本發(fā)明涉及藥物化學，具體涉及藥物制備方法，尤其涉及一種制備大環(huán)內(nèi)酯類藥物索利霉素的制備新方法。
背景技術(shù)：
：索利霉素(英文名稱solithromycin)是cempra制藥公司開發(fā)的新一代大環(huán)內(nèi)酯類抗生素藥物，用于治療社區(qū)獲得性細菌性肺炎(cabp)，還可以應用于慢性阻塞性肺疾病(copd)、細菌性肺炎和一些感染治療，該藥物現(xiàn)處于iii期臨床試驗中。索利霉素是目前進入臨床的第一個含氟取代的大環(huán)內(nèi)酯藥物。美國化學文摘號cas：760981-83-7，具有以下式i所示的化學結(jié)構(gòu)：wo2009055557公開了以克拉霉素為起始原料制備索利霉素i的方法，如反應式1所示，克拉霉素依次通過酰基(如苯甲?；鵥z)保護糖羥基；與具有空間位阻的羥基活化劑羰基二咪唑(cdi)反應生成中間體cl-1；與疊氮丁胺生成含疊氮的噁唑環(huán)中間體cl-2；在酸性條件下脫除其中一個糖基，形成中間體cl-3；使用氧化劑將脫除糖基后形成的羥基氧化，形成中間體cl-4；經(jīng)氟化反應在鄰位進行f取代，形成中間體cl-5；最后與芳香炔形成三氮唑，并且脫去糖羥基保護，形成索利霉素。國際專利申請wo2010048599對上述進行了一定的調(diào)整，在從cl-1制備cl-2過程中，采用4-氨基丁醇為原料，然后將羥基轉(zhuǎn)化疊氮基團，再按原方法反應。該方法反應步驟長，對含疊氮中間體進行脫糖、氧化等反應操作危險，因為疊氮化合物都是容易爆炸且有毒的化合物；同時，疊氮中間體與炔類通過關環(huán)來產(chǎn)生五元環(huán)三氮唑的步驟中副反應較多。反應式1：wo2014145210為減少反應步驟，對上述方法進行改進，如反應式2所示。該方法直接引入自帶側(cè)鏈五元環(huán)三氮唑的原料，具體的反應步驟包括由克拉霉素制備中間體cl-1，與五元環(huán)三氮唑側(cè)鏈對接，形成噁唑環(huán)中間體(其中cp為氨基、保護氨基、或者硝基)，再依次經(jīng)過脫糖、氧化、氟化等步驟，最后根據(jù)cp基團采取相應的方法使其形成氨基，得到索利霉素i。該方法雖然無需引入疊氮基、以及與炔進行關環(huán)的步驟，減少了反應步驟，但是隨著反應原料及部分中間體分子量的加大，降低了反應原料及部分中間體在有機反應中的溶解度，影響了反應后處理，而且側(cè)鏈五元環(huán)三氮唑需要經(jīng)受脫糖、氧化等步驟，容易產(chǎn)生較多的副反應。反應式2：廣東東陽光藥業(yè)有限公司的專利cn104650166公開了另一制備方法，如反應式3所示：采用先脫糖氧化后制備得到的中間體ii，然后采用先前五元環(huán)三氮唑側(cè)鏈對接形成噁唑環(huán)，最后氟代形成目標化合物索利霉素。該方法避免了側(cè)鏈五元環(huán)三氮唑經(jīng)受脫糖、氧化步驟，減少了副反應的發(fā)生。但是由于脫糖、氧化后的化合物中間體ii比中間體cl-1溶解度差，導致反應困難，轉(zhuǎn)化率低；而且，裸露氨基在脫保護的時候，會產(chǎn)生?；w移雜質(zhì)，難以實施工業(yè)化生產(chǎn)。反應式3：因此，上述方法存在著諸多缺陷，不宜工業(yè)化生產(chǎn)，亟待改進。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于克服上述不足之處，研究設計革除毒害性操作、減少副反應、提高反應收率、降低成本，利于環(huán)保，并適于工業(yè)化生產(chǎn)的制備索利霉素方法。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一種制備索利霉素(式i)的方法，包括以下步驟：(1)制備化合物iii，方法一：化合物ii進行氟代反應，生成化合物iii，或方法二：化合物vii先進行氟代反應，再與羰基二咪唑(cdi)反應生成化合物iii；式中r為h或羥基保護劑，所述的羥基保護基為?；Ｗo基，優(yōu)選苯甲酰(bz)基或乙酰基(ac)。所述氟代反應使用的氟代試劑選自n-氟代雙苯磺酰胺(nfsi)、n-氟-苯二磺酰胺(nfobs)或1-氟-4-羥基-1,4-二氮二環(huán)[2,2,2]辛烷雙四氫硼酸鹽(nfth)親電氟化劑。優(yōu)選n-氟代雙苯磺酰胺(nfsi)氟代試劑與化合物ii用量摩爾比1～2優(yōu)選1:1.2～1.5氟代試劑與化合物vii用量摩爾比1～2優(yōu)選1:1.2～1.5所述步驟(1)的氟代反應在-78℃～30℃溫度下進行，優(yōu)選-20～0℃反應時間0.5h～4h，優(yōu)選2～3h。所述步驟(1)氟代反應使用的有機溶劑選自四氫呋喃、2-甲基四氫呋喃、甲苯、1,4-二氧六環(huán)、n,n-二甲基甲酰胺、乙酸乙酯或乙酸異丙酯中的一種或者兩種以上混合物。優(yōu)選n,n-二甲基甲酰胺與四氫呋喃混合體系。具體的有機溶劑也可以是本領域人員能夠輕易完成本發(fā)明的其他有機溶劑，并不局限于此。所述步驟(1)的氟代反應可以在堿促進下進行，所述的堿為無機堿，選自碳酸鉀、碳酸氫鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸銫、叔丁醇鉀、叔丁醇鋰、甲醇鈉、乙醇鈉,鈉氫或nahmds中的一種或者兩種以上混合物，優(yōu)選叔丁醇鉀。實現(xiàn)本方案的堿也可以是本領域人員能夠輕易完成本發(fā)明的其他堿，并不局限于此。(2)化合物iii與化合物iv(1-(4-氨基丁基)-4-(3-保護氨基苯基)-1h-1，2，3-三氮唑)五元環(huán)三氮唑的側(cè)鏈氨對接，形成噁唑環(huán)化合物v，見下式：其中cp為氨基、保護氨基、或者硝基，當cp為氨基時化合物v即為索利霉素i；當cp為保護氨基時，所述保護氨基選自boc-nh、bsmoc-nh、trityl-nh或meotrityl-nh，實現(xiàn)本方案的氨基保護基也可以是本領域人員能夠輕易完成本發(fā)明的其他氨基保護基，并不局限于此。所述步驟(2)在有機溶劑中進行，所述有機溶劑選自四氫呋喃、乙腈、n,n-二甲氨基甲酰胺、二甲基亞砜、二氯甲烷、甲苯中的一種或者兩種以上混合物，優(yōu)選乙腈。所述反應溶劑用量為：溶劑(ml):化合物iii重量(g)＝5～30:1，優(yōu)選5～7:1。所述步驟(2)也可以在上述有機溶劑與水(如乙腈：水＝1～10：1)優(yōu)選2:1(ml)的混合體系下反應，(時間0.5h～16h，溫度50℃～100℃)：化合物iii重量(g):化合物v＝5～30:1，優(yōu)選7:1。化合物v糖單元羥基保護基r在反應中可以自行脫除，無需進一步采取脫保護方法。而單獨使用有機溶劑得到的產(chǎn)物可以采取常規(guī)的脫糖羥基保護的方案；將反應后產(chǎn)物置于質(zhì)子溶劑中，在室溫至回流條件下即可脫去?；Ｗo得到化合物v，所述的質(zhì)子溶劑選自醇或水或兩種以上混合物；所述醇選自甲醇、乙醇、異丙醇；優(yōu)選甲醇；醇:水體積比為1～10:1，優(yōu)選2:1。(時間0.5h～16h，溫度20℃～100℃，溶劑(ml):化合物iii重量(g)＝5～30:1，優(yōu)選7:1)。所述步驟(2)的反應在有機堿促進下進行，所述的有機堿選自1,8-二氮雜二環(huán)十一碳-7-烯(dbu)、二環(huán)己基碳二亞胺(dcc)、n,n-二甲基吡啶胺(dmap)、三亞乙基二胺(dabco)或1,5-二氮雜雙環(huán)[4.3.0]-5-壬烯(dbn)中的一種或者兩種以上混合物。優(yōu)選dbu。所述化合物iii與化合物iv的摩爾比為1:1～3。優(yōu)選1:1～2步驟(2)的反應溫度為0℃～100℃，優(yōu)選50℃～60℃。步驟(2)的反應產(chǎn)物v：當所述化合物v的cp為氨基時，化合物v即為索利霉素i。當所述化合物v的cp為保護氨基或為硝基時，化合物v進行相應的脫保護氨基或還原硝基后形成氨基，得到索利霉素i。見下式：所述步驟(2)，當cp為保護氨基時，所述保護氨基選自boc-ny、bsmoc-nh、trityl-nh或meotrityl-nh時，采用酸解反應脫保護氨基，(溫度20℃～50℃，時間0.5h～10h)。所述酸解反應的酸選自鹽酸、硫酸、三氟乙酸或氫溴酸中一種或幾種；實現(xiàn)本方案的脫氨基保護的方法也可以是本領域人員能夠輕易完成本發(fā)明的其他方法，并不局限于此。所述步驟(2)，當cp為硝基時，采用催化加氫還原硝基為氨基，制成索利霉素，所述的催化加氫催化劑為鈀碳或雷尼鎳，優(yōu)選鈀碳；加氫催化劑用量與化合物v的質(zhì)量比為5％～20％，優(yōu)選5％，加氫的壓力為常壓至10mpa。優(yōu)選常壓。反應溶劑選自醇類、酯類或醚類；優(yōu)選醇類，所述的醇類溶劑選自甲醇、乙醇或異丙醇優(yōu)選甲醇；酯類溶劑選自乙酸乙酯或乙酸異丙酯優(yōu)選乙酸乙酯，醚類溶劑選自乙醚、甲基叔丁基醚、四氫呋喃或2-甲基四氫呋喃優(yōu)選四氫呋喃。(其他條件溫度20℃～80℃，時間1h～10h)。實現(xiàn)本方案的硝基還原也可以是本領域人員能夠輕易完成本發(fā)明的其他還原硝基方法，并不局限于此。所述化合物ii通過下列方法制備：r為糖羥基保護基以克拉霉素為起始物料，對糖羥基進行?；Ｗo；然后在酸性條件下脫去一糖單元；在三光氣或者光氣作用下，保護雙羥基，形成碳酸酯；然后氧化羥基形成羰基，氧化反應可以采用氯鉻酸吡啶鹽(pcc)或者斯文氧化來實現(xiàn)；最后在羰基二咪唑(cdi)的作用下形成化合物ii，合成路線如下所示：具體的，如當糖羥基保護基r為苯甲?；鶗r制備化合物ii：(1)制備化合物a在500ml反應瓶中加入克拉霉素(50g，0.067mol)、三乙胺(18.75ml，0.135mol，2當量)、乙酸乙酯(350ml)攪拌混合。分批加入苯甲酸酐(22.5g，0.1mol，1.5當量)。加畢，于室溫下(20-25℃)攪拌24h。檢測克拉霉素反應完全后，減壓蒸除溶劑(溫度＜45℃)。殘留物中加入500ml冰甲醇，冰浴下(0-5℃)攪拌0.5h，抽濾。濾餅用冰甲醇(100ml×2)淋洗，50℃真空干燥，得化合物a白色固體56g。(2)制備化合物b于1000ml反應瓶中加入上步反應所得化合物a(56g，0.0657mol)、乙醇(300ml)、水(300ml)混合攪拌。緩慢滴加濃鹽酸(56ml，0.672mol，10當量)，約0.5h滴畢。攪拌反應1h后，取樣檢測化合物a反應完全。將反應液置冰浴(0℃-5℃)冷卻，于10℃以下用氨水調(diào)節(jié)ph至9～10，有白色固體析出。繼續(xù)攪拌0.5h，抽濾。濾餅用水(500ml×2)淋洗，50℃真空干燥，得到化合物b白色固體42g。所得固體用乙酸乙酯：石油醚＝1：4混合溶劑77℃重結(jié)晶，得到白色固體37g。(3)制備化合物c于500ml三口燒瓶中加入上步反應產(chǎn)物化合物b(19.3g，0.0268mol)、吡啶(17.7g，0.2265mol，8當量)、二氯甲烷(150ml)，氮氣置換，冰鹽浴(-20～-5℃)冷卻下攪拌溶清。同時將三光氣(9.6g，0.0322mol，1.2當量)溶于50ml二氯甲烷中，待反應液冷卻至-10℃后，滴加上述三光氣的二氯甲烷溶液，控溫不超過5℃。約1h滴畢，滴畢自然升溫至(20-25℃)攪拌反應1h，取樣檢測中間體b反應完全后，將反應液倒入300ml冰鹽水中，分液，水相用二氯甲烷(100ml×3)萃取，合并有機相，用無水硫酸鈉干燥，抽濾旋干，得化合物c粗品22.9g，無需純化即可直接用于下一步反應。(4-1)pcc氧化法制備化合物d在250ml反應瓶中加入上步反應所得化合物c(8g，0.0111mol)、二氯甲烷(100ml)攪拌溶解，分批加入氯鉻酸吡啶鹽(pcc，7.16g，0.0333mol，3當量)。加畢，室溫攪拌反應24h。取樣檢測化合物c反應完全后，反應液經(jīng)硅藻土過濾，濾液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液(50ml)，飽和食鹽水(50ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥，抽濾，40℃旋干，得到化合物d粗品7.8g，無需純化即可直接用于下一步反應。(4-2)斯文氧化法制備化合物d在250ml三口反應瓶中加入dmso(二甲亞砜)(2.7g，0.03459mol，3當量)、二氯甲烷(50ml)，氮氣置換，置于干冰-丙酮浴冷卻。待反應液冷卻至-70℃后，滴加草酰氯(2.92g，0.023mol，2當量)，控溫不超過-65℃。約30min滴畢，保溫-65～-70℃攪拌反應1h。滴加化合物c(8.3g，0.01153mol)的二氯甲烷(30ml)溶液，控溫不超過-65℃。約45min滴畢，保溫反應1.5h。加入三乙胺(11.64g，0.1153mol，10當量)。加畢，撤出干冰浴，自然升溫至室溫。加入二氯甲烷稀釋反應液，依次用1n鹽酸，飽和碳酸氫鈉水溶液，飽和食鹽水洗滌。無水硫酸鈉干燥，抽濾，40℃旋干得到化合物d粗品8.7g，無需純化即可直接用于下一步反應。(5)制備化合物應為ⅶ在250ml反應瓶中加入上步產(chǎn)物化合物d(9.7g，0.0135mol)、丙酮(60ml)攪拌溶解。加入dbu(1,8-二氮雜二環(huán)十一碳-7-烯)(5.27g，0.03377mol，2.5當量)。加畢，室溫攪拌24h。取樣檢測化合物d反應完全后，減壓蒸除溶劑，殘留物用二氯甲烷(60ml)溶解，用0.5n的磷酸二氫鉀溶液調(diào)節(jié)至ph＝7～9，分液。水相用二氯甲烷(50ml×2)萃取，合并有機相，用飽和食鹽水(50ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥，抽濾，40℃旋干，得化合物ⅶ粗品6.88g，無需純化即可直接用于下一步反應。(6)制備化合物ii在250ml三口燒瓶中，加入上步反應所得中間體vii(6.88g，0.0102mol)、dmf(40ml)，氮氣置換，攪拌溶清。將反應液冷卻至-25℃，分批加入氫化鈉(0.814g，0.0204mol，2當量)。加畢，于-20℃～-25℃保溫攪拌1h。滴加羰基二咪唑cdi(5.02g，0.0306mol，3當量)的dmf(二甲基甲酰胺)(20ml)溶液，控溫不超過-10℃。滴畢，于-10～-15℃保溫攪拌1h。取樣檢測反應完全后，往反應液中滴加冰水(120ml)，控溫不超過10℃，有固體析出。滴畢，攪拌15min，抽濾，濾餅用水(50ml×2)淋洗。濾餅用乙酸乙酯(50ml)溶解，飽和食鹽水(30ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥，抽濾，旋干。柱層析純化(200-300目硅膠，柱型號：25×500m，洗脫液為甲醇：二氯甲烷＝1:10)，得到化合物ii白色固體3.6g。本發(fā)明提供的制備索利霉素的方法革除了現(xiàn)有技術(shù)中易爆及危險的疊氮中間體氧化、氟代反應，反應操作更安全；尤其驚喜的是在制備噁唑環(huán)和五元環(huán)三氮唑時，由于反應物溶解度較高，使反應物的轉(zhuǎn)化率高，副反應少，降低生產(chǎn)成本，有利于環(huán)保，適宜工業(yè)化生產(chǎn)，有較大的應用價值。具體實施方式以下結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進一步說明。應理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。本文中涉及到多種物質(zhì)的添加量、含量及濃度，其中所述的百分含量，除特別說明外，皆指質(zhì)量百分含量。本文的實施例中，如果對于反應溫度或操作溫度沒有做出具體說明，則該溫度通常指室溫(20-25℃)。在本發(fā)明的化合物結(jié)構(gòu)式中，羥基保護基bzo-是苯甲酰氧基，這是本領域技術(shù)人員熟知的。一、試劑試劑：本發(fā)明實施例中使用的反應物和催化劑均為化學純，可直接使用或根據(jù)需要經(jīng)過簡單純化；有機溶劑等均為分析純，直接使用。試劑均購自中國醫(yī)藥(集團)上?；瘜W試劑公司。二、檢測方法1hnmr核磁共振儀采用bruker-400mhz.質(zhì)譜儀為液質(zhì)聯(lián)用儀(lcms)，型號：agilent6120b，檢測器：dad，流動相a為水，流動相b為1％甲酸水溶液。檢測條件：時間(min)ab流速(ml/min)壓力(bar)080201.04003020801.04003110901.04004010901.0400實施例1中間體ii的制備：①制備化合物a在500ml反應瓶中加入克拉霉素(50g，0.067mol)、三乙胺(18.75ml，0.135mol，2當量)、乙酸乙酯(350ml)攪拌混合。分批加入苯甲酸酐(22.5g，0.1mol，1.5當量)。加畢，于室溫下(20-25℃)攪拌24h。檢測克拉霉素反應完全后，減壓蒸除溶劑(溫度＜45℃)。殘留物中加入500ml冰甲醇，冰浴下(0-5℃)攪拌0.5h，抽濾。濾餅用冰甲醇(100ml×2)淋洗，50℃真空干燥，得化合物a白色固體56g。esi[m+1]:852②制備化合物b于1000ml反應瓶中加入上步反應所得化合物a(56g，0.0657mol)、乙醇(300ml)、水(300ml)混合攪拌。緩慢滴加濃鹽酸(56ml，0.672mol，10當量)，約0.5h滴畢。攪拌反應1h后，取樣檢測中間體a反應完全。將反應液置冰浴(0-5℃)冷卻，于10℃以下用氨水調(diào)節(jié)ph至9～10，有白色固體析出。繼續(xù)攪拌0.5h，抽濾。濾餅用水(500ml×2)淋洗，50℃真空干燥，得到白色固體42g。所得固體用乙酸乙酯：石油醚＝1：4混合溶劑重結(jié)晶，得到化合物b白色固體37g。esi[m+1]:694。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.06(d,j＝7.1hz,2h),7.57(d,j＝7.4hz,1h),7.45(d,j＝7.8hz,2h),5.12(dd,j＝11.1,2.3hz,1h),5.04(m,1h),4.75(d,j＝7.6hz,1h),3.94(s,1h),3.73～3.75(m,2h),3.53～3.58(m,1h),3.43～3.57(m,1h),2.93(s,3h),2.86～2.90(m,1h),2.48～2.68(m,2h),2.28(s,6h),1.97～1.99(m,1h),1.87～1.92(m,1h),1.60～1.65(m,1h),1.37～1.47(m,3h),1.19～1.33(m,9h),1.04～1.08(m,9h),0.81(t,j＝7.4hz,3h)。③制備化合物c于500ml三口燒瓶中加入上步反應產(chǎn)物化合物b(19.3g，0.0268mol)、吡啶(17.7g，0.2265mol，8當量)、二氯甲烷(150ml)，氮氣置換，冰鹽浴(-20～-5℃)冷卻下攪拌溶清。同時將三光氣(9.6g，0.0322mol，1.2當量)溶于50ml二氯甲烷中，待反應液冷卻至-10℃后，滴加上述三光氣的二氯甲烷溶液，控溫不超過5℃。約1h滴畢，滴畢自然升溫至(20-25℃)攪拌反應1h，取樣檢測中間體b反應完全后，將反應液倒入300ml冰鹽水中，分液，水相用二氯甲烷(100ml×3)萃取，合并有機相，用無水硫酸鈉干燥，抽濾，40℃旋干，得化合物c粗品22.9g，無需純化即可直接用于下一步反應。esi[m+1]:720。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.06(d,j＝7.8hz,2h),7.56(t,j＝7.4hz,1h),7.45(t,j＝7.8hz,2h),5.02～5.09(m,2h),4.73(d,j＝7.6hz,1h),4.68(s,1h),3.72(d,j＝2.5hz,1h),3.54～3.60(m,1h),3.43～3.48(m,2h),2.91(s,3h),2.80～2.87(m,1h),2.54～2.64(m,2h),2.28(s,6h),1.76～1.89(m,3h),1.43～51.51(m,3h),1.39～1.41(m,1h),1.38(s,3h),1.20～1.32(m,9h),1.10～1.17(m,3h),1.05(d,j＝7.1hz,3h),0.82(t,j＝7.4hz,3h),0.70(d,j＝7.5hz,3h)。④-1pcc(氯鉻酸吡啶鹽)氧化法制備化合物d在250ml反應瓶中加入上步反應所得化合物c(8g，0.0111mol)、二氯甲烷(100ml)攪拌溶解，分批加入氯鉻酸吡啶鹽(pcc，7.16g，0.0333mol，3當量)。加畢，室溫攪拌反應24h。取樣檢測中間體c反應完全后，反應液經(jīng)硅藻土過濾，濾液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液(50ml)，飽和食鹽水(50ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥，抽濾，旋干，得到化合物d粗品7.8g，無需純化即可直接用于下一步反應。esi[m+1]:718。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.03(d,j＝7.8hz,2h),7.57(t,j＝7.4hz,1h),7.44(t,j＝7.8hz,2h),4.95～5.05(m,2h),4.60(s,1h),4.54(d,j＝7.6hz,1h),4.19(d,j＝7.8hz,1h),3.59～3.71(m,2h),2.80～2.93(m,3h),2.64(s,3h),2.26(s,6h),1.78～1.85(m,2h),1.65(dd,j＝14.5,2.7hz,1h),1.51～1.56(m,1h),1.48(s,3h),1.25～1.34(m,9h),1.17(d,j＝6.8hz,3h),1.13(d,j＝7.0hz,3h),0.96(d,j＝7.5hz,3h),0.86(t,j＝7.4hz,3h).④-2斯文氧化法制備化合物d在250ml三口反應瓶中加入dmso(2.7g，0.03459mol，3當量)、二氯甲烷(50ml)，氮氣置換，置于干冰-丙酮浴冷卻。待反應液冷卻至-70℃后，滴加草酰氯(2.92g，0.023mol，2當量)，控溫不超過-65℃。30min滴畢，保溫-65～-70℃攪拌反應1h。滴加中間體c(8.3g，0.01153mol)的二氯甲烷(30ml)溶液，控溫不超過-65℃。45min滴畢，保溫反應1.5h。加入三乙胺(11.64g，0.1153mol，10當量)。加畢，撤出干冰浴，自然升溫至室溫。加入二氯甲烷稀釋反應液，依次用1n鹽酸，飽和碳酸氫鈉水溶液，飽和食鹽水洗滌。無水硫酸鈉干燥，抽濾，旋干得到粗品化合物d8.7g，無需純化即可直接用于下一步反應。esi[m+1]:718。⑤制備化合物ⅶ在250ml反應瓶中加入上步產(chǎn)物化合物d(9.7g，0.0135mol)、丙酮(60ml)攪拌溶解。加入dbu(5.27g，0.03377mol，2.5當量)。加畢，室溫攪拌24h。取樣檢測化合物d反應完全后，減壓蒸除溶劑，殘留物用二氯甲烷(60ml)溶解，用0.5n的磷酸二氫鉀溶液調(diào)節(jié)至ph＝7～9，分液。水相用二氯甲烷(50ml×2)萃取，合并有機相，用飽和食鹽水(50ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥，抽濾，旋干，得化合物ⅶ粗品6.88g，無需純化即可直接用于下一步反應。esi[m+1]:674。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.01(d,j＝8.1hz,2h),7.55(t,j＝7.6hz,1h),7.43(t,j＝7.6hz,2h),6.55(s,1h),4.99～5.04(m,1h),4.54(dd,j＝9.6,2.7hz,1h),4.51(d,j＝7.6hz,1h),4.15(d,j＝8.3hz,1h),3.59～3.64(m,2h),3.13～3.16(m,1h),2.92～2.96(m,1h),2.85(s,3h),2.33～2.36(m,1h),2.26(s,6h),1.99(s,3h),1.86～1.95(m,2h),1.77～1.82(m,2h),1.50～1.56(m,1h),1.40～1.48(m,3h),1.36(s,3h),1.26～1.30(m,9h),1.15(d,j＝6.8hz,3h),0.95(d,j＝7.4hz,3h),0.89(t,j＝7.3hz,3h)。⑥制備化合物ⅱ在250ml三口燒瓶中，加入上步反應所得化合物vii(6.88g，0.0102mol)、dmf(40ml)，氮氣置換，攪拌溶清。將反應液冷卻至-25℃，分批加入氫化鈉(0.814g，0.0204mol，2當量)。加畢，于-20～-25℃保溫攪拌1h。滴加羰基二咪唑cdi(5.02g，0.0306mol，3當量)的dmf(20ml)溶液，控溫不超過-10℃。滴畢，于-10～-15℃保溫攪拌1h。取樣hplc檢測反應完全后，往反應液中滴加冰水(120ml)，控溫不超過10℃，有固體析出。滴畢，攪拌15min，抽濾，濾餅用水(50ml×2)淋洗。濾餅用乙酸乙酯(50ml)溶解，飽和食鹽水(30ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥，抽濾，旋干。柱層析純化(200-300目硅膠，柱型號：25×500m，洗脫液為甲醇：二氯甲烷＝1:10)，得到白色固體3.6g，即為化合物ii。esi[m+1]:768。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.08(s,1h),8.03(d,j＝7.1hz,2h),7.56(t,j＝7.4hz,1h),7.44(t,j＝7.8hz,2h),7.35～7.36(m,1h),7.06～7.07(m,1h),6.76(s,1h),5.66(dd,j＝9.8,3.2hz,1h),4.99～5.04(m,1h),4.51(d,j＝7.6hz,1h),4.15(d,j＝8.8hz,1h),3.55～3.66(m,3h),3.08～3.23(m,3h),2.90(s,1h),2.80～2.97(m,2h),2.78(m,3h),2.28～2.34(m,4h),2.25(s,6h),2.17(d,j＝3.1hz,1h),1.81(s,3h),1.76(s,3h),1.59～1.68(m,4h),1.40～1.48(m,3h),1.36(s,3h),1.22～1.35(m,15h),1.15(d,j＝6.7hz,3h),0.95(t,j＝7.3hz,3h)。實施例2氟代反應制備化合物iii其中糖羥基保護基為乙?；鶎?.05克乙酰基保護的化合物ii(2.90mmol)溶解在20毫升dmf/thf的混合溶液中(9:1)，-20℃條件下，分批加入0.39克叔丁醇鉀(3.48mmol)，加畢，混合物-20℃攪拌0.5個小時，然后加入1.01克nfsi(n-氟代雙苯磺酰胺)(3.19mmol)，加畢，繼續(xù)-20℃反應兩個小時。取樣hplc檢測反應完畢，加入少量水淬滅反應，用50毫升乙酸乙酯稀釋反應液，然后用飽和食鹽水多次洗滌(6*50毫升)，無水硫酸鈉干燥，過濾旋干得到粗品(可直接用于下一步)。粗品經(jīng)過柱層析純化(硅膠200-300目，青島黃海)，4l乙酸乙酯為洗脫劑，得到1.57克泡沫狀白色固體iiib，應為iii！(收率74.7％)。esi(m+1)＝724實施例3對接反應制備化合物v將1.33克化合物iii(1.84mmol)和2.44克i(7.36mmol)溶解在20毫升乙腈/水混合液中(10:1)，加熱回流過夜。第二天，將反應液冷卻至室溫，直接旋干，殘余物經(jīng)過柱層析(硅膠200-300目，青島黃海)(二氯甲烷：甲醇＝30:1)得到v粗品(直接用于下一步)。實施例4脫保護反應制備索利霉素i將上步制備的v粗品溶解在20毫升的二氯甲烷中，零度滴加10毫升三氟乙酸，室溫攪拌3個小時。反應液旋干，殘余物經(jīng)過柱層析純化(硅膠200-300目，青島黃海)(二氯甲烷：甲醇＝20:1)得到1.26克索利霉素i。ms＝423[(m+2)/2]實施例5化合物iii的cp為氨基直接制備索利霉素將化合物iii(0.94g，0.0012mol)，1-(4-氨基丁基)-4-(3-氨基苯基)-1h-1，2，3-三氮唑(0.83g,0.0036mol,3eq),乙腈(10ml)，水(1ml)混合。在氮氣保護下，于55-60℃下加熱反應12h。旋干反應液,柱層析純化(硅膠200-300目，青島黃海)(二氯甲烷：甲醇＝20:1)，得到索利霉素白色固體，0.5g，ms＝423[(m+2)/2]。實施例6化合物iii的cp為硝基直接制備索利霉素將化合物iii(0.94g，0.0012mol)，1-(4-氨基丁基)-4-(3-硝基苯基)-1h-1，2，3-三氮唑(0.94g,0.0036mol,3eq),乙腈(10ml)，水(1ml)混合。在氮氣保護下，于55℃-60℃下加熱反應6h。40℃旋干反應液,得到粗品。柱層析純化(硅膠200-300目，青島黃海)(二氯甲烷：甲醇＝20:1)得到硝基化合物v，白色固體0.5g于反應瓶中加入上述硝基化合物v(0.4g，0.00046mol)，甲醇20ml，醋酸2滴，5％鈀碳(0.04g，10％wt)，氫氣置換，室溫攪拌反應16h。取樣檢測中間體i反應完全后，濾除鈀碳，濾餅用甲醇(20ml)淋洗，濾液旋干，得到粗品。柱層析純化(硅膠200-300目，青島黃海)(二氯甲烷：甲醇＝20:1)，得到索利霉素白色固體0.1g。ms＝423((m+2)/2)。實施例8制備化合物iii化合物vii(6.74g，0.01mol)溶于dmf:thf＝9:1混合溶劑(40ml)中，氮氣置換。將反應液冷卻至-25℃。加入鈉氫(1g，0.025mol，2.5eq)。加畢，于-20℃～-25℃反應1h。分批加入nfsi(5g，0.015mol，1.5eq)。加畢，于-20℃～-25℃反應1h。取樣檢測原料反應完全后，滴加冰水90ml，控溫不超過10℃，有固體析出。滴畢，攪拌15min，抽濾，冰水淋洗。濾餅溶于50ml乙酸乙酯中，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥。抽濾，旋干，得到淺黃色固體粗品6.67g，ms＝692。粗品不經(jīng)純化直接下一步反應。上述粗品(6.67g，0.0096mol)溶于40mldmf中，氮氣置換。將反應液冷卻至-25℃。加入鈉氫(0.77g，0.0193mol，2eq)。加畢，于-20℃～-25℃反應1h。滴加cdi的dmf溶液(4.84g，0.0288mol，3eq)30ml。滴畢，于-20℃～-25℃反應1h。取樣檢測原料反應完全后，滴加冰水90ml，控溫不超過10℃，有固體析出。滴畢，攪拌15min，抽濾，冰水淋洗。濾餅溶于50ml乙酸乙酯中，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥。抽濾，40℃旋干，得到粗品淺黃色固體6.6g，ms＝786。柱層析純化(硅膠200-300目，青島黃海)(石油醚：丙酮＝6：1+1％三乙胺)得到白色固體化合物vii6g。當前第1頁12