本發(fā)明涉及il-15前藥及其制備和使用方法。本發(fā)明還涉及所述可活化的il-15前藥的裂解產(chǎn)物及其使用方法。

背景技術(shù)：

1、細(xì)胞因子是有效的免疫激動劑，因此被認(rèn)為是非常有前途的腫瘤治療劑。例如，目前正在研究白細(xì)胞介素-15(il-15)的抗腫瘤活性并已用于人類治療。然而，細(xì)胞因子的治療窗口很窄，且血清半衰期短。因此，細(xì)胞因子的治療性給藥會產(chǎn)生不期望的全身效應(yīng)和毒性。由于需要在細(xì)胞因子的預(yù)期作用部位(例如，腫瘤)施用大量細(xì)胞因子才能達(dá)到所需的細(xì)胞因子水平，因此加劇了上述問題。

2、抗體被視為治療癌癥、自身免疫性疾病和慢性炎癥性疾病的理想候選物，但有時抗體治療受限于其與健康組織的交叉反應(yīng)性。已經(jīng)描述了多種通過工程抗體改善腫瘤靶向性從而克服這些“脫靶”效應(yīng)的方法，例如，通過制備在腫瘤微環(huán)境中選擇性激活的掩蔽抗體(參見wo2003/068934、wo2004/009638、wo2009/025846、wo2101/081173和wo2014/103973)。

3、本技術(shù)涉及具有與掩蔽多肽(mp)連接的可裂解部分的條件性可活化前藥(例如，細(xì)胞因子前藥和抗體前藥)用于治療癌癥或其他疾病。掩蔽多肽(mp)可以發(fā)揮對生物活性部分的空間位阻作用。所述可裂解部分可被設(shè)計為被特定組織或病理組織的蛋白酶裂解，從而使前藥能夠在所需部位(例如，腫瘤)優(yōu)先激活，以克服細(xì)胞因子的劑量限制或抗體的“脫靶”效應(yīng)。

4、申請概述

5、本技術(shù)提供il-15前藥，其中所述il-15前藥包含：(i)一個或多個il-15細(xì)胞因子(i)，(ii)一個或多個可裂解部分(cm)，以及(iii)一個或多個掩蔽多肽(mp)。

6、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述掩蔽多肽(mp)減弱所述il-15細(xì)胞因子(i)的活性，以及所述可裂解部分(cm)易在腫瘤或靶細(xì)胞處或附近裂解。

7、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述il-15細(xì)胞因子(i)和所述掩蔽多肽(mp)通過所述可裂解部分(cm)連接。

8、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述il-15前藥進(jìn)一步包含il-15rα或其功能片段(s)，以及其中所述il-15rα或其功能片段選自il-15rα胞外域或sushi結(jié)構(gòu)域或功能類似物。

9、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述il-15rα或其功能片段(s)和所述掩蔽多肽(mp)通過所述可裂解部分(cm)連接。

10、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述il-15前藥進(jìn)一步包含一個或多個半衰期延長部分(c)。

11、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述il-15細(xì)胞因子(i)和所述半衰期延長部分(c)連接。

12、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述il-15rα或其功能片段(s)和所述半衰期延長部分(c)連接。

13、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述掩蔽多肽(mp)和所述半衰期延長部分(c)通過所述可裂解部分(cm)連接。

14、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述il-15細(xì)胞因子(i)和所述半衰期延長部分(c)連接，所述il-15rα或其功能片段(s)和所述il-15細(xì)胞因子(i)連接，以及所述掩蔽多肽(mp)和所述il-15rα或其功能片段(s)通過所述可裂解部分(cm)連接。

15、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述il-15細(xì)胞因子(i)和所述半衰期延長部分(c)連接，所述il-15rα或其功能片段(s)和所述半衰期延長部分(c)連接，以及所述掩蔽多肽(mp)和所述il-15細(xì)胞因子(i)通過所述可裂解部分(cm)連接。

16、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述il-15rα或其功能片段(s)和所述半衰期延長部分(c)連接，所述il-15細(xì)胞因子(i)和所述il-15rα或其功能片段(s)連接，以及所述掩蔽多肽(mp)和所述il-15細(xì)胞因子(i)通過所述可裂解部分(cm)連接。

17、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述il-15細(xì)胞因子(i)和所述半衰期延長部分(c)連接，所述il-15rα或其功能片段(s)和所述半衰期延長部分(c)連接，以及所述掩蔽多肽(mp)和所述il-15rα或其功能片段(s)通過所述可裂解部分(cm)連接。

18、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述掩蔽多肽(mp)和所述半衰期延長部分(c)通過所述可裂解部分(cm)連接，所述il-15rα或其功能片段(s)和所述半衰期延長部分(c)連接，以及所述il-15細(xì)胞因子(i)和所述il-15rα或其功能片段(s)連接。

19、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述掩蔽多肽(mp)和所述半衰期延長部分(c)通過所述可裂解部分(cm)連接，所述il-15細(xì)胞因子(i)和所述半衰期延長部分(c)連接，以及所述il-15rα或其功能片段(s)和所述il-15細(xì)胞因子(i)連接。

20、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥是單體或二聚體。

21、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中，一個單體包含第一個半衰期延長部分(c)、所述il-15rα或其功能片段(s)、所述il-15細(xì)胞因子(i)；以及，另一個單體包含第二個半衰期延長部分(c)、所述掩蔽多肽(mp)和所述可裂解部分(cm)，其中所述掩蔽多肽(mp)和第二個半衰期延長部分(c)通過所述可裂解部分(cm)連接

22、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中，一個單體包含第一個半衰期延長部分(c)、所述il-15rα或其功能片段(s)、所述掩蔽多肽(mp)和所述可裂解部分(cm)；以及，另一個單體包含第二個半衰期延長部分(c)和所述il-15細(xì)胞因子(i)。

23、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中，一個單體包含第一個半衰期延長部分(c)、所述il-15細(xì)胞因子(i)、所述掩蔽多肽(mp)和所述可裂解部分(cm)；以及，另一個單體包含第二個半衰期延長部分(c)和所述il-15rα或其功能片段(s)。

24、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中，一個單體和另一個單體分別包含所述半衰期延長部分(c)、所述il-15細(xì)胞因子(i)、所述il-15rα或其功能片段(s)、所述可裂解部分(cm)和所述掩蔽多肽(mp)。

25、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中，在一個單體中：所述il-15細(xì)胞因子(i)與所述il-15rα或其功能片段(s)均和第一個半衰期延長部分(c)連接；以及，在另一個單體中：所述掩蔽多肽(mp)和第二個半衰期延長部分(c)通過所述可裂解部分(cm)連接。

26、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中，在一個單體中：所述il-15細(xì)胞因子(i)和第一個半衰期延長部分(c)連接，所述il-15rα或其功能片段(s)和所述il-15細(xì)胞因子(i)連接；以及，在另一個單體中：所述掩蔽多肽(mp)和第二個半衰期延長部分(c)通過所述可裂解部分(cm)連接。

27、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中，在一個單體中：所述il-15rα或其功能片段(s)和第一個半衰期延長部分(c)連接，所述il-15細(xì)胞因子(i)和所述il-15rα或其功能片段(s)連接；以及，在另一個單體中：所述掩蔽多肽(mp)和第二個半衰期延長部分(c)通過所述可裂解部分(cm)連接。

28、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中，在一個單體中：所述il-15rα或其功能片段(s)和第一個半衰期延長部分(c)連接，所述掩蔽多肽(mp)和第一個半衰期延長部分(c)通過所述可裂解部分(cm)連接；以及，在另一個單體中：所述il-15細(xì)胞因子(i)和第二個半衰期延長部分(c)連接。

29、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中在一個單體中：所述il-15rα或其功能片段(s)和第一個半衰期延長部分(c)連接，所述掩蔽多肽(mp)和所述il-15rα或其功能片段(s)通過所述可裂解部分(cm)連接；以及，在另一個單體中：所述il-15細(xì)胞因子(i)和第二個半衰期延長部分(c)連接。

30、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中在一個單體中：所述il-15細(xì)胞因子(i)和第一個半衰期延長部分(c)連接，所述掩蔽多肽(mp)和第一個半衰期延長部分(c)通過所述可裂解部分(cm)連接；以及，在另一個單體中：所述il-15rα或其功能片段(s)和第二個半衰期延長部分(c)連接。

31、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中在一個單體中：所述il-15細(xì)胞因子(i)和第一個半衰期延長部分(c)連接，所述掩蔽多肽(mp)和所述il-15細(xì)胞因子(i)通過所述可裂解部分(cm)連接；以及，在另一個單體中：所述il-15rα或其功能片段(s)和第二個半衰期延長部分(c)連接。

32、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述il-15rα或其功能片段(s)和所述il-15細(xì)胞因子(i)共價連接；或所述il-15rα或其功能片段(s)和所述il-15細(xì)胞因子(i)非共價連接，并形成il-15/il-15rα復(fù)合物。

33、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述il-15細(xì)胞因子(i)包含一個或多個氨基酸突變，所述氨基酸突變選自由l45d、l45e、q48k、s51d、l52d、e64k、i67d、i67e、i68d和n72d組成的組中。

34、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述il-15細(xì)胞因子(i)包含seq?idnos:22-23和67-76中任一所示的氨基酸序列，或其變體，所述變體與seq?id?nos:22-23和67-76中任一所示的氨基酸序列具有至少90％(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性。

35、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述il-15rα或其功能片段(s)包含seq?id?nos:24-26中任一所示的氨基酸序列，或其變體，所述變體與seq?id?nos:24-26中任一所示的氨基酸序列具有至少90％(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性。

36、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述半衰期延長部分(c)包含fc結(jié)構(gòu)域；優(yōu)選地，所述fc結(jié)構(gòu)域選自由人igg1?fc結(jié)構(gòu)域、人igg2?fc結(jié)構(gòu)域、人igg3?fc結(jié)構(gòu)域、人igg4?fc結(jié)構(gòu)域、iga?fc結(jié)構(gòu)域、igd?fc結(jié)構(gòu)域、ige?fc結(jié)構(gòu)域和igm?fc結(jié)構(gòu)域組成的組中；更優(yōu)選地，所述fc結(jié)構(gòu)域是人igg1?fc結(jié)構(gòu)域。

37、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述fc結(jié)構(gòu)域是具有l(wèi)234a和l235a突變的人igg1?fc結(jié)構(gòu)域，所述突變位點根據(jù)eu編號系統(tǒng)編號。

38、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述fc結(jié)構(gòu)域包含杵-臼(knobs-into-holes)突變(fc杵(knob)和fc臼(hole))。

39、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述fc杵(knob)在fc結(jié)構(gòu)域包含t366w突變，以及所述fc臼(hole)在fc結(jié)構(gòu)域包含t366s、l368a和y407v突變，所述突變位點根據(jù)eu編號系統(tǒng)編號。

40、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述fc杵(knob)進(jìn)一步包含s354c突變，以及所述fc臼(hole)進(jìn)一步包含y349c突變，所述突變位點根據(jù)eu編號系統(tǒng)編號。

41、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述掩蔽多肽(mp)由四種或五種氨基酸殘基組成，所述氨基酸殘基選自由脯氨酸(p)、丙氨酸(a)、絲氨酸(s)、甘氨酸(g)和谷氨酸(e)組成的組中。

42、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述掩蔽多肽(mp)由五種氨基酸g、s、p、e和a組成；進(jìn)一步地，在所述掩蔽多肽中，氨基酸殘基g的百分比約為15％-30％，優(yōu)選為20％；在所述掩蔽多肽中，氨基酸殘基s的百分比約為20％-40％，優(yōu)選為40％；在所述掩蔽多肽中，氨基酸殘基p的百分比約為15％-40％，優(yōu)選為20％；在所述掩蔽多肽中，氨基酸殘基e的百分比約為1％-20％，優(yōu)選為10％；在所述掩蔽多肽中，氨基酸殘基a的百分比約為5％-20％，優(yōu)選為10％；當(dāng)氨基酸數(shù)量不是整數(shù)時，取整數(shù)值。

43、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述掩蔽多肽(mp)由四種氨基酸s、p、e和g組成；進(jìn)一步地，在所述掩蔽多肽中，氨基酸殘基s的百分比約為20％-40％，優(yōu)選為23％；在所述掩蔽多肽中，氨基酸殘基p的百分比約為15％-40％，優(yōu)選為29％；在所述掩蔽多肽中，氨基酸殘基e的百分比約為1％-20％，優(yōu)選為18％；在所述掩蔽多肽中，氨基酸殘基g的百分比約為15％-30％，優(yōu)選為30％；當(dāng)氨基酸數(shù)量不是整數(shù)時，取整數(shù)值。

44、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述掩蔽多肽(mp)包含約40至720個氨基酸殘基；優(yōu)選地，包含80至320個氨基酸殘基；更優(yōu)選地，包含80至240個氨基酸殘基。

45、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述掩蔽多肽(mp)包含氨基酸序列seq?id?no:6。

46、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述掩蔽多肽(mp)包含氨基酸序列seq?id?no:1。

47、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述掩蔽多肽(mp)包含seq?idnos:1-5中任一所示的氨基酸序列；或其變體，所述變體與seq?id?nos:1-5中任一所示的氨基酸序列具有至少90％(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性；或其變體，所述變體包含一個或多個氨基酸取代、添加和/或缺失。

48、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述可裂解部分(cm)包含氨基酸序列mvx1x2ax3tx4sg(seq?id?no:49)，其中x1選自p、l、v或a，x2選自l或s，x3選自l、v、p或y，以及x4選自a或v。

49、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述可裂解部分(cm)包含尿激酶型纖溶酶原激活劑(upa)、基質(zhì)金屬蛋白酶(mmp)1、mmp2、mmp3、mmp4、mmp5、mmp6、mmp7、mmp8、mmp9、mmp10、mmp11、mmp12、mmp13、mmp14、成纖維細(xì)胞活化蛋白(fap)、基質(zhì)蛋白酶、組織蛋白酶、半胱天冬酶、凝血酶、金屬蛋白酶、絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、豆莢蛋白酶(legumain)、激肽釋放酶(kallikrein)、組織蛋白酶a(cathepsin?a)、組織蛋白酶b(cathepsin?b)、糜蛋白酶、位于腫瘤部位或其周圍環(huán)境的蛋白酶或其任何組合的底物序列。

50、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥，其中所述可裂解部分(cm)包含seq?idnos:8-16中任一所示的氨基酸序列，或其變體，所述變體與seq?id?nos:8-16中任一所示的氨基酸序列具有至少90％(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性。

51、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中，在一個單體中，所述il-15rα或其功能片段(s)和第一個fc結(jié)構(gòu)域連接，以及，在另一個單體中，所述il-15細(xì)胞因子(i)和第二個fc結(jié)構(gòu)域連接，所述掩蔽多肽(mp)和所述il-15細(xì)胞因子(i)通過所述可裂解部分(cm)連接。

52、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中，一個單體包含氨基酸序列seq?id?no:33或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:33具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性；以及，另一個單體包氨基酸序列seq?id?no:32或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:32具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性。

53、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中，一個單體包含氨基酸序列seq?id?no:34或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:34具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性；以及，另一個單體包氨基酸序列seq?id?no:32或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:32具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性。

54、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中，一個單體包含氨基酸序列seq?id?no:36或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:36具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性；以及，另一個單體包氨基酸序列seq?id?no:32或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:32具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性。

55、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中，一個單體包含氨基酸序列seq?id?no:37或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:37具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性；以及，另一個單體包氨基酸序列seq?id?no:32或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:32具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性。

56、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中，一個單體包含氨基酸序列seq?id?no:38或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:38具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性；以及，另一個單體包氨基酸序列seq?id?no:32或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:32具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性。

57、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中，一個單體包含氨基酸序列seq?id?no:39或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:39具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性；以及，另一個單體包氨基酸序列seq?id?no:32或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:32具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性。

58、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中，一個單體包含氨基酸序列seq?id?no:45或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:45具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性；以及，另一個單體包氨基酸序列seq?id?no:46或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:46具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性。

59、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中，一個單體包含氨基酸序列seq?id?no:47或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:47具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性；以及，另一個單體包氨基酸序列seq?id?no:40或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:40具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性。

60、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中，一個單體包含氨基酸序列seq?id?no:33或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:33具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性；以及，另一個單體包氨基酸序列seq?id?no:40或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:40具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性。

61、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中，一個單體包含氨基酸序列seq?id?no:62或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:62具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性；以及，另一個單體包氨基酸序列seq?id?no:63或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:63具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性。

62、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中，一個單體包含氨基酸序列seq?id?no:41或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:41具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性；以及，另一個單體包氨基酸序列seq?id?no:63或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:63具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性。

63、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中，一個單體包含氨基酸序列seq?id?no:64或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:64具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性；以及，另一個單體包氨基酸序列seq?id?no:65或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:65具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性。

64、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中，一個單體包含氨基酸序列seq?id?no:62或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:62具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性；以及，另一個單體包氨基酸序列seq?id?no:65或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:65具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性。

65、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中，一個單體包含氨基酸序列seq?id?no:41或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:41具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性；以及，另一個單體包氨基酸序列seq?id?no:65或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:65具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性。

66、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中，一個單體包含氨基酸序列seq?id?no:66或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:66具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性；以及，另一個單體包氨基酸序列seq?id?no:65或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:65具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性。

67、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中，一個單體包含氨基酸序列seq?id?no:43或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:43具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性；以及，另一個單體包氨基酸序列seq?id?no:46或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:46具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性。

68、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中，一個單體包含氨基酸序列seq?id?no:39或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:39具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性；以及，另一個單體包氨基酸序列seq?id?no:40或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:40具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性。

69、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中，一個單體包含氨基酸序列seq?id?no:41或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:41具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性；以及，另一個單體包氨基酸序列seq?id?no:87或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:87具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性。

70、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中，一個單體包含氨基酸序列seq?id?no:41或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:41具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性；以及，另一個單體包氨基酸序列seq?id?no:91或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:91具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性。

71、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中，一個單體包含氨基酸序列seq?id?no:41或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:41具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性；以及，另一個單體包氨基酸序列seq?id?no:93或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:93具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性。

72、在一些實施例中，本文提供的il-15前藥包含兩個單體，其中，一個單體包含氨基酸序列seq?id?no:41或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:41具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性；以及，另一個單體包氨基酸序列seq?id?no:94或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:94具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性。

73、在一些實施例中，本文提供的il-15藥物包含兩個單體，其中，在一個單體中，所述il-15rα或其功能片段(s)和第一個fc結(jié)構(gòu)域連接，以及，在另一個單體中，所述il-15細(xì)胞因子(i)和第二個fc結(jié)構(gòu)域連接。

74、在一些實施例中，本文提供的il-15藥物包含兩個單體，其中，一個單體包含氨基酸序列seq?id?no:43或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:43具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性；以及，另一個單體包氨基酸序列seq?id?no:83或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:83具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性。

75、在一些實施例中，本文提供的il-15藥物包含兩個單體，其中，一個單體包含氨基酸序列seq?id?no:43或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:43具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性；以及，另一個單體包氨基酸序列seq?id?no:84或其變體，所述變體與氨基酸序列seq?id?no:84具有至少約80％(例如，至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)序列同一性。

76、同時提供編碼本文提供的任何il-15前藥或藥物的分離的核酸分子，包含所述核酸分子的載體，包含所述核酸分子或所述載體的宿主細(xì)胞(例如，cho細(xì)胞、hek?293細(xì)胞、hela細(xì)胞或cos細(xì)胞)，組合物(例如，藥物組合物)，試劑盒以及包含本文提供的任何掩蔽多肽、可裂解部分、前藥或藥物的制品。還提供使用本文提供的任何il-15前藥或藥物或其藥物組合物用于個體(例如，人類)治療疾病(例如，腫瘤)的方法。

技術(shù)實現(xiàn)思路