本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域,特別是涉及一種提純白桂皮醛的方法。
背景技術(shù):
白桂皮醛(Canellal):倍半萜醛,分子式:C15H20O3,分子量:248.32。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明,白桂皮醛具有很強(qiáng)的抗菌作用,體外對(duì)白色念珠菌、釀酒酵母、須發(fā)癬菌的MIC分別為6、1.6、3μg/mL。白桂皮醛還可用作拒食劑,對(duì)行軍蟲(chóng)Spodoptera littoralis具有很強(qiáng)的抗食活性。植物毒性研究表明,用浮萍生物測(cè)試白桂皮醛的IC50為8~16μM。經(jīng)檢索,尚未見(jiàn)采用高速逆流色譜法純化白桂皮醛的方法。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
本發(fā)明的目的在于解決現(xiàn)有技術(shù)的不足和缺陷,提供一種提純白桂皮醛的方法。
為了實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明的技術(shù)方案如下:
一種提純白桂皮醛的方法,包括以下步驟:
(1)取白桂皮的皮和葉粉碎,加水混合,添加8~12萬(wàn)活力單位/0.1g葡萄籽粉末的纖維素酶進(jìn)行酶解,酶解結(jié)束后滅菌;加入乙醇逆流提取,得到提取液;
(2)提取液進(jìn)行減壓,將乙醇試劑回收;
(3)依次用磷酸三丁脂、乙酸乙酯萃取,收集萃取液,用3%碳酸鈉溶液洗滌后,濃縮干燥,再以復(fù)合溶劑采用高速逆流色譜分離,流分減壓濃縮,析晶,甲醇重結(jié)晶,干燥即得白桂皮醛。
所述的復(fù)合溶劑為磷酸三丁脂、乙酸乙酯、甲醇和水組成的溶劑,各溶劑的體積比為3.5-5.5∶4.5-6∶6.5-10∶3。
本發(fā)明提供的一種提純白桂皮醛的方法,先對(duì)白桂皮進(jìn)行酶解,再采用逆流提取,節(jié)約溶劑,提取效率高;采用高速逆流色譜分離,分離過(guò)程無(wú)產(chǎn)品損失,制備周期短,制備量大,易操作,克服了傳統(tǒng)硅膠柱分離過(guò)程中樣品死吸附、工藝繁瑣、重現(xiàn)性差的技術(shù)缺陷。
具體實(shí)施方式
以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明,但本發(fā)明不僅限于這些實(shí)施例,在未脫離本發(fā)明宗旨的前提下,所作的任何改進(jìn)均落在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
實(shí)施例1:
一種提純白桂皮醛的方法,包括以下步驟:
(1)取白桂皮的皮和葉粉碎,加水混合,添加8~12萬(wàn)活力單位/0.1g葡萄籽粉末的纖維素酶進(jìn)行酶解,酶解結(jié)束后滅菌;加入乙醇逆流提取,得到提取液;
(2)提取液進(jìn)行減壓,將乙醇試劑回收;
(3)依次用磷酸三丁脂、乙酸乙酯萃取,收集萃取液,用3%碳酸鈉溶液洗滌后,濃縮干燥,再以復(fù)合溶劑采用高速逆流色譜分離,流分減壓濃縮,析晶,甲醇重結(jié)晶,干燥即得白桂皮醛。
所述的復(fù)合溶劑為磷酸三丁脂、乙酸乙酯、甲醇和水組成的溶劑,各溶劑的體積比為3.5∶6∶6.5∶3。
實(shí)施例2:
一種提純白桂皮醛的方法,包括以下步驟:
(1)取白桂皮的皮和葉粉碎,加水混合,添加8~12萬(wàn)活力單位/0.1g葡萄籽粉末的纖維素酶進(jìn)行酶解,酶解結(jié)束后滅菌;加入乙醇逆流提取,得到提取液;(2)提取液進(jìn)行減壓,將乙醇試劑回收;
(3)依次用磷酸三丁脂、乙酸乙酯萃取,收集萃取液,用3%碳酸鈉溶液洗滌后,濃縮干燥,再以復(fù)合溶劑采用高速逆流色譜分離,流分減壓濃縮,析晶,甲醇重結(jié)晶,干燥即得白桂皮醛。
所述的復(fù)合溶劑為磷酸三丁脂、乙酸乙酯、甲醇和水組成的溶劑,各溶劑的體積比為5.5∶4.5∶10∶3。
以上所述實(shí)施例僅表達(dá)了本發(fā)明的幾種實(shí)施方式,其描述較為具體和詳細(xì),但并不能因此而理解為對(duì)本發(fā)明專(zhuān)利范圍的限制。應(yīng)當(dāng)指出的是,對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō),在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下,還可以做出若干變形和改進(jìn),這些都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。因此,本發(fā)明專(zhuān)利的保護(hù)范圍應(yīng)以所附權(quán)利要求為準(zhǔn)。