本發(fā)明涉及中藥提取技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種從黃芩中提取黃芩苷的方法。
背景技術(shù):
黃芩為一種常用中藥,具有清熱解毒、瀉火解毒、止血、安胎等功效,臨床應(yīng)用廣,且不產(chǎn)生抗藥性。黃芩苷作為黃芩的重要有效成分之一,藥理上已證實(shí)具有抑菌、清熱降壓、利尿、保肝、利膽、鎮(zhèn)靜、解除平滑肌痙攣、抗過敏、抗炎、抗癌等作用。黃芩苷還能吸水紫外線,清除氧自由基,又能抑制黑色素的生成,因此即可用于醫(yī)藥,也可用于化妝品。
黃芩苷傳統(tǒng)的提取方法是將新鮮的黃芩根切碎,以10倍量的水加熱沸騰提取,合并提取液,放置提取液至常溫,加酸調(diào)節(jié)ph值,黃芩苷隨即沉降至底部,去掉上清液,沉淀加水?dāng)嚢?,繼續(xù)調(diào)酸,得到沉淀的黃芩苷粗品,再以適當(dāng)?shù)娜軇┻M(jìn)行結(jié)晶和重結(jié)晶,即得產(chǎn)品。這種方法存在提取時(shí)間長(zhǎng),成本高,提取率有待提高等缺點(diǎn)。
cn103044507b公開了一種從野生黃芩里提取黃芩苷的工藝方法,它采用復(fù)合纖維素酶酶解、超聲波乙醇提取、過濾、聚酰胺初步精制、乙醇洗脫、重結(jié)晶等工序完成,據(jù)稱可得到純度在98%以上的黃芩苷。但工藝復(fù)雜,生產(chǎn)周期長(zhǎng),生產(chǎn)成本高。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)存在的不足,本發(fā)明的目的是提供一種新的從黃芩中提取黃芩苷的方法,該方法只需兩步即可完成,更適應(yīng)于工業(yè)化生產(chǎn)。
為實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采用的技術(shù)方案是:一種從黃芩中提取黃芩苷的方法,是通過以下步驟來完成的:
(1)酶解:將黃芩根粉碎至40-60目,加適量水、加酶,水解,所用酶為纖維素酶、淀粉酶及中性蛋白酶三種酶,其中纖維素酶的添加量為底物的2%-3%,適宜溫度為40℃,ph為4.5-6.5,活力為10萬單位每克,作用時(shí)間1-1.5h;淀粉酶的添加量為底物的0.5-1.0%,適宜溫度為50-55℃,ph值為6.8,活力為5000單位每克,作用時(shí)間0.5-1h;中性蛋白酶的添加量為0.05%-0.25%,適宜溫度為35-55℃,ph值為6.5-7.2,活力為10萬單位每克,作用時(shí)間為0.5-0.8h;然后調(diào)節(jié)ph值至3-5并加熱煮沸,維持煮沸狀態(tài)1-2h,分離得黃芩根渣和酶解液;
(2)膜分離:將步驟(2)獲得的酶解液先冷卻至常溫,然后送入中空纖維膜圓柱中,采用膜分離技術(shù)進(jìn)行分離、純化,從而制得黃芩苷產(chǎn)品。
優(yōu)選地,在上述酶解步驟中,往過濾得到的黃芩根渣中加入弱堿性小分子團(tuán)水,每公斤黃芩根渣加入6-10升弱堿性小分子團(tuán)水,在20-25℃下提取2-4h,再次分離出黃芩根渣和提取液,其中提取液連同酶解液一起送入中空纖維膜圓柱中進(jìn)行分離、純化。
與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明的有益效果是:1、整個(gè)提取工藝只需兩步即可完成,簡(jiǎn)化了工序,降低了成本(節(jié)約了約62%的成本),更適用于工業(yè)化生產(chǎn);2、采用三種酶解、加熱煮沸,加快了黃芩苷從黃芩中的釋放速率,也免去了溶劑乙醇的使用以及加酸、加堿對(duì)黃芩苷的破壞,提高了黃芩苷的品質(zhì),以及提取速率;3、采用膜分離技術(shù),一次性完成分離、純化、精制等功能,節(jié)約了提取時(shí)間,成品含量也能達(dá)到98%以上。
具體實(shí)施方式
現(xiàn)結(jié)合具體實(shí)施例,來對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)描述。顯然,不能因此將本發(fā)明限制在所述的實(shí)施例范圍之中。基于本發(fā)明中的實(shí)施例,本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有作出創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下所獲得的所有其他實(shí)施例,均應(yīng)屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。下述實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法,按照常規(guī)方法和條件,或按照商品說明書選擇。
實(shí)施例一
從黃芩中提取黃芩苷的方法,是通過以下步驟來完成的:
(1)酶解:將黃芩根粉碎至60目,加適量水、加酶,水解,所用酶為纖維素酶、淀粉酶及中性蛋白酶三種酶,其中纖維素酶的添加量為底物的2%,適宜溫度為40℃,ph為5.5,活力為10萬單位每克,作用時(shí)間1h;淀粉酶的添加量為底物的0.5%,適宜溫度為50℃,ph值為6.8,活力為5000單位每克,作用時(shí)間0.5h;中性蛋白酶的添加量為0.05%%,適宜溫度為35℃,ph值為6.5,活力為10萬單位每克,作用時(shí)間為0.5h;然后調(diào)節(jié)ph值至5并加熱煮沸,維持煮沸狀態(tài)2h,分離得黃芩根渣和酶解液;
(2)膜分離:將步驟(2)獲得的酶解液先冷卻至常溫,然后送入中空纖維膜圓柱中,采用膜分離技術(shù)進(jìn)行分離、純化,從而制得黃芩苷產(chǎn)品。
在酶解步驟中,往過濾得到的黃芩根渣中加入弱堿性小分子團(tuán)水,每公斤黃芩根渣加入6升弱堿性小分子團(tuán)水,在25℃下提取2h,再次分離出黃芩根渣和提取液,其中提取液連同酶解液一起送入中空纖維膜圓柱中進(jìn)行分離、純化。
實(shí)施例二
將黃芩根粉碎至40目,加適量水、加酶,水解,所用酶為纖維素酶、淀粉酶及中性蛋白酶三種酶,其中纖維素酶的添加量為底物的3%,適宜溫度為40℃,ph為6.5,活力為10萬單位每克,作用時(shí)間1.5h;淀粉酶的添加量為底物的1.0%,適宜溫度為55℃,ph值為6.8,活力為5000單位每克,作用時(shí)間1h;中性蛋白酶的添加量為0.25%,適宜溫度為55℃,ph值為7.2,活力為10萬單位每克,作用時(shí)間為0.8h;然后調(diào)節(jié)ph值至4并加熱煮沸,維持煮沸狀態(tài)1h,分離得黃芩根渣和酶解液;
(2)膜分離:將步驟(2)獲得的酶解液先冷卻至常溫,然后送入中空纖維膜圓柱中,采用膜分離技術(shù)進(jìn)行分離、純化,從而制得黃芩苷產(chǎn)品。
在酶解步驟中,往過濾得到的黃芩根渣中加入弱堿性小分子團(tuán)水,每公斤黃芩根渣加入10升弱堿性小分子團(tuán)水,在20℃下提取4h,再次分離出黃芩根渣和提取液,其中提取液連同酶解液一起送入中空纖維膜圓柱中進(jìn)行分離、純化。