專利名稱:高濃度光合細(xì)菌制劑的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及高濃度光合細(xì)菌制劑的制備方法。
背景技術(shù)：
光合細(xì)菌制劑的制備方法很多，如公開號為CN1104250A的中國專利介紹的方法為在菌種培養(yǎng)液中接種30％以上的兩株菌株的混合菌群，接種后的培養(yǎng)液在溫度為26-32℃，光照強(qiáng)度為3000-5000LX、pH為6-8，厭氧條件下培養(yǎng)48-72小時(shí)，然后將培養(yǎng)出的菌液在敞開體系中、自然光照下，根據(jù)菌液中的碳源殘存量適時(shí)添加一次以上的碳源，在溫度為20-35℃、好氧充氣條件下培養(yǎng)72-120小時(shí)后，收集菌液分裝，制成液體微生物混合制劑。還有的是在培養(yǎng)過程中進(jìn)行定時(shí)攪拌(如公開號為CN1400303A的中國專利)，可見，絕大多數(shù)的光合細(xì)菌制劑制備方法的關(guān)注重點(diǎn)都是集中于對碳源、光照強(qiáng)度、溫度、氧含量及pH值的控制，通過添加碳源、充氧、攪拌等多種方法來進(jìn)行菌劑生產(chǎn)，這些方法一是在生產(chǎn)中需要添加碳源、充入氧氣，操作過程繁瑣，并且需要一定的設(shè)備；二是容易感染雜菌，影響菌劑質(zhì)量；三是培養(yǎng)時(shí)間長，菌體含量低，品質(zhì)難以保障。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種生長速度快、菌體含量高、具有抑菌作用的高濃度光合細(xì)菌制劑的制備方法。
本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是在光合細(xì)菌基本培養(yǎng)基中加入促酵劑和木瓜提取液制成菌體生產(chǎn)培養(yǎng)液，再加入占菌體培養(yǎng)液總體積10～20％的菌種，混合均勻后裝入透明容器中，在溫度28～35℃、光照強(qiáng)度1500～2500LX的條件下微好氧培養(yǎng)72～120小時(shí)，制成活菌含量在30億/ml以上的光合菌劑。
本發(fā)明中所述的光合細(xì)菌菌種均可外購，至少采用兩種或兩種以上的菌株進(jìn)行混合培養(yǎng)，菌種密度在30億/ml以上。
所述的光合細(xì)菌基本培養(yǎng)基的組成為酵母膏1～2g，磷酸二氫鉀0.4～0.6g，硫酸鎂0.3～0.6g，乙酸鈉2～4g，水1000g，pH值6.5～7.5。
本發(fā)明中所述的促酵劑是指黃腐酸。黃腐酸在菌體生產(chǎn)培養(yǎng)液中的添加量為0.05～0.1％。
以上所說的木瓜提取液是指新鮮木瓜絞碎后，加入3倍重量的水，用文火煮沸半小時(shí)，過濾后得到的原液。木瓜提取液的添加量為0.5～1.5％。
以上所說的透明容器是指透明的塑料容器或玻璃容器。
以上所說的微好氧培養(yǎng)是指菌體培養(yǎng)容器用滅菌棉塞封口，培養(yǎng)過程中每隔5～8小時(shí)搖勻一次。
以上所說的菌體培養(yǎng)液所采用的原料，如果是用于農(nóng)業(yè)種植或生活垃圾、污水處理，則采用工業(yè)級原料；如果是用于禽獸飼養(yǎng)、水產(chǎn)養(yǎng)殖，則采用食品級原料；水可以采用潔凈的河水、地下水、自來水等，但是其硬度、大腸桿菌數(shù)、BOD值、氯含量等各項(xiàng)指標(biāo)均應(yīng)滿足一般微生物生長的要求。
本發(fā)明中所加入的黃腐酸能明顯促進(jìn)光合細(xì)菌的生長速度，縮短生產(chǎn)時(shí)間，提高培養(yǎng)液中的菌體密度；木瓜提取液中含有豐富的維生素、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸、木瓜酵素等有效成分，這些成分均能被光合細(xì)菌利用，為光合細(xì)菌生長提供了充足的養(yǎng)份。此外，黃腐酸和木瓜中含有的有機(jī)酸均為弱酸，在培養(yǎng)液中能起緩沖作用，使pH值保持相對穩(wěn)定，有利于光合細(xì)菌的生長。另外，木瓜酵素能抑制雜菌生長，提高光合細(xì)菌的活性。
本發(fā)明與一般的培養(yǎng)方法相比，其優(yōu)點(diǎn)在于一是生長過程中無需添加碳源和充氧，操作簡單；二是培養(yǎng)時(shí)間縮短為3～5天，提高了生產(chǎn)效率；三是菌體得率高，成品中菌體含量在3‰以上；四是基本無雜菌，有一定的抑菌作用。
具體實(shí)施方式
下面通過實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。
實(shí)施例11.配制菌種光合細(xì)菌采用莢膜紅假單胞菌Rhodopseudomonas capsulata和沼澤紅假單胞菌Rps.Palustris，將這兩個(gè)菌株分別培養(yǎng)后按體積比1∶1混合得到混合菌種；2.配制培養(yǎng)液稱取酵母膏1.5kg，磷酸二氫鉀0.5kg，硫酸鎂0.3kg，乙酸鈉2.5kg，黃腐酸0.8kg，分別溶解于1000kg水中，再加入木瓜提取液1kg，調(diào)整pH值為7.0；3.培養(yǎng)菌種將180kg混合菌種加入培養(yǎng)液中，混合均勻，裝入透明的塑料桶中，塞上棉塞，在溫度32～35℃、光照強(qiáng)度2000LX的條件下培養(yǎng)3～5天，培養(yǎng)過程中每隔5小時(shí)搖勻一次，當(dāng)菌液中活菌濃度達(dá)到30億/ml以上時(shí)，制成光合菌劑。
實(shí)施例21.配制菌種光合細(xì)菌采用莢膜紅假單胞菌Rhodobacter capsulatus、沼澤紅假單胞菌Rps.rutila和球形紅假單胞菌Rps.Globiformis。將三個(gè)菌株分別培養(yǎng)后按體積比1∶1∶1混合得到混合菌種；2.配制培養(yǎng)液稱取酵母膏2kg，磷酸二氫鉀0.5kg，硫酸鎂0.5kg，乙酸鈉3kg，黃腐酸0.5kg，分別溶解于1000kg水中，再加入木瓜提取液1.5kg，調(diào)整pH值為7.0；3.培養(yǎng)菌種將200kg混合菌種加入培養(yǎng)液中，混合均勻，裝入透明的塑料桶中，塞上棉塞，在溫度32～35℃、光照強(qiáng)度2500LX的條件下培養(yǎng)4天，培養(yǎng)過程中每隔5小時(shí)搖勻一次，當(dāng)菌液中活菌濃度達(dá)到30億/ml以上時(shí)，制成光合菌劑。
權(quán)利要求
1.一種高濃度光合細(xì)菌制劑的制備方法，其特征在于，在光合細(xì)菌基本培養(yǎng)基中加入促酵劑和木瓜提取液制成菌體生產(chǎn)培養(yǎng)液，再加入占菌體培養(yǎng)液總體積10～20％的菌種，混合均勻后裝入透明容器中，在溫度28～35℃、光照強(qiáng)度1500～2500LX的條件下微好氧培養(yǎng)72～120小時(shí)，制成活菌含量在30億/ml以上的光合菌劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求
1所述的高濃度光合細(xì)菌制劑的制備方法，其特征在于，促酵劑是指黃腐酸，其在菌體生產(chǎn)培養(yǎng)液中的添加量為0.05～0.1％。
3.根據(jù)權(quán)利要求
1所述的高濃度光合細(xì)菌制劑的制備方法，其特征在于，木瓜提取液是指新鮮木瓜絞碎后，加入3倍重量的水，用文火煮沸半小時(shí)，過濾后得到的原液，其在菌體生產(chǎn)培養(yǎng)液中的添加量為0.5～1.5％。
4.根據(jù)權(quán)利要求
1所述的高濃度光合細(xì)菌制劑的制備方法，其特征在于，光合細(xì)菌基本培養(yǎng)基的組成為酵母膏1～2g，磷酸二氫鉀0.4～0.6g，硫酸鎂0.3～0.6g，乙酸鈉2～4g，水1000g，pH值6.5～7.5。
5.根據(jù)權(quán)利要求
1所述的高濃度光合細(xì)菌制劑的制備方法，其特征在于，微好氧培養(yǎng)是指菌體培養(yǎng)容器用滅菌棉塞封口，培養(yǎng)過程中每隔5～8小時(shí)搖勻一次。
專利摘要
一種高濃度光合細(xì)菌制劑的制備方法，具體為在光合細(xì)菌基本培養(yǎng)基中加入促酵劑和木瓜提取液制成菌體生產(chǎn)培養(yǎng)液，再加入占菌體培養(yǎng)液總體積10～20％的菌種，混合均勻后裝入透明容器中，在溫度28～35℃、光照強(qiáng)度1500～2500LX的條件下微好氧培養(yǎng)72～120小時(shí)，制成活菌含量在30億/ml以上的光合菌劑，其中所述的微好氧培養(yǎng)是指菌體培養(yǎng)容器用滅菌棉塞封口，培養(yǎng)過程中每隔5～8小時(shí)搖勻一次。一般的培養(yǎng)方法相比，本發(fā)明所述的制備方法操作簡單，培養(yǎng)時(shí)間短，生長速度快，菌體得率高，菌劑質(zhì)量穩(wěn)定，并且具有一定的抑菌作用。
文檔編號C12N1/20GKCN1706933SQ200410048678
公開日2005年12月14日 申請日期2004年6月11日
發(fā)明者郭偉光 申請人:郭偉光導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan