本發(fā)明涉及一種根皮素的提純方法，確切地說是一種從湖北海棠葉中提純根皮素的方法。

背景技術：

根皮素化學名：3-(4-羥基苯基)-1-(2、4、6-三羥基苯基)-1-丙酮，是黃酮類物質。根皮素具有很強的保濕作用，同時還具有良好的抗氧化、抗癌、美白等作用。隨著高純度根皮素的需求量不斷增加，使其具有廣闊的市場前景。

對于根皮素的提取，一般是先提取根皮苷，再進行酶解或酸解后得到根皮素。如專利申請?zhí)枺?01010510889.x，該發(fā)明以蘋果、海棠葉為原料，將提取液經(jīng)大孔樹脂純化后，通過生物酶解，制備得到純度96％以上的根皮素。但酶解法由于具有成本高、反應條件苛刻等條件限制了其應用。酸解法具有成本低、反應速度快等優(yōu)點，但有可能帶來環(huán)境污染。

湖北海棠廣泛分布于我國很多省份，枝條和葉中含有豐富的根皮苷，各部位含量在0.9～13％不等，其嫩葉中含量最高，(方榮，等，湖北海棠中根皮苷含量測定，食品科技，2008年33卷6期)，可以作為提取根皮苷的來源。從湖北海棠葉中提取根皮苷的報道相對較多，如專利申請?zhí)枺?01410346970.7，該發(fā)明利用水提法從湖北海棠葉或嫩枝中提取得到了根皮苷提取物，但并未對其進行進一步純化。為了得到純度較高的根皮苷，現(xiàn)有技術大多用到了大孔樹脂富集純化，如專利申請?zhí)枺?01510053556.1，該發(fā)明公開了一種從湖北海棠嫩枝綠葉中提取不同純度根皮苷的方法，通過大孔樹脂吸附和洗脫制備得到了高純度的根皮苷。但由于大孔樹脂層析具有周期長，溶劑用量大等缺點，大大限制了產(chǎn)業(yè)化的可能性。

為了克服現(xiàn)有技術存在的缺陷，本發(fā)明采取新的提純方法，為湖北海棠葉中根皮素的開發(fā)利用提供了方便。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明旨在為湖北海棠葉中根皮素的開發(fā)利用提供數(shù)據(jù)支持。本發(fā)明提供了一種工藝簡單、成本低廉的根皮素生產(chǎn)工藝，得到的根皮素純度大于98％，并適合進行放大生產(chǎn)。

本發(fā)明的目的是通過以下技術方案來實現(xiàn)的。

一種從湖北海棠葉中提純根皮素的方法，其特征在于該方法包括如下步驟：

①溶劑回流提?。喝『焙Ｌ哪廴~，每次加入8～12倍的乙醇水溶液，回流提取2次，每次2小時，合并提取液，減壓濃縮至密度為1.1～1.2。具體的，乙醇水溶液的濃度優(yōu)化為30％～70％；

②醇沉除雜：向①得到的濃縮液中加入3-5倍體積的無水乙醇進行醇沉，4℃條件下過夜，過濾得到濾液并減壓濃縮至無醇味；

③萃取：向步驟②得到濃縮液中加入0.3-1體積的中等極性溶劑萃取2次，將萃取液濃縮，烘干得萃取物。具體的，中等極性的溶劑優(yōu)選為為乙酸乙酯、二氯甲烷或乙酸丁酯中的一種；

④結晶：向步驟③所得萃取物中加入5-10倍量的水進行回流溶解，過濾去除不溶物，在攪拌的條件下，冷卻析晶，過濾、干燥后得到淡黃色晶體；

⑤酸水解：向步驟④所得晶體中加入其干重8-12倍量一定濃度的鹽酸，在85～95℃條件下攪拌水解4h，冷卻至室溫，調pH為5～6后過濾得根皮素粗品。具體的，鹽酸的濃度優(yōu)化為0.5～1.5mol/L；

⑥提取精制：加入步驟⑤所得根皮素粗品干重8-12倍量的中等極性溶劑進行回流提取2次，將提取液濃縮后真空干燥即得純度大于98％的根皮素，收率在70％以上。具體的，中等極性的溶劑優(yōu)選為乙酸乙酯、丙酮或二氯甲烷中的一種。

具體的，一種從湖北海棠葉中提純根皮素的方法，其特征在于該方法包括如下步驟：

①溶劑回流提?。喝『焙Ｌ哪廴~，每次加入8～12倍的乙醇水溶液，回流提取2次，每次2小時，合并提取液，減壓濃縮至密度為1.1～1.2；

②醇沉除雜：向①得到的濃縮液中加入3倍體積的無水乙醇進行醇沉，4℃條件下過夜，過濾得到濾液并減壓濃縮至無醇味；

③萃?。合虿襟E②得到濃縮液中加入0.5倍體積的中等極性溶劑萃取2次，將萃取液濃縮，烘干得萃取物；

④結晶：向步驟③所得萃取物中加入8倍量的水進行回流溶解，過濾去除不溶物，在攪拌的條件下，冷卻析晶，過濾、干燥后得到淡黃色晶體；

⑤酸水解：向步驟④所得晶體中加入其干重10倍量的鹽酸，在85～95℃條件下攪拌水解4h，冷卻至室溫，調pH為5～6后過濾得根皮素粗品；

⑥提取精制：加入步驟⑤所得根皮素粗品干重10倍量的中等極性溶劑進行回流提取2次，將提取液濃縮后真空干燥即得。

與現(xiàn)有提取技術相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點：

1.本發(fā)明中的工藝摒棄了傳統(tǒng)的大孔樹脂柱純化步驟，節(jié)約了大量時間和成本；

2.本發(fā)明根皮苷的水解采用的是酸解后中和的方法，避免了酶解帶來的高額成本以及酸解帶來的環(huán)境污染；

3.本發(fā)明工藝簡單，可以制備得到純度大于98％的根皮素，收率在70％以上。

具體實施方式

下面通過實施例對本發(fā)明作進一步說明，但并不因此將本發(fā)明限制在所述的實施例中。

實施例1

取湖北海棠干葉5kg(根皮苷含量10.3％)，投入提取罐中，分別加入50L、40L的30％的乙醇回流提取2次，每次2h，提取液過濾后，減壓濃縮至密度為1.15，加入4倍體積無水乙醇，醇沉過夜后過濾，濾液濃縮至無醇味，加入1/2體積的乙酸丁酯萃取2次，萃取液濃縮，烘干得到萃取物。加入萃取物8倍量水回流溶解后過濾，濾液在攪拌的條件下，冷卻析晶，過濾，干燥后得到淡黃色晶體460.5g，含量93.2％。

將淡黃色晶體加入到10倍量1.5mol/L的鹽酸中，在85～95℃條件下反應4h，冷卻至室溫調pH為5～6，過濾后濃縮得到根皮素粗品。粗品加入10倍量的丙酮回流提取2次，濾液濃縮，真空干燥得到根皮素240.5g，含量98.3％，總收率為73.1％。

實施例2

取湖北海棠干葉5kg(根皮苷含量10.3％)，投入提取罐中，分別加入60L、50L的50％的乙醇回流提取2次，每次2h，提取液過濾后，濾液減壓濃縮至密度為1.18，加入4倍體積無水乙醇，醇沉過夜后過濾，濃縮至無醇味，加入1/2體積的乙酸乙酯萃取2次，萃取液濃縮，烘干得到萃取物。加入萃取物8倍量水回流溶解后過濾，濾液在攪拌的條件下，冷卻析晶，過濾，干燥后得到淡黃色晶體463.0g，含量92.5％。

將淡黃色晶體加入到10倍量1.5mol/L的鹽酸中，在85～95℃條件下反應4h，冷卻至室溫調pH為5～6，過濾后濃縮得到根皮素粗品。粗品加入10倍量的二氯甲烷回流提取2次，濾液濃縮，真空干燥得到根皮素248.2g，含量99.2％，總收率為76.1％。

實施例3

取湖北海棠干葉10kg(根皮苷含量10.3％)，投入提取罐中，分別加入120L、80L的70％的乙醇回流提取2次，每次2h，提取液過濾后，減壓濃縮至密度為1.12，加入4倍體積無水乙醇，醇沉過夜后過濾，濾液濃縮至無醇味，加入1/2體積的二氯甲烷萃取2次，萃取液濃縮，烘干得到萃取物。加入萃取物8倍量水回流溶解后過濾，濾液在攪拌的條件下，冷卻析晶，過濾，干燥后得到淡黃色晶體918.3g，含量91.6％。

將淡黃色晶體加入到10倍量0.5mol/L的鹽酸中，在85～95℃條件下反應4h，冷卻至室溫調pH為5～6，過濾后濃縮得到根皮素粗品。粗品加入10倍量的乙酸乙酯回流提取2次，濾液濃縮，真空干燥得到根皮素490.0g，含量98.1％，總收率為74.3％。

實施例4

取湖北海棠干葉10kg(根皮苷含量10.3％)，投入提取罐中，分別加入100L、80L的50％的乙醇回流提取2次，每次2h，提取液過濾后，減壓濃縮至密度為1.16，加入4倍體積無水乙醇，醇沉過夜后過濾，濾液濃縮至無醇味，加入1/2體積的乙酸丁酯萃取2次，萃取液濃縮，烘干得到萃取物。加入萃取物8倍量水回流溶解后過濾，濾液在攪拌的條件下，冷卻析晶，過濾，干燥后得到淡黃色晶體922.8g，含量92.9％。

將淡黃色晶體加入到10倍量1.0mol/L的鹽酸中，在85～95℃條件下反應4h，冷卻至室溫調pH為5～6，過濾后濃縮得到根皮素粗品。粗品加入10倍量的乙酸乙酯回流提取2次，濾液濃縮，真空干燥得到根皮素496.3g，含量98.8％，總收率為75.8％。

實施例5

取湖北海棠干葉5kg(根皮苷含量10.3％)，投入提取罐中，分別加入60L、50L的50％的乙醇回流提取2次，每次2h，提取液過濾后，濾液減壓濃縮至密度為1.18，加入3倍體積無水乙醇，醇沉過夜后過濾，濃縮至無醇味，加入0.3體積的乙酸乙酯萃取2次，萃取液濃縮，烘干得到萃取物。加入萃取物5倍量水回流溶解后過濾，濾液在攪拌的條件下，冷卻析晶，過濾，干燥后得到淡黃色晶體460.0g，含量92.5％。

將淡黃色晶體加入到8倍量1.0mol/L的鹽酸中，在85～95℃條件下反應2h，冷卻至室溫調pH為5～6，過濾后濃縮得到根皮素粗品。粗品加入8倍量的乙酸乙酯回流提取2次，濾液濃縮，真空干燥得到根皮素496.3g，含量98.5％，總收率為75.5％。

實施例6

取湖北海棠干葉10kg(根皮苷含量10.3％)，投入提取罐中，分別加入100L、80L的50％的乙醇回流提取2次，每次2h，提取液過濾后，減壓濃縮至密度為1.16，加入5倍體積無水乙醇，醇沉過夜后過濾，濾液濃縮至無醇味，加入1體積的乙酸乙酯萃取2次，萃取液濃縮，烘干得到萃取物。加入萃取物10倍量水回流溶解后過濾，濾液在攪拌的條件下，冷卻析晶，過濾，干燥后得到淡黃色晶體918.8g，含量92.7％。

將淡黃色晶體加入到12倍量1.0mol/L的鹽酸中，在85～95℃條件下反應6h，冷卻至室溫調pH為5～6，過濾后濃縮得到根皮素粗品。粗品加入12倍量的丙酮回流提取2次，濾液濃縮，真空干燥得到根皮素493.1g，含量98.3％，總收率為74.9％。