本發(fā)明屬于生物發(fā)酵工程技術(shù)領(lǐng)域，涉及玉米浸泡的生產(chǎn)，尤其是一種嗜熱型乳酸桿菌及人工添加該嗜熱型乳酸桿菌的玉米浸泡方法。
背景技術(shù)：
玉米淀粉的制備分干法和濕法兩種。所謂干法是指靠磨碎篩分風(fēng)選的方法，分出胚芽和纖維，而得到低脂肪的玉米粉。濕法是指“一浸二磨三分”，即將玉米溫水浸泡，粗磨、細(xì)磨、分離胚芽、纖維素和蛋白質(zhì)，而得到高純的淀粉。為獲得高純度的玉米淀粉，一般都采用封閉式濕法工藝進(jìn)行。
玉米漿含有豐富的氨基酸和維生素，在谷氨酸發(fā)酵生產(chǎn)中作為廉價(jià)的有機(jī)氮源促進(jìn)菌體生長(zhǎng)，影響發(fā)酵的產(chǎn)酸率和糖酸轉(zhuǎn)化率。在實(shí)際生產(chǎn)中，由于受到玉米質(zhì)量和浸泡時(shí)間短造成玉米漿質(zhì)量不穩(wěn)的影響，溫敏型谷氨酸發(fā)酵的生產(chǎn)受到嚴(yán)重制約。
通過(guò)檢索，發(fā)現(xiàn)如下兩篇與本專利申請(qǐng)相關(guān)的專利公開(kāi)文獻(xiàn)：
1、一種用于提高玉米浸泡效果的乳酸菌接種法(公開(kāi)號(hào)102942632B)，涉及一種用于提高玉米浸泡效果的乳酸菌接種法，使循環(huán)浸漬罐組中老酸通過(guò)壓差進(jìn)入該新增的老酸罐，該老酸在該新增老酸罐中放置7～9個(gè)小時(shí)，溫度50℃，乳酸含量達(dá)到2.2％～2.6％；對(duì)SO2值在100ppm～200ppm的浸泡罐添加新增的老酸罐中的培養(yǎng)后的老酸，按照浸漬液：培養(yǎng)后老酸＝30:1的重量比例加入，且保持老酸罐液位不變，得到了大生產(chǎn)中提高浸泡液中乳酸含量最佳方法，提高了浸泡效果和淀粉收率。
2、玉米淀粉酶法浸泡生產(chǎn)方法(專利號(hào)：200610016774)，涉及農(nóng)副產(chǎn)品精深加工，特別是涉及玉米淀粉酶法浸泡生產(chǎn)方法。它克服了傳統(tǒng)的濕法玉米淀粉生產(chǎn)工藝存在著浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、水和能源消耗大、二氧化硫污染環(huán)境等不足。其生產(chǎn)工藝步驟是：第一步，選育適宜玉米浸泡液乳酸菌種，將其發(fā)酵培養(yǎng)后加入在玉米浸泡液中，以縮短有效的乳酸濃度達(dá)到的時(shí)間，使玉米籽粒胚乳吸水膨脹軟化，細(xì)胞壁遭到破壞；第二步，將初浸的玉米破碎成4－6瓣，分離胚芽，為乳酸及蛋白酶的透入創(chuàng)造更好的條件；第三步，在破碎的玉米浸泡液中加入植物蛋白酶，以充分降解蛋白基質(zhì)釋放淀粉，進(jìn)一步縮短浸泡時(shí)間。
通過(guò)對(duì)比，本發(fā)明專利申請(qǐng)與上述專利公開(kāi)文獻(xiàn)存在本質(zhì)的不同。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足之處，為了解決目前玉米浸泡方法存在的玉米浸泡時(shí)間短、乳酸含量低導(dǎo)致玉米漿質(zhì)量差的現(xiàn)象，提出一種嗜熱型乳酸桿菌及人工添加該嗜熱型乳酸桿菌的玉米浸泡方法，該方法操作簡(jiǎn)單、控制方便，能有效解決玉米浸泡過(guò)程中玉米漿質(zhì)量差，有效提高谷氨酸產(chǎn)酸速率，降低生產(chǎn)成本的生產(chǎn)方法。
本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：
一種嗜熱型乳酸桿菌，名稱為C15，分類名稱為芽孢桿菌Bacillus sp.，保藏編號(hào)為：CGMCC No.13471，保藏日期：2016年12月19日，北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，保藏單位：中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心。
而且，所述嗜熱型乳酸桿菌分離自玉米浸泡水中，分離步驟如下：
a.制備平板分離培養(yǎng)基、斜面培養(yǎng)基：葡萄糖0.2％，酵母膏1％，蛋白胨0.5％，豆粕水解液0.5％，碳酸鈣0.5％，瓊脂2％，余量為水，121℃滅菌30分鐘，上述百分?jǐn)?shù)均為質(zhì)量百分?jǐn)?shù)；
b.取2mL常規(guī)方法制取的玉米浸泡水樣品接入250mL三角瓶?jī)?nèi)，充分振蕩15～20分鐘，然后取該菌液1mL，移入盛有9ml質(zhì)量百分?jǐn)?shù)0.9％的生理鹽水的試管內(nèi)，搖勻，再?gòu)脑撛嚬苤形?mL移入下一支試管內(nèi)搖勻，用同樣方法稀釋至第3支試管，取10-1、10-2、10-3三個(gè)稀釋度的菌液0.1～0.5mL，各涂于2只平板分離培養(yǎng)基內(nèi)，用玻璃棒涂均勻，然后置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)48～50℃培養(yǎng)24～48小時(shí)；
從培養(yǎng)好的平板上在無(wú)菌條件下用接種環(huán)提取單個(gè)菌落，移植到菌種保藏斜面培養(yǎng)基內(nèi)，50℃培養(yǎng)22～24小時(shí)后，即得嗜熱型乳酸桿菌，放置2～4℃冰箱內(nèi)保藏。
一種人工添加嗜熱型乳酸桿菌的玉米浸泡方法，所述方法中添加了如權(quán)利要求1或2中所述的嗜熱型乳酸桿菌。
而且，步驟如下：
⑴向浸泡液中加入玉米，玉米和浸泡液的質(zhì)量比例為1：2.5-3.0，得玉米浸泡混合液，并加入到玉米浸泡罐中；
⑵浸泡玉米，在玉米浸泡至20～26h、浸泡液中SO2值在100ppm與200ppm之間時(shí)，將OD值為0.5～0.9的嗜熱型乳酸桿菌的種子培養(yǎng)液按照種子培養(yǎng)液：玉米浸泡混合液的體積比為0.05～0.1：1的比例接入到玉米浸泡罐中，繼續(xù)浸泡至45小時(shí)后結(jié)束，得到玉米浸泡液，浸泡過(guò)程中溫度控制在50℃±2；pH為4.0±1.0。
而且，所述步驟⑵中種子培養(yǎng)液的活化方法如下：
⑴從斜面上接嗜熱型乳酸桿菌菌株于種子培養(yǎng)基中，50℃振蕩培養(yǎng)18～24h，OD值為0.3～0.8，得菌株活化液；
⑵將菌株活化液按體積比為0.05～0.2：1的比例接入種子培養(yǎng)基中，50℃振蕩培養(yǎng)18～24h，得種子培養(yǎng)液；
其中，所述嗜熱型乳酸桿菌的種子培養(yǎng)基為：葡萄糖20～35g/L，酵母膏5～20g/L，蛋白胨5～10g/L，玉米漿5～10g/L，糖蜜2～5g/L，K2HPO41.0～1.5g/L，MnSO40.00025～0.0015g/L，VB10.0001～0.0005g/L，Na2HPO41.5～2.5g/L，溶劑為水，純生物素0～30μg/L，碳酸鈣5～10g/L，pH為6.5，121℃滅菌20分鐘。
本發(fā)明取得的優(yōu)點(diǎn)和積極效果是：
1、本發(fā)明方法通過(guò)在玉米浸泡液中添加一定量的嗜熱乳酸菌的方法，增強(qiáng)玉米籽粒浸泡效果，縮短了玉米浸泡時(shí)間，提高了玉米浸泡液的質(zhì)量，保證了穩(wěn)定性高的溫敏型谷氨酸發(fā)酵的產(chǎn)酸水平和轉(zhuǎn)化率，為味精生產(chǎn)提供良好的生產(chǎn)條件，降低了味精生產(chǎn)成本。
2、本發(fā)明方法利用了嗜熱型乳酸桿菌利用玉米浸泡液中的糖類經(jīng)過(guò)發(fā)酵途徑產(chǎn)生乳酸，適量的經(jīng)過(guò)發(fā)酵途徑產(chǎn)生的乳酸作用于玉米胚乳細(xì)胞壁上形成洞或坑，使浸泡水進(jìn)入籽粒內(nèi)部而作用于蛋白質(zhì)網(wǎng)，促進(jìn)玉米蛋白的軟化及膨脹，還能使分子質(zhì)量相對(duì)高的可溶蛋白發(fā)生水解，從而減少浸泡水蒸發(fā)濃縮過(guò)程中泡沫的產(chǎn)生和膠體沉淀的工藝特點(diǎn)。方法操作簡(jiǎn)單、控制方便。
3、本發(fā)明方法是通過(guò)進(jìn)行嗜熱型乳酸菌的種子高密度擴(kuò)大培養(yǎng)，結(jié)合玉米浸泡過(guò)程中浸泡液SO2值在100ppm與200ppm之間，因此添加時(shí)間和添加量容易控制，操作簡(jiǎn)單，非常適合于工業(yè)化生產(chǎn)應(yīng)用。
4、本發(fā)明方法的玉米淀粉生產(chǎn)工藝采用先進(jìn)的濕磨閉路生產(chǎn)流程，在玉米淀粉生產(chǎn)加工過(guò)程中，玉米浸泡是頭道工序，玉米浸泡時(shí)亞硫酸濃度為0.10％～0.35％，浸泡溫度48～52℃，浸泡時(shí)間40～50h。浸泡目的：一是籽粒變軟，籽粒含水45％左右；二是使可溶性物質(zhì)浸出，主要是礦物質(zhì)、蛋白質(zhì)和糖等；三是破壞蛋白質(zhì)的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)使淀粉和蛋白質(zhì)分離；四是防止雜菌污染，阻止腐敗生物生長(zhǎng)；五是具有漂白作用，可抑制氧化酶反應(yīng)，避免淀粉變色。浸泡過(guò)程中，有1.0％～1.2％少量的嗜熱乳酸菌存在，利用浸泡液中的糖類經(jīng)過(guò)發(fā)酵途徑產(chǎn)生乳酸，乳酸影響軟化籽粒，與浸泡液中的Ca2+、Mg2+生成絡(luò)合物，呈溶解狀態(tài)。玉米浸泡后得到的浸泡水，含干物質(zhì)7％～9％，pH3.9～4.1，酸度11％以上，鏡檢乳酸桿菌菌體粗壯，經(jīng)過(guò)3～4效蒸發(fā)器濃縮后制成玉米漿。玉米漿含有豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，一般含干物質(zhì)≥40％，蛋白質(zhì)≥40％，酸度9％～14％，亞硫酸≤0.3％，濃度22～240Be，,含維生素H(0.33mg/kg)等豐富的氨基酸。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此，不能以下述實(shí)施例來(lái)限定本發(fā)明的保護(hù)范圍。
下述實(shí)施實(shí)例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無(wú)特殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法；所使用的材料、試劑等，如無(wú)特殊說(shuō)明，均可從商業(yè)途徑得到。
本發(fā)明中所使用的玉米漿中玉米漿固形物含量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30-50％，生物素質(zhì)量含量為600～800μg/L；糖蜜中糖蜜固形物含量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30-60％，生物素質(zhì)量含量為2000～3000μg/L。
一種嗜熱型乳酸桿菌，名稱為C15，分類名稱為芽孢桿菌Bacillus sp.，保藏編號(hào)為：CGMCC No.13471，保藏日期：2016年12月19日，北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，保藏單位：中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心。
具體地，上述嗜熱型乳酸桿菌分離自玉米浸泡水中，分離步驟如下：
a.制備平板分離培養(yǎng)基、斜面培養(yǎng)基：葡萄糖0.2％，酵母膏1％，蛋白胨0.5％，豆粕水解液0.5％，碳酸鈣0.5％，瓊脂2％，余量為水，121℃滅菌30分鐘，上述百分?jǐn)?shù)均為質(zhì)量百分?jǐn)?shù)；
b.取2mL常規(guī)方法制取的玉米浸泡水樣品接入250mL三角瓶?jī)?nèi)，充分振蕩15～20分鐘，然后取該菌液1mL，移入盛有9ml質(zhì)量百分?jǐn)?shù)0.9％的生理鹽水的試管內(nèi)，搖勻，再?gòu)脑撛嚬苤形?mL移入下一支試管內(nèi)搖勻，用同樣方法稀釋至第3支試管，取10-1、10-2、10-3三個(gè)稀釋度的菌液0.1～0.5mL，各涂于2只平板分離培養(yǎng)基內(nèi)，用玻璃棒涂均勻，然后置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)48～50℃培養(yǎng)24～48小時(shí)；
從培養(yǎng)好的平板上在無(wú)菌條件下用接種環(huán)提取單個(gè)菌落，移植到菌種保藏斜面培養(yǎng)基內(nèi)，50℃培養(yǎng)22～24小時(shí)后，即得嗜熱型乳酸桿菌，放置2～4℃冰箱內(nèi)保藏。
一種人工添加嗜熱型乳酸桿菌的玉米浸泡方法，所述方法中添加了如上所述的嗜熱型乳酸桿菌。
具體地，步驟如下：
⑴向浸泡液中加入玉米，玉米和浸泡液的質(zhì)量比例為1：2.5-3.0，得玉米浸泡混合液，并加入到玉米浸泡罐中；
⑵浸泡玉米，在玉米浸泡至20～26h、浸泡液中SO2值在100ppm與200ppm之間時(shí)，將OD值為0.5～0.9的嗜熱型乳酸桿菌的種子培養(yǎng)液按照種子培養(yǎng)液：玉米浸泡混合液的體積比為0.05～0.1：1的比例接入到玉米浸泡罐中，繼續(xù)浸泡至45小時(shí)后結(jié)束，得到玉米浸泡液，浸泡過(guò)程中溫度控制在50℃±2；pH為4.0±1.0。
實(shí)施例1：
本實(shí)施中例所使用的培養(yǎng)基有兩種：
⑴嗜熱型乳酸菌種子培養(yǎng)基：葡萄糖20g/L，酵母膏5g/L，蛋白胨5g/L，玉米漿5g/L，糖蜜2g/L，K2HPO41.0g/L，MnSO40.00025g/L，VB10.0001g/L，Na2HPO41.5g/L，溶劑為水，純生物素5μg/L，碳酸鈣5g/L。pH為6.5，121℃滅菌20分鐘；
(2)溫敏型谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基：淀粉水解糖40g/L；玉米漿50ml/L；蛋白水解液10g/L；糖蜜5ml/L；磷酸氫二鈉7g/L；氯化鉀2g/L；硫酸鎂1.4g/L；消泡劑0.1ml/L，溶劑為水，pH為6.9～7.1，121℃滅菌20分鐘。
補(bǔ)加糖：補(bǔ)加糖液為葡萄糖的質(zhì)量濃度為600g/L的葡萄糖液，115℃滅菌20分鐘。
一種人工添加嗜熱型乳酸桿菌的玉米浸泡方法，步驟如下：
(1)一環(huán)斜面培養(yǎng)基上的嗜熱型乳酸菌桿菌接入己滅菌的裝有250ml種子培養(yǎng)基的1L的三角瓶?jī)?nèi)，50℃振蕩培養(yǎng)24h，得菌株活化液(OD值為0.8)，置于4℃冰箱內(nèi)冷藏備用；將活化后的嗜熱型乳酸菌桿菌的菌株活化液按活化液：種子培養(yǎng)基的體積比為0.05～0.2：1的比例接入種子培養(yǎng)基中，50℃振蕩培養(yǎng)24h，得種子培養(yǎng)液(OD值為0.8)；
(2)向浸泡液中加入玉米，玉米和浸泡液的質(zhì)量比例為1：2.5-3.0，得玉米浸泡混合液，并加入到玉米浸泡罐中；
(3)浸泡玉米，在玉米浸泡至20～26h、浸泡液中SO2值在100ppm與200ppm之間時(shí)，將OD值為0.5～0.9的嗜熱型乳酸桿菌的種子培養(yǎng)液按照種子培養(yǎng)液：玉米浸泡混合液的體積比為0.05～0.1：1的比例接入到玉米浸泡罐中，繼續(xù)浸泡至45小時(shí)后結(jié)束，得到玉米浸泡液，浸泡過(guò)程中溫度控制在50℃±2；pH為4.0±1.0；
(4)將玉米浸泡液經(jīng)蒸發(fā)濃縮后，制取成溫敏型菌株谷氨酸發(fā)酵用玉米漿。
將上述方法制取的玉米漿應(yīng)用到溫敏型谷氨酸發(fā)酵用培養(yǎng)基生產(chǎn)谷氨酸的方法，步驟如下：
按15％的接種量將生產(chǎn)菌種子液(OD在0.8～1.2)接入發(fā)酵培養(yǎng)基，采用連續(xù)流加質(zhì)量分?jǐn)?shù)28％的氨水的方式補(bǔ)充氮源并控制發(fā)酵液的pH在6.8～7.2，根據(jù)需要流加適量泡敵至泡沫消失，流加質(zhì)量濃度為600g/L的葡萄糖溶液(即補(bǔ)加糖液)將殘?zhí)强刂圃诎l(fā)酵液中的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5～10g/L，發(fā)酵培養(yǎng)至32小時(shí)后發(fā)酵結(jié)束，即發(fā)酵得谷氨酸；
其中，所使用的微生物菌株為溫敏型谷氨酸菌；
發(fā)酵培養(yǎng)基：淀粉水解糖40g/L；玉米漿50ml/L；蛋白水解液10g/L；糖蜜5ml/L；磷酸氫二鈉7g/L；氯化鉀2g/L；硫酸鎂1.4g/L；消泡劑0.1ml/L，溶劑為水，pH為6.9～7.1，121℃滅菌20分鐘；
補(bǔ)加糖液：補(bǔ)加糖液為葡萄糖的質(zhì)量濃度為600g/L的葡萄糖液，115℃滅菌20分鐘后備用。
經(jīng)檢測(cè)，發(fā)酵產(chǎn)谷氨酸水平為180g/L，糖酸轉(zhuǎn)化率為68％。
實(shí)施例2：
本實(shí)施中例所使用的培養(yǎng)基有兩種：
⑴嗜熱乳酸菌種子培養(yǎng)基：葡萄糖20g/L，酵母膏10g/L，蛋白胨5g/L，玉米漿5g/L，糖蜜2g/L，K2HPO41.0g/L，MnSO40.00025g/L，VB10.0001g/L，Na2HPO41.5g/L，溶劑為水，純生物素5μg/L，碳酸鈣5g/L。pH為6.5，115℃滅菌20分鐘；
(2)溫敏型谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基：淀粉水解糖50g/L；玉米漿55ml/L；蛋白水解液15g/L；糖蜜10ml/L；磷酸氫二鈉8g/L；氯化鉀3g/L；硫酸鎂1.5g/L；消泡劑0.2ml/L，溶劑為水，pH為6.9～7.1，121℃滅菌20分鐘。
補(bǔ)加糖：補(bǔ)加糖液為葡萄糖的質(zhì)量濃度為600g/L的葡萄糖液，115℃滅菌20分鐘。
一種人工添加嗜熱型乳酸桿菌的玉米浸泡方法，所述方法中添加了如上所述的嗜熱型乳酸桿菌。
具體地，步驟如下：
⑴向浸泡液中加入玉米，玉米和浸泡液的質(zhì)量比例為1：2.5-3.0，得玉米浸泡混合液，并加入到玉米浸泡罐中；
⑵浸泡玉米，在玉米浸泡至20～26h、浸泡液中SO2值在100ppm與200ppm之間時(shí)，將OD值為0.5～0.9的嗜熱型乳酸桿菌的種子培養(yǎng)液按照種子培養(yǎng)液：玉米浸泡混合液的體積比為0.05～0.1：1的比例接入到玉米浸泡罐中，繼續(xù)浸泡至45小時(shí)后結(jié)束，得到玉米浸泡液，浸泡過(guò)程中溫度控制在50℃±2；pH為4.0±1.0；
所述步驟⑵中種子培養(yǎng)液的活化方法如下：
⑴從斜面上接嗜熱型乳酸桿菌菌株于種子培養(yǎng)基中，50℃振蕩培養(yǎng)18～24h，OD值為0.3～0.8，得菌株活化液；
⑵將菌株活化液按體積比為0.05～0.2：1的比例接入種子培養(yǎng)基中，50℃振蕩培養(yǎng)18～24h，得種子培養(yǎng)液；
其中，所述嗜熱型乳酸桿菌的種子培養(yǎng)基為：葡萄糖20～35g/L，酵母膏5～20g/L，蛋白胨5～10g/L，玉米漿5～10g/L，糖蜜2～5g/L，K2HPO41.0～1.5g/L，MnSO40.00025～0.0015g/L，VB10.0001～0.0005g/L，Na2HPO41.5～2.5g/L，溶劑為水，純生物素0～30μg/L，碳酸鈣5～10g/L，pH為6.5，121℃滅菌20分鐘。
(3)將玉米浸泡液經(jīng)蒸發(fā)濃縮后，制取成溫敏型菌株谷氨酸發(fā)酵用玉米漿。
利用上述方法制取的玉米漿應(yīng)用到溫敏型谷氨酸發(fā)酵用培養(yǎng)基生產(chǎn)谷氨酸的方法，步驟如下：
按15％的接種量生產(chǎn)菌將種子液(OD在0.8～1.2)接入發(fā)酵培養(yǎng)基，采用連續(xù)流加質(zhì)量分?jǐn)?shù)28％的氨水的方式補(bǔ)充氮源并控制發(fā)酵液的pH在6.8～7.2；根據(jù)需要流加適量泡敵至泡沫消失，流加質(zhì)量濃度為700g/L的葡萄糖溶液(即補(bǔ)加糖液)將殘?zhí)强刂圃诎l(fā)酵液中的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5～10g/L，發(fā)酵培養(yǎng)至32小時(shí)后發(fā)酵結(jié)束，即發(fā)酵得谷氨酸；
其中，所使用的微生物菌株為溫敏型谷氨酸菌；
發(fā)酵培養(yǎng)基：淀粉水解糖50g/L；玉米漿55ml/L；蛋白水解液15g/L；糖蜜10ml/L；磷酸氫二鈉8g/L；氯化鉀3g/L；硫酸鎂1.5g/L；消泡劑0.2ml/L，溶劑為水，pH為6.9～7.1，121℃滅菌20分鐘；
補(bǔ)加糖液：補(bǔ)加糖液為葡萄糖的質(zhì)量濃度為700g/L的葡萄糖液，115℃滅菌20分鐘后備用。
經(jīng)檢測(cè)，發(fā)酵產(chǎn)谷氨酸水平為191g/L，糖酸轉(zhuǎn)化率為70％。
實(shí)施例3：
本實(shí)施例中所使用的培養(yǎng)基有兩種：
(1)嗜熱乳酸菌種子培養(yǎng)基：葡萄糖30g/L，酵母膏10g/L，蛋白胨5g/L，玉米漿5g/L，糖蜜2g/L，K2HPO41.0g/L，MnSO40.00025g/L，VB10.0001g/L，Na2HPO41.5g/L，溶劑為水，純生物素5μg/L，碳酸鈣5g/L。pH為6.5，115℃滅菌20分鐘；
(2)溫敏型谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基：淀粉水解糖60g/L；玉米漿60ml/L；蛋白水解液20g/L；糖蜜15ml/L；磷酸氫二鈉9g/L；氯化鉀4g/L；硫酸鎂1.6g/L；消泡劑0.3ml/L，溶劑為水，pH為6.9～7.1，121℃滅菌20分鐘。
補(bǔ)加糖：補(bǔ)加糖液為葡萄糖的質(zhì)量濃度為600g/L的葡萄糖液，115℃滅菌20分鐘。
一種人工添加嗜熱型乳酸桿菌的玉米浸泡方法及玉米漿的制取，步驟同實(shí)施例2。
利用上述方法制取的玉米漿應(yīng)用到溫敏型谷氨酸發(fā)酵用培養(yǎng)基生產(chǎn)谷氨酸的方法，步驟如下：
按15％的接種量將生產(chǎn)菌種子液(OD在0.8～1.2)接入發(fā)酵培養(yǎng)基，采用連續(xù)流加質(zhì)量分?jǐn)?shù)28％的氨水的方式補(bǔ)充氮源并控制發(fā)酵液的pH在6.8～7.2；根據(jù)需要流加適量泡敵至泡沫消失，流加質(zhì)量濃度為800g/L的葡萄糖溶液(即補(bǔ)加糖液)將殘?zhí)强刂圃诎l(fā)酵液中的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5～10g/L，發(fā)酵培養(yǎng)至32小時(shí)后發(fā)酵結(jié)束，即發(fā)酵得谷氨酸；
其中，所使用的微生物菌株為溫敏型谷氨酸菌；
發(fā)酵培養(yǎng)基：淀粉水解糖60g/L；玉米漿60ml/L；蛋白水解液20g/L；糖蜜15ml/L；磷酸氫二鈉9g/L；氯化鉀4g/L；硫酸鎂1.6g/L；消泡劑0.3ml/L，溶劑為水，pH為6.9～7.1，121℃滅菌20分鐘；
補(bǔ)加糖液：補(bǔ)加糖液為葡萄糖的質(zhì)量濃度為800g/L的葡萄糖液，115℃滅菌20分鐘后備用。
經(jīng)檢測(cè)，發(fā)酵產(chǎn)谷氨酸水平為208g/L，糖酸轉(zhuǎn)化率為72％。
采用本發(fā)明所述的培養(yǎng)基發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸與采用公知培養(yǎng)基發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸的技術(shù)指標(biāo)對(duì)比見(jiàn)表1:
表1本發(fā)明的培養(yǎng)基發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸與采用公知培養(yǎng)基發(fā)酵生產(chǎn)的谷氨酸的技術(shù)指標(biāo)對(duì)比表
由表1的結(jié)果可以看出，用人工添加嗜熱乳酸菌進(jìn)行玉米浸泡制取的玉米漿的方法，溫敏型谷氨酸發(fā)酵的各項(xiàng)生產(chǎn)指標(biāo)未有明顯的降低，谷氨酸產(chǎn)酸率和糖酸轉(zhuǎn)化率也有所提高。證明本發(fā)明方法在溫敏型谷氨酸發(fā)酵工藝生產(chǎn)中全面推廣是可行的。