取長春堿的方法，其特征在于所述超聲波處 理勻漿的時間為10 90分鐘。
3.根據(jù)權利要求
1所述的從長春花中提取長春堿的方法，其特征在于所用的重結晶 溶劑為85% 95%的甲醇或乙醇溶液。
專利摘要
本發(fā)明公開了一種從長春花中提取長春堿的方法，它是將長春花鮮品加入含鹽的酸性提取溶液制成勻漿，經(jīng)超聲波處理后采用沉降離心機進行固液分離，提取液經(jīng)調(diào)pH值至堿性、有機溶劑萃取，萃取液再經(jīng)濃縮、純化后得到長春堿成品。本發(fā)明具有工藝簡單、生產(chǎn)周期短、提取效率高、無污染等特點，易于在生產(chǎn)中應用。
文檔編號A61K36/24GKCN101337972 B發(fā)布類型授權 專利申請?zhí)朇N 200810131031
公開日2010年9月15日 申請日期2008年8月12日
發(fā)明者何際嬋, 龐玉新, 晏小霞, 王建榮, 王祝年, 董志超, 鄒冬梅 申請人:中國熱帶農(nóng)業(yè)科學院熱帶作物品種資源研究所導出引文BiBTeX, EndNote, RefMan專利引用 (2),